MAP添加液对冰冻解冻去甘油红细胞保存的质量影响

目的观察冰冻解冻去甘油红细胞悬浮于MAP添加液中对保存效果的影响,探索最佳保存方式。方法本研究将采集后d 3的400 mL全血,离心制备成浓缩红细胞,使用ACP 215全自动血细胞仪,加入40%复方甘油溶液,置于-65℃超低温冰箱中保存30 d,解冻去甘油洗涤后,等量分离成两袋,以添加0.9%氯化钠溶液为对照组;添加MAP为实验组,两组保存于2~6℃冷藏条件下,分别于0、1、3、5、7、14 d取样检测血液学参数指标、溶血指标、细胞代谢指标,观察两组在14 d保存期内的质量变化情况。结果研究发现两组红细胞在解冻去甘油后6项质控项目包括容量、血红蛋白含量、游离血红蛋白含量、白细胞残留量、甘油残留量、无菌试验的检测值均符合《全血及成分血质量要求》(GB18469-2012);压积、红细胞计数、Hb洗涤后回收率、MCV符合《冰冻红细胞质量评价指标专家共识》检测限值,血小板残留量超过检测限值(≤1%);在14 d保存期内,两组的RBC、Hct、MCV和血红蛋白含量值无统计学意义;两组游离血红蛋白、溶血率和K+值随保存时间延长而增加,分别于3、5、7、14 d;3、5、7、14 d;14 d组间有统计学意义(P<0.05),两组红细胞渗透脆性于14 d组间有统计学意义(P<0.05);两组ATP、pH值随保存时间延长而下降,分别于3、5、7 d;1、3、5、7、14 d组间有统计学意义(P<0.05)。结论悬浮于MAP添加液中的冰冻解冻去甘油红细胞可将血液保存期延长至7 d,本研究为相关标准的制定提供参考依据。

冰冻解冻去甘油红细胞制备过程质量控制方法

目的探讨冰冻解冻去甘油红细胞制备过程的质量控制方法。方法将40袋血液随机分为实验组和对照组,分别监测相关变量对产品质量的影响。结果两种方法白细胞残留量、甘油残留量和容量合格率均为100%,血红蛋白含量和游离血红蛋白含量的差异有统计学意义(i2和P值分别为5.625,0.044和10.157,0.030)。结论血红蛋白含量和游离血红蛋白含量合格率与甘油化及去甘油化过程中的诸多因素有关。

国产智能红细胞洗涤机及配套耗材制备冰冻解冻去甘油红细胞的质量观察

目的观察国产智能红细胞洗涤机及配套耗材制备冰冻解冻去甘油红细胞的质量。方法按照《中华人民共和国国家标准GBl8469-2012全血及成分血质量要求》的方法进行不同的实验验证机器的性能。结果采用该国产智能红细胞洗涤机及配套设备制备冰冻解冻去甘油红细胞的质量检测结果:容量(364.6±1.90)ml,血红蛋白(47.43±7.27)g,游离血红蛋白(0.52±0.10)g/L,白细胞残留量(0.13±0.06)×10~7,甘油残留量(1.44±0.58)g/L,细菌培养均为阴性。结论该国产智能红细胞洗涤机及配套设备制备冰冻解冻去甘油红细胞的质量符合要求,有广阔的应用前景。

渗透压法检测冰冻解冻去甘油红细胞甘油残留量的可行性

目的探讨渗透压法检测冰冻解冻去甘油红细胞甘油残留量的可行性。方法用生理盐水、氯化钠-腺嘌呤-葡萄糖-甘露醇-磷酸二氢钠（MAP）液、血浆等不同介质溶液制备成含不同甘油浓度的洗涤红细胞,以模拟冰冻解冻去甘油红细胞,用渗透压仪测定其渗透压值,进行线性回归处理与相关系数的计算;并进行溶血干扰试验及重复性试验。结果渗透压值与甘油含量之间有很好的线性关系,但相同浓度的甘油在不同介质溶液（生理盐水、MAP液、血浆）悬浮的洗涤红细胞中的渗透压值有差异,生理盐水、MAP液、血浆悬浮的甘油浓度为10 g/L的洗涤红细胞的渗透压值分别为434、467、461 mmol/kg。游离血红蛋白在1.466-7.713 g/L时,渗透压测定值的差异无统计学意义。结论渗透压与甘油含量之间有良好的线性关系,溶血对渗透压测定影响小,可用于冰冻解冻去甘油红细胞的甘油残留量检测,且操作简单、快捷,但测定时应考虑制品的悬浮介质。

