基于角膜共焦激光显微镜检测的角膜基底神经变化与2型糖尿病视网膜微血管病变的相关性研究

目的探讨角膜共焦激光显微镜检测的角膜基底神经变化与2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)视网膜微血管病变的相关性。方法选取2016年2月至2017年2月在我院治疗的T2DM患者118例,其中合并糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)患者57例(DR组),无DR患者61例(NDR组),同时选取健康志愿者60人作为对照组,所有研究对象采用角膜共焦激光显微镜检查,分析角膜神经形态参数与临床指标的关系。结果 DR组角膜神经纤维密度、角膜神经分支密度和角膜神经长度分别为(20.03±4.22)条·mm-2、(22.01±7.05)条·mm-2和(9.50±1.76)mm·mm-2,明显小于对照组和NDR组(均为P<0.05),而角膜神经纤维弯曲度为0.30±0.03,明显高于对照组和NDR组(均为P<0.05);DR患者中,Ⅲ期患者角膜神经纤维密度、角膜神经分支密度和角膜神经长度明显小于Ⅰ期和Ⅱ期DR患者(均为P<0.05),而角膜神经纤维弯曲度明显高于Ⅰ期和Ⅱ期DR患者(均为P<0.05)。DR组病程为(12.04±2.48)a,明显高于NDR组(P<0.05),而空腹C肽和空腹胰岛素分别为(1.41±0.58)μg·L-1和(20.05±7.91)m U·L-1,明显低于NDR组(均为P<0.05)。T2DM患者病程与角膜神经分支密度及角膜神经纤维长度呈负相关(r=-0.322、-0.317,均为P<0.05);空腹C肽与角膜神经分支密度呈正相关(r=0.298,P<0.05),与角膜神经弯曲度呈负相关(r=-0.311,P<0.05)。结论 T2DM视网膜微血管病变患者角膜神经形态参数异常,对病程较长或空腹C肽水平低的T2DM患者应用角膜共激光显微镜检测有助于早期发现微血管病变。

人活体角膜神经形态特征的激光共焦显微镜观察

评价角膜激光共焦显微镜作为一种新的方法观察正常及病变角膜的神经形态特征变化.本研究对76人的76眼进行了角膜激光共焦显微镜的检查.包括20例健康志愿者,20例Ⅱ型糖尿病患者,15例因Sjogren综合征导致的角结膜干燥征患者,5例长期佩戴软性角膜接触镜超过10年的患者,8例圆锥角膜患者及8例翼状胬肉患者.角膜共焦显微镜的扫描结果显示,人角膜上皮层下神经丛平行于前弹力层走行,部分有分支和交叉.在多种眼表面疾病中均可观察到神经形态的改变.糖尿病患者的角膜神经分支减少而曲折度增加,Sjogren综合征患者的角膜神经细而不连续,角膜接触镜佩戴者可查见螺旋状的角膜神经,圆锥角膜和翼状胬肉患者的角膜神经可发生多种形态的改变.研究结果显示角膜激光共焦显微镜提供了研究角膜疾病中神经形态改变的基本方法.

