添加植物抗冻蛋白提高猪胚胎冷冻保存成活率的初步试验

本试验采集7天猪扩张囊胚和孵化后囊胚,在1.5M甘油冷冻液中添加二种浓度(0.5mg/ml,5mg/ml)植物抗冻蛋白(AFGPs),用慢速降温方法冷冻。猪胚胎冷冻-解冻后,体外培养12小时,发育率分别为25％(1/4)和80％(4/5);24小时发育率分别为0％(0/4)和40％(2/5),孵化囊胚率分别为0％(0/5)和20％(1/5),而对照组冷冻-解冻后培养发育率12小时和24小时均为0％(0/4)。试验表明,在冷冻液中添加一定浓度的植物抗冻蛋白,可提高猪胚胎冷冻-解冻后的成活率。

小鼠半胚冷冻的研究

对半胚冷冻的方法和条件进行了系统研究,证明采用下述程序冷冻小鼠半胚可显著提高解冻半胚的成活率:①在含10％甘油的磷酸缓冲液中平衡35～40min;②在-6.5℃或-7℃诱发结晶,③以0.05℃/min的速度缓慢降温15min;④以0.3℃/min的速度降温至-35℃投入液氮;⑤在30～35℃的水浴中解冻;⑥在含不同浓度(6.6％,3.3％,0％)甘油和0.3mol/L蔗糖的磷酸缓冲液中平衡35～40min,去除甘油。将按上述程序冷冻—解冻的16对半胚移植后,获半胚鼠12只,其中5对为同卵双生。

中国荷斯坦牛胚胎冷冻与移植受胎技术研究

牛冷冻胚胎解冻成活率达８４．４％（３８／４５）；冷冻胚胎移植总受胎率达到４６．７％（５７／１２２），其中１９９６年达到５５．６％（２０／３６），Ａ级胚胎达到７７．８％（２１／２７）。并在我国首次获得中国荷斯坦牛冷冻胚胎二分胚的同卵孪生牛犊，且达到４２．９％（３／７）的移植受胎率。