产角蛋白酶芽孢杆菌50-3的分离与初步鉴定

为获得产角蛋白酶活性较高的菌株,以1 942株动物粪便源芽孢杆菌为对象,在角蛋白酶筛选培养基中进行初筛,以菌株生长的透明圈与菌落直径比值较大的菌株在种子培养基中进行复筛,并进行菌株鉴定。结果表明:复筛得到的菌株50-3在鸡毛粉作为角蛋白酶诱导底物的培养基上,37℃发酵36 h,角蛋白酶活力可以达到(694±15)U/mL。通过形态观察、生理生化分析、全细胞蛋白电泳和16S rDNA序列分析,初步鉴定菌株50-3为枯草芽孢杆菌进化分支中的一个种,命名为Bacillus sp.50-3。

聚乙烯醇/角蛋白/碳纳米管自愈合导电水凝胶的构建

为了进一步提高聚乙烯醇水凝胶的力学性能和导电灵敏性,本文以聚乙烯醇(PVA)为原料,以羊毛角蛋白(KE)和三氯化铝(AlCl_(3))为交联剂,添加碳纳米管(CNT)作为导电载体,制备出具有互穿双网络结构的自愈合导电水凝胶。通过扫描电子显微镜(SEM)、傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)、X射线衍射仪(XRD)等测试手段对PVA/KE/CNT复合水凝胶进行测试分析。结果表明,AlCl_(3)中的Al^(3+)与角蛋白中的—COOH、—OH配位络合促使角蛋白间相互交联形成团簇,同时AlCl_(3)中的Al^(3+)也与PVA中的—OH交联形成紧密结构,增强了水凝胶的强度和韧性,CNT被两种交联结构紧紧包裹并赋予水凝胶导电性能。CNT的加入使复合水凝胶的韧性增加,添加质量分数为4%和5%的CNT可明显提升材料的强度;所制备的水凝胶都具有较好的自愈合性能,在一定范围内的自愈合性能与愈合时长成正比,12 h的愈合时长效果最佳;加入CNT使水凝胶电阻下降,添加质量分数为2%~5%的CNT后水凝胶电阻分别为8.98、4.56、3.81、3.12 kΩ。这种力学性能、自愈性能和导电性能均良好的水凝胶与人体运动检测应用具有天然的柔韧匹配性,在电子皮肤和柔性传感器领域有很好的应用前景。

细胞角蛋白7在宫颈癌及癌前病变中的表达及临床意义

目的 探究细胞角蛋白7 (cytokeratin7,CK7)在宫颈癌及癌前病变中的表达及临床意义。方法 选取2017年1月至2023年4月在甘肃省妇幼保健院就诊疑似宫颈病变患者的存档病理蜡块及其相关的病历资料,其中包括正常宫颈鳞状上皮100例(正常组)、宫颈鳞癌100例(宫颈鳞癌组)、宫颈低级别鳞状上皮内病变(low-grade squamous intraepithelial lesions,LSIL) 100例(LSIL组)、宫颈高级别鳞状上皮内病变(high-grade squamous intraepithelial lesions,HSIL) 100例(HSIL组)、宫颈腺癌50例(宫颈腺癌组)。使用免疫组织化学方法检测各组p16、Ki-67和CK7的表达情况,分析其对宫颈癌与癌前病变的诊断价值和对LSIL与HSIL的鉴别价值,并比较宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)Ⅱ级及CINⅢ级、高危型人乳头瘤病毒(high-risk human papillomavirus,HR-HPV)感染及非感染患者的p16、Ki-67和CK7表达情况。结果 五组p16、Ki-67和CK7阳性表达率比较差异均有统计学意义(均P<0.05);宫颈鳞癌组、宫颈腺癌组、HSIL组、LSIL组的p16、Ki-67和CK7阳性表达率均显著高于正常组(均P<0.05),宫颈鳞癌组、宫颈腺癌组的p16、Ki-67和CK7阳性表达率均显著高于HSIL组、LSIL组(均P<0.05),HSIL组的p16、Ki-67和CK7阳性表达率均显著高于LSIL组(均P<0.05);p16、Ki-67和CK7表达联合检测诊断宫颈癌及癌前病变的曲线下面积(the area under curve,AUC)均显著大于各指标单独检测(均P<0.05)。p16、Ki-67和CK7表达联合检测鉴别LSIL与HSIL的AUC均显著大于各指标单独检测(均P<0.05);CINⅡ级和CINⅢ级患者的p16、Ki-67和CK7阳性表达率比较差异均无统计学意义(均P>0.05);HR-HPV感染组的p16、Ki-67和CK7阳性表达率均显著高于非感染组(均P<0.05)。结论 CK7在宫颈癌及癌前病变患者中多呈现阳性表达现象,其与p16、Ki-67联合检测对宫颈癌及癌前病变具有诊断价值,且HR-HPV感染可促进CK7阳性表达。

