用Cyfra21-1检测血中细胞角质素片断CKS-19在肺癌诊断中的意义

用酶联免疫方法，试剂Cyfra21－1，测定42例健康人，23便非肿瘤性肺部疾病病人，68例肺癌病人血清中的细胞角质素片断CKS－19。健康人为1．45±0．86ng／ml，非肿瘤性肺疾病病人为1．64±1．40ng／ml。肺癌中鳞癌16例，腺癌33例，小细胞肺癌19例，Cyfra21－1阳性率各为75．0％，66．7／，31．6％。比较Cyfra21－1和CEA，NSE三种肺癌标志物的ROC曲线，Cyfra21－1的曲线最接近左上角，证明Cyfra21－1是敏感性，特异性较好的肺癌标志物。

鲨鱼软骨多糖中硫酸角质素分离方法研究

探索简单有效的分离和检测鲨鱼软骨多糖中硫酸角质素组分的方法。使用乙醇分级沉淀法分离多糖中硫酸角质素,使用硫酸-咔唑法测定糖醛酸含量,Mono Q HPLC法测定硫酸角质素含量。:硫酸角质素从多糖中分离的条件:氯化钠浓度为2.0%,乙醇浓度小于56%时;氯化钠浓度为1.5%,乙醇浓度小于58%时;氯化钠浓度为1.0%,乙醇浓度小于60%时。使用乙醇分级沉淀法可实现鲨鱼软骨多糖中硫酸角质素组分的分离,Mono Q HPLC法可简单快速检测多糖中硫酸角质素组分。

一株高效聚磷菌解角质素微杆菌的分离、鉴定及其除磷条件优化

利用蓝白斑法从金华市市郊池塘的水体样品中分离筛选得到1株高效聚磷MK-6菌株。经鉴定,MK-6菌株为解角质素微杆菌(Microbacterium keratanolyticum)。对MK-6菌株的培养条件和合成污水培养基配方进行综合优化,结果表明,该菌株的适宜除磷条件为:初始p H值6.0,装液量40.0 m L,温度30℃,转速220 r/min,接种量10%,醋酸钠浓度600 mg/L,且适宜浓度的铜离子、铅离子和钾离子对该菌株的除磷起着促进作用。经优化,该菌株对改良后合成污水(PO43--P浓度为14.9 mg/L)的去磷率达到了70.81%。该菌株的获得,对于扩大聚磷菌菌种库、防治富营养化具有实际意义。

CEA、CA199、细胞角质素片段19和CK联合检测对结肠癌的诊断价值

目的探讨血清CEA、CA19-9、细胞角质素片段19(CY211)和CK联合检测对结肠息肉和结肠癌的诊断价值。方法检测结肠息肉组和结肠癌组患者及对照组血清CEA、CA19-9、CY211和CK含量。二元Logistic回归分析。结果结肠癌组与结肠息肉组相比较,CEA和CA199含量均显著升高(P<0.05),而CK含量显著降低(P<0.05)。CEA在结肠息肉组和结肠癌组患者的诊断价值最高,其曲线下面积为0.728,诊断灵敏性和特异性为54.9%和91.4%。当CEA、CA199、CY211和CK联合检测时,其曲线下面积为0.847,诊断灵敏性和特异性分别为73.6%和85.5%。结论与单独指标检测相比,联合检测同时兼顾灵敏性和特异性,可作为临床结肠癌的辅助诊断方法。

