角膜内树突状细胞及其在角膜移植免疫排斥反应中的作用

树突状细胞是目前已知的体内功能最强的抗原呈递细胞。成熟树突状细胞可引发机体免疫反应,而未成熟树突状细胞则会诱导机体免疫耐受。最近研究表明,角膜中央区内的树突状细胞完全处于未成熟状态,而角膜周边区内的树突状细胞则大多处于成熟状态;树突状细胞在角膜移植免疫排斥反应中发挥着重要作用。本文就角膜内的树突状细胞以及其在角膜移植免疫排斥反应中的作用作一综述。

雷公藤多甙滴眼液防治角膜移植免疫排斥反应的实验研究

目的 观察雷公藤多甙（ＴⅡ）滴眼液局部应用对角膜移植免疫排斥反应的影响。方法 建立大鼠角膜移植模型，随机分组：Ａ，Ｂ，Ｃ组为ＳＤ大鼠－Ｗｉｓｔａｒ大鼠组间同种异体角膜移植，ＳＤ大鼠为受体，Ｗｉｓｔａｒ大鼠为供体，其中Ａ组为空白对照组、Ｂ组为０．０２％ＴⅡ滴眼液组、Ｃ组为０．０３％ＴⅡ滴眼液组，另设Ｄ组为ＳＤ大鼠同种间对照组、Ｅ组为ＳＤ大鼠自体对照组。用裂隙灯显微镜记录及比较各组移植排斥指数（ＲＩ），包括角膜植片透明度、水肿度、新生血管程度，并比较角膜排斥发生时间。结果 术后各组移植排斥指数及发生角膜移植排斥时间，Ａ组与Ｂ组、Ａ组与Ｃ组、Ｂ组与Ｃ组比较均有显著性差异，Ｐ＜０．０５；Ｄ组和Ｅ组两对照组之间比较Ｐ＞０．０５，无显著性差异。结论ＴⅡ滴眼液可有效地防治角膜移植免疫排斥反应，０．０３％比０．０２％ＴⅡ滴眼液更有效。

中药菊花决明散防治大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的研究

目的探讨中药菊花决明散对大鼠高危角膜移植排斥反应的抑制作用。方法角膜缝线法诱导受体角膜新生血管,行穿透性角膜移植,建立大鼠高危角膜移植排斥反应模型。术后治疗组采用每天菊花决明散方0.1g/2mL灌胃,对照组采用生理盐水2mL灌胃,观察植片存活状况;应用组织病理学、免疫荧光组织化学,流式细胞仪等方法对受体局部和全身免疫状态进行检测。结果治疗组大鼠角膜植片存活时间为(14.50±3.55)天,明显长于生理盐水组的(8.25±0.71)天(P<0.01);治疗组术后虹膜铺片Fas、FasL的表达低于对照组;术后14天外周血中CD4+CD2+5FOXP3+阳性细胞治疗组[(14.81±2.58)%]高于对照组[(5.11±3.92)%],差异有统计学意义(P<0.01);治疗组房水中IL-2浓度低于对照组而IL-10浓度高于对照组。结论菊花决明散方对高危角膜移植排斥反应模型大鼠术后免疫排斥反应具有一定抑制作用。

雷帕霉素抑制大鼠角膜移植免疫排斥反应的实验研究△

目的研究雷帕霉素对大鼠角膜移植免疫排斥反应的抑制作用。方法建立大鼠穿透性角膜移植动物模型,以SD大鼠为受体,Wistar大鼠为供体,分为4组,手术当日起分别腹腔注射0.5%羧甲基纤维素、雷帕霉素(2.5mg·kg-1·d-1)、环孢霉素A(10mg·kg-1·d-1)、雷帕霉素+环孢霉素A(RPM1.5mg·kg-1·d-1+CsA5mg·kg-1·d-1),共12d。对角膜植片进行临床观察,以混浊、水肿和新生血管3项指标作为临床评估标准。结果4组角膜植片的存活时间分别为11.29d±1.50d、20.57d±2.37d、20.86d±2·12d及22.57d±1.99d,各用药组与对照组比较差异有显著性(P<0.01)。结论雷帕霉素能显著延长角膜植片的存活时间,对大鼠穿透性角膜移植排斥反应具有抑制作用,联合用药具有协同作用。

