记忆性干细胞样T细胞在肿瘤治疗应用中的研究进展

记忆性干细胞样T细胞(stem memory T cells,TSCM)是最近几年发现的一个细胞亚群,约占外周血中总的CD4+T细胞和CD8+T细胞的2%~4%,是记忆性T细胞的早期分化阶段,具有记忆性细胞和干细胞的特点,基因谱介于初始T细胞和中央记忆T细胞之间。记忆性干细胞样T细胞具有自我更新和长期存活能力,这些特点使它们成为肿瘤领域关注的热点。本文将简述记忆性干细胞样T细胞的一些特点,以及它们在肿瘤治疗中的应用。

干细胞样记忆性T细胞的研究进展

干细胞样记忆性T细胞(stem like memory T cells,T SCM)是近年来发现的一种具有明显干细胞特性的记忆性T细胞亚群,除了具有记忆性T细胞快速高效的再次免疫应答的特点外,它还具有极强的自我更新、持续增殖分化等一系列干细胞特点。本文针对其分化、功能特点,在疾病发生发展中的作用和在制备预防性疫苗、肿瘤免疫治疗中的应用等方面进行综述,为其研究与应用提供相关的线索。

干细胞样记忆性CD8^+T细胞的生物学特性研究进展

干细胞样记忆性T细胞(TSCM)是一种新型记忆细胞亚群,TSCM具有类似干细胞样自我更新能力,能够在体内长期存活,并在抗原刺激下迅速分化为成熟的中枢记忆、效应记忆和效应T细胞。TSCM在临床患者和小鼠模型中均可检出且参与相关疾病的发生与发展。本文对CD8^+TSCM生物学特性进行总结,重点探讨CD8^+TSCM表型和转录特征、参与CD8^+TSCM分化的细胞因子和信号通路,及其在免疫相关疾病和肿瘤免疫治疗中的应用价值。

记忆性干细胞样T细胞:从哪里来?

记忆性干细胞样T细胞(stem cell-like memory T cells,T_(SCM))是近期发现的一群具有自我更新、长期生存以及分化为其他类型T细胞的多能干细胞。这些特性使其正成为细胞免疫治疗的重要武器。但是,由于正常人体内的T_(SCM)极为稀少,这成为其临床转化应用的绊脚石。近年来,越来越多的研究发现通过调控WNT、m TORC、Notch等信号通路可以促进T_(SCM)的产生。通过小分子药物调控相关信号通路可以诱导、促进多能干细胞的转化。同时,细胞因子以及APC在T_(SCM)细胞的产生上也扮演着至关重要的角色。本文主要聚焦通过小分子药物、细胞因子等调控相关信号通路获取T_(SCM)机制的研究进展。

重症肌无力患者外周血中CD4^+记忆性干细胞样T细胞水平的表达及临床意义

目的探讨重症肌无力(myasthenia gravis,MG)患者外周血中CD4^+记忆性干细胞样T细胞(memory stem cell-like T cell,Tscm)的表达水平及其临床意义。方法收集2016年9月—2018年12月在徐州医科大学附属医院神经内科就诊的34例MG患者及20例健康体检者(健康对照组)外周静脉血样,并根据MG患者病情程度分为眼肌型重症肌无力(ocular myasthenia gravis,OMG)组和全身型重症肌无力(generalized myasthenia gravis,GMG)组,根据定量重症肌无力(QMG)量表评分。流式细胞术检测外周血中CD4^+Tscm表达水平、CD38^+CD138^+浆细胞频率,ELISA法检测血清炎性因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-17的表达水平。分析OMG组和GMG组CD4^+Tscm的表达水平与QMG评分、CD38^+CD138^+浆细胞频率及IL-1β、IL-6、IL-17血清炎性因子的相关性。结果与健康对照组比较,OMG组和GMG组CD4^+Tscm表达水平、CD38^+CD138^+浆细胞频率及IL-1β、IL-6、IL-17血清炎性因子表达水平均升高,差异有统计学意义(P<0.01),且GMG组变化较OMG组变化更为显著(P<0.01)。OMG组和GMG组外周血CD4^+Tscm的表达水平与QMG评分、CD38^+CD138^+浆细胞频率及IL-1β、IL-6、IL-17血清炎性因子呈显著正相关。结论CD4^+Tscm在MG患者外周血中表达增加,与临床严重程度、浆细胞频率及血清炎性因子均呈正相关,提示CD4^+Tscm可能通过介导炎症因子的释放而参与MG的发病。

