解吸附电晕束电离质谱法快速检测微量雌激素

目的建立解吸附电晕束电离质谱(DCBI-MS)快速检测微量雌激素的分析方法。方法通过DCBI-MS直接分析,对比标准物质一级和二级质谱图,对检测样品中非法添加的炔诺酮、黄体酮、甲羟孕酮、左炔诺孕酮、醋酸甲地孕酮和枸橼酸氯米芬等6种雌激素进行快速定性和半定量检测。结果各目标化合物均可在1 min内被检出。基于一级分子离子的定量分析,6种雌激素的半定量检测结果可信,线性关系最差的醋酸甲地孕酮相关系数为0.9471,而黄体酮则为0.9998。最低检出值分别是0.0875、0.045、0.1775、0.05、0.15、0.1 mg/L。结论本方法无需复杂的前处理过程,简便、快速、灵敏度高,可用于保健食品和中成药中违禁添加微量雌激素的快速定性及半定量检测。

解吸附电晕束电离质谱法快速测定黄精中的薯蓣皂苷元

应用解吸附电晕束质谱法(DCBI-MS)快速定性定量分析传统中药黄精中的薯蓣皂苷元,通过质谱碎片离子探究薯蓣皂苷元的裂解规律。采用DCBI-MS技术在选择离子监测(SIM)正离子模式下工作,氦气流量、放电电压和解吸附温度分别设置为1.0 L·min^(-1),1.8 kV和320℃。样品上样体积为20μL。以甲睾酮作为内标,薯蓣皂苷元在0.5~10.0 mg·L^(-1)具有良好的线性相关性,相关系数R 2为0.9993。检测的精密度为15%,检出限(LOD)和定量限(LOQ)分别为0.1和0.4 mg·L^(-1)。加标回收率范围为90.0%~106.8%。采用DCBI-MS法和传统高效液相色谱(HPLC)法对8批次黄精中的薯蓣皂苷元含量进行测定,两种方法得到的测定结果无显著性差异。本研究建立的黄精中薯蓣皂苷元的DCBI-MS检测方法拥有无需色谱分离过程、试剂消耗少、简单快速的优点,可作为黄精中薯蓣皂苷元快速定性定量分析的新策略。

解吸附电晕束电离质谱法快速筛选保健食品中非法添加的5型磷酸二酯酶抑制剂

建立了解吸附电晕束离子源(DCBI)结合离子阱质谱快速检测保健食品中非法添加的3种磷酸二酯酶5(PDE5)抑制剂(伐地那非、西地那非、他达拉非)的方法。采用一级质谱筛选,二级质谱确证,对样品中非法添加物进行定性鉴别;通过二级特征碎片离子进行半定量分析,并与传统高效液相色谱-紫外(HPLC-UV)定量检测法对比。对12个市售保健品进行检测,DCBI-MS定性检测结果与HPLC-UV检测结果一致,有7个样品检出他达拉非,3个样品检出西地那非,1个样品检出伐地那非。通过研究3种PDE5抑制剂的二级质谱裂解规律,推测一个样品中含有羟基豪莫西地那非。本方法快速准确,适用于大批量复杂基质样品中PDE5抑制剂的筛查。

解吸附电晕束电离质谱法快速检测中成药及保健食品中非法添加的β-受体阻滞剂

建立了新型的解吸附电晕束离子源耦合离子阱质谱法(DCBI-MS),在无需复杂的样品前处理及色谱分离的条件下,可快速检测降血压中成药及保健食品中非法添加的7种β-受体阻滞剂阿替洛尔、比索洛尔、美托洛尔、普萘洛尔、盐酸塞利洛尔、盐酸贝凡洛尔和卡维地洛.采用一级质谱快速筛选和二级质谱确证的方法对目标化合物进行了定性和半定量测定.各目标物的检出限均低于0.1 mg/L,在0.5～100 mg/L浓度范围内线性关系良好.实验获得的7种β-受体阻滞剂的裂解规律为芳氧丙醇胺类化合物的质谱检测提供了参考依据.通过与高效液相色谱-电喷雾离子化质谱法(HPLC-ESI/MS)对比表明,DCBI-MS方法的检测结果可靠.对9种市售样品进行检测,有1批次中成药检出含有未标示的卡维地洛.结果表明,DCBI-MS法测定单个样品的时间不超过1 min,分析速度快,可以在大批量复杂基质样品中β-受体阻滞剂的筛查和药品品质的在线监测中发挥重要作用.