角膜激光共焦显微镜在糖尿病视网膜病变中的应用

目的探讨角膜激光共焦显微镜在观察糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)患者角膜上皮下神经丛、角膜细胞密度及形态变化中的价值。方法选取确诊的DR患者94例(114眼),其中非增生型糖尿病视网膜病变(non-proliferative diabetic retinopathy,NPDR)患者41例(52眼,NPDR组)、增生型糖尿病视网膜病变(proliferative diabetic retinopathy,PDR)患者53例(62眼,PDR组),收治时间2016年1月至2017年4月,同期糖尿病无眼底改变的患者40例(40眼)作为对照组,三组均采用角膜激光共焦显微镜进行检测,对比各组角膜上皮下神经丛、角膜细胞密度及形态的变化。结果 NPDR组和PDR组患者的角膜基底层、浅基质层、中基质层、深基质层的细胞密度均显著低于对照组(均为P<0.05);PDR组患者的角膜基底层、浅基质层、中基质层、深基质层的细胞密度均显著低于NPDR组(均为P<0.05);NPDR组和PDR组患者的角膜内皮细胞密度、六边形细胞比例、神经纤维密度、神经纤维长度均显著低于对照组(均为P<0.05),NPDR组和PDR组患者的内皮细胞变异率、神经分支密度均显著高于对照组(均为P<0.05);PDR组患者的角膜内皮细胞密度、六边形细胞比例、神经纤维密度、神经纤维长度分别为(1962.0±117.3)个·mm^(-2)、46.1%±5.5%、(15.4±3.3)根·mm^(-2)、(6.2±2.7)mm·mm^(-2),均显著低于NPDR组的(2381.4±144.0)个·mm^(-2)、58.2%±7.0%、(20.6±3.8)根·mm^(-2)、(8.6±2.4)mm·mm^(-2)(均为P<0.05),PDR组患者的内皮细胞变异率、神经分支密度均显著高于NPDR组(均为P<0.05)。结论角膜激光共焦显微镜能有效观察DR患者角膜上皮下神经丛、角膜细胞密度及形态变化,为临床诊断、治疗提供指导。

激光共焦显微镜下圆锥角膜交联术后角膜基质的观察

目的通过角膜激光共焦显微镜观察圆锥角膜交联术后基质的变化。方法收集2018年12月至2019年7月于西安市第一医院和深圳市第六人民医院确诊为进展期圆锥角膜患者,行等渗核黄素液角膜交联手术,于术后1周、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月行角膜激光共焦显微镜观察角膜基质形态的变化,并测量相应变化处角膜的深度。结果角膜交联术后1周基质胶原纤维水肿增粗,细胞激活、细胞核反光增强,病变深至角膜(210.2±2.2)μm处;术后1个月、2个月、3个月基质胶原纤维水肿、排列不规则,可见高反光瘢痕,分别深至角膜(209.4±2.8)μm、(210.1±2.1)μm、(209.2±2.6)μm处;术后4个月胶原纤维水肿消退、排列趋于规则,瘢痕深至(179.0±2.4)μm,术后5个月,胶原纤维排列规则,瘢痕深至(146.3±2.1)μm,术后6个月,胶原纤维排列规则,瘢痕深至(128.1±2.3)μm。术后前3个月病变最深处差异无统计学意义,3个月与4个月、4个月与5个月,5个月与6个月差异有统计学意义(P<0.05)。结论角膜交联术后,基质胶原纤维由水肿、排列紊乱逐渐重塑规则;基质细胞激活、出现瘢痕并于术后3个月开始逐渐从深开始消减。

共焦激光角膜显微镜观察角膜炎的病变形态学特征

正常角膜的细胞形态的共焦显微镜特征已被广泛、深入的研究。共焦显微镜检查可在细胞水平对活体角膜进行四维(三维空间加时间)观察,且具有快速、敏感、可重复等特点,作为一种非侵入性无创性检查对各种类型角膜炎的诊断、治疗具有重要的价值。就共焦显微镜检查在各种感染性角膜炎及非感染性角膜炎中的病变形态学特征进行综述。