核基质蛋白22、细胞角质素20和存活素mRNA对膀胱癌诊断价值的研究

目的探讨核基质蛋白22(NMP22)、细胞角质素20(CK20)和存活素mRNA在膀胱癌诊断中临床应用价值。方法选择因血尿和膀胱刺激症状到该院泌尿外科诊治的患者107例,分为对照组(44例)和观察组(63例)。观察组中按照肿瘤TNM分期和WHO分级,包括T1s^T1 44例,T2~T4 19例;G1 14例,G2 31例,G3 18例;另外选择45例健康志愿者作为健康组。通过ELISA方法检测所有志愿者尿液中NMP22水平,通过RT-PCR方法检测对照组和观察组受试者尿液中CK20和存活素mRNA表达量,比较这3种检测方法的灵敏度和特异度,以评估对膀胱癌诊断的价值。结果观察组患者尿液中NMP22的水平(37.92U/mL)显著高于健康组(4.31U/mL)和对照组(7.04U/mL),差异有统计学意义(P<0.05)。NMP22检测指标的灵敏度和特异度分别为82.54%和61.36%,与肿瘤分期和分级无明显相关性;CK20和存活素mRNA检测指标的灵敏度和特异度分别为83.70%、63.64%和85.71%、90.91%,与肿瘤分期有显著的相关性;T2~T4亚组患者CK20和存活素mRNA检测灵敏度高于T1s^T1亚组患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论尿液NMP22、CK20和存活素mRNA检测对膀胱癌的诊断均有较高的灵敏度和特异度,是诊断膀胱癌较好的无创性手段。

细胞角质素19及消减基因PO2在肝细胞癌组织及卵圆细胞中的表达

目的:观察细胞角质素19(CK19)及消减基因P02在肝细胞癌,肝硬化组织及卵圆细胞中的表达情况.方法:采用免疫组化SP法观察8例正常肝组织,27例肝硬化组织和43例肝细胞癌组织中CK19的表达.采用DIG-probe synthesis kit,聚合酶链反应方法制备P02探针,通过原位杂交方法检测P02在肝细胞癌,肝硬化组织及卵圆细胞中的表达.结果:CK19在肝硬化组与正常肝组织之间表达率无明显差异,但在肝细胞癌组与肝硬化组之间差异有显著性(69.77% vs 25.93%,P<0.01).肝硬化组织与肝细胞癌组织中CK19标记的卵圆细胞数量有显著性差异(5.74±1.05 vs 10.51±1.78,P<0.01).P02在肝硬化和肝细胞癌中的阳性表达率分别为26.7%和80%,二者之间表达有显著性差异(P<0.01).结论:CK19可能参与了肝硬化到肝细胞癌的癌变过程.卵圆细胞与肝脏损伤后再生及癌变有关,可能是P02通过促进卵圆细胞的增殖来介导肝细胞癌的发生.

肝细胞癌组织及卵圆细胞中细胞角质素18及消减基因P02的表达

目的:观察肝细胞癌、癌周肝硬化组织及卵圆细胞中细胞角质素18(CK18)及消减基因P02的表达情况。方法:采用免疫组化SP法观察8例正常肝组织,27例肝硬化组织和43例肝细胞癌组织中CK18的表达;采用原位杂交方法检测肝细胞癌、癌周肝硬化组织及卵圆细胞中P02的表达。结果:肝硬化组织和正常肝组织中CK18阳性表达率分别为29.6%和25.0%(P>0.05),肝细胞癌组织中CK18阳性表达率为65.1%,与肝硬化组和正常肝组织比较差异有统计学意义(P<0.05)。在13对肝硬化的汇管区和肝细胞癌癌巢周边可见到卵圆细胞中P02的强阳性表达,且其数量在2种组织中差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CK18参与了肝硬化到肝细胞癌的癌变过程;CK18在卵圆细胞中的强阳性表达,及其在肝细胞癌和肝硬化组织中数量上的显著性差异,证明卵圆细胞与肝脏损伤后再生及癌变有关,支持肝细胞癌的卵圆细胞起源学说;P02是一个肝细胞癌高表达基因,可能通过促进卵圆细胞的增殖来介导肝细胞癌的发生。