MAP液保存的冰冻解冻去甘油红细胞可保存天数的研究

目的研究悬浮于MAP液中的冰冻解冻去甘油红细胞最多是否可保存7 d。方法将11份2 U悬浮红细胞制品制备成冰冻解冻去甘油红细胞,冻存1年,解冻去甘油后悬浮于MAP液中,于0 h、3 d、5 d和7 d取样检测钾离子浓度(K+)、ATP浓度、2,3-DPG浓度、游离血红蛋白含量(FHb)和溶血率。结果 ATP浓度随着保存时间的延长略有下降,保存7 d的ATP浓度为(5.36±0.91)μmol/g Hb,ATP回收率仍高达94%。2,3-DPG浓度下降速度较ATP快,但保存7 d的红细胞仍然存在2,3-DPG,浓度为(0.62±0.29)μmol/g Hb。保存7 d的FHb为(0.30±0.12)g/L,符合GB18469-2012对冰冻解冻去甘油红细胞FHb的规定(≤1 g/L)。溶血率由解冻后的(0.05±0.01)%上升至7 d的(0.11±0.04)%,符合国标保存期末溶血率≤0.8%的要求。解冻后保存3 d的K+上升至(5.70±1.09)mmol/L,已超出人体正常K+参考范围上限(5.5 mmol/L)。结论 MAP液保存冰冻解冻去甘油红细胞可以保存7 d。但对于高钾血症贫血患者这部分特殊人群,若以不超过人体正常K+参考范围上限为判断依据,则MAP液保存的冰冻解冻去甘油红细胞,最好不要超过24 h。

Rh(D)阴性冰冻解冻去甘油红细胞的质量分析及产科应用

目的分析本站冰冻解冻去甘油红细胞质量及临床应用疗效。方法采用ACP125全自动血细胞处理仪对48袋(96 U)Rh(D)阴性冰冻红细胞进行去甘油化和复苏洗涤,使用前检测血红蛋白含量、甘油残留量及游离血红蛋白含量等指标,检测32例产妇输注前后血红蛋白(Hb)、红细胞比容(Hct)、总胆红素(TB)、直接胆红素(DB)和尿胆原(UBG)水平,评估临床疗效。结果 48袋(96 U)冰冻解冻去甘油红细胞各项质控指标均达到GB18469-2012《全血及成分血的质量要求》。32例产妇输注后,均达到满意的疗效,无输血不良反应的发生。输注后Hb为(86±3.2)g/L、Hct为(35.0±1.8)%,均高于输注前的(72±2.5)g/L、(27.5±1.1)%,比较差异具有统计学意义(P<0.05);而输注前后TB和DB比较差异无统计学意义(P>0.05);输注前后UBG均为阴性。结论 ACP125全自动血细胞处理仪制备冰冻解冻去甘油红细胞质量合格,可以用于Rh(D)阴性患者的临床输血。

