清热解毒注射液解热抗炎、活血化瘀作用研究

清热解毒注射液是王永炎院士多年临床经验方,经采用现代制剂工艺,提取栀子、灯盏花等中药的有效组分组成的现代复方中药制剂,具有清热解毒、逐疫化瘀之功,主要用于感受疫疠之邪,热邪疫毒内盛,相互瘀结所致的高热不退,头身酸痛,咳嗽,胸闷气促,乏力,甚或高热神昏等症.根据其功能主治,本研究主要观察了该药的解热、抗炎作用及对血液流变学的影响,为清热解毒注射液的进一步研究提供实验依据.

清热解毒注射液指纹图谱多维多息特征的数字化评价

目的提出中药指纹图谱多维多息特征数字化评价方法,用F和I等37个指标揭示中药指纹图谱的多维多息特征。方法用自行研制的“中药指纹图谱多维多息特征数字化评价系统软件”评价清热解毒注射液的11味药材、中间体和制剂的HPLC指纹图谱实验结果,进行比较研究。结果从积分信号强度、信号均化程度、分离度、指纹信息量等多方面综合评价出金银花、黄芩、连翘、中间体和制剂的指纹图谱比较理想。结论F和I等37个指标可客观、真实、全面地揭示中药指纹图谱的多维多息的数字化特征。

清热解毒注射液统一化HPLC指纹图谱的评价

目的建立清热解毒注射液、单味药材和中间体的统一化色谱指纹图谱（normalized chromatographic fingerprints，NCFP），用25个相对统一化特征参数进行评价。方法采用RP·HPLC法，色谱柱为Century SIL C18 BDS（250mm×4．6mm，μm）色谱柱，流动相为体积分数为1％的醋酸-水和体积分数为1％的醋酸-乙腈进行低压梯度洗脱，流速为1．0mL·min^-1，柱温为（30．0±0．15）℃，进样量为5-10μL，紫外检测波长为254—300nm。分别建立清热解毒注射液、单味药材和中间体的指纹图谱。用“中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统”计算13个对照指纹图谱的25个相对统一化特征参数并生成统一化指纹图谱。结果所建立的S9麦冬和S11玄参的HPLC指纹图谱（HPLC—FP）最理想，S1金银花、S3连翘、S7板蓝根、S8地黄、S10甜地丁、S12中间体和S13制剂的HPLC—FP较理想。结论中药NCFP能够真实反映指纹图谱的全貌，25个相对统一化特征判据参数能够准确、真实、直观地揭示清热解毒注射液HPLC对照指纹图谱的优劣及其统一化特征。

柴胡解毒注射液体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒试验

为筛选抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的中药,制备柴胡解毒注射液,并以其为试验药物,同时以利巴韦林注射液作为对照药物,观察在细胞上对猪繁殖与呼吸综合征病毒的作用效果。结果表明,自最大安全浓度作倍比稀释后,对PRRSV均具有一定的抑制、杀灭和阻断作用。其中,柴胡解毒注射液抑制和杀灭作用均较为突出,利巴韦林注射液杀灭和抑制作用均较为显著。

基于HPLC-DAD-ELSD指纹谱的系统指纹定量法评价清热解毒注射液质量

目的建立自制清热解毒注射液HPLC-DAD-ELSD指纹图谱,以系统指纹定量法评价其质量。方法采用DAD-ELSD串联技术,以1%HAc溶液和1%HAc乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1,柱温(30±0.5)℃,进样量5μL;漂移管温度110℃,雾化室温度40℃,载气压力50 psi。结果以黄芩苷为参照物峰,确定DAD图谱中有60个共有峰;以绿原酸为参照物峰,确定ELSD图谱中有37个共有峰。采用"中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统3.0"软件,按平均值法计算,生成对照指纹图谱(RFP),以此RFP为标准,采用系统指纹定量法表征其质量,并与市售制剂和混合药材模拟样进行比较,初步确定了市售制剂含量低的原因为药材投料量不足或制剂被稀释。结论采用DAD-ELSD联用可以获得中药复方制剂真实质量重要信息,结合系统指纹定量法从整体定性分析和整体定量分析出发实现了对中药质量有效评价。

