以聚乙二醇水凝胶膜为载体构建的角膜上皮移植片对LSCD治疗的可行性

目的探讨聚乙二醇水凝胶膜(PHFs)是否能作为角膜上皮细胞(CECs)体外扩增的载体以及其能否用于角膜缘干细胞缺乏症(LSCD)的治疗。方法利用癸二酰氯、聚氧乙基甘油醚、聚已酸内酯二醇人工合成PHFs,检测其厚度、透光度和机械拉伸性能。取清洁级新西兰大白兔4只,培养原代角膜缘上皮细胞,荧光显微镜下观察培养细胞中角蛋白标志物AE1/AE3和干细胞标志物p63的表达;将细胞分为阴性对照组、阳性对照组和PHFs+CECs组,其中将阴性对照组细胞直接种植在培养皿底,加入普通细胞培养液,将阳性对照组细胞种植在培养皿后加入含有100μmol/L H_(2)O_(2)的普通细胞培养液,将PHF+CECs组细胞种植在铺有PHFs的培养皿中用普通细胞培养液培养,各组培养24 h。采用MTT和TUNEL染色法分别观察3个组细胞增生和细胞凋亡情况。采用随机数字表法将清洁级新西兰大白兔15只分为对照组、PHFs组和PHFs+CECs组,每组5只。其中对照组造模后不给予任何处置;PHFs组将空PHFs膜置于LSCD实验兔角膜表面;PHFs+CECs组为将CECs传代后种植于PHFs上构建组织工程移植片后将移植片置于LSCD兔模型的角膜表面。采用荧光素染色法检测各组实验兔角膜缺损面积大小并评分;采用苏木精-伊红染色法检测各组实验兔角膜上皮组织学特点。结果PHFs厚度不超过150μm,能承受约6 MPa的拉力,在400~700 nm可见光范围内透过率>99%。角膜缘原代培养的大多数细胞AE1/AE3染色和p63染色阳性。MTT实验结果显示,PHFs+CECs组、阴性对照组和阳性对照组A_(490)值分别为0.59±0.01、0.65±0.07和0.06±0.04,总体比较差异有统计学意义(F=12.25,P<0.05),其中PHFs+CECs组和阴性对照组A_(490)值明显大于阳性对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。TUNEL检测结果显示,PHFs+CECs组、阴性对照组和阳性对照组TUNEL阳性细胞率总体比较差异有统计学意义(F=13.45,P<0.05),其中PHFs+CECs组和阴性对照组TUNEL阳性细胞率明显低于阳性对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。荧光素染色结果显示,随着术后时间的延长,各组角膜荧光素钠染色评分均降低,对照组、PHFs组和PHFs+CECs组角膜荧光素钠染色评分依次降低。苏木精-伊红染色结果显示,对照组存在较少形状不规则的角膜上皮细胞,PHFs组一些区域出现单层稀疏的角膜上皮细胞;PHFs+CECs组角膜上皮覆盖范围最大,细胞层数增加到3~5层,形态较规则,排列较紧密。结论PHFs韧性强、透光度高且能够体外扩增角膜上皮,适合做角膜上皮移植片,并能促进LSCD兔模型角膜上皮的修复。

眼痛息滴眼液的研制及疗效观察

电光性眼炎、角膜异物剔除术、眼前段挫裂伤等是眼科常见病,主要表现为眼部出血、红肿、剧烈疼痛.而眼科医生除使用麻药地卡因和氯霉素滴眼液外,尚无其它药品使用。而地卡因除止痛时间短以外,还影响角膜上皮再生.为此我们研制了融止痛、止血、消炎于一体的眼科制剂——眼痛息滴眼液.通过大鼠病理模型的治疗实验和眼科临床观察,疗效确切,现报告如下:

准分子激光角膜原位磨镶术治疗近视的效果观察

随着电子产品种类的多样化及其在各领域的全面普及,近视患者数量与日俱增,已成为临床眼科的多发疾病^([1])。有研究显示^([2]),我国近视患者已超过3亿人,且高度近视患者具有高致盲风险。既往多采用准分子激光屈光性角膜切除术治疗近视,疗效确切,但术中可能会破坏角膜上皮与前弹力层,容易致使角膜结构改变,或使角膜上皮再生和上皮下雾状浑浊,不利于提高患者术后生活质量^([3])。为进一步提高临床疗效,提升患者术后生活质量,本文分析准分子激光角膜原位磨镶术治疗近视的效果,现报告如下。