来自詹氏乳杆菌的耐热D-乳酸脱氢酶的酶学性质研究

【目的】D-乳酸脱氢酶是催化丙酮酸合成D-乳酸的关键酶。由于其不耐热,从而限制了D-乳酸高温发酵菌株的构建。本文从詹氏乳杆菌中克隆新型D-乳酸脱氢酶研究其酶学性质,为构建D-乳酸高温发酵菌株,进一步降低D-乳酸生产成本奠定基础。【方法】通过克隆詹氏乳杆菌的D-乳酸脱氢酶,将其进行体外表达,并与来自植物乳杆菌中的D-乳酸脱氢酶的最适温度、最适p H、动力学参数及热稳定性和热失活性相比较,研究詹氏乳杆菌D-乳酸脱氢酶的耐热性。【结果】詹氏乳杆菌的D-乳酸脱氢酶最适温度(45°C)比植物乳杆菌中的D-乳酸脱氢酶的最适温度(30°C)高很多,热失活的时间和温度均要比植物乳杆菌中D-乳酸脱氢酶高很多。同时其催化效率(kcat/Km)是植物乳杆菌D-乳酸脱氢酶的3倍左右。【结论】詹氏乳杆菌的D-乳酸脱氢酶具有更好的耐热性和更高的催化活力。

常规小鼠盲肠内容物中乳酸杆菌(Lactobacillus)的分离鉴定

乳酸杆菌在机体消化道中具有合成维生素,促进代谢,帮助食物消化,降低胆固醇,增强宿主对乳糖耐力,防止腐败过程等生理意义。在人和动物体内是重要的正常菌丛成员。因此,不少国家在培育悉生动物时,大多数选用该菌作为居留菌之一,接种到无菌动物的消化道内。我们从常规615系小鼠盲肠内容物中分离到3株乳酸杆菌,经培养特性、细菌形态、生化反应等试验,证明这3株菌分别是干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌及詹氏乳杆菌,现依次编号为86-6、86-7、86-8,准备应用于悉生小鼠培育的研究中。