清热解毒注射液治疗猪热性疾病疗效观察

清热解毒注射液由黄芩、连翘、麦冬等5味中药按一定比例配制而成,对猪热性疾病的治疗试验结果表明,清热解毒注射液高、中、低剂量组与空白对照组比较差异极显著(P<0.01);与安乃近对照组比较治愈率差异极显著(P<0.01),有效率差异不显著;与柴胡注射液组比较差异显著(P<0.05);安乃近组与柴胡注射液组差异显著(P<0.05)。表明清热解毒注射液高、中剂量组试验疗效确切。

清肝解毒注射液治疗重型肝炎临床疗效观察

在综合治疗基础上，针对重型肝炎血分瘀热火毒炽盛的病机，采用清肝解毒针（由水牛角、赤芍、丹皮、生地等组成），治疗重型肝炎３８例，存活率为６３．１６％（２４／３８），单用综合治疗的对照组存活率为４０％（１４／３５），Ｐ＜０．０５。治疗组用药后患者血清谷丙转氨酶、胆红素、凝血酶原活动度及胆碱酯酶都有显著改善，表明该药对肝脏具有良好的保护作用，并能改善由于肝功能损害而引起的凝血机制障碍。

清肝解毒注射液对急性肝衰竭大鼠免疫功能的影响

目的:探讨清肝解毒注射液对实验性急性肝衰竭大鼠免疫功能的影响。方法:大鼠随机分四组:清肝解毒针组;肝细胞生长因子组;生理盐水组;空白组。前三组用D-氨基半乳糖腹腔注射2h后,分别给予相应药物治疗,1次/d,连续10d后,处死大鼠,采血,进行红细胞免疫功能,血清免疫球蛋白,血清补体测定。结果:清肝解毒注射液能提高红细胞免疫功能,抑制过强的体液免疫,用效阻断补体系统C3途径的激活、使补体合成增加。结论:清肝解毒注射液具有调节机体免疫功能的作用,从而减少或防止肝细胞的大量坏死,对急性肝衰竭起到良好的治疗作用。

高效液相法测定清热解毒注射液中黄芩苷含量

目的:测定清热解毒注射液中黄芩苷的含量。方法:采用高效液相色谱法,测定条件为:色谱柱为AgelaODS(5um,4.6×200mm),流动相:甲醇-0.2%磷酸溶液(47:53);检测波长:276nm;流速:1.0ml/min;柱温:30℃。结果:木犀草苷在50.03-500.3μg/ml浓度范围内线性关系良好,r=0.9994,平均回收率为99.5(RSD=0.31%,n=6)。结论:该方法稳定、可靠、专属性强,可用于清热解毒注射液中黄芩苷的含量测定。

柴胡解毒注射液的制备及体外抗PRRSV作用试验

为筛选抗猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒的中药,制备柴胡解毒注射液,并以其为试验药物,同时以利巴韦林注射液作为对照药物。观察在细胞上对猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒的作用效果。结果表明,自最大安全浓度做倍比稀释后,对猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒均具有一定的抑制、杀灭和阻断作用。其中,柴胡解毒注射液抑制和杀灭作用均较为突出,利巴韦林注射液杀灭和抑制作用均较为显著。

清肝解毒注射液治疗大鼠实验性急性肝衰竭的研究

目的：研究清肝解毒注射液治疗大鼠急性肝衰竭（ＦＨＦ）的作用。方法：用Ｄ氨基半乳糖（Ｇａｌｎ）造成大鼠实验性ＦＨＦ，观察清肝解毒注射液对其存活率和肝功能的影响，并设肝细胞生长因子（ＨＧＦ）为对照。结果：清肝解毒注射液组（简称清肝组）大鼠存活率为６３．６４％，ＨＧＦ组和模型组分别为５９．０９％和２７．２７％，清肝组存活率明显高于模型组，Ｐ＜０．０５。该药还可降低ＦＨＦ大鼠ＡＬＴ、ＴＢｉｌ水平，提高ＴＣＨ活性，与模型组比较差异显著。

HPLC测定退热解毒注射液中绿原酸和咖啡酸含量

目的:建立退热解毒注射液中绿原酸和咖啡酸的高效液相色谱分析方法。方法:以Hypersil ODS柱,0.01 mol/L磷酸二氢钠溶液(1%磷酸溶液调节pH值至3.9)-甲醇(15∶85)为流动相,流速为1.0 mL/min,柱温30℃,于323 nm测定退热解毒注射液中绿原酸和咖啡酸。结果:绿原酸在0.40～200 mg/L咖啡酸在0.16～160 mg/L内线性关系良好;平均回收率和RSD分别为99.4%,100.9%;1.0%,1.6%;检测限(S/N=3)分别为0.013,0.005 mg/L;定量限(S/N=10)分别为0.040,0.016 mg/L。结论:本法简便、准确、无干扰,可用于控制退热解毒注射液的质量。

