分子遗传学实验研究在角膜营养不良临床诊断中的应用

目的 :通过对相关基因突变的检测 ,探讨以分子遗传学为基础的新的临床分类方法在角膜营养不良临床诊断中的应用。方法 :取我院门诊及病房收治的角膜营养不良患者 2 0例及 10例正常人外周静脉血 2ml,采取快速法提取白细胞DNA ,合成特异引物 ,分别行BIGH3基因第 4及第 12外显子PCR扩增 ,将PCR扩增产物进行纯化和测序。结果 :所有角膜营养不良患者均有BIGH3基因突变 ,其中 ,13例为R12 4H杂合子 ,确诊为Avellino角膜营养不良 ;3例为R5 5 5W杂合子 ,确诊为颗粒状角膜营养不良 ;4例为R12 4C杂合子 ,确诊为格子状角膜营养不良Ⅰ型。所有正常对照者均无BIGH3基因突变。结论 :通过本研究证实 ,以分子遗传学为基础的新的临床分类方法使诊断更为准确 ,同时使更为准确地预测疾病的发生、发展及预后成为可能 ,并为今后进行更为根本、有效的治疗包括基因治疗打下了良好的基础。

共焦显微镜在角膜营养不良诊断中的应用

目的探讨共焦显微镜在角膜营养不良诊断中的应用价值。设计病例系列研究。研究对象6例角膜营养不良,包括4例ReisB櫣cklers角膜营养不良、1例角膜斑点状营养不良、1例Fuchs角膜内皮营养不良。方法患者双眼行裂隙灯显微镜及共焦显微镜检查,选择病变在不同角膜层次的共焦显微镜图像,对角膜沉淀进行形态学评价,并与裂隙灯检查比较。主要指标角膜病变的裂隙灯显微镜及共焦显微镜图像。结果共焦显微镜显示ReisB櫣cklers角膜营养不良病变主要累及前部基质,包括角膜上皮、基底细胞及前弹力层;斑点状角膜营养不良病变仅累及基质层,而角膜上皮层及内皮层正常;在Fuchs角膜内皮营养不良中,可直接观察角膜小滴及角膜内皮情况。结论共焦显微镜检查提供了一种评价角膜病变的方法,较裂隙灯显微镜的分辨率高。