萸连丸对葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎小鼠记忆性滤泡辅助性T细胞的调节作用

目的探究萸连丸(黄连、吴茱萸)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎小鼠脾脏记忆性滤泡辅助性T细胞(Memory follicular T helper cell,m Tfh)的调节作用。方法将40只BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、萸连丸组(0.5 g·kg^(-1))和美沙拉嗪组(0.3 g·kg^(-1)),每组10只。采用3%DSS溶液自由饮用7 d诱导溃疡性结肠炎小鼠模型。实验过程每天记录小鼠的精神状态、粪便性状、便血及体质量情况;测量小鼠结肠长度、结肠质量,计算结肠质量指数;采用HE染色法观察结肠组织病理形态变化;ELISA法测定结肠组织中白细胞介素6(IL-6)、IL-15的表达水平;流式细胞术测定脾脏组织中m Tfh细胞亚群的表达情况;Western Blot法测定结肠组织中Roquin-1、AMPK-α、p-AMPK-α蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组小鼠的体质量显著下降(P<0.01),结肠长度显著缩短(P<0.01),结肠质量明显增加(P<0.05),结肠质量指数显著升高(P<0.01),结肠组织病理损伤严重;结肠组织中的促炎细胞因子IL-6、IL-15表达水平显著升高(P<0.01);脾脏组织中CD4^(+)CCR7-CXCR5^(+)CD62L^(+)、CD4^(+)CCR7^(+)CXCR5^(+)GL7^(+)、CD4^(+)CCR7-CXCR5^(+)GL7^(+)细胞表达水平显著升高(P<0.01),而CD4^(+)CCR7^(+)CXCR5^(+)CD62L^(+)细胞表达水平显著降低(P<0.01);结肠组织中Roquin-1、AMPK-α、p-AMPK-α蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与模型组比较,萸连丸组及美沙拉嗪组小鼠的体质量明显上升(P<0.05),结肠长度显著延长(P<0.01),结肠质量明显降低(P<0.05),结肠质量指数显著下降(P<0.01),结肠组织病理损伤得到较明显改善;结肠组织中的IL-6、IL-15表达水平显著降低(P<0.01);脾脏组织中CD4^(+)CCR7-CXCR5^(+)CD62L^(+)、CD4^(+)CCR7^(+)CXCR5^(+)GL7^(+)、CD4^(+)CCR7-CXCR5^(+)GL7^(+)细胞表达水平显著降低(P<0.01),而CD4^(+)CCR7^(+)CXCR5^(+)CD62L^(+)细胞表达水平显著升高(P<0.01);结肠组织中Roquin-1、AMPK-α、p-AMPK-α蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论萸连丸对DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎具有治疗作用,能够改善结肠组织病理损伤,可能与其激活Roquin-1/AMPK-α信号通路,下调炎性细胞因子IL-6、IL-15表达,调控m Tfh细胞亚群稳态有关。

姜黄素对肥胖小鼠溃疡性结肠炎记忆性滤泡性T细胞的调控作用

本研究在明确姜黄素有效治疗肥胖小鼠溃疡性结肠炎的基础上,评价其对结肠炎肥胖小鼠记忆性滤泡性T细胞(memory follicular T cells,mTf)的调控作用。经江西中医药大学实验动物伦理委员会审议同意并批准后,将40只瘦素突变型(ob/ob)雄性小鼠随机分为对照组、对照+姜黄素组、模型组和模型+姜黄素组,每组10只。采用葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)诱导模型组和模型+姜黄素组小鼠建立慢性溃疡性结肠炎模型后,对照+姜黄素组和模型+姜黄素组小鼠灌胃给予姜黄素(200 mg·kg^(-1)·d^(-1))。麻醉处死小鼠,观察各组小鼠结肠质量、结肠质量指数、结肠长度等情况;HE染色后进行病理损伤评分;流式细胞术检测小鼠脾脏记忆性滤泡性辅助性T细胞(memory follicular helper T cells,mTfh)和记忆性滤泡性调节性T细胞(memory follicular regulatory T cells,mTfr)细胞亚群水平;酶联免疫吸附法检测结肠组织中白介素-10(interleukin-10,IL-10)和白介素-17A(interleukin-17A,IL-17A)的表达量。结果表明,姜黄素可明显增加结肠炎肥胖小鼠的体重和结肠长度,降低结肠重量、结肠质量指数和病理评分(P<0.05);并且姜黄素可显著降低中枢型记忆性滤泡性T细胞(central memory follicular T cells,cmTf)、mTfh1、mTfh17细胞水平和促炎细胞因子IL-17A含量(P<0.01),升高效应型记忆性滤泡性T细胞(effector memory follicular T cells,emTf)、mTfr细胞水平及抑炎细胞因子IL-10含量(P<0.05,P<0.01)。因此,姜黄素治疗肥胖小鼠结肠炎,可能是通过调控mTf细胞亚群平衡来实现的。