细胞角质素片断19(Cyfra 21—1)在肺癌诊断中的应用

用酶联免疫方法(Cyfra21—1)测定42例健康人,68例肺癌病人,23例非肿瘤性肺部疾病病人血清中的细胞角质素片断19(CKS—19)。健康人血清中Cyfra21—1浓度为1.45±0.86ng/ml。非肿瘤性肺疾病病人为1.64+1.40ng/ml。68例肺癌中鳞癌16例,腺癌33例,小细胞肺癌19例,鳞癌中Cyfra21—1阳性率为75.0％,腺癌为66.7％,小细胞肺癌为31.6％。比较Cyfra21—1和CEA,NSE三种肺癌标志物的ROC曲线,Cyfra21—1的曲线最接近左上角,证明Cyfra21—1是敏感性,特异性较好的肺癌标志物。

角质素结构、分布及其在创面愈合中的作用

1 角质素的结构真核细胞内含复杂的细胞骨架,由三种结构蛋白组成:含肌动蛋白的微丝(microfilament,直径6nm)、含微管蛋白的微管(microtubule,直径25nm)和粗细介于上述两者之间的中间丝(intermediate filament,IF,直径10nm).根据其基因结构和蛋白排列顺序的特点,可将IF分为六个亚型:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ型.其中Ⅰ型和Ⅱ型即为角质素(keratin),是所有IF蛋白中最为复杂的,可作为上皮增生、分化的特征性蛋白.

血清角质素在肺癌诊断及鉴别诊断中的应用

目的 研究CYFRA2 1 - 1在肺癌诊断、鉴别诊断中的临床应用价值。方法 应用酶联免疫法 (EIA)测定 1 1 0例健康人 ,92例非肿瘤肺疾病和 42 3例癌症患者 (其中包括 1 2 3例肺癌、97例肝癌、1 0 5例乳腺癌和 1 0 8例鼻咽癌 )血清中的CYFRA2 1 - 1的水平。结果 肺癌组CYFRA2 1 - 1的水平为 (8.2 4± 6 .72 ) μg/L明显高于健康对照组 (1 .67± 0 .68) μg/L及良性肺疾病组 (1 .92± 0 .95) μg/L ,差异均有高度显著性 (P <0 .0 0 1 )。以 >3 .3μg/L为阳性判断值 ,各组别阳性率分别为 :良性肺疾病组 5 .4 %、肺癌组 61 .0 %、乳腺癌组 2 6 .7%、肝癌组 2 3 .7%、鼻咽癌组 1 2 .0 %。经统计学分析 ,肺癌组其含量及阳性率与其他组别之间差异有显著性 (P <0 .0 5)。不同组织类型肺癌阳性率在 35 .7%～ 76 .1 %,其中以鳞癌为最高。结论 血清中CYFRA2 1 - 1的测定对肺癌的实验室诊断 ,尤其是鳞癌的诊断有重要的临床应用价值 ,它是敏感、特异性较高的肺癌肿瘤标志物。

细胞角质素与泌尿系移行上皮癌的关系

细胞角质素是近年来出现的一种新的移行上皮癌标志物 ,其本质是细胞的中间丝成分 ,有 2 0个亚型 ,不同的亚型在移行上皮癌的表达是不同的 ,有的显示出特异性 ,特别是细胞角质素 2 0可能会成为早期诊断泌尿系移行上皮癌的很有价值的标志物。

膀胱癌尿液脱落细胞角质素mRNA表达检测方法的建立

目的 :建立采用RT PCR对膀胱癌尿液脱落细胞CK8和CK2 0的mRNA表达进行分析的实验方法。方法 :从 2 2例膀胱癌患者尿液脱落细胞中提取总RNA ,采用RT PCR和特异性引物进行逆转录、扩增 ,并用琼脂糖凝胶电泳进行分析。结果 :从所有标本中提取的总RNA均有较好纯度和均一性 ;2 2例标本均表达CK8mRNA ,1 8例标本表达CK2 0mRNA。结论 :RT PCR是一种敏感、快捷的检测膀胱癌尿液脱落细胞中CK8、CK2 0mRNA表达的方法 ,可采用此方法从分子水平对膀胱癌患者尿液脱落细胞表达产物进行无创性检测 ,为研究膀胱癌的发病机制。