激光共焦显微镜与组织病理学对翼状胬肉组织中微血管密度研究的比较

背景研究表明，翼状胬肉是眼表的一种异常细胞增生性疾病，血管因素在它的生长和复发中起重要作用。多种抗新生血管治疗方法被应用于翼状胬肉，但活体观察翼状胬肉血管情况的研究尚少见。目的比较角膜激光共焦显微镜与免疫组织化学染色对翼状胬肉组织中微血管密度研究的结果。方法采用前瞻性病例对照研究方法，收集原发性翼状胬肉患者20例20眼为翼状胬肉组，手术中获取翼状胬肉组织；另收集年龄和性别匹配的行内眼手术及斜视手术的患者20例20眼为正常球结膜组，手术中获取正常鼻侧球结膜组织作为对照，翼状胬肉组患者均于术前用海德堡角膜激光共焦显微镜采集5幅翼状胬肉头部的微血管图像，同时采集正常球结膜组正常球结膜微血管图像。对两组患者手术中获得的标本进行常规组织病理学检查和CD31免疫组织化学染色，计算组织标本中微血管密度值，对翼状胬肉组患者激光共焦显微镜所测的微血管密度值以及手术标本中的微血管密度值分别与正常球结膜组进行比较，并分别将两组用两种方法测得的血管密度值进行相关分析。结果角膜激光共焦显微镜下翼状胬肉基质中的微血管密度（MVD）值为（8929±2993）μLm／mm2，正常球结膜中的微血管密度值为（4202±692）μm／mm2，二者比较差异有统计学意义（t=6．881，P〈0．01）。翼状胬肉的组织标本中CD31染色阳性的微血管数为（21．00±4．06）个／高倍视野，正常球结膜组为（6．07±1．75）个／高倍视野，二者比较差异有统计学意义（t=12．312，P〈0．01）。翼状胬肉组和正常球结膜组激光共焦显微镜活体测得的MVD值与免疫组织化学离体测得的MVD值均呈显著正相关（翼状胬肉组：r=0．649，P〈0．01；正常球结膜组：r=0．572，P〈0．01）。结论角膜激光共焦显微镜活体动态观察翼状胬肉组织微血管的方法优于离体的免疫组织化学检测法，角膜激光共焦显微镜对翼状胬肉的血管形态进行活体研究有助于进一步研究翼状胬肉组织的生物学行为及其机制。

翼状胬肉的激光共焦显微镜观察

目的翼状胬肉是常见的眼表面疾病,活体显微结构的观察有助于治疗与随访。方法用海德堡角膜激光共焦显微镜观察了20例原发性翼状胬肉(翼状胬肉组)以及20例正常志愿者(对照组)的结膜和角膜缘。比较了2组角膜各部分细胞数及中央厚度,并对翼状胬肉的血管、树突状细胞数与对照组的的角膜缘进行了比较。结果角膜激光共焦显微镜扫描的图像能清晰地观察翼状胬肉患者眼表面的超微结构,包括翼状胬肉周围角膜浅层神经的形态、上皮及其与角膜交界的边缘,翼状胬肉的基质及其血管和浸润的炎性细胞。与正常眼表面相比较,翼状胬肉生长的眼表面,其角膜基底部上皮细胞、前基质细胞、后基质细胞、内皮细胞数量以及中央角膜厚度无显著改变,翼状胬肉基质中的血管密度显著高于正常角膜缘(P<0.05)。翼状胬肉组织浅层及其边缘可见较多的树突状细胞,数量显著高于正常角膜缘(P<0.05)。结论角膜激光共焦显微镜可对翼状胬肉进行精确活体观察。

角膜营养不良家系的共焦显微镜观察研究

目的:采用角膜激光共焦显微镜观察研究颗粒状角膜营养不良家系患者的角膜状况。方法:采用角膜激光共焦显微镜对4例(6只眼)颗粒状角膜营养不良患者的角膜进行扫描检测,对比裂隙灯及普通显微镜观察分析检查情况。结果:颗粒状角膜营养不良患者的病变角膜裂隙灯下呈现面包屑样的灰白色混浊,在苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色中呈现出伊红染的颗粒,沉积于基质板层之间,在共焦显微镜下则为中高反光的团块,相互融合,并取代了基质细胞。结论:颗粒状角膜营养不良患者角膜病变从裂隙灯到普通HE染色下的显微镜,乃至高倍的共焦显微镜观察到的沉积物,分布情况相吻合,印证角膜病变发展的状况,有利于了解该病变的发展情况。

活体中的真菌孢子和培养真菌孢子的共焦显微镜对照研究

目的采用角膜激光共焦显微镜对真菌孢子致病的真菌性角膜溃疡及培养菌落进行观察,比较并总结其特点。方法回顾性系列病例研究。11例(11只眼)角膜溃疡经取溃疡灶取材培养、菌种鉴定确诊为孢子致病的真菌性角膜溃疡患者,采用激光角膜共焦显微镜分别观察角膜溃疡灶中的真菌孢子形态和培养菌落涂片的真菌孢子形态,研究二者孢子图像的相似性,为早期诊断单纯孢子致病的真菌性角膜溃疡打下研究基础。结果溃疡灶中的活体孢子与实验室培养出的真菌菌落涂片的孢子,在角膜激光共焦显微镜图像上,有很好的一致性。结论孢子致病的真菌性角膜溃疡,其角膜激光共焦显微镜检查到的活体孢子图像与培养孢子的图像特点基本吻合。角膜激光共焦显微镜检查在孢子致病的真菌性角膜溃疡诊断方面上,是对角膜刮片培养、实验室检查的有力补充。

