槟榔碱对Hacat及DOK细胞FHIT和SMAD4蛋白表达影响研究

目的通过研究人永生化角质形成细胞(Hacat细胞)和异常增生角质形成细胞细胞在不同浓度槟榔碱刺激下增殖活性的改变以及脆性组氨酸三聚体(FHIT)蛋白和胰腺癌缺失(SMAD4)蛋白的表达,探讨FHIT和SMAD4蛋白在口腔黏膜组织从正常到潜在恶性病变过程中的可能作用机制。方法 MTT法检测不同浓度槟榔碱(0、2.5、5、10、20、40、80、160μg/m L)、不同作用时间(24、48、72 h)条件下,Hacat细胞和异常增生角质形成细胞存活率的改变;Western Blot检测不同浓度槟榔碱(0、20、40、60、80μg/m L)作用24 h后,Hacat细胞和异常增生角质形成细胞FHIT蛋白和SMAD4蛋白的表达。结果不同浓度槟榔碱、不同时间干预后,Hacat细胞和异常增生角质形成细胞的存活率均随槟榔碱浓度的增加、干预时间的延长而降低;在槟榔碱浓度相同、干预时间相同的情况下,异常增生角质形成细胞的存活率高于Hacat细胞(P<0.05);槟榔碱浓度为0时,Hacat细胞FHIT和SMAD4蛋白表达水平高于异常增生角质形成细胞(P<0.05);不同浓度槟榔碱干预24 h后,Hacat细胞和异常增生角质形成细胞FHIT和SMAD4蛋白表达量随槟榔碱浓度的增加而下降。结论槟榔碱可导致Hacat细胞和异常增生角质形成细胞存活率降低,并呈浓度、时间依赖性;槟榔碱可诱导Hacat细胞和异常增生角质形成细胞FHIT和SMAD4蛋白表达减少;FHIT蛋白和SMAD4蛋白表达减少可能是口腔潜在恶性病变的发病机制之一。