山茱萸总甙滴眼液防治角膜移植免疫排斥反应的实验研究

目的 :观察山茱萸总甙 (COG)滴眼液局部应用对角膜移植免疫排斥反应的影响。方法 :建立封闭群大鼠角膜移植模型 ,用裂隙灯显微镜记录及比较各组角膜排斥反应发生时间 ;并进行病理学和扫描电镜检查。结果 :病理学检查B、C组 15d时的角膜植片淋巴细胞浸润及新生血管明显少于A组。免疫组化显示 :ICAM - 1的表达在 15d时B、C组明显少于A组。结论 :COG滴眼液能有效地防治角膜移植免疫排斥反应。

雷公藤多甙防治角膜移植免疫排斥反应的实验研究

用兔同种异体角膜移植模型，观察了雷公藤多甙及联合环孢霉素A对植片存活时间和移植抗原诱导的迟发型超敏反应的影响。结果显示：与对照组相比，雷公藤多甙组、环孢霉素组和两种药物联合组植片存活时间显著延长，移植抗原诱导的迟发型超敏反应也显著受到抑制；其中联合组的作用又大于两种药物单独应用组。结果提示：雷公藤多甙具有显著延长角膜移植存活和防止免疫排斥反应发生的作用；与环胞霉素A具有一定的协同作用，为进一步应用于临床提供了实验依据。

白介素-1受体拮抗剂滴眼液治疗大鼠高危角膜移植免疫排斥反应

目的 观察白介素 1受体拮抗剂 (IL 1ra)滴眼液对高危角膜移植排斥反应的治疗作用。方法 SD大鼠为供体 ,Wistar大鼠为受体。缝线法诱导角膜新生血管后行角膜移植。对照组用生理盐水点眼 ,实验组分别用IL 1ra 1、3、5mg/mL点眼。同时设IL 1ra 1mg/mL结膜下注射组。观察植片的存活情况并检测植片中CD1阳性细胞。结果 与对照组相比 ,IL 1ra 3、5mg/mL组和结膜下注射组均可明显延长植片的存活时间 (P <0 0 5 )并减少植片中CD1阳性细胞的浸润。结论 IL

ICOS共刺激通路参与角膜移植免疫排斥反应的研究

目的研究可诱导共刺激分子(ICOS)共刺激通路与角膜移植急性免疫排斥反应的关系。方法建立大鼠同种异体穿透角膜移植模型,分别于术后7d、14d取植片进行病理学观察,采用RT-PCR法检测植片组织ICOS mRNA的表达情况,免疫组织化学法检测植片组织淋巴细胞ICOS蛋白水平;同时采用流式细胞术检测外周血CD3+ICOS+T/CD3+T的表达情况。均以正常大鼠作为正常对照。结果正常大鼠角膜组织未检测到ICOS蛋白及ICOS mRNA的表达,移植术后植片组织可以检测到ICOS蛋白及ICOS mRNA的表达,且术后14d高于术后7d(P=0.000);与正常大鼠外周血CD3+ICOS+T/CD3+T的表达相比术后表达皆升高(方差齐性,P=0.156),且术后14d外周血CD3+ICOS+T/CD3+T的表达高于术后7d的表达(P=0.000)。结论共刺激分子ICOS与角膜移植急性免疫排斥反应密切相关。

角膜移植免疫排斥反应防治的研究进展

角膜移植是众多器官和组织移植中成功率最高的,然而移植后的免疫排斥反应仍是导致角膜移植术失败的主要原因。本文综述角膜移植后免疫排斥反应发生的机制、排斥反应的预防及其治疗等几个方面的研究进展。

