试验通过提取绒山羊皮肤总RNA,克隆角蛋白辅助蛋白1.1(keratin-associated protein 1.1,KAP1.1)基因,构建重组真核表达载体pEGFP-N3-KAP1.1,利用脂质体介导法将重组质粒转入内蒙古绒山羊体外培养的成纤维细胞中,研究该基因在真核细胞中...试验通过提取绒山羊皮肤总RNA,克隆角蛋白辅助蛋白1.1(keratin-associated protein 1.1,KAP1.1)基因,构建重组真核表达载体pEGFP-N3-KAP1.1,利用脂质体介导法将重组质粒转入内蒙古绒山羊体外培养的成纤维细胞中,研究该基因在真核细胞中的时空表达、亚细胞定位及表达规律。结果显示,2.0μg重组质粒和6.0μL脂质体的比例为适合本试验的最优化方案,KAP1.1基因能在内蒙古绒山羊成纤维细胞中成功表达,并在转染后48h转染率达到峰值,该基因在真核体外培养细胞中细胞核、细胞质和细胞膜上均有表达,但以细胞核表达量最强。展开更多
文摘试验通过提取绒山羊皮肤总RNA,克隆角蛋白辅助蛋白1.1(keratin-associated protein 1.1,KAP1.1)基因,构建重组真核表达载体pEGFP-N3-KAP1.1,利用脂质体介导法将重组质粒转入内蒙古绒山羊体外培养的成纤维细胞中,研究该基因在真核细胞中的时空表达、亚细胞定位及表达规律。结果显示,2.0μg重组质粒和6.0μL脂质体的比例为适合本试验的最优化方案,KAP1.1基因能在内蒙古绒山羊成纤维细胞中成功表达,并在转染后48h转染率达到峰值,该基因在真核体外培养细胞中细胞核、细胞质和细胞膜上均有表达,但以细胞核表达量最强。