外周血干细胞样记忆性T细胞和调节性T细胞在卵巢癌患者外周血中的表达及临床意义

目的探讨外周血干细胞样记忆性T细胞(Tscm)和调节性T细胞(Treg)在卵巢癌患者外周血中的表达及临床意义。方法选取行腹腔镜切除根治术治疗的卵巢癌患者83例作为研究组,以60例同期体检的健康志愿者作为对照组,采集研究组术后24 h内、对照组体检当日的外周血,检测Tscm及Treg比率,分析卵巢癌患者外周血Tscm、Treg比率与临床病理特征的关系;术后随访3年,统计卵巢癌患者生存情况,并比较死亡组和生存组患者的Tscm、Treg比率;采用Cox回归分析影响卵巢癌患者预后的因素,绘制受试者工作特征曲线(ROC),以曲线下面积(AUC)评价外周血Tscm、Treg对卵巢癌患者预后的预测效能。结果研究组Tscm比率明显低于对照组、Treg比率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001);不同肿瘤大小、临床分期、分化程度、有无淋巴结转移、有无腹水卵巢癌患者外周血Tscm、Treg比率比较,差异有统计学意义(P<0.05);死亡组患者Tscm比率低于生存组、Treg比率高于生存组,差异有统计学意义(P<0.05);Cox回归分析显示临床分期、分化程度、淋巴结转移、外周血Tscm、Treg比率均为影响卵巢癌患者预后的独立影响因素(P<0.05);ROC分析显示,外周血Tscm、Treg比率单独及两者联合预测卵巢癌患者预后的灵敏度分别为82.61%、69.57%、69.57%,特异度分别为70.69%、75.86%、92.28%,AUC分别为0.756、0.743、0.892,。结论卵巢癌患者外周血Tscm比率偏低、Treg比率偏高,两者联合预测卵巢癌患者预后的效能较高。

HIV-1慢性感染者外周血中CD8^+干细胞样记忆型T细胞变化以及对疾病进展的影响

目的观察人类免疫缺陷病毒-1(human immunodeficiency virus-1,HIV-1)慢性感染者外周血中CD8+干细胞样记忆型T细胞(CD8+stem memory T cells,CD8+TSCM)随治疗的动态变化,分析其与疾病进展的关系。方法观察25例经抗反转录病毒治疗(antiretroviral therapy,ART)的慢性HIV-1感染者(治疗方案为替诺福韦+依非韦伦+拉米夫定)以及36例健康对照者,对样本外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)分别用CD3-APCCy7、CD4-FITC、CD8-Per CPCy5、CD45RAPECy7、CCR7-APC、CD27-PE、CD95-Pacific Blue抗体和CD38-PE、HLA DR-APC抗体进行细胞表面染色并通过流式细胞仪检测CD8+TSCM细胞比例。比较HIV-1慢性感染者和健康者CD8+TSCM细胞比例的差异,并分析其与疾病进展指标(CD4+T细胞计数、HIV病毒载量以及免疫活化指标)的关系。结果 HIV-1慢性感染组的CD8+TSCM细胞比例小于健康对照组;CD8+TSCM细胞比例与CD4+T细胞计数呈正相关,与HIV-1病毒载量以及免疫活化指标CD38+HLA-DR+CD8+T细胞呈负相关;随着ART治疗,CD8+TSCM细胞比例在144周后升至健康对照水平。结论 CD8+TSCM在慢性HIV-1感染中发挥一定的保护作用,HIV-1相关特异性CD8+TSCM细胞可能是未来T细胞疫苗设计的靶点。

人干细胞样记忆性T细胞的免疫学特征及功能研究进展

干细胞样记忆性T细胞(stem-like memory T cell,Tscm)是新发现的一类记忆性T淋巴细胞亚群,具有自我更新和分化为中央型记忆性T细胞(Tcm)、效应型记忆性T细胞(Tem)以及效应T细胞(Teff)的多种分化潜能,是人体潜在的记忆性T细胞库。这些细胞能够特异性识别多种病毒和自身肿瘤抗原,与其他已知的记忆性细胞相比,Tscm细胞具有更高的增殖能力,能在体内长期维持,在抗原的刺激下能迅速产生大量细胞因子,更有效的调节抗肿瘤和抗感染免疫。人Tscm细胞的发现,为T细胞疫苗和T细胞免疫治疗提供了理论依据。本文就Tscm细胞的免疫学特征及功能进行综述。