白细胞介素-1受体拮抗剂抑制大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的实验研究

目的观察白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1ra)抑制大鼠高危角膜移植后免疫排斥反应、促进植片存活的作用。方法对40只SD大鼠(40眼)用缝线法诱导角膜新生血管增生,选取其中的30只大鼠(30眼)并随机分为实验Ⅰ、Ⅱ组及对照组Ⅲ组,每组均接受同种异系(Wistar大鼠)供体角膜,行穿透性角膜移植术。实验组于术后第1日起分别滴用50 μg/ml的IL-1ra滴眼液(Ⅰ组)和1%的CsA滴眼液(Ⅱ组),每日3次。受试动物术后均每日滴用典必殊滴眼液及托品卡胺滴眼液3次,连续14 d。术后比较各组大鼠免疫排斥反应发生的时间,对角膜植片存活情况进行评分,观察其效果。结果两实验组角膜植片平均存活时间分别为(12.00±1.50) d和(10.44±1.13) d,明显高于对照组(8.00±1.25) d,差异有显著性(P<0 01);两实验组间比较,差异亦有显著性(P<0 01)。结论IL-1ra可抑制高危角膜移植后的免疫排斥反应,减少新生血管的生成,减轻免疫性炎性反应,延长角膜植片的存活时间。

雷公藤内酯醇滴眼液防治角膜移植免疫排斥反应的实验研究

目的 探讨雷公藤内酯醇 (T1 0 )滴眼液局部应用对角膜移植免疫排斥反应的影响。方法 建立封闭群大鼠角膜移植模型 ,随机分组 :A、B、C组为 SD- Wistar组间同种异体角膜移植 ,SD为受体 ,Wistar为供体 ,其中 A组为空白对照组 ,B组为 0 .5 mg· L- 1 T1 0滴眼液组 ,C组为 1mg· L- 1 T1 0 滴眼液组 ,D组为 SD- SD对照组 ,即 SD大鼠间同种异体移植组和 E组 SD自体角膜移植对照组。用裂隙灯显微镜记录及比较各组 :角膜透明度、水肿度、新生血管度、移植排斥指数 (RI)以及角膜排斥发生时间。结果 术后各组角膜植片透明度、水肿度、新生血管程度以及发生角膜移植排斥时间 ,A组与 C组比较有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;D组和 E组比较无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 T1 0 滴眼液可有效防治角膜移植免疫排斥反应。

黑睛排斥汤对大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的防治研究

背景高危角膜移植患者虽然常规应用免疫抑制性药物，但角膜移植片的排斥率仍很高。近年来传统中药在角膜移植中的作用逐渐引起关注，黑睛排斥汤对大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的防治作用需要进一步研究。目的探讨黑睛排斥汤对大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的抑制作用。方法16只正常雌性SD大鼠角膜作为供体，32只雌性Wistar大鼠作为受体，用角膜缝线法诱导角膜新生血管（CNV），建立大鼠高危角膜移植模型，然后行封闭群大鼠SD．Wistar组间同种异体全板层角膜移植。采用随机数字表法将大鼠随机分为4个组，包括模型对照组（生理盐水灌服）、CsA组[10mg／（kg·d）CsA灌服]、黑睛排斥汤组[4g／（kg·d）黑睛排斥汤灌服]和联合用药组[10mg／（kg·d）CsA＋4g／（kg·d）黑睛排斥汤灌服]，各组大鼠均于同种异体角膜移植后4d开始灌服相应药物，于术后第4天起裂隙灯显微镜下观察眼前节反应，每隔2天观察1次，连续观察30d。参考Larkin等的标准对角膜}昆浊程度、水肿程度及新生血管程度进行评分，记录移植排斥指数（RI）并观察植片的存活状况，对角膜进行常规组织病理学检查，采用流式细胞分析法对受体角膜局部和全身免疫状态进行检测，对4个组大鼠的各种检测指标进行比较。结果模型对照组大鼠角膜移植术后10d左右发生排斥反应，CsA组和黑睛排斥汤组大鼠均于术后12～13d发生排斥反应，而联合用药组大鼠于术后22d发生排斥反应。与模型对照组比较，CsA组、黑睛排斥汤组和联合用药组大鼠角膜移植后角膜混浊程度评分、角膜水肿评分和新生血管评分均明显下降，差异均有统计学意义（P〈0．05），且联合用药组上述各指标的评分均明显低于CsA组和黑睛排斥汤组，差异均有统计学意义（P〈0．05），而CsA组与黑睛排斥汤组的各种评分差异均无统计学意义（P〉0．05）。模型对照组角膜移植片存活时间平均为（10．38±1．69）d，联合用药组平均为（22．50±3．07）d，差异有统计学意义（t=-9．790，P=0．000）。组织病理学检查表明，术后15d联合用药组大鼠角膜基质中淋巴细胞浸润及新生血管评分少于CsA组和黑睛排斥汤组。流式细胞学检查证实，黑睛排斥汤组、CsA组和联合用药组大鼠角膜移植术后外周血中CD4＋淋巴细胞计数及CD4＋／CD8＋比值均低于模型对照组，联合用药组CD4＋淋巴细胞计数及CD4＋／CD8＋比值均低于CsA组和黑睛排斥汤组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论黑睛排斥汤对高危角膜移植模型大鼠术后角膜排斥反应有抑制作用，其疗效与0．1％CsA接近，二者联合用药有协同作用。