羽毛角蛋白/鱼鳞明胶复合导电凝胶的制备及性能

蛋白质导电凝胶因其还具有生物相容性和生物活性,是可用于生物医学领域的一种新兴的导电材料。文章以废弃鸡毛为原料通过“一锅法”制备鸡毛角蛋白提取液,与热水法提取的鱼鳞明胶复合制备了一系列FK/FG-G复合导电凝胶。该蛋白凝胶具有优异的机械性能和一定的导电性以及体积响应性,其中,FK/FG-G-5凝胶拉伸强度7.28 MPa、伸长率21.33%的、弹性模量8.98 MPa;电导率为125.69μS/mm,压缩30%后电导率增加16%,之后再拉伸30%后电导率增加184%,导电性体积响应明显。

单纯型大疱性表皮松解症患儿的角蛋白5基因突变研究

目的:对1例单纯型大疱性表皮松解症(EBS)患儿及其家系进行基因突变检测和致病性分析。方法:应用高通量二代测序技术捕获目标序列,对患儿进行全外显子组测序。发现致病位点后,应用Sanger测序法进行家系验证,查阅人类基因突变数据库(HGMD),运用生物信息学蛋白功能预测软件,分析变异位点的致病性。结果:患儿角蛋白5(KRT5)基因的第一外显子检出杂合变异c.536T>C(p.F179S),该变异造成KRT5蛋白的第179位氨基酸改变,患儿父母均未检测到相同突变。结论:患儿KRT5基因的杂合变异c.536T>C(p.F179S)为新发致病性变异,导致患儿KRT5缺陷,进而引发疱疹样型EBS(DM-EBS)。该变异位点在国内未见报道,扩大了我国人群KRT5的基因突变谱,为家系的遗传咨询和产前诊断提供依据。

氧化+角蛋白处理对羊绒抗起毛起球的影响

针对羊绒织物存在起毛起球影响服用性能的问题,采用氧化+角蛋白协同后处理方法,改变工艺的各项技术参数。结果表明:当氧化液中过碳酸钠用量达到8.0g/L,TAED的用量为1.5g/L,氧漂稳定剂用量为4.0g/L,氧化处理时间为25min,过氧化氢酶用量为0.6g/L,氧化处理时间为30min,氧化处理温度为50℃;角蛋白液中角蛋白的用量为2.5g/L,角蛋白处理时间为20min,角蛋白处理温度为40℃,与未经后处理的羊绒织物相比,抗起毛起球达到3.0级,色差和手感无明显变化,断裂强力略有降低,符合羊绒织物的生产要求。