解吸附电晕束电离质谱法快速检测功能保健食品中违禁添加的降糖类药物

目的建立解吸附电晕束电离质谱快速检测保健食品中违禁添加的6种降糖类化学合成药物(那格列奈,二甲双胍,伏格列波糖,格列吡嗪,吡格列酮,瑞格列奈)的分析方法。方法通过DCBI-MS直接分析,对比标准物质一级和二级质谱图,对检测样品中非法添加的那格列奈、二甲双胍、伏格列波糖、格列吡嗪、吡格列酮、瑞格列奈等6种降糖类化学合成药物进行快速定性和半定量检测。结果各目标物在一定范围内线性关系良好,线性相关系数R2均大于0.98,检测限均在1 mg/L以下,相对标准偏差为8%～40%。结论此方法可以完成降糖类违禁药物的快速检测,定性准确,专属性高,同时完成半定量分析,为进一步准确测定样品提供依据。

解吸附电晕束电离质谱法快速检测保健食品和中成药中违禁添加的β_2-受体激动剂

本文建立了解吸附电晕束电离质谱(DCBI-MS)快速检测保健食品和中成药中违禁添加的9种β2-受体激动剂的分析方法。采用DCBI源正离子模式在全扫描模式下进行扫描,考察了温度和进样体积对解吸附效率的影响,9种β2-受体激动剂样品的快速测定不受基质影响,各目标化合物在1 min内均可被检出。基于二级特征碎片离子的定量分析结果表明,9种β2-受体激动剂在1～100 mg.L 1内呈线性,相关系数(r2)均大于0.991 7。相对标准偏差在14.29%～25.13%之间。利用该方法对10种市售标具止咳平喘作用的保健品及中成药进行检测,结果均为阴性。本方法无需复杂的前处理过程,简便、快速、灵敏度高,可用于止咳平喘类保健食品及中成药中违禁添加的β2-受体激动剂的快速定性及半定量检测。

解吸附电晕束电离质谱辅助高效液相色谱法检测减肥类保健食品中的违禁药物

目的利用解吸附电晕束电离质谱(DCBI-MS)对减肥类保健食品中违禁药物进行快速筛选,进而用高效液相色谱法(HPLC-UV)对疑似检出样品准确定量。方法通过DCBI-MS直接分析,对比标准物质的一级、二级质谱谱图,对检测样品中非法添加的芬氟拉明、酚酞、西布曲明、单去甲基西布曲明、双去甲基西布曲明进行定性鉴别。HPLC-UV对5种目标化合物准确定量。结果 HPLC-UV方法中各目标物的线性范围为0.25～300 mg/L。12个检测样品中3个样品共3种违禁物被DCBI-MS方法检出。高效液相色谱法准确复检结果显示DCBI-MS的半定量结果可信。结论 DCBI-MS无需样品预处理,单个样品的分析时间不到1 min,辅助高效液相色谱法实现了减肥类违禁药物的快速、高通量、高精度检测。

解吸电晕束电离源质谱法快速检测食品包装材料中的双酚A

采用解吸电晕束电离源（DCBI）与质谱联用法测定食品包装材料中的双酚A。优化了萃取溶剂和离子源等参数。DCBI优化后，甲醇为萃取溶剂，检测模式为负离子模式，电离电压为-2kV，离子传输管温度225℃，He气体流速1．0L/min。当选用全扫描的模式时，单个样品测定时间小于30s，对双酚A的检出限为0．1mg／L，在1—100mg／L浓度范围内线性良好，相关系数达到0．98，直接检测食品包装材料中的双酚A时，平均回收率为94％～125％，测定结果的相对标准偏差（RSD）小于17％。本方法分析速度快，灵敏度高，基体影响小，适用于大量样品快速检测。