激光角膜共焦显微镜在真菌性眼内炎伴前房积脓诊断中应用

目的对真菌性眼内炎伴前房积脓的患者，采用激光角膜共焦显微镜检查进行观察研究，并归纳总结其临床特点。方法对11例（11只眼）真菌性眼内炎伴前房积脓的患者，其无明显角膜溃疡，角膜结构基本完整，早期进行激光角膜共焦显微镜检查，研究其图象特点。结果文中真菌性眼内炎合并前房积脓的患者，采用激光角膜共焦显微镜能早期在角膜内皮面发现不同程度的真菌菌丝浸润。结论激光角膜共焦显微镜可以无创的检查角膜各层，特别是角膜内皮面的细胞级结构，对于真菌性眼内炎伴前房积脓的患者，能够早期无创的检查角膜内皮面，比传统的侵入性检查能更早发现角膜内皮面的真菌菌丝，有利早期对该病进行诊断和治疗。

共焦激光角膜显微镜在真菌性角膜炎诊断中的应用

目的评价共焦激光角膜显微镜在临床诊断真菌性角膜炎中的应用价值。方法用共焦激光角膜显微镜对临床拟诊为真菌性角膜炎的26例患者进行检查,同时行涂片检查真菌菌丝,对两组结果进行比较。结果26例患者中,根据病史、临床表现24例确诊为真菌性角膜炎,其中共焦激光角膜显微镜的确诊率为95.83%(23/24),角膜刮片的确诊率为83.33%(20/24)。结论共焦激光角膜显微镜是一种快速、有效、无损伤的活体检查方法,在真菌性角膜炎的早期诊断、治疗和研究中将起重要作用。

角膜激光共焦显微镜对糖尿病周围神经病变的早期诊断

目的通过角膜激光共焦显微镜研究角膜神经的改变与糖尿病周围神经病变(DPN)的相关性。方法入选45例2型糖尿病(T2DM)患者,其中合并DPN组25例,不伴DPN组20例,另选年龄相匹配的正常对照(NC)组10名,采用角膜激光共焦显微镜观察并记录受检者角膜上皮下神经的形态结构情况。结果 NC组的角膜上皮下神经较直,分支较少。糖尿病不伴DPN组角膜上皮下神经纤维长度与NC组相比无明显差异,但神经曲折度显著增加(P<0.05),神经分支密度亦明显增加(P<0.05)。而糖尿病合并DPN组的神经纤维长度相比于NC组、糖尿病不伴DPN组均显著减少,同时神经曲折度进一步增加,神经分支密度显著降低。结论糖尿病患者在周围神经病变的不同时期均有角膜上皮下神经的变化,提示使用角膜激光共焦显微镜进行角膜上皮下神经的形态结构观察对DPN的早期诊断有一定的价值。

暗场显微镜联合角膜激光共焦显微镜在非典型真菌性角膜溃疡的应用研究

目的对非典型的真菌性角膜溃疡患者（角膜刮片取材，涂片镜检不能确诊的真菌性角膜溃疡），采用暗场显微镜联合角膜激光共焦显微镜检查进行观察研究，并归纳总结其临床特点。方法23例（23只眼）非典型的真菌性角膜溃疡患者，在角膜刮片取材培养前采用激光角膜共焦显微镜对溃疡灶进行活体检查，然后进行角膜刮片取材，涂片常规镜检和暗场显微镜检查，研究其图象特点，并进行对比研究。结果非典型真菌性角膜溃疡灶中的真菌菌丝在活体角膜激光共焦显微镜中结构不完整、成像不清晰；在常规镜检下，成像不清甚至难以成像；但采用暗场显微镜检查能发现清晰的真菌菌丝。结论暗场显微镜观察非典型真菌性角膜溃疡有着独特的优点，该方法联合常规涂片镜检及共焦显微镜检查能提高对非典型真菌性角膜溃疡的诊断水平。