血清基质金属蛋白酶-9、细胞角蛋白19片段及血管内皮细胞生长因子水平与非小细胞肺癌患者顺铂治疗效果的关系

目的探讨血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、细胞角蛋白19片段(CYRFA21-1)及血管内皮细胞生长因子(VEGF)水平与非小细胞肺癌患者顺铂化疗治疗效果的关系。方法选取130例于2020年12月至2022年12月期间在南通大学附属医院采用顺铂为基础化疗的晚期驱动基因阴性ⅢB~Ⅳ期非小细胞肺癌患者进行标准的一线治疗,作为观察对象;同期选取100例在我院进行健康体检的人员,作为对照组。比较各组血清MMP-9、CYRFA21-1、VEGF水平,通过顺铂治疗效果将其分为治疗无效组15例,治疗有效组37例;治疗显效组78例,比较各组血清MMP-9、CYRFA21-1、VEGF水平,探索与非小细胞肺癌患者治疗效果的关系。结果非小细胞肺癌患者使用顺铂治疗后,血清MMP-9、CYRFA21-1、VEGF水平均降低(P<0.05);与治疗无效组相比,治疗显效组、治疗有效组患者血清MMP-9、CYRFA21-1、VEGF水平均降低(P<0.05);对比治疗显效组、有效组和治疗无效组患者各项因素分析,经过logistic回归分析显示,MMP-9、CYRFA21-1、VEGF同样是影响非小细胞肺癌患者顺铂治疗效果的危险因素(P<0.05);采用ROC分析得出,血清MMP-9、CYRFA21-1、VEGF单项预测非小细胞肺癌患者使用顺铂治疗效果,预测价值较高(P<0.05)。结论在重症肺炎患者血清中MMP-9、CYRFA21-1、VEGF表达水平升高,MMP-9、CYRFA21-1、VEGF在非小细胞肺癌患者经顺铂治疗后,其表达降低,且与非小细胞肺癌患者顺铂治疗效果有关,临床可通过早期监测血清MMP-9、CYRFA21-1、VEGF水平早期预测治疗效果,以改善患者预后。

血清癌胚抗原、细胞角蛋白片段19、鳞状细胞癌抗原、血清铁蛋白、C反应蛋白对非小细胞肺癌的诊断效能

目的观察血清癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白片段19(CYFRA21-1)、鳞状细胞癌抗原(SCC)、血清铁蛋白(SF)、C反应蛋白(CRP)对非小细胞肺癌(NSCLC)的诊断效能,为NSCLC的早期诊断提供参考。方法经病理证实的NSCLC患者316例,记为NSCLC组;同期住院的其他肺病患者316例作为对照组。患者入院后采集肘部静脉血,采用免疫比浊法检测血清CRP,采用化学发光法检测血清CEA、CYFRA21-1、SCC、SF,比较两组患者血清CEA、CYFRA21-1、SCC、SF、CRP水平,采用多因素logistic回归分析法分析NSCLC发病的影响因素。绘制受试者工作特征曲线,评价血清CEA、CYFRA21-1、SCC、SF、CRP单项检测或多项指标联合检测对NSCLC的诊断效能。结果NSCLC组患者血清CEA、CYFRA21-1、SCC、SF、CRP水平均高于对照组(P均<0.05),血清CRP、CEA、CYFRA21-1、SCC、SF水平是NSCLC发病的影响因素(P均<0.05)。血清CRP、CEA、CYFRA21-1、SCC、SF单项检测诊断NSCLC的AUC分别为73.4%、72.1%、70.1%、64.9%、70.0%。CRP+CEA、CRP+SCC、CRP+SF、CEA+CYFRA21-1、CYFRA21-1+SCC、CYFRA21-1+SF两项指标联合检测诊断NSCLC的AUC分别为79.1%、73.7%、77.3%、76.4%、71.2%、76.6%。CRP+CEA+CYFRA21-1、CRP+CEA+SCC、CRP+CEA+SF、CRP+CYFRA21-1+SCC、CRP+CYFRA21-1+SF、CRP+SCC+SF、CEA+CYFRA21-1+SCC、CEA+CYFRA21-1+SF、CYFRA21-1+SCC+SF三项指标联合检测诊断NSCLC的AUC分别为80.7%、80.4%、81.3%、77.2%、79.9%、79.8%、77.3%、81.3%、78.4%。CEA+CYFRA21-1+SCC+CRP、CEA+CYFRA21-1+SCC+SF四项指标联合检测诊断NSCLC的AUC分别为81.2%、82.3%。五项指标联合检测诊断NSCLC的AUC为84%。结论NSCLC患者血清CEA、CYFRA21-1、SCC、SF、CRP水平升高,是NSCLC发病的影响因素。检测血清CEA、CYFRA21-1、SCC、SF、CRP有助于NSCLC的诊断,且多项指标联合检测的诊断效能优于单项检测。