角膜移植免疫排斥反应细胞疗法的研究进展

角膜移植术后免疫排斥反应是导致手术失败的主要原因，而临床上常用的免疫抑制剂存在着许多不良反应。细胞治疗效果确切，不良反应少，已成为新的研究热点。大量研究表明，在诱导、维持机体免疫耐受和免疫应答稳态方面具有重要作用的调节性T细胞能直接参与角膜移植术后免疫耐受的形成。近年来，树突状细胞被发现在免疫系统中扮演着双重角色，除作为抗原递呈细胞诱发免疫反应外，不成熟或表达抑制性细胞因子的树突状细胞还可诱导免疫耐受。体内外研究表明，间充质干细胞是一种具有多向分化潜能的非造血基质细胞，可通过对免疫细胞的影响，诱导抗炎效应和／或免疫耐受状态，有效抑制器官移植排斥反应。而作为继Tregs之后的又一热点细胞，髓源性抑制细胞能由多种途径抑制效应性T细胞增生，减少细胞因子的分泌，促进T细胞凋亡，抑制B细胞、NK细胞和巨噬细胞等的活动，甚至能诱导Tregs的产生，在抑制自身免疫性疾病和器官移植排斥中起着重要的作用。本文就以上4种细胞的免疫特点及其在角膜移植排斥反应治疗方面的研究进展进行综述。

雷帕霉素抑制大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的实验研究

目的:研究雷帕霉素对大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的抑制作用。方法:建立大鼠高危穿透性角膜移植动物模型,以角膜新生血管化SD大鼠为受体,W istar大鼠为供体,分别腹腔注射0.5%羧甲基纤维素(对照组)、雷帕霉素、环孢霉素A、雷帕霉素+环孢霉素A,共12 d。用裂隙灯显微镜对角膜植片进行临床观察,记录角膜植片存活时间,并进行组织学检查。结果:用药组角膜植片的存活时间显著增加(P<0.01);组织学发现联合用药组的角膜炎性细胞浸润、新生血管形成及水肿程度均明显好于其他各组。结论:雷帕霉素能显著延长角膜植片的存活时间,对大鼠高危穿透性角膜移植排斥反应具有抑制作用,与环孢霉素A联合用药具有协同作用,优于各单药物治疗组。