不同洗涤液制备冰冻解冻去甘油红细胞的检测结果分析

目的通过用两种洗涤溶液制备冰冻解冻去甘油红细胞结果进行质量分析,来比较应用不同洗涤溶液,一类是9%氯化钠、羟乙基淀粉130氯化钠注射液、0.9%氯化钠;一类是9%氯化钠、0.9%氯化钠分别进行解冻红细胞洗涤,选择合适制备冰冻解冻去甘油红细胞的洗涤方法。方法随机抽取2010年采血6d之内新鲜全血32份,通过手工制备冰冻红细胞:6d之内(2～6℃保存)新鲜全血经过25min,2300转,离心后去除血浆,将血液倒入三珠空袋内,用无菌接驳机连接输血器,应用甘油160ml,25min加入振荡器60次/min,室温沉淀30min后放入-80℃冰箱速冻,1个月后进行解冻。随机分为A、B两组,每组16袋,应用ACP215血液处理仪进行解冻红细胞。A组洗涤液包括9%氯化钠、羟乙基淀粉130氯化钠、0.9%氯化钠这三种溶液;B组洗涤液包括9%氯化钠、0.9%氯化钠这两种溶液。用两种不同洗涤溶液进行冰冻解冻去甘油红细胞洗涤,通过检测项目为红细胞回收率%,白细胞残留率%,血小板残留率%,甘油含量,血浆游离血红蛋白含量,体外溶血等指标进行检测分析。结果 A组解冻红细胞:红细胞回收率81.0%±2.6%,白细胞残留率0.67%±0.14%,血小板残留率0.00%,甘油含量4.8±0.43g/L,血浆游离血红蛋白含量0.62±0.11g/L,体外溶血13%±5%。B组解冻红细胞:红细胞回收率82.0%±2.3%,白细胞残留率0.61%±0.26%,血小板残留率0.42%±0.1%,甘油含量(5.1±0.13)g/L,血浆游离血红蛋白含量(0.53±0.12)g/L,体外溶血12%±4%。两组结果均符合国家标准,且无统计学意义。结论通过手工制备冰冻红细胞后,应用ACP215血液处理仪制备冰冻解冻去甘油红细胞分别使用A、B两种洗涤液,根据统计学分析洗涤效果无统计学意义,检测结果均达到国家标准,可以确定在洗涤中不加入羟乙基淀粉130氯化钠注射液,检测结果也能达到国家标准。

手工法和机器法制备冰冻解冻去甘油红细胞的质量分析

冰冻红细胞是使用高浓度甘油与红细胞混合后冰冻保存的一种成分血。近年来因临床RH（-）血使用量增加,急诊用血情况时有发生,本站最开始是用手工方法制备冰冻解冻去甘油红细胞,目前是使用美国全自动红细胞处理仪ACP215制备,现将两种制备方法进行对比,研究两种制备方法获得的冰冻解冻去甘油红细胞的效果差异,现报告如下。

不同制备方法制备冰冻解冻去甘油红细胞质量研究

目的考察全自动细胞处理仪ACP215和传统手工制备冰冻解冻去甘油红细胞的质量差异。方法将采集40袋400ml全血随机分2组,全自动细胞处理仪ACP215组和传统手工法分离组,对制备成的冰冻解冻去甘油红细胞进行血红蛋白质量、游离血红蛋白、白细胞残留量、甘油残留量的质量检测。结果全自动细胞处理仪ACP215制备血红蛋白含量显著高于传统手工制备法,甘油残留量和游离血红蛋白显著低于传统手工制备法,差异具有统计学意义(P<0.05),两种制备方法的白细胞残留量差异无统计学意义(P>0.05)。结论全自动细胞处理仪ACP215制备的冰冻解冻去甘油红细胞质量比传统手工制备冰冻解冻去甘油红细胞质量更好。

甘油化时滴速对冰冻解冻去甘油红细胞质量影响

目的对本站制备冰冻解冻去甘油红细胞方法进行探索,并对其质量进行分析评价。方法随机抽取本站红细胞悬液4℃保存9d以内20u,随机分成甲组10u,加甘油速度40滴/分和乙组10U加甘油速度120滴/min,分别进行甘油化,-80℃冰冻及用ACP215全自动血细胞处理仪解冻。甘油化处理,进行质量检测:甲组游离血红蛋白(0.14±0.05)g/L;乙组游离血红蛋白(1.01±0.02)g/L,两组差异有统计学意义,(P<0.01),甲乙两组其他指标符合国家标准,差异均无统计学意义。结论本站制备冰冻解冻去甘油红细胞的方法高效高质,值得推广。