膀胱肿瘤抗原、尿核基质蛋白22、细胞角蛋白-19对膀胱癌的诊断价值分析

目的分析膀胱肿瘤抗原(BTA)、尿核基质蛋白22(NMP22)、细胞角蛋白-19(CK-19)对膀胱癌的诊断价值。方法选取53例膀胱癌患者作为膀胱癌组,49例泌尿系良性疾病患者作为对照组。比较两组患者CK-19、NMP22及BTA水平,分析三者水平与膀胱癌患者临床特征的关系,分析CK-19、NMP22及BTA单独及联合检测对膀胱癌的诊断价值。结果膀胱癌组患者尿液NMP22、BTA及血清CK-19水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。肿瘤分期为Ⅲ~Ⅳ期的膀胱癌患者尿液NMP22、BTA及血清CK-19水平均明显高于Ⅰ~Ⅱ期患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。CK-19、NMP22及BTA联合检测诊断膀胱癌的灵敏度和特异度分别为0.805和0.869,曲线下面积(AUC)为0.854(95%CI:0.774~0.934),均高于CK-19、NMP22及BTA单独检测。结论膀胱癌患者CK-19、NMP22及BTA水平显著升高,三者水平升高与肿瘤分期相关,密切监测三者水平变化可为临床诊断膀胱癌提供依据。

甲状腺转录因子-1、细胞角蛋白7、p63、p40在非小细胞肺癌患者中的表达及与分化程度的关系

目的探讨甲状腺转录因子-1(TTF-1)、细胞角蛋白7(CK7)、p63、p40在非小细胞肺癌(NSCLC)患者中的表达及与分化程度的关系。方法选取107例NSCLC患者和100例肺部良性疾病患者,分别作为观察组和对照组。比较两组患者及不同分化程度NSCLC患者的TTF-1、CK7、p63、p40表达情况,并比较不同分化程度NSCLC患者的临床特征。采用Logistic回归模型分析NSCLC低分化的影响因素。结果观察组患者TTF-1、CK7阳性表达率均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。低分化NSCLC患者TTF-1、CK7阳性表达率均明显高于中高分化患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。低分化NSCLC患者肿瘤直径≥5 cm、淋巴结转移比例均明显高于中高分化患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。多因素Logistic回归分析结果显示,TTF-1阳性表达、CK7阳性表达及淋巴结转移均是NSCLC低分化的危险因素(P﹤0.01)。结论NSCLC患者中TTF-1、CK7阳性表达率均较高,且TTF-1、CK7表达情况与NSCLC患者的分化程度有关。

兔毛角蛋白海绵的制备及其对亚甲基蓝的吸附研究

针对兔毛角蛋白资源浪费,采用冻融-干燥的方法制备了兔毛角蛋白海绵,通过红外光谱、X射线衍射、扫描电镜对其结构、形貌等进行表征。以亚甲基蓝为溶液,考察了角蛋白浓度、亚甲基蓝初始浓度、吸附时间对角蛋白海绵吸附性能的影响,结果表明,角蛋白海绵结构稳定且具有均匀的孔结构。角蛋白海绵对亚甲基蓝的吸附率随浓度增加而增加,当浓度为8%时,15min达到吸附平衡,且亚甲基蓝浓度30mg/L^(-1)时吸附率最大。角蛋白海绵对亚甲基蓝吸附过程符合二级动力学吸附模型,以化学吸附为主。