激光角膜共焦显微镜观察真菌性角膜炎的研究

目的探讨激光角膜共焦显微镜在真菌性角膜炎临床诊断中的意义。方法真菌性角膜炎患者40例40只眼,同时行角膜组织刮片及角膜真菌培养、激光角膜共焦显微镜检查,对三组结果进行比较。结果根据病史、临床表现确诊的真菌性角膜炎患者40例40只眼,激光角膜共焦显微镜的确诊率为90%,角膜刮片的确诊率为30%,培养查真菌菌落确诊率为25%。激光角膜共焦显微镜检查检出率高于角膜组织刮片(P<0.01)及真菌培养(P<0.01)检查。结论激光角膜共焦显微镜对真菌性角膜炎的检出具有及时、无创和高阳性率的特点,对真菌性角膜炎的早期诊断、治疗和研究具有重要的临床意义。

新鲜硬腭黏膜片在激光角膜共焦显微镜下的表现

目的研究新鲜硬腭黏膜片在激光角膜共焦显微镜下的表现，为评价采用新鲜硬腭黏膜片重建眼睑后层的手术方式提供新的研究方法和依据。方法临床病例系列研究。对2006年6月2010年11月在深圳市眼科医院应用硬腭黏膜片移植联合眼周皮瓣转移重建眼睑术中，取新鲜硬腭黏膜片立即进行激光角膜共焦显微镜检查，同时行病理组织学检查，对二者结果进行比较研究。结果在激光角膜共焦显微镜下检查新鲜的硬腭黏膜片分为上皮层和固有层，上皮层从表至里又分为角化层、颗粒细胞层和棘细胞层，上皮层与固有层的交界处为上皮嵴。最表层的上皮细胞呈圆盘状结构，也可以带有2-3个边角，边界为高反光结构，细胞内是中低反光结构，看不见细胞核，细胞成群排列；颗粒细胞层位于表层上皮细胞层和棘细胞层之间，为4-6边形的细胞结构，细胞边界为高反光结构，细胞内是低反光结构，看不见细胞核；棘细胞层为圆形排列的细胞结构，细胞边界为低反光结构，细胞内为中低反光结构，看不见细胞核。固有层为中-高反光的条索状结构，细胞结构不清晰。硬腭黏膜的上皮层向固有层突人形成的上皮嵴，在共焦显微镜下呈较大的圆形或者椭圆形结构，由上皮面观察，细胞结构不清，圆圈中央是低反光结构，圆圈周边是中-高反光结构；从固有层面观察上皮嵴呈阒形或椭圆形的中-高反光结构，周围是成群的细胞。新鲜硬腭黏膜片在激光角膜共焦显微镜下的检查结构与其在光学显微镜下的检查结构基本对应。结论用激光角膜共焦显微镜可以直接检查新鲜的硬腭黏膜片，能够较为清晰的观察新鲜的硬腭黏膜片的各层细胞结构，确定硬腭黏膜片的质量，检查结果基本与病理学检查结果相对应，可以将该技术进一步应用于硬腭黏膜片重建眼睑术后的活体硬腭黏膜组织观察上，并为评价该手术的疗效提供客观依据。

共焦激光角膜显微镜在真菌性角膜炎早期诊断中的意义

目的探讨共焦激光角膜显微镜在真菌性角膜炎诊断中的应用价值。方法真菌性角膜炎患者34例34只眼,同时行共焦激光角膜显微镜检查及角膜组织刮片检查,对比分析两种方法真菌检出率情况。结果 34例患者中,共焦激光角膜显微镜的确诊率为94. 12%(32/34),角膜组织刮片检查确诊率为58. 82%(26/34),两者比较差异具有统计学意义(P <0. 05)。结论共焦激光角膜显微镜在真菌性角膜炎的早期诊断中具有重要的临床意义。