糖链抗原153、细胞角质素片段19和CEA联合检测评价乳腺癌的诊断价值

目的评价糖链抗原153(CA153)、细胞角质素片段19(CY211)和CEA单项检测和联合检测用于乳腺癌的诊断价值。方法检测乳腺癌组、乳腺增生组和对照组CA153、CY211和CEA含量,并用受试者工作特征曲线(ROC)评价指标的诊断价值。结果乳腺增生组与对照组相比较,CA153含量显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),其他二指标间无统计学意义;而乳腺癌组CA153和CY211含量显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),CEA差异无统计学意义。乳腺癌组CA153含量与乳腺增生组相比较显著降低,而CY211和CEA含量显著升高;CA153、CY211和CEA单项检测时,CY211的诊断价值最高,诊断灵敏性和特异性分别为63.5%和68.1%;CA153、CY211和CEA联合检测时,其灵敏性和特异性分别为76.4%和74.6%。结论三项指标联检可提高检测的灵敏性和特异性,可作为临床乳腺癌的辅助诊断方法之一。

血清细胞角质素片段19在胃癌患者中的表达及对HER-2阳性的预测能力

背景HER-2阳性的胃癌患者预后较差,且缺少与胃癌HER-2阳性相关肿瘤标志物的报道。目的探讨血清CYFRA21-1表达水平与HER-2阳性胃癌患者的相关性。方法收集2019年1月-2021年12月在解放军总医院手术治疗的胃癌患者165例,其中男115例,女50例,年龄29~82岁。分析HER-2基因表达阳性患者的CYFRA21-1水平,并绘制CYFRA21-1在HER-2阳性患者中表达的ROC曲线,分析其预测HER-2阳性胃癌的阈值。结果血清CYFRA21-1水平与胃癌的病理组织学分化程度和分型、TNM分期及肿瘤大小有关(P<0.05);HER-2阳性组中CYFRA21-1水平显著高于阴性组(P=0.038);CYFRA21-1阳性表达在HER-2阳性组中的OR值为3.529(95%CI:0.967~12.878),对HER-2阳性胃癌患者的预测百分比为70.4%,当CYFRA21-1的Cut-off值为3.62 ng/mL时,对胃癌患者HER-2阳性的预测敏感度和特异度达到最高,分别为0.552和0.833。CYFRA21-1<3.62 ng/mL的胃癌患者1年、2年、3年生存率高于CYFRA21-1>3.62 ng/mL者(P=0.002),HER-2阴性胃癌患者1年、2年、3年生存率高于阳性者(P=0.044)。结论HER-2基因及血清CYFRA21-1水平在胃癌转移、肿瘤较大、TNM分期较晚的患者中表达升高。CYFRA21-1水平较高、HER-2阳性者生存预后较差。高血清CYFRA21-1水平对胃癌患者HER-2基因阳性表达有一定的预测价值。

离子肼飞行时间质谱表征硫酸软骨素/硫酸角质素二糖

硫酸软骨素(CS)和硫酸角质素(DS)结构决定它与蛋白的相互作用。因此对CS/DS结构的解析,能够进一步阐明结构与功能之间的关系。采用电喷雾离子阱多级质谱技术(ESI-MSn)在负离子模式(ESI-)下表征8种CS/DS二糖裂解规律。二糖的裂解发生在糖苷键和糖环位置,N-乙酰半乳糖胺上主要断裂方式为0,2X,而糖醛酸主要断裂方式为0,2Z。所含亚硫酸根越多越不稳定。亚硫酸根的位点决定了糖结构稳定性,含4位氧亚硫酸的二糖相对最不稳定。此外糖苷键的位置也决定了糖结构的稳定性。二级质谱表明同分异构体有其特定的裂解规律。该质谱裂解规律有助于CS/DS二糖同分异构体的鉴定。