干性记忆型T细胞及其在抗肿瘤研究中的进展

伴随CAR-T细胞疗法获得FDA批准正式上市以来,足以改变癌症治疗模式的过继免疫治疗（AIT）成为人们持续关注的热点。AIT目前大多采用分化终末期的效应T细胞,而且其疗效与过继转移T细胞的数量有关。研究表明中晚期T细胞回输后,其扩增及存活能力均不如早期T细胞,例如Klebanoff等^（[1]）观察了中心记忆型T细胞（TCM）和效应型T细胞（TEM）分别输注于接种肿瘤细胞的小鼠模型,发现在体内TCM比TEM具有更持久的存活时长和更好的抗肿瘤效果。

HIV-1慢性感染者CD8^+Tscm异常免疫活化对T细胞耗竭的影响

目的探讨HIV-1慢性感染者CD8^+干细胞样记忆性T细胞(stem memory T cell,Tscm)免疫活化水平的变化特点及其活化对CD8^+T细胞功能耗竭的影响。方法选取24例未经治疗的HIV-1慢性期感染者和41名健康对照者,采用流式细胞术分别检测健康对照者和HIV-1感染者CD8^+Tscm的比例、CD8^+Tscm的免疫活化水平、CD8^+T细胞表面抑制性分子(CD160、PD-1、TIGIT、TIM-3和LAG-3)表达水平及CD8^+T细胞功能(分泌细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α的能力);分析CD8^+Tscm的免疫活化水平与CD8^+T细胞抑制性分子表达及CD8^+T细胞功能的相关性。结果与健康对照者相比,HIV-1慢性期感染者CD8^+Tscm的比例显著下降,CD8^+Tscm免疫活化水平(CD38^+HLA-DR^+CD8^+Tscm比例)显著升高。HIV-1慢性期感染者CD8^+Tscm免疫活化水平与CD8^+T细胞分泌IL-2和TNF-α水平呈负相关。HIV-1慢性感染引起CD8^+T细胞抑制性分子(CD160、PD-1、TIGIT和LAG-3)上调,但活化的CD8^+Tscm仅与CD8^+T细胞抑制性分子TIGIT表达水平呈正相关。CD8^+T细胞抑制性分子TIGIT表达水平与CD8^+T细胞分泌IL-2和TNF-α水平呈负相关。结论 HIV-1慢性感染引起CD8^+Tscm的异常免疫活化,活化的CD8^+Tscm通过上调CD8^+T细胞抑制性分子TIGIT抑制CD8^+T细胞功能。

不同CD8^+T细胞分化状态对CAR-T实体肿瘤疗效影响的研究进展

T淋巴细胞分化是一个表型和功能不断改变的渐进过程。T细胞不同分化亚群的抗病毒特征已被较为清晰地揭示,然而在抗肿瘤过程中,这些T细胞亚群的作用和功能研究远不够深入,人们对哪些T细胞亚群能在体内有效地杀伤实体肿瘤知之甚少。2017年美国FDA准入了两款抗CD19嵌合型抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor modified T cells,CAR-T)产品上市,为难治性淋巴瘤患者带来了希望。而相较之下,CAR-T在实体肿瘤中的临床应用则相对滞后。近年来深入的T细胞分化研究显示,不同阶段的CD8^+T细胞体内外抗肿瘤效应存在较大差异,幼稚CD8^+T细胞在沿着干细胞样记忆型T细胞向终末效应型T细胞分化的系列进程中会逐渐丧失自我更新、增殖存活、再活化能力,但细胞毒作用却显著增强。这种CD8^+T细胞分化中呈现的效应功能与细胞自我更新、增殖和存活能力的负相关关系,可能是导致CAR-T在体外杀伤效能无法准确反映体内抗实体瘤疗效的重要原因。本文就CD8^+T细胞各分化阶段的特征,以体外靶向杀伤能力评估临床CD8^+CAR-T抗实体瘤疗效的局限性,以及针对这一临床问题可能的解决方案进行了综述。

环黄芪醇联合IL-7和IL-15对人脐带血T细胞体外扩增的影响

目的探究环黄芪醇(cycloastragenol,CAG)联合细胞因子IL-7和IL-15对人脐带血T细胞体外扩增和CD8^+T细胞亚群中干细胞样中心记忆性T细胞(stem cell-like central memory T cells,TSCM)比例的影响,为基于T细胞的肿瘤细胞免疫治疗研究奠定实验基础。方法采集健康产妇脐带血,通过密度梯度离心法分离获得脐带血单个核细胞(umbilical cord blood mononuclear cells,UCBMC),利用CD3/CD28抗体偶联磁珠刺激活化后,采用不同浓度的CAG(0、0.04、0.2、1、5μmol/L)联合IL-7和IL-15连续培养,利用多色流式细胞术分别测定T细胞的增殖程度以及CD8^+T细胞中TSCM比例的变化情况。结果 0.2μmol/L CAG与IL-7和IL-15细胞因子联用组促T细胞扩增作用显著高于其他浓度CAG与细胞因子IL-7和IL-15联用组或单独使用细胞因子IL-7和IL-15组。同时,0.2μmol/L CAG联用IL-7和IL-15组还可以促进CD8^+T中CD197^+CD45RA+细胞表型的表达,即维持CD8^+T中高比例的TSCM亚群。结论 0.2μmol/L CAG联合IL-7和IL-15可以显著提高活化T细胞扩增能力,并能保持CD8^+T细胞中高比例的TSCM亚群。

