基于大鼠肝星状细胞氧化应激探讨化浊解毒补肾方治疗绝经后女性肝纤维化机制

目的通过研究化浊解毒补肾方含药血清对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)氧化应激的影响,进一步探讨该方治疗绝经后女性肝纤维化的机制。方法制备化浊解毒补肾方含药血清和正常血清。将肝星状细胞随机分为空白组、模型组、空白血清组、氟维司群(ICI 182780,以下简记为ICI)组、中药组、中药+ICI组、雌二醇(estradiol,E2)组、E2+ICI组,随后按照分组处理细胞。采用流式细胞术检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;ELISA法检测细胞中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)水平;免疫荧光染色法检测细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达;Western Blot法检测胞浆细胞色素C(cytochrome C)、环氧化酶-Ⅰ(cyclooxygenase-Ⅰ,COX-Ⅰ)、α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ)表达。结果与空白组比较,模型组细胞中ROS、MDA水平和α-SMA、collagenⅠ蛋白表达以及α-SMA平均荧光强度均明显升高(P<0.0001,P<0.001),SOD水平、cytochrome C、COX-Ⅰ蛋白表达均明显降低(P<0.0001);与模型组比较,中药组和E2组ROS、MDA水平和α-SMA、collagenⅠ蛋白表达以及α-SMA平均荧光强度均有明显降低(P<0.0001,P<0.001,P<0.01,P<0.05),SOD水平、cytochrome C、COX-Ⅰ蛋白表达均有明显升高(P<0.0001);与中药组和E2组比较,在各自加入ICI处理后,对应的ROS、MDA水平和α-SMA、collagenⅠ蛋白表达以及α-SMA平均荧光强度均有明显升高(P<0.0001,P<0.001,P<0.05),SOD水平和cytochrome C、COX-Ⅰ蛋白表达均有明显降低(P<0.001,P<0.05,P<0.01)。结论化浊解毒补肾方含药血清可通过雌激素受体降低ROS、MDA水平和α-SMA、collagenⅠ蛋白表达以及α-SMA平均荧光强度,提高SOD水平和cytochrome C、COX-Ⅰ蛋白表达,从而提高抗氧化能力,减轻氧化应激反应,最终起到防治绝经后女性肝纤维化的作用。

益肾解毒汤在阴道炎治疗中对雌激素水平、肾功能、肝功能及瘙痒评分的影响

目的探究益肾解毒汤联合硝呋太尔制霉素+多西环素+复方甘草酸苷胶囊对阴道炎患者的雌激素水平、肾功能、肝功能及瘙痒评分的影响。方法研究为回顾性研究,选取2019年3月—2021年3月医院收治的130例阴道炎合并皮肤瘙痒的患者,根据治疗方式不同分为观察组和对照组,各65例。对照组采用硝呋太尔制霉素阴道软胶囊+多西环素+复方甘草酸苷胶囊治疗,观察组患者在对照组的基础上联用益肾解毒汤,均连续治疗14 d。观察并比较两组性激素[黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、卵泡雌激素(follicles estrogen,FSH)、雌二醇(estradiol,E2)及睾酮(testosterone,T)]、肾功能[肾小球滤过率(glomerular filtration rate,GFR)水平、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血肌酐(blood cre-atinine,Scr)、24 h尿蛋白含量水平(24-hour urine protein content level,24 h pro)]、四项目瘙痒量表(four-item itch ques-tionnaire,FIIQ)评分、不良反应发生情况和生活质量。结果两组治疗后的LH、FSH、E2、T等性激素表达水平均显著优于治疗前,且观察组显著优于对照组(P<0.05)。治疗后,观察组Scr、BUN、24 h pro和CFR等肾功能指标均优于对照组(P<0.05)。治疗后,观察组IgG、IgM、MDA、SOD等肝功能指标水平均低于对照组(P<0.05)。治疗后,观察组患者的FIIQ评分各项均显著低于对照组,差异对比具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组患者的躯体能力、生理状态、心理状态、社会参与情况和一般健康情况5个维度评分均显著高于对照组(P<0.05)。治疗期间两组患者不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论益肾解毒汤联合硝呋太尔制霉素+多西环素+复方甘草酸苷胶囊能有效改善阴道炎患者雌激素水平,提升患者肾功能和肝功能,减轻患者皮肤瘙痒症状,提高患者生活质量,且未增加不良反应,值得进一步深入开展相关研究。