甘露醇在冷冻解冻去甘油红细胞中应用的研究

目的探讨在红细胞冷冻前、解冻洗涤过程中添加适宜浓度大分子细胞膜保护剂-甘露醇,提高冷冻解冻去甘油红细胞RBC回收率、降低甘油残存量的可行性。方法选取20袋6 d内制备的400 mL去白细胞悬浮红细胞,离心去浆后等量分装(各100 mL)作为实验组和对照组,其中实验组在160 mL甘油化试剂、解冻第1次洗涤80mL 9%NaCl溶液、第2次洗涤200 mL 0.9%NaCl溶液中分别加入终浓度为1.6%、1%、0.2%的甘露醇,通过统计学分析比较实验组与对照组RBC回收率、甘油残存量、红细胞渗透脆性是否有显著性差异,并通过检测冷冻红细胞解冻洗涤过程中游离血红蛋白含量,确定提高冷冻解冻去甘油红细胞RBC回收率的关键点。结果实验组RBC回收率显著高于对照组(t=20.727,P<0.05)、甘油残存量显著低于对照组(t=-4.611,P<0.05)、红细胞渗透脆性与对照组差异无统计学意义(t=0.317,P>0.05),冷冻红细胞解冻第1次洗涤后实验组血浆游离血红蛋白含量低于对照组(t=-22.326,P<0.05),其余洗涤步骤实验组与对照组血浆游离血红蛋白含量差异无统计学意义(P>0.05)。结论冷冻解冻去甘油红细胞在160 mL甘油化试剂、解冻第1次洗涤80 mL 9%NaCl溶液、第2次洗涤200 mL0.9%NaCl溶液中分别加入终浓度为1.6%、1%、0.2%的甘露醇,红细胞回收率显著提高、甘油残存量显著降低、红细胞渗透脆性无显著性差异,冷冻解冻去甘油红细胞RBC回收率提高的关键点为解冻第一次洗涤过程。

ACP215处理机制备冰冻解冻去甘油红细胞与手工制备的对比研究

目的观察ACP215血细胞处理机洗涤制备冰冻解冻去甘油红细胞与手工洗涤制备的效果,并对其检测结果进行初步分析。方法采用48袋Rh(D)阴性全血,先甘油化冰冻保存,后解冻将其随机等分成2组,实验组采用ACP215血细胞处理机洗涤制备冰冻解冻去甘油红细胞,对照组采用手工开放式洗涤法进行制备。按照相关标准分别对实验组和对照组的红细胞回收率、游离血红蛋白含量、甘油含量、残留白细胞、体外溶血试验进行检测分析。结果实验组的红细胞回收率明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),实验组的甘油含量、残留白细胞均低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。但是两种方法制备产品中游离血红蛋白含量、体外溶血试验的差异无统计学意义(P>0.05)。结论用ACP215血细胞处理机洗涤制备冰冻解冻去甘油红细胞操作简单易行,安全可靠,省时、省力,且产品质量均符合国家标准,有实际应用价值,值得推广。

甘油化震荡频率对冰冻解冻去甘油红细胞质量的影响

目的对本站制备冰冻解冻去甘油红细胞的方法进行探索并对其质量进行评价。方法随机抽取本站40 U<ALT<60 U于4℃保存6 d内的悬浮少白红细胞43 U,随机分成甲组(22 U,甘油化震荡频率90次/分)和乙组(21 U,甘油化震荡频率50次/分),分别进行甘油化、-80℃冰冻及解冻、COBE2991细胞处理仪去甘油化处理,观察细菌学检测、红细胞回收率、游离血红蛋白、血红蛋白增加率、残留甘油、残留白细胞和残余血小板等指标。结果甘油化、冰冻及解冻、洗涤去甘油后均无细菌生长,解冻、洗涤全过程仅约30 min。甲组红细胞回收率(82.51±2.51)%,乙组(74.01±2.41)%,两组差别有统计学意义,P<0.01;甲乙两组其余指标均符合国家质量标准,差别均无统计学意义。结论本站制备冰冻解冻去甘油红细胞的方法省时高效,产品质量可靠,值得推广。

BBS 926全自动医用低速离心机制备冰冻解冻去甘油红细胞的质量评价

目的评价BBS 926全自动医用低速离心机制备的冰冻解冻去甘油红细胞的质量。方法 BBS 926全自动医用低速离心机制备冰冻解冻去甘油红细胞完成后,立即留取样本,检测其血红蛋白含量、游离血红蛋白含量、白细胞残留量、甘油残留量等质量监测指标。结果血红蛋白含量为(23±5)g/L、游离血红蛋白含量为(0.43±0.25)g/L、白细胞残留量为(0.6±0.3)×107个、甘油残留量为(3.6±2.5)g/L、细菌培养试验阴性。结论 BBS 926全自动医用低速离心机制备冰冻解冻去甘油红细胞各项检测指标均达到国家质量标准,能有效地保障临床输血安全。