吸头小柱微萃取-解吸电晕束电离质谱用于快速分析体液中的降压药物

将C18 ZipTip吸头小柱微萃取(Micropipette tip-based micro-extraction)与解吸电晕束电离质谱(Desorption corona beam ionization mass spectrometry,DCBI-MS)联用,用于快速分析复杂生物样品中的小分子药物。吸头小柱微萃取装置简单、操作快速,适合作为与常压直接离子化质谱技术联用的前处理技术,能实现分析物的富集和基质干扰的消除。优化了萃取条件和离子源的参数,最终选择20%(V/V)乙腈溶液作为上样溶液,4!L乙腈作为解吸液。分析全过程包括萃取、自然挥干、电晕束解析电离等步骤,并可以在3 min内完成。此方法用于血浆中的地平类降血压药及尿液中氯胺酮的快速分析,结果满意。这种方法拓展了常压直接离子化质谱技术在体液分析中的应用。

基质辅助激光解吸附电离-飞行时间串联质谱研究重组人促红细胞生成素一级结构

建立了生物质谱研究rhEPO一级结构的系列方法,包括分子量、唾液酸含量以及N-糖含量等糖基化性质的测定方法,并用于4种国产rhEPO样品的分析;在此基础上优化酶切条件,使测定的肽质量指纹谱(PMF)的覆盖率均达到98%,成功鉴定了4个样品中的全部N-糖基化位点以及对分子中两对二硫键进行了结构确证,测定4个样品分子量分别为27754.1±27.4Da、27941.4±23.2Da、27682.5±22.0Da和27914.7±22.5Da;唾液酸含量分别为5.0%、4.8%、5.6%和5.4%;糖含量分别为34.3%、34.7%、34.1%和34·6%。此外还对4种产品在O-连接糖型及N-连接糖型上的区别做了初步探讨。

基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱在临床病毒学中的应用

基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)是一种新型的微生物鉴定技术,具有准确、快速、高通量等特点,目前在细菌和真菌的鉴定方面已比较成熟,但在病毒方面应用较少。本文从病毒的诊断、分型及耐药基因检测3个方面对MALDI-TOF MS在临床病毒学中的应用作一综述。

基质辅助激光解吸附电离质谱成像技术在帕金森病研究中的应用

基质辅助激光解吸附电离质谱成像(MALDI-MSI)技术是一种基于质谱检测的成像技术,可以无标记地在生物样品组织上同时检测多种物质的分布情况。目前,MALDI-MSI越来越多地用于分子水平的中枢神经系统疾病研究,包括帕金森病、阿尔茨海默病、亨廷顿病、肌萎缩性侧索硬化症和脑卒中等。本文就MALDI-MSI在帕金森病研究中的应用情况进行综述,为定位帕金森病发展过程中小分子代谢产物的功能障碍途径提供信息,为研究其治疗策略的潜在机制提供参考。

富集和纯化用于包括基质辅助激光解吸附／电离（MALDI）质谱（MS）分析的化学分析的分析物的方法和装置

本发明公开了首先利用电泳驱动分析物通过滤网基质去除大分子物质的分离低丰度物质的方法和装置，然后保留低丰度物质与捕获膜上的小的捕获位点结合，电泳富集到捕获膜上。捕获膜被风干，并被置于导电的MALDI样品板上。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术对分枝杆菌液体培养系统菌种鉴定的临床研究

目的应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)对Bactec^(TM) MGIT^(TM) 960液体培养出的阳性培养物进行高通量、快速、准确的菌种鉴定,为临床早期、精准治疗提供病原学依据。方法选取我院Bactec^(TM) MGIT^(TM) 960分枝杆菌快速液体培养的阳性培养物为研究对象,通过不同的孵育时间、不同大小的研磨珠处理、不同的破壁方式摸索出MALDI-TOF MS对Bactec^(TM) MGIT^(TM) 960阳性培养物鉴定的"最优处理方法",并将所有结果与基因芯片法菌种鉴定做参照进行比对,鉴定不一致的结果通过基因测序确认。结果Bactec^(TM) MGIT^(TM) 960液体培养报阳性后增加孵育时间可提高检出率及鉴定分值,同时使用0.5 mm的氧化锆珠研磨,使用超声震荡混匀处理,鉴定效果最佳。鉴定结果方面,液体系统报阳的420份阳性标本,基因芯片法鉴定结果为结核分枝杆菌占69.05%(290/420),非结核菌占28.81%(121/420),9例未鉴定出,未鉴定占2.14%(9/420),错误鉴定占0.95%(4/420),总鉴定率为97.86%(411/420);采用MALDI-TOF MS质谱鉴定420份阳性标本中鉴定出419例,其中结核分枝杆菌占69.05%(290/420),非结核占30.00%(126/420),星型奴卡菌0.48%(2/420),巴西奴卡菌占0.24%(1/420),1例未鉴定出,总鉴定率为99.76%。质谱鉴定分值≥2.0的400例占95.24%,分值在1.7~2.0的19例占4.52%,分值<1.7的1例占0.24%。结论本实验实现了Bactec^(TM) MGIT^(TM) 960液体培养阳性培养物的直接质谱鉴定,缩短了培养鉴定的时间,将分枝杆菌鉴定到种水平,能区分出结核菌与非结核菌,同时也能将与分枝杆菌相似的奴卡菌鉴定出来,对临床疾病的鉴别诊断起到了积极的作用。