基于“肾毒”理论辨治尿酸性肾病撷要

尿酸性肾病(UAN)是主要因体内血尿酸产生过多或排泄减少形成高尿酸血症所致的肾损害。本病发生发展的基础在脾肾亏虚,而“肾毒”内蕴为其病机关键。各种原因导致的外邪炽盛直犯肾脏,蕴积于肾脏,或肾内之邪郁积宣张,即为“肾毒”。“肾毒”不仅导致UAN的发生,更是UAN的病理产物,是本病发生发展、缠绵难愈的关键所在。因此,对UAN的治疗应以益脾肾为基础,将解“肾毒”作为治疗的核心与重点,并贯穿始终。验之临床,疗效显著。附验案1则以佐证。

周恩超运用苏叶-茵陈药对治疗慢性肾脏病经验

慢性肾脏病是一种以慢性肾功能损害为主要表现,并可合并全身多器官损害的疾病。中医药在本病治疗上具有独特优势。周恩超教授通过中医理论结合临床经验提出从“肾毒”论治慢性肾脏病,他认为“肾毒”致病,或由外感,或由内生,或由药毒所伤,诸毒内外相引,伏于肾脏,损伤肾气,久致肾失藏泄,导致疾病的发生。治疗上以补益肾元为基础,泄浊解毒为关键。苏叶-茵陈是其常用药对,具有祛毒散结,调气和血之功,切中“肾毒”致病这一病机,是“解肾毒”思想运用于临床的具体体现。文章从“肾毒”理论、苏叶-茵陈的功效及其现代药理学研究总结了周恩超教授运用此药对治疗慢性肾脏病的经验,为该病的治疗及新药研发提供了参考。

补肾健脾活血解毒煎剂对单侧输尿管梗阻大鼠TGF-β1及α-SMA表达的影响

目的:研究补肾健脾活血解毒煎剂对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,探讨其抗肾间质纤维化的作用机制。方法:建立大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型,50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、代文组、补肾健脾活血解毒煎剂低、中剂量组,于造模4周后腹主动脉采血检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),收集24 h尿液检测N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG)、β2-微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG),取梗阻侧肾组织,HE、Mason染色观察肾小管间质病变,免疫组织化学染色观察α-SMA、TGF-β1在肾间质的阳性染色表达,并进行半定量分析。结果:与假手术组比较,模型组大鼠Scr、BUN、尿NAG、β2-MG水平以及α-SMA、TGF-β1阳性表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,补肾健脾活血解毒煎剂低、中剂量组大鼠Scr、BUN水平降低,尿NAG、β2-MG排泄减少(P<0.05或P<0.01),与代文组相当;补肾健脾活血解毒煎剂低、中剂量组和代文组α-SMA、TGF-β1阳性表达均显著下调(P<0.01)。结论:补肾健脾活血解毒煎剂可能通过改善肾小球、肾小管功能,抑制α-SMA、TGF-β1的表达,从而抑制肾小管上皮细胞间充质转分化,达到改善肾间质纤维化的作用。