一株羽毛角蛋白降解菌的分离与鉴定

从长期堆积腐烂羽毛的土壤中分离出一株能降解羽毛角蛋白的细菌,经形态观察和16S rRNA测序初步鉴定为黄单胞菌属,与嗜麦芽窄食单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)相似性达98%,命名为黄单胞菌DHHJ(Stenotroph-omonas maltophiliaDHHJ)。该菌降解羽毛蛋白的最适温度为40℃,最适pH值为7.5。迄今为止,国内还未见黄单胞菌降解羽毛角蛋白的相关报道。

羽毛角蛋白降解的研究进展

羽毛角蛋白是一种硬性蛋白,在动物饲料、复合材料、食品包装和医药制品等领域展现出良好应用前景。但因羽毛角蛋白难溶解和降解的特殊性,一般方法很难获得可溶性角蛋白,酶法相对于传统物理和化学降解法具有反应条件温和、环境污染小和降解产物稳定等优点,是具有很高实用价值的羽毛降解途径。文中重点介绍角蛋白酶对羽毛的降解作用,并概述物理、化学方法的降解原理以及角蛋白的综合利用。

细胞角蛋白14、17和19在银屑病中的表达

目的探讨细胞角蛋白(Cytokeratin,CK)14、17、19表达与银屑病病理改变的关系。方法应用免疫组织化学方法检测银屑病30例(银屑病组)皮损处和健康对照者10例(健康对照组)皮肤组织CK14、CK17、CK19表达情况并进行分析比较。结果健康对照组皮肤组织CK14主要在基底细胞层表达,而银屑病组皮损处CK14可扩展至基底上层,多为全层弥漫阳性表达;健康对照组皮肤组织CK17均阴性表达,银屑病组皮损处CK17均阳性表达且多在基底层以上;健康对照组CK19均在基底细胞层阳性表达,银屑病组皮损处CK19则多表达阴性。健康对照组和银屑病组CK14、CK17、CK19表达的平均光密度值分别为5.09±1.86和2.83±1.12、5.81±1.42和0、0.49±0.03和2.03±1.08,两组比较差异均有统计学意义(t=4.612,P=0.000;t=22.415,P=0.000;t=4.516,P=0.002)。结论 CK14、CK17、CK19可能在银屑病发生与发展过程中发挥着重要作用。

角蛋白的微生物降解与利用

本文对角蛋白、角蛋白酶、角蛋白降解菌的研究和应用状况作了系统的综述。现代化的家禽养殖产生大量角蛋白废物 (如羽毛和毛发 ) ,若加以合理利用 ,它们是一种新的蛋白质来源。多种角蛋白降解菌和角蛋白酶已被分离并得到深入研究。在强调可持续发展的今天 。

再生角蛋白凝胶对纺织退浆废水中浆料分子的吸附性能

为实现废弃角蛋白纤维资源的高值化循环利用,在采用“还原预处理-甲酸”溶解法获取角蛋白多肽并引入α-硫辛酸进行化学改性基础上,制备再生凝胶材料用于纺织退浆废水中浆料分子的吸附处理。借助扫描电子显微镜、傅里叶红外光谱等测试技术对角蛋白凝胶的结构和性能进行表征。针对聚乙烯醇(PVA)和淀粉2种浆料,探究凝胶对不同浆料分子的吸附规律及机制。结果表明:角蛋白凝胶具有均匀的三维孔隙结构,其化学组成和官能团结构与原纤维基本一致,且结晶程度较高;该凝胶对溶液体系中PVA分子的吸附量和去除率分别为16.278 mg/g和30.013%,对淀粉浆料则可达到133.234 mg/g和28.868%;此外,吸附动力学和热力学研究显示,角蛋白凝胶对2种浆料的吸附规律均符合准二级动力学模型,其中对PVA分子主要为物理吸附作用,而对淀粉则可能存在化学吸附效果。

