胶质细胞和促炎性细胞因子参与鞘内注射血小板活化因子诱发的触诱发痛和热痛敏

目的:探讨脊髓胶质细胞、促炎性细胞因子TNF-α和IL-1β以及NF-κB通路在鞘内注射血小板活化因子(PAF)诱发大鼠痛敏中的作用。方法:鞘内置管成功的雄性Sprague-Dawley大鼠64只随机分为6组:人工脑脊液(artificial cerebral spinal fluid,ACSF),对照组(n=16),鞘内注射ACSF 10μl;PAF组(n=16),鞘内注射PAF 10μg,溶解于10μl人工脑脊液;二甲基亚砜(DMSO)对照组(n=8),腹腔注射0.1%DMSO生理盐水2 ml;SC-514(10 mg/kg)组Ⅰ,SC-514(50 mg/kg)组Ⅱ和SC-514(100 mg/kg)组Ⅲ(n=16)。SC-514溶解于2 ml 0.1%DMSO生理盐水。DMSO组和SC-514组在鞘内注射PAF前2 h分别腹腔注射给药。鞘内给药后测机械缩爪阈值和热缩爪潜伏期,5 h后免疫组织化学染色检测腰段脊髓GFAP和OX-42的表达,ELISA检测脊髓TNF-α和IL-1β表达。结果:鞘内注射PAF激活大鼠脊髓星形胶质细胞和小胶质细胞,GFAP和OX-42标记免疫阳性反应增强,脊髓TNF-α和IL-1β表达增强;IKKβ抑制剂SC-514剂量依赖性减轻PAF诱发的触觉痛敏和热痛敏,并抑制TNF-α和IL-1β的表达增强。结论:鞘内注射PAF诱发大鼠触诱发痛和热痛敏,脊髓胶质细胞和NF-κB通路的激活以及促炎性细胞因子TNF-α和IL-1β表达增强可能参与其机制。

脊髓神经元凋亡在鞘内注射血小板活化因子诱发大鼠痛敏中的作用

目的探讨脊髓神经元凋亡在鞘内注射血小板活化因子(PAF)诱发大鼠痛敏中的作用。方法鞘内置管成功的雄性Sprague-Dawley大鼠60只,随机分为2组:对照组,30只,鞘内注射人工脑脊液(artificial cerebral spinal fluid,ACSF)10μl;PAF组,30只,鞘内注射PAF 10μg,溶解于10μl人工脑脊液;分别于鞘内给药前1 d、给药后1、3、5、7、14 d分别测定机械痛阈(PWMT)和热痛阈(PWTL)。取L4-6脊髓,采用TUNEL法观察脊髓神经元凋亡。结果鞘内注射血小板活化因子(PAF)可诱发出大鼠机械性触诱发痛和热痛觉过敏。PAF组术后1 d脊髓中开始有少量凋亡神经元出现,凋亡指数于术后3 d开始迅速增加,术后5 d达峰值,与对照组比较,有显著性差异(P<0.01)。结论鞘内注射PAF诱发大鼠触觉异常痛敏和热痛敏,脊髓神经元凋亡可能参与了鞘内注射PAF大鼠痛敏的形成。