综合线性定量指纹法评价退热解毒注射液融合指纹图谱研究

该研究引入综合线性定性相似度Sl、综合线性定量相似度Pl%和指纹变异系数α3个参数建立了1种新颖的综合线性指纹图谱评价方法,从定性定量的角度全面评价了中药的整体质量。方法采用高效液相二极管阵列(HPLC/DAD)采集了退热解毒注射液样品在210、254、265、330、360 nm波长下的指纹图谱并进行数据融合,同时定量分析了绿原酸、连翘酯苷A、丹皮酚和柴胡皂苷D 4个指标成分。通过综合线性指纹法鉴定样品质量。结果显示,10批注射液样品被分成5个等级,10批中间体样品被分成4个等级。此外,4个指标成分的定量分析结果与融合指纹图谱的定量相似度Pl%具有高度相关性,表明综合线性定量指纹法具有代替标准物质用于样品定量分析的潜力。该方法为中药整体质量控制提供了一种新思路。

用薄层扫描法测定清热解毒注射液中的栀子甙

栀子甙为清热解毒注射液中栀子的主要成分。采用薄层扫描法[1]测定其含量，具有直接点样展开、快速、简便、灵敏度高等优点，平均回收率97．99％，变异系数1．55％，这为本品的质量控制提供了可靠的依据。

HPLC法测定退热解毒注射液中连翘苷的含量

目的建立HPLC法测定退热解毒注射液中连翘苷的含量。方法采用Acclaim 120 C18色谱柱,乙腈-水(25∶75)为流动相,流速:1.2mL.min-1,检测波长:205nm,柱温:27℃。结果连翘苷在1.047～10.470mg.L-1范围内与峰面积呈良好线性关系,平均加样回收率为100.2%。结论本法简便、准确、重复性好,可用于退热解毒注射液中连翘苷的的测定。

HPLC双波长梯度洗脱法同时测定退热解毒注射液中绿原酸、连翘苷、丹皮酚的含量

目的：建立同时测定退热解毒注射液中绿原酸、连翘苷、丹皮酚含量的HPLC双渡长梯度洗脱法。方法：色谱柱为Kromasil C18（4．6mm×250mm，5μm）；以乙腈-水（25：75）为流动相A，0．3％磷酸为流动相B，梯度洗脱。检测波长λ1=327nm，A2=276nm；流速为1．0mL·min-1；柱温为30℃。结果：绿原酸、连翘苷、丹皮酚分别在8．34～66．69、8．01。64．08、4．01～32．05μg·mL-1范围内线性关系良好（r=0．9999）。平均回收率分别为99．14％、99．01％、99．00％。相应的RSD分别为0．72％、0．47％、0．82％（n=6）。结论：方法简便可靠，结果重现性好，为控制退热解毒注射液的内在质量提供了科学依据。

高效液相法测定清热解毒注射液中连翘苷的含量

目的采用高效液相色谱法(HPLC)测定清热解毒注射液中连翘苷的含量。方法高效液相外标法,以C18化学键和硅胶为固定相,以乙腈-水(25:75)为流动相,检测波长为278nm。结果连翘苷的平均回收率为99.1%,RSD为1.52%(n=6)。连翘苷在1.625～9.75μg范围内进样量与峰面积值呈良好线性关系。结论此方法简便、准确,可用于含量的测定。

清热解毒注射液中氯原酸含量的测定

利用差示分光光度法对清热解毒注射液(金银花、柴胡、连翘、丹皮、板蓝根等)中的氯原酸含量进行测定。暂定清热解毒注射液中氯原酸含量为每ml不得少于1.0mg。

高效液相色谱法测定清热解毒注射液中绿原酸含量

目的建立测定清热解毒注射液中绿原酸含量的高效液相色谱法。方法色谱柱为Agela Promosil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水-冰醋酸(10∶90∶1)为流动相,检测波长为326 nm。结果绿原酸进样量在0.15～0.92μg范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 99,n=6),平均回收率为99.5%,RSD=0.30%(n=6)。结论该方法简便、快速、灵敏、准确。