角蛋白凝胶新型制备技术及对重金属离子吸附性能研究

毛纺产业每年会产生大量废弃纤维及废旧制品,这些资源若无法有效处理将会造成资源浪费及环境污染等诸多问题。提取羊毛纤维中富含的角蛋白并制备为再生凝胶材料,是实现废弃资源高值化循环利用的重要途径之一。但由于羊毛复杂的化学结构及加工技术的不足,现有研究中角蛋白凝胶普遍存在制备率低或机械性能差等缺陷,难以实现产业化生产。基于此,对羊毛角蛋白的提取技术和凝胶制备方法进行了探究,并将制得的凝胶用于重金属离子吸附研究。实验中利用“还原预处理-甲酸法”提取角蛋白多肽,对还原预处理的工艺进行了优化。研究结果表明还原预处理工艺最优条件为TCEP质量分数100 g/L,浴比1∶10,处理时间2 h,处理温度80℃。经该工艺预处理后,纤维在甲酸中的溶解率可高达70%。随后,利用“透析-冷冻法”制得孔隙结构较均匀的角蛋白凝胶并将其用于铜离子和锌离子的吸附性能研究。结果显示在特定条件下,凝胶材料对两种重金属离子的吸附量和去除率均可达到0.06 mg/g以及40%左右,具有一定的研究和开发价值。

术前三酰甘油、超氧化物歧化酶和细胞角蛋白19片段水平对非小细胞肺癌及肺良性结节的鉴别诊断价值

目的探讨术前三酰甘油(triglyceride,TG)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和细胞角蛋白19片段(cytokeratin 19-fragments,CYFRA21-1)对非小细胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)与肺良性结节的鉴别诊断价值。方法收集2022年10月至2023年10月在解放军总医院第一医学中心手术治疗的非小细胞肺癌患者105例、肺良性结节患者84例的临床资料,对患者基本信息及血清相关指标进行统计分析。结果NSCLC组的TG水平低于良性结节组(Z=-2.295,P=0.022),SOD、CYFRA21-1水平高于良性结节组(Z=-3.298、-2.611,P=0.001、0.009)。二元Logistic回归分析结果显示,低水平TG对NSCLC的预测优于良性结节组(OR=0.557),SOD、CYFRA21-1是NSCLC发生的独立危险因素(P<0.05),OR值分别为1.054、1.850。ROC曲线分析显示,TG、SOD、CYFRA21-1鉴别诊断两者的灵敏度分别为0.762、0.448、0.419,特异性分别为0.389、0.815、0.796,ROC曲线下面积(AUC)分别为0.549、0.653、0.619,3者联合检测灵敏度、特异性、AUC分别为0.657、0.815、0.763。结论联合检测术前血清TG、SOD和CYFRA21-1,可以提高NSCLC与良性结节鉴别诊断的灵敏度及特异性。

羊毛角蛋白的应用现状

对羊毛角蛋白的应用现状作了简要介绍,将羊毛中提取出的角蛋白溶液或粉末,通过与其他高分子材料混合,制得不同形态的角蛋白混合材料,并对这些材料在纺织和生物医用领域的应用进行了概述。

间隔织物-羊毛角蛋白气凝胶复合材料研究

采用羊毛角蛋白制备有机气凝胶,存在结构不稳定、力学性能较差等问题。为提升材料的性能,通过还原C法从废旧羊毛中提取R-角蛋白并制备角蛋白气凝胶,将特殊的三维立体结构经编间隔织物引入气凝胶中,开发出经编间隔织物增强废旧羊毛角蛋白气凝胶复合材料,并对废旧羊毛的溶解率、提取率以及材料的密度、力学及隔热性能进行测试与分析。结果表明,通过还原C法得到的羊毛溶解率为89.4%,R-角蛋白提取率为72.6%。复合材料的密度不超过28.23 mg/cm^(3),具备传统气凝胶低密的优良特性,同时经编间隔织物与角蛋白气凝胶原位复合后,材料的压缩性能显著提升,并仍具有良好的隔热性能。