应用角质层真菌计量生物学分析法建立药敏试验新模型

目的应用角质层真菌计量生物学分析法建立药敏试验新模型,以更好地评价抗真菌药物的体内外一致性。方法21名健康志愿者被随机分为两组,分别口服不同剂量(200mg,2次/d;200mg,1次/d)的伊曲康唑1周;取志愿者服药前、服药后不同时间(多次)皮肤角质层作为培养基(皮肤角质层剥离条),将红色毛癣菌、须毛癣菌、犬小孢子菌、白念珠菌、光滑念珠菌和热带念珠菌的菌悬液分别接种其上。培养后,行碘酸-雪夫(PAS)染色;采用角质层真菌计量生物学分析法并辅以计算机辅助图像分析,测定被孢子和菌丝覆盖的面积大小。结果在两组受试者的角质层培养基上6种真菌均可生长,但随着药物在角质层中的含量(浓度)不同,菌落的大小、菌丝稠密度、孢子数量也不同。真菌的生长受到药物的抑制,尤其是服药7d后真菌覆盖的面积明显低于服药前(P<0·01)。两种不同服药方法对3种皮肤癣菌及白念珠菌和热带念珠菌的抑制作用差异无统计学意义,均P>0.05。而对于光滑念珠菌差异则有统计学意义,P<0.01。伊曲康唑在人体角质层的生物利用度较高,对6株菌表现了很高的抗真菌活性。伊曲康唑在人体角质层的生物利用度较高,对6株菌表现了很高的抗真菌活性。结论应用改良的角质层真菌计量生物学分析辅以计算机图形分析法进行药物敏感性分析在概念上有别于传统的体外药敏试验,建立了一种与体内环境相似的新模型,对评价抗皮肤真菌药物的体内外一致性有一定的参考价值。

口服伊曲康唑在人角质层抗念珠菌活性的研究

目的通过测定伊曲康唑(口服给药)在人角质层的抗念珠菌活性,探索一种与体内环境相似的药敏试验新方法。方法将21例健康志愿者用数字表法随机分为2组,分别口服伊曲康唑200 mg,1次/d(Qd)×7 d和200 mg,2次/d(B id)×7 d。于服药前、服药后1、4、7、10、14、21、28、35 d制备皮肤角质层剥离条,将白念珠菌、光滑念珠菌、近平滑念珠菌和热带念珠菌孢子接种其上,培养48 h,过碘酸-雪夫(PAS)染色,采用角质层真菌计量生物学分析法,并用计算机辅助图像分析测定真菌覆盖的面积。结果2种剂量的伊曲康唑在皮肤角质层对4种念珠菌均有明显的抗真菌活性。2种剂量的伊曲康唑对白念珠菌、近平滑念珠菌和热带念珠菌的抗真菌效果的差异无统计学意义(P>0.05);而对于光滑念珠菌,伊曲康唑200 mg B id×7 d在人角质层的抗真菌活性明显优于200 mg Qd×7 d(P<0.01)。结论角质层真菌计量生物学分析法是介于体外试验与体内疗效之间的一种新方法的有效尝试。