益肾解毒汤治疗肾癌根治术后肾功能不全的临床观察

目的观察益肾解毒汤治疗肾癌根治术后肾功能不全的临床疗效。方法将40例肾癌根治术后合并肾功能不全的患者按随机、对照原则,分为观察组与对照组,对照组予西医常规基础治疗,观察组在对照组治疗基础上加服益肾解毒汤,随访6个月,观察两组患者的中医症状改善情况、血清肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)水平,进行疗效评价及分析。结果治疗总有效率:观察组优于对照组[95%(19/20)vs75%(15/20)],两组比较差异有统计学意义(P<0.05);组内对比,治疗后两组中医证候积分、SCr、BUN均有下降,差异有统计学意义(P<0.05),组间对比,治疗后观察组中医证候积分、SCr、BUN下降幅度均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论益肾解毒汤能改善肾癌术后合并肾功能不全患者中医症状,降低SCr、BUN水平,对肾癌术后肾功能不全有良好疗效。

基于Nrf2-NLRP3-GSDMD信号通路探讨肾消解毒通络方含药血清抑制高糖诱导的肾小球系膜细胞焦亡的分子机制

目的基于核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid2 related factor2,Nrf2)-Nod样受体蛋白3(nod-like receptor protein 3,NLRP3)-消皮素D(gasdermin D,GSDMD)信号通路,探究肾消解毒通络方(Shenxiao Jiedu Tongluo Recipe,SJTR)含药血清对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞HBZY-1焦亡的影响及分子机制。方法金黄地鼠灌胃给药制备SJTR含药血清。体外常规培养HBZY-1细胞,随机分为对照组、模型组、抑制剂组及中药低中高剂量6组。对照组细胞加入正常血清在低糖培养液中培养,模型组加入正常血清在高糖培养液中培养,抑制剂组加入正常血清及MCC950在高糖培养液中培养,中药低中高剂量组分别加入SJTR含药血清在高糖培养液中培养,干预24 h后收集细胞及上清液,ELISA检测各组细胞上清液中白介素-1β(Interleukin,IL-1β)、IL-18(Interleukin,IL-18)、IL-6(Interleukin,IL-6)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF-α)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD);RT-PCR检测HBZY-1细胞Nrf2、NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β分子mRNA表达;Western blot法检测各分子蛋白的表达;免疫荧光法检测NLRP3分子蛋白的表达及分布;LDH释放实验检测细胞膜损伤情况;TUNEL染色检测DNA损伤情况。结果与对照组比较,模型组细胞上清液各炎症因子水平升高,MDA表达升高,SOD表达降低(P<0.05);细胞Nrf2分子呈低表达,IL-1β分子mRNA表达升高,NLRP3、Casepase-1、GSDMD分子mRNA及蛋白表达增强(P<0.05);上清液LDH含量增高(P<0.05);TUNEL阳性细胞增多。与模型组比较,中药中高剂量组及抑制组细胞上清液炎症因子含量下降,MDA水平降低而SOD升高(P<0.05);细胞Nrf2分子表达上调,而NLRP3、Caspase-1、GSDMD等分子表达明显降低(P<0.05);上清液LDH含量下降(P<0.05);TUNEL阳性细胞减少。结论SJTR含药血清可通过调控Nrf2-NLRP3-GSDMD信号通路各分子表达,抑制高糖诱导的HBZY-1细胞氧化应激及炎症反应,拮抗细胞焦亡,发挥细胞保护作用。

解毒补肾汤结合艾灸治疗慢性肾衰竭临床疗效及安全性研究

目的探究解毒补肾汤结合艾灸治疗慢性肾衰竭临床疗效及安全性。方法研究共计纳入89例慢性肾衰竭患者,均由该院近3年收治,采取随机数字表法将其分为两组,对照组患者(44例)西医常规治疗,观察组患者(45例)西医常规疗法+解毒补肾汤结合艾灸治疗,比较两组患者临床治疗疗效、治疗前后中医症状(面色晦暗、食少纳呆、肌肤甲错、倦怠乏力、恶心呕吐、气短懒言、脘腹胀满等)积分变化、治疗前后肾功能指标变化及血常规指标变化、炎性因子指标水平变化、不良反应情况。结果观察组患者治疗有效率(93.33%,42/45)高于对照组(77.27%,34/44)(P<0.05);治疗前,两组患者中医症状积分、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、内生肌酐清除率(Ccr)等肾功能指标、血红蛋白(Hb)、血清白蛋白(ALB)等血常规指标、白细胞介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)等血清炎性因子水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后各组患者以上指标均一定程度改善,观察组患者治疗后以上指标均优于对照组(P<0.05);观察组不良反应率(4.44%,2/45)低于对照组(18.18%,8/44)(P<0.05)。结论解毒补肾汤结合艾灸治疗慢性肾衰竭临床疗效良好,患者症状改善,肾功能恢复良好,不良反应率低,安全性高,值得推广与应用。