白细胞介素-33在大鼠角膜移植免疫排斥反应中的作用

目的探讨白细胞介素(interleukin,IL)-33在大鼠角膜组织中的表达及其在角膜移植术后免疫排斥反应中的作用。方法以SD大鼠为供体,Wistar大鼠为受体建立同种异体大鼠穿透性角膜移植模型,随机分为4组,取Wistar鼠4只(8眼)为正常对照组(A组),另取24只Wistar鼠作为自体角膜移植组(B组),最后取24只SD鼠和48只Wistar鼠行SD-Wistar鼠之间同种异体角膜移植(C组、D组),术后D组每日滴典必殊眼液(每日2次),共2周。参照Larkin法对各组角膜植片进行临床评估;分别于术后第5天、第14天取材,行实时荧光定量PCR、组织病理学观察,检测各组角膜组织内IL-33 mR NA的表达水平。结果 C组角膜植片的存活时间为(10.13±0.44)d,D组为(18.00±0.66)d,两组间差异有统计学意义(P=0.000)。IL-33 mR NA在A组和B组角膜组织中均有表达,C组角膜组织中IL-33 mR NA表达水平明显升高,而在D组中表达显著降低(P<0.05)。结论IL-33可能参与大鼠角膜移植术后免疫排斥反应。

IL-1ra抑制大鼠角膜移植免疫排斥反应的研究

目的 观察白细胞介素 - 1受体拮抗剂 (IL 1ra)对大鼠穿透性角膜移植术后免疫排斥反应的影响。方法 建立大鼠同种异体穿透性角膜移植动物模型 ,受者随机分为生理盐水对照组 ,CsA治疗组 ,IL - 1ra治疗组。术后连续观察 2周 ,对各组大鼠角膜植片存活情况进行评分比较 ,评价药效。结果 IL - 1ra组与CsA组角膜植片存活时间分别为 (19.5 83± 0 .2 88)d和 (16.667± 0 .43 2 )d ,与对照组 (11.0 0 0± 0 .3 2 6)d相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;IL - 1ra组和CsA组排斥反应指数 (RI)均明显低于对照组 (P <0 .0 1) ;IL - 1ra组新生血管评分明显低于对照组和CsA组 (P <0 .0 1)。结论 IL - 1ra可明显抑制角膜移植术后免疫排斥反应 ,减轻炎性反应 ,减少新生血管生成 。

转化生长因子-β防治角膜移植免疫排斥反应的实验研究

转化生长因子-β（TGF）是一具有免疫调节活性的多肽分子，包括抑制T细胞和B细胞的分化以及灭活巨噬细胞功能。本研究建立兔同种异体偏中心穿透性角膜移植和异位角膜移植模型，观察了TGF-β对角膜移植排斥反应的影响。发现使用TGF-β具有延长移植片存活和抑制供体特异性迟发型超敏反应的作用。结果提示TGF-β具有作为免疫抑制剂抑制角膜移植排斥反应的能力。

黑睛排斥汤防治大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的机理研究

目的探讨黒睛排斥汤在大鼠高危角膜移植免疫排斥反应中作用的机理。方法角膜缝线法诱导角膜新生血管,建立大鼠高危角膜移植模型,随机分为A组(模型对照),B组(灌服黒睛排斥汤4 g/(kg.d)),C组(灌服黒睛排斥汤4 g/(kg.d)+CsA 10 mg/(kg.d))。行封闭群大鼠SD-Wistar组间同种异体全板层角膜移植,观察植片存活状况;应用流式细胞分析,免疫荧光组织化学等方法对受体局部和全身免疫状态机制进行检测。结果 1.角膜植片存活时间:A组(10.38±1.69)d,B组(13.00±2.03)d,C组(22.50±3.07)d,3组比较差异有统计学意义(P<0.01)。2.外周血淋巴细胞CD4+和CD8+亚群:术后7 d,CD4+,CD8+,CD4+/CD8+各组之间比较均无明显差别(P>0.05);术后14 d,C组CD4+、CD4+/CD8+与A组比较明显降低(P<0.05);术后21 d,B、C组CD4+、CD4+/CD8+与A组比较明显降低(P<0.05),但各组CD8+比较无明显差异(P>0.05)。3.ConA诱导的脾淋巴细胞的增殖:B组、C组脾T淋巴细胞的增殖被明显抑制,与A组比较差异有统计学意义(P<0.01),其中以C组更为明显。结论黒睛排斥汤对高危角膜移植排斥反应模型大鼠术后免疫排斥反应的抑制作用主要是通过抑制T淋巴细胞的增殖来实现的。