共焦激光角膜显微镜在真菌性角膜炎诊断及治疗中的应用

目的本研究旨在观察共焦激光角膜显微镜检查真菌性角膜炎及治疗转归的图像特点,探讨共焦激光角膜显微镜在真菌性角膜炎的早期诊断和合理用药中的作用。方法 2012年4月—2013年4月期间在丽水市人民医院眼科拟诊为真菌性角膜炎的38例(38眼)患者在治疗前同时行角膜刮片、角膜真菌培养及激光角膜共焦显微镜检查,使用那他霉素滴眼液、两性霉素B滴眼液及氟康唑抗真菌治疗,在治疗后7、14、21 d和停药后7 d再次行角膜显微镜检查,观察局部菌丝密度及炎性细胞密度,以此判断治疗效果,并根据检查结果调整治疗方案,治愈后继续随访1个月以观察有无真菌复发。结果共焦显微镜在34例患者中查找到菌丝,阳性率达到89.47%,真菌菌丝主要表现为高折光性的丝状物,有分支。显微镜下符合镰刀菌属特点(分支夹角多为90°)的有14例(41.18%);符合霉菌属特点(分支夹角一般为45°)的有10例(29.41%);符合酵母菌特点(表现为瘦长粒状)的有2例(5.88%)。经治疗后31例治愈,治愈率为81.58%,7例好转,无恶化及复发患者,平均病程19 d。经治疗后共焦角膜显微镜可及时观察到病灶中菌丝及炎性细胞数量逐渐减少,治愈后完全消失。结论共焦显微镜在真菌性角膜炎的早期诊断、菌种的初步鉴别及动态随访方面具有重要作用,能够为临床用药提供客观依据。

活体粘连虹膜在角膜激光共焦显微镜下表现及图像分类

目的应用角膜激光共焦显微镜观察活体粘连虹膜的形态学特征。方法临床病例观察对比研究。对2008年3月至2011年3月在深圳市眼科医院应用共焦显微镜观察15例各种原因引起虹膜与角膜粘连的患者，进行角膜激光共焦显微镜检查，透过透明的角膜组织观察到了活体粘连虹膜组织的共焦显微镜图像，并对图像进行分类研究。结果角膜激光共焦显微镜下活体粘连虹膜的形态结构分为6种：（1）树干状支架结构。（2）树枝状支架结构。（3）树丛状支架结构；（4）结果状结构。（5）上皮样结构。（6）深层结构。结论角膜激光显微镜能够观察特定条件下的活体虹膜显微结构，特别能清晰观察虹膜表面的支架结构和色素团块结构，有助于对各种累及虹膜疾病的深入理解。

不同角膜屈光手术对基底膜下神经的影响

目的:观察角膜屈光不同术式后基底膜下神经恢复情况。方法:角膜激光共焦显微镜观察术后1mo的LASEK 12眼、LASIK 12眼、FLEx 12眼、SMILE 12眼,并对部分其它术后时段进行了对比观察。结果:术后1mo SMILE组基底膜下神经均未见明显破坏,走行规律,完整,切口处被切断神经对合良好;LASEK,LASIK和FLEx基底膜下神经仍现不同程度损害,其它时段眼显示随着时间推移,逐渐形成交通支。结论:SMILE手术对基底膜下神经影响小,相对于其他几种角膜屈光手术,在术后神经恢复方面可能有一定优势。

真菌性角膜炎70例早期临床诊断分析

目的:分析70例真菌性角膜炎早期临床诊断结果,评价共焦激光显微镜在真菌性角膜炎早期临床诊断中的应用价值。方法:用共焦激光角膜显微镜对临床拟诊为真菌性角膜炎的70例患者进行检查,同时行涂片检查真菌菌丝及培养查真菌菌落,对三组结果进行比较。结果:在70例患者中,根据病史、临床表现确诊为真菌性角膜炎,其中共焦激光角膜显微镜的确诊率为94%(66/70),角膜刮片的确诊率为31%(22/70),培养查真菌菌落确诊率为20%(14/70)。激光共焦角膜显微镜检查检出率高于角膜组织刮片(χ2=29.615,P<0.01)及真菌培养(χ2=39.433,P<0.01)检查。结论:共焦激光角膜显微镜是一种无创、快速、有效的活体检查方法,在真菌性角膜炎的早期诊断、治疗和研究中将起重要作用。