全自动细胞处理系统与手工法制备冰冻解冻去甘油红细胞效果研究

目的探讨全自动细胞处理系统与手工法制备冰冻解冻去甘油红细胞制备效果。方法对2016年6月~2017年8月40袋原料血冰冻红细胞按照洗涤方法的不同分为手工对照组和全自动试验组,每组20袋,试验组采用全自动细胞处理系统制备冰冻解冻去甘油红细胞,对照组采用手工开放式洗涤法进行制备。对试验组和对照组制备的产品进行红细胞产品容量(mL)、血红蛋白含量(g/袋)、游离血红蛋白含量(g/L)、白细胞残留量(×10^7个/袋)、甘油残留量(g/L)、红细胞回收率(%)及无菌试验等指标的检测分析。结果两组洗涤法制备的冰冻解冻去甘油红细胞产品各项质量指标均符合国家相关规定标准要求,试验组中血红蛋白含量、红细胞回收率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);游离血红蛋白含量、甘油残留量等指标均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。试验组与对照组在容量、白细胞残留量质量指标方面基本一致,差异无统计学意义(P>0.05)。结论全自动细胞处理系统可有效保证临床对Rh(D)阴性患者的紧急抢救用血,为患者抢救生命赢得时间,同时也可减少因手工开放操作而引起的血液细菌污染的可能性,提高采供血机构工作人员工作效率,提升冰冻解冻去甘油红细胞的产品质量,从而确保血液质量和临床用血安全。

改良法制备冰冻解冻去甘油红细胞技术的应用

目的:通过改良冰冻解冻去甘油红细胞制备方法,缩短冰冻解冻去甘油红细胞的制备时间,提高产品红细胞回收率,进一步降低甘油残留率、上清血红蛋白含量、血小板残留量及白细胞残余量,同时使产品质量保持持续稳定。方法:以原有引进手工法制备冰冻解冻去甘油红细胞技术为基础,引进全自动洗涤红细胞机器用于自动化冰冻解冻去甘油红细胞,结合两者方法,进行技术改进。2014年7月—2016年6月进行实验,于技术改良前、技术改良后分两组共制备30袋,原始血液为6 d内的去白悬浮红细胞,制备成冰冻解冻去甘油红细胞产品,将其分为改良组和原始组,每组15袋。结果:技术改良后缩短了冰冻解冻去甘油红细胞的制备时间,改良组终产品红细胞回收率与原始组相比明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);上清游离血红蛋白含量、甘油残留量、血小板残留量以及白细胞残留量四项指标与原始组相比较含量下降,差异有统计学意义(P<0.05)。以上指标在符合国家标准的基础上,进一步提升了血液输注安全性。结论:通过改良冰冻解冻去甘油红细胞制备方法,缩短了冰冻解冻去甘油红细胞的制备时间,提高了产品红细胞回收率,进一步降低了甘油残留率及上清血红蛋白残留量,使产品质量保持持续稳定,从而为临床RH(-)血型急救患者及时提供安全、有效输注血液的能力,进一步推进临床输血的发展。