补肾解毒方对辐射致小鼠胎盘结构损伤的防护作用研究

目的探究中、低剂量辐射对小鼠胎盘结构的影响及补肾解毒方对胎盘损伤的防护作用。方法选取受孕后孕鼠25只,随机分为5组,分别为空白对照组,1 Gy辐射组,4 Gy辐射组,1 Gy辐射+中药组,4 Gy辐射+中药组,自受孕第1天开始每日分别予1 Gy辐射组,4 Gy辐射组组生理盐水灌胃,1 Gy辐射+中药组,4 Gy辐射+中药组补肾解毒方溶液灌胃,10 d后分别予1 Gy、4 Gy 60 Co-γ射线照射,照射后仍以以上方法灌胃10 d,剖腹取出仔鼠及胎盘,称重胎盘,电镜观察胎盘切片。结果与空白对照组相比,1 Gy辐射组和1 Gy辐射+中药组仔鼠胎盘组织损伤轻微,胎盘重量及胎盘结构改变均不明显;4 Gy辐射组胎盘重量较空白对照组明显降低(P<0.05),胎盘结构疏松紊乱,主要可见血管管腔扩大,内有血凝块,血管内红细胞明显减少,组织间有淤血现象,纤维素样坏死等表现;4 Gy辐射+中药组胎盘重量较空白对照组亦明显降低(P<0.05),但较单纯4 Gy辐射组有所增加(P<0.05),胎盘血管组织结构尚清晰,血管扩张不明显。结论中高剂量辐射会导致胎盘重量减低和组织损伤,尤其血管损伤明显,补肾解毒方对中高剂量辐射具有较好的防护作用。

PMC方案联合益肾解毒汤治疗女性系统性红斑狼疮及对血清MCP-4和IL-4的影响

目的 探讨PMC方案联合益肾解毒汤治疗女性系统性红斑狼疮(SLE)的疗效及对患者血清单核细胞趋化蛋白-4(MCP-4)和白细胞介素-4(IL-4)的影响。方法 选择2015年1月—2019年10月医院治疗的女性系统性红斑狼疮患者84例,随机分成两组各42例。对照组采用PMC方案治疗,观察组采用PMC方案联合益肾解毒汤共同治疗。结果 观察组总有效率95.24%高于对照组总有效率80.95%(P<0.05)。治疗后,观察组血清MCP-4、IL-4低于对照组(P<0.01);观察组SLE活动指数(SLEDAI)积分、疲劳程度量表(FSS)评分、中医证候积分(TCMSS)评分低于对照组(P<0.01)。结论 PMC方案联合益肾解毒汤治疗系统性红斑狼疮疗效显著,可以降低患者血清MCP-4和IL-4水平,改善生活质量。

