耐盐、低温适生芽孢杆菌TS1、TS3的拮抗及降解纤维素活性分析

为获得在高原生态农牧业中具有研究应用潜力的根围促生菌,从极端环境生境筛选出具有耐盐、耐低温适生性的菌株,并对其进行生理生化及分子鉴定。通过gyr B及16S r DNA基因序列分析,将菌株TS1鉴定为萎缩芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus),菌株TS3鉴定为解淀粉芽孢杆菌(B. amyloliquefaciens);平板对峙试验发现,菌株TS1、TS3均具有拮抗植物病原真菌及细菌的活性(抑菌圈直径≥8 mm);经Landy培养基发酵提取的菌株脂肽类化合物可在血平板上形成直径≥11 cm的透明圈;通过基质辅助激光解吸附-离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析所产生的脂肽类化合物,菌株TS1可产生表面活性素(Surfactin)、泛革素(Fengycin),菌株TS3可产生表面活性素、伊枯草菌素(Iturin A),推测菌株的拮抗活性与脂肽类化合物合成有关;羧甲基纤维素钠(CMC-Na)法检测发现,菌株具有降解纤维素活性; 3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定菌株解纤维素酶活性分别为116. 76、150. 12 U/m L;菌株TS1可在含Na Cl浓度为13%的LB培养基平板上及4、10℃低温条件下正常生长,表现出良好的耐低温及耐盐性。2株耐盐、耐低温适生芽孢杆菌兼具多种功能特性,在高原生态农牧业中具有一定的研究应用潜力,有望进一步研究并开发成为微生物肥料生产菌种。

几株解纤维素生防芽孢杆菌的分子鉴定及其抗逆促生特性分析

【目的】探究青藏高原解纤维素生防芽孢杆菌资源。【方法】采用BOX-PCR指纹图谱分析、gyr B基因及16S r RNA基因序列分析,对分离自青海互助北山桦树根围的5株芽孢杆菌进行分子鉴定;通过CMC法检测菌株降解纤维素活性;平板对峙法检测菌株拮抗病原真菌及病原细菌活性;检测菌株的耐盐性、低温适生性;测定菌株促种子萌发及幼苗生长特性。【结果】5株菌均鉴定为解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens;具有显著降解纤维素的特性,在CMC平板上形成纤维素降解透明圈直径≥20 mm;对油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)、瓜类枯萎病菌(Fusarium oxysporum)、水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae)及植物梨火疫病菌(Erwinia amylovora)均有显著拮抗活性;菌株可在含Na Cl浓度为11%的LB平板上正常生长,在10°C低温条件下生长良好;菌株BS11、BS12菌悬液(细胞浓度106 CFU/m L)可促进水稻种子萌发及幼苗生长。【结论】5株B.amyloliquefaciens菌株为抗逆性强的、具有降解纤维素活性的生防芽孢杆菌,在青藏高原生态农业及畜牧产业中具有应用潜力。