基于吸光材料的激光解吸附离子化质谱用于纺织品快速筛查

建立了基于微纳吸光材料的激光解吸附离子化质谱法快速检测纺织品中有害物质邻苯二甲酸酯、乙醇胺和己内酰胺。以不锈钢板为基底,利用激光加工技术获得微纳吸光材料,可将紫外激光能量高效转化为热能,实现材料表面待测物的解吸附和离子化,并进行质谱分析。为考察方法的定量能力,采用内标法定量分析邻苯二甲酸二丙酯、邻苯二甲酸二乙酯,结果表明,二者分别在10~200、10~150μmol/L浓度范围内呈现较好的线性关系。该方法无需繁琐的样品前处理,在1 min内即可完成待测样品的快速质谱分析,且灵敏度高、溶剂消耗少,适用于纺织品中有害物质的快速、高通量筛查。

在线测量气溶胶大小和化学组分的质谱技术与应用

介绍了在线连续监测大气单粒子气溶胶的粒径和化学组分的飞行时间质谱仪。本装置采用喷嘴加两个skimmer构成的差分真空进样,双光束空气动力学测量技术,激光解吸附电离和双极飞行时间质谱技术。利用这套装置对室内外的空气进行了实际的测量,该技术可以在线测量气溶胶的粒径分布,并同时对气溶胶的化学组分进行实时监测。

大气气溶胶质谱研究进展

文中较为详细地介绍了大气气溶胶粒子质谱研究的发展概况,从离线的质谱测量技术到实时在线的测量技术,特别是目前应用较为广泛的激光电离气溶胶飞行时间质谱技术—一种可以同时测量气溶胶粒子的大小和化学成分的方法的原理和应用。

黑木耳核糖体失活蛋白的质谱分析

目的:对悬浮培养黑木耳菌丝体中分离纯化得到的核糖体失活蛋白进行质谱分析,测定其肽的指纹图谱。为用5′-RACE与3′-RACE方法,克隆和表达核糖体失活蛋白的基因,设计5′和3′末端的PCR引物。方法:使用HPLC和MALDI-TOF-MS(基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱)分析方法。结果:测定出肽的指纹图谱及三个随机肽段的氨基酸序列。结论:可根据所测肽段氨基酸序列设计5’-和3’-RACE的引物。

生物质谱在蛋白质组学研究中的应用

本文简述了生物质谱的发展以及在蛋白质组学研究中的应用。

应用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析宫颈鳞癌早期浸润蛋白质

目的探讨基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization ti me of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)对宫颈鳞癌(squamous carcinoma of thecervix,SCC)组织切片直接分析,获取宫颈鳞癌早期浸润的分子标志物的有效性。方法利用超微量点样枪将化学基质直接点样到宫颈鳞癌组织切片上,然后利用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱直接扫描宫颈鳞癌组织切片,分析宫颈鳞癌组织蛋白质分子。结果获得的25种蛋白质质谱峰强度比较,差异有显著意义(P<0.05)。其中7种差异蛋白质有分类意义,其质/核(M/Z)分别为:m/z3433,m/z4786,m/z10092,m/z10835,m/z15114,m/z15854和m/z16345。差异蛋白质m/z3433,m/z15114,m/z15854在宫颈鳞癌鳞状上皮组织高度表达,可作为宫颈鳞癌早期诊断的标志蛋白;差异蛋白质m/z16345在宫颈鳞癌的间质组织高度表达,可作为宫颈鳞癌早期间质浸润和扩散诊断的标志蛋白。结论利用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱技术成功获取一组差异蛋白质。该差异蛋白组可望作为宫颈鳞癌早期诊断的标志蛋白。