记忆性干细胞样T细胞的研究进展

人记忆性干细胞样T细胞（TSCM）是新发现的一个T细胞亚群.这一类群的细胞具有干细胞的特征,具有较强的多向分化潜能,TSCM细胞能够分化为中枢性记忆性T细胞（TCM）,效应性记忆性T细胞（TEM）和效应性T细胞（TEF）,在分化的同时又能够维持自我更新.虽然TSCM细胞表达初始T细胞的标记,但是在基因表达谱、功能等方面又表现出记忆性T细胞的特征等,基于目前人们对TSCM细胞的生物学特点以及其在肿瘤免疫中的作用的了解,为TSCM细胞应用于临床免疫治提供依据疗.

胃癌患者外周血记忆性干细胞样T细胞的分布特征及临床意义

目的研究胃癌患者外周血记忆性干细胞样T细胞(memory stem cell T cells,TSCM)的分布特征,分析TSCM与临床病理特征的关系,探讨其临床应用价值。方法选取2018年7—12月在我院住院的胃癌患者32例为病例组,同期健康志愿者23例作为对照组。流式细胞术检测胃癌患者外周血TSCM、初始T细胞(naive T cells,TN)、记忆性T细胞(memory T cells,TM)的比例,并比较其与对照组的差异,分析TN、TSCM、TSCM/TN值、TM与临床病理特征的关系。结果病例组患者外周血TN比例、TSCM比例均明显低于健康对照组,TSCM/TN值明显高于健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。TN比例与肿瘤TNM分期、浸润深度呈负相关,与组织分化程度呈正相关;TSCM/TN值与肿瘤TNM分期、浸润深度、淋巴结转移呈正相关。结论胃癌患者外周血TN、TSCM/TN值与肿瘤分期、浸润深度等临床病理特征密切相关,可作为一种新的方式用于评价患者的免疫状态;TSCM在胃癌的过继细胞免疫治疗中可能有重要的临床应用价值,但需大规模多中心临床研究进一步评价。

干细胞样记忆性CD4+T细胞与临床疾病的研究进展

干细胞样记忆性T细胞(stem cell-like memory T cell,TSCM)是记忆T细胞的重要组成,具有干细胞样自我更新、多分化潜能和免疫重构特性。有别于中枢记忆T细胞(central memory T cell,TCM)或效应记忆T细胞(effective memory T cell,TEM)亚群,TSCM具有初始T细胞表型且分化程度较低。CD4+TSCM细胞在疾病发生发展中发挥保护性或致病性双重作用,现就记忆T细胞的形成机制和CD4+TSCM生物学特性做一综述,进而探讨其在艾滋病、肿瘤、结核和自身免疫性疾病中的作用。

宫颈癌患者外周血TSCM与Treg的分布特征及临床意义

目的探讨宫颈癌患者外周血中干细胞样记忆性T细胞(TSCM)与调节性T细胞(Treg)的分布特点及临床价值。方法选取2019年10月至2020年3月在徐州医科大学附属医院住院的宫颈癌、高级别上皮内瘤变、低级别上皮内瘤变各30例为观察组,同期15例宫颈炎患者作为对照组。采集外周静脉血2ml,流式细胞学方法检测TSCM与Treg的比例。结果宫颈癌组、高级别上皮内瘤变组、低级别上皮内瘤变组、宫颈炎组中TSCM表达呈显著上升趋势,Treg表达水平则逐渐下降(P<0.05);外周血中TSCM、Treg、Treg/TSCM的表达水平与临床分期、淋巴结转移和组织分化程度相关(P<0.05),而与患者年龄、病理类型、是否侵犯肌层及肿瘤大小等无明确相关。结论伴随肿瘤进展,机体抗肿瘤免疫储备能力逐渐减退,免疫抑制以及负调节能力逐步增强;基于TSCM和Treg的细胞免疫治疗未来有巨大的发展潜力。