膝关节腔注射透明质酸钠对成人大骨节病血清透明质酸、CD44、硫酸角质素含量的影响

目的探讨透明质酸钠治疗对大骨节病(KBD)患者血清中透明质酸(HA)、CD44、硫酸角质素(KS)含量的影响。方法分别检测关节腔注射透明质酸钠的成人KBD患者治疗前、治疗4周后,以及健康成人血清中的HA、CD44、KS含量。结果 KBD患者血清HA、CD44、KS含量明显高于健康成人,且不同性别HA、CD44、KS含量无差异。在经过关节腔注射透明质酸钠治疗后,血清中三指标含量均明显下降,其中HA含量男性高于女性。结论膝关节腔注射透明质酸钠可明显降低KBD患者血清中的HA、CD44、KS含量。血清HA、CD44、KS含量可作为KBD疗效评价指标之一。

尿囊素

尿囊素乙醛酸和尿素合成的尿囊素是一种精细化工产品。它应用于医药、轻工、日化等方面。它具有促进皮细胞生长，使伤口迅速愈合的作用，与干燥氢氧化铝凝胶混合，于消化道溃疡及炎症；能软化角质素，使皮肤保持水分、滋润和柔软，是化妆品的特效添加剂；还能用于护发制品...

胃癌患者术前血清CA72-4、CYFRA21-1水平与生存预后的关系

目的 通过研究不同肿瘤标志物水平、不同病理状态下胃癌患者的预后生存情况,找到影响患者生存预后的危险因素。方法 收集2018年12月至2021年1月在解放军总医院第一医学中心行手术治疗的164例胃癌患者临床资料,并随访患者生存情况,分析影响胃癌患者生存的风险因素。结果 生存时间≤2年的胃癌患者血清CYFRA21-1、PGII水平明显高于生存时间>2年组,差异具有统计学意义(P=0.002、0.023)。胃癌患者在CA72-4≤10U/mL、CYFRA21-1≤4.0ng/mL、TNM分期为I+II期、Lauren分型为肠型、非印戒细胞癌中1、2、3年生存率较高,在CA72-4>10U/mL、CYFRA21-1>4.0ng/mL、TNM分期为III+IV期、Lauren分型为弥散型、印戒细胞癌中生存率较低,差异具有统计学意义(P=0.0001、0.0007、<0.0001、<0.0001、0.0002)。血清CA72-4、CYFRA21-1水平、印戒细胞癌、TNM分期是影响胃癌患者生存的风险因素(P=0.001、<0.001、<0.001、<0.001)。结论 血清高CA72-4、CYFRA21-1水平、印戒细胞癌、TNM分期较晚是胃癌患者生存预后的风险因素。

马氏珠母贝磺基转移酶基因的克隆及功能

硫酸角质素具有丰富的携带大量负电荷的磺酸基团,参与生物矿化的成核过程。磺基转移酶催化磺酸基团的转移,对硫酸角质素的生物合成起决定性作用。本研究利用RACE技术克隆马氏珠母贝磺基转移酶PmCHST1a全长,并通过RNA干扰技术检测PmCHST1a对硫酸角质素合成及贝壳珍珠层形成的影响。结果显示,PmCHST1a基因全长1385 bp,编码366个氨基酸;含有磺基转移酶结构域,具有跨膜结构和信号肽,定位于高尔基体上。组织差异表达分析发现,PmCHST1a在中央膜显著高表达。注射PmCHST1a的RNAi探针后,PmCHST1a在中央膜的表达量显著下调,并且外套膜外液中硫酸角质素的浓度显著降低;SEM检测发现珍珠层结构紊乱。综上所述,PmCHST1a可能通过影响外套膜外液中硫酸角质素的合成,参与珍珠层的形成。本研究为进一步探讨磺基转移酶及其参与合成的糖胺聚糖硫酸角质素在马氏珠母贝生物矿化中的作用提供依据。