冻存前细胞外多余甘油溶液的去留对解冻后红细胞质量影响的比较

目的探讨甘油化红细胞冻存前保留或去除细胞外多余甘油溶液对解冻后红细胞质量影响的差异。方法采取配对设计的方法,以甘油化红细胞冻存前保留细胞外多余甘油溶液为试验组,去除细胞外多余甘油溶液为对照组,制备生成6对红细胞添加液（甘露醇-腺嘌呤-磷酸盐,简称MAP）悬浮和6对0.9%Na Cl悬浮的冰冻解冻去甘油红细胞,比较分析其新鲜制备后甘油残留量、血红蛋白含量和游离血红蛋白（FHb）含量的差异,以及保存期间FHb含量和上清钾离子（K＋）浓度的差异。结果新鲜制备的冰冻解冻去甘油红细胞,甘油残留量、FHb含量和血红蛋白含量均符合国家质量标准要求,试验组与对照组之间甘油残留量,FHb含量差异均无统计学意义,受实验过程留样损失的影响,试验组与对照组之间Hb含量差异有统计学意义;保存期间MAP悬浮和0.9%Na Cl悬浮冰冻解冻去甘油红细胞,上清K＋浓度和FHb含量均呈现试验组低于对照组的总体趋势,其中MAP悬浮冰冻解冻去甘油红细胞,制备后21 d、28 d,试验组与对照组FHb含量差异具有统计学意义（P〈0.05）,制备后7 d上清K＋浓度差异具有统计学意义（P〈0.05）,0.9%Na Cl悬浮冰冻解冻去甘油红细胞,制备后12 h、24 h试验组与对照组FHb含量差异具有统计学意义（P〈0.05）,制备后6 h、12 h、24 h上清K＋浓度差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论甘油化红细胞冻存前保留或去除细胞外多余甘油溶液对新鲜制备冰冻解冻去甘油红细胞质量的影响没有显著差异,但随着保存时间的延长前者表现出更有利于红细胞稳定性保持的特点。

冰冻解冻去甘油红细胞研究进展

冰冻解冻去甘油红细胞主要用于稀有血型血液及自体血液的长期保存,可减少输血反应,避免酸中毒、高钾血症及输血传播疾病,可杜绝因缺血引发的死亡事件,冰冻解冻去甘油红细胞制剂的作用是其他制剂所不能替代的,本文介绍冰冻解冻去甘油红细胞的研究进展。1冰冻解冻去甘油红细胞的应用范围目前冰冻解冻去甘油红细胞主要用途是：稀有血型患者的临床输血,Rh（D）阴性患者输血,其他稀有血型患者输血;自身输血,ABO亚型、

运用甘油磷酸氧化酶法测定冰冻红细胞解冻后残留甘油的含量

目的建立测定冰冻红细胞解冻洗涤后残留甘油含量的酶学方法测定工艺。方法进行甘油磷酸氧化酶法的线性范围测定、重复性、准确性（回收试验）、游离血红蛋白干扰试验,并比较不同样本处理方法（钨酸钠裂解法、三氯醋酸裂解法及制备后2 h直接取上清液法）对酶法检测甘油的影响;进行系列浓度甘油红细胞酶法测定结果与传统过碘酸钠滴定法测定结果比对。结果用GPO-PAP法检测甘油浓度在0.05~2.0 g/L时有较好的线性关系,r2=0.9994,Y=0.942 X＋0.0239;甘油含量为0.2 g/L、1.0 g/L的样本,批内CV值分别为2.68%、0.81%（n=20）,日间CV值分别为4.59%、4.37%（n=20）;甘油浓度从0.29~2.09 g/L间其回收率97.1%~100.8%,样本的平均回收率为99.0%;10 g/L游离血红蛋白对GPO-PAP法检测结果无干扰;3种样本处理方法所测得的系列浓度甘油红细胞样品及解冻去甘油红细胞制品（n=18）酶法测定结果一致（P〉0.05）;系列浓度甘油红细胞测定结果显示酶法测定比滴定法更准确,滴定法测定值偏高。结论甘油磷酸氧化酶法可用于冰冻解冻去甘油红细胞制品中残留甘油含量的测定,方法简便、快速、准确、重复性好。3种样本处理方法对GPO-PAP法检测甘油含量无影响。

甘油残留量检测方法确认

目的采用三酰甘油试剂盒检测冰冻解冻去甘油红细胞中甘油残留量,对该检测方法进行全面评价。方法对该方法的准确度、批内和批间精密度、线性范围及可报告范围等性能进行确认,以确保检测结果的准确、可靠。结果准确度:偏移小于或等于2.50%;批内精密度相对标准偏差(RSD)≤1.0%,批间精密度RSD≤2.0%;在0.007 8~2.000 0g/L浓度范围内,测定结果与标准溶液浓度呈线性相关,Y=0.975 2 X+0.009 5(r2=0.999 8);可报告范围下限为0.007 8g/L,上限为64.0g/L。结论采用三酰甘油试剂盒检测甘油残留量的方法能满足采供血机构需求。