通络益肾方及其拆方对高糖诱导足细胞自噬及凋亡的干预研究

目的 观察通络益肾方及其拆方滋阴温阳方、解毒通络方含药血清对高糖刺激足细胞自噬及凋亡的影响,研究该方能否提高足细胞自噬水平,抑制足细胞凋亡。方法 足细胞常规培养达一定密度,随机分为:正常组、高糖组、通络益肾方组、解毒通络方组、滋阴温阳方组、甘露醇高渗组。按照各组培养条件培养48 h后分别采用透射电镜观察足细胞线粒体超微结构及自噬体改变,AnnexinV-/PI双染检测足细胞凋亡率,免疫印迹检测自噬蛋白Txnip、mTOR、Beclin-1及凋亡蛋白Bax、Bcl-2表达的变化。结果 电镜下可看到与高糖组相比,通络益肾方组、解毒通络方组、滋阴温阳方组线粒体损伤减轻,肿胀减轻,空泡减少,内部可见不同程度自噬体形成。高糖干预后足细胞凋亡率升高,而通络益肾方、解毒通络方、滋阴温阳方含药血清干预后足细胞凋亡减少差异有统计学意义,(P<0.05或P<0.01)。免疫印迹结果显示通络益肾方组、解毒通络方组、滋阴温阳方组足细胞Txnip、mTOR、Bax蛋白表达降低,Beclin-1、Bcl-2蛋白表达升高,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 通络益肾方及其拆方能提高足细胞自噬水平,保护足细胞,降低凋亡率。

蓉黄益肾解毒汤治疗慢性肾脏病患者后血脂变化与血清骨保护素、甲状旁腺激素的关系研究

目的：探讨对于慢性肾脏病患者采用蓉黄益肾解毒汤治疗后血脂的变化及其与血清骨保护素和甲状旁腺激素的关系。方法：选取我院2012年5月至2014年5月的慢性肾脏病患者41例作为对照组,采取常规治疗;选取同期的123例3~5期的慢性肾脏病患者作为试验组,分为3期慢性肾脏病组、4期慢性肾脏病组和5期慢性肾脏病组,均采用蓉黄益肾解毒汤治疗;同时选取41例健康人群作为健康组。采用酶联免疫吸附法（ELISA法）测定5组研究对象的血脂变化、血清骨保护素和甲状旁腺激素浓度。结果：3期慢性肾脏病、4期慢性肾脏病和5期慢性肾脏病的血清骨保护素、甲状旁腺激素浓度明显高于对照组,4组研究对象的血脂指标没有明显差异;5期慢性肾脏病与3期慢性肾脏病和4期慢性肾脏病之间的血清骨保护素、甲状旁腺激素浓度存在明显差异,具有统计学意义（P〈0.05）;5期的慢性肾脏病患者治疗后的血脂变化与血清骨保护素、甲状旁腺激素具有正相关性。结论：慢性肾脏病患者经过蓉黄益肾解毒汤治疗后的血脂变化、血清骨保护素、甲状旁腺激素均得到改善,5期的慢性肾脏病患者血脂变化与血清骨保护素、甲状旁腺激素有相关性。

化浊通络汤治疗血管性痴呆的临床观察

目的:探讨化浊通络汤防治血管性痴呆的临床疗效。方法:选取符合血管性痴呆纳入标准的患者160例,随机分为治疗组和对照组各80例。两组患者基础治疗基本相同,治疗组联用中药化浊通络汤,疗程3个月,观察两组患者治疗前后简易智能量表(MMSE)、日常生活能力(ADL)、临床疗效及中医证候积分的变化以及该药的安全性。结果:治疗后治疗组各项积分及总积分均较治疗前提高,差异有统计学意义(P <0.05);对照组回忆、定向、语言积分及总积分较治疗前提高,差异有统计学意义(P <0.05),计算和识记积分与治疗前比较差异无统计学意义(P> 0.05)。两组治疗后计算、回忆和总积分比较差异有统计学意义(P <0.05)。治疗组总有效率为87.5%,对照组为72.5%,治疗组疗效优于对照组(P <0.05)。两组中医证候积分治疗后较治疗前降低,差异有统计学意义(P <0.05),治疗组评分显著低于对照组(P <0.05)。两组患者治疗后较本组治疗前ADL评分降低,治疗组治疗后ADL评分显著低于对照组(P <0.05)。结论:化浊通络汤能有效改善VD患者的MMSE、ADL及临床疗效,提高患者的日常生活自理能力,有肯定的临床疗效,且安全可靠,值得临床推广及进一步深化研究。