MyD88及Trif对心脏移植小鼠体内供者特异性抗体及记忆性T淋巴细胞的影响

目的探讨髓样分化因子88（MyD88）及Trif对皮肤移植预致敏的心脏移植小鼠体内供者特异性抗体（DSA）及记忆性T淋巴细胞的影响。方法实验分为空白组（C57BI。／6野生型小鼠，不行移植手术）、对照组（C3H小鼠为供者，C57BL／6小鼠为受者）和实验组（C3H小鼠为供者，MyD88及Trif基因敲除的C57BL／6小鼠为受者）。将C3H小鼠皮片移植给受鼠，进行预致敏，2周后检测受鼠血清中DSA的水平，并且将C3H小鼠心脏移植给相应受鼠，观察移植心脏存活时间。在观察终点时，再次检测受鼠血清中DSA水平，同时检测受鼠脾脏中记忆性T淋巴细胞的比例。结果皮肤移植2周后，实验组受鼠DSAIgG2水平低于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05），DSAIgGl和IgG3的水平亦低于对照组，但差异无统计学意义（P〉0．05）。心脏移植3d后，与对照组相比较，实验组受鼠DSAIgG2水平明显降低（P〈0．01），受鼠脾脏中CD4＋和CD8＋记忆性T淋巴细胞的比例低于对照组（P〈0．01，P〈0．05）。两组受鼠心脏移植后平均存活时间的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论敲除小鼠MyD88及Trif基因虽然不能延长预致敏小鼠移植心脏的存活时间，但是能显著降低受鼠血清中DSA的水平及脾脏中记忆性T淋巴细胞的比例。

急性乙型肝炎患者程序性细胞死亡受体1表达与记忆性T淋巴细胞形成的关系

目的观察急性自限性乙型肝炎发病过程中患者体内病毒抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）上程序性细胞死亡受体1（PD—1）表达的动态变化特点及其与记忆性抗原特异性CD8’T淋巴细胞形成的关系。方法针对不同表位合成4种五聚体，长期随访收集11例人类白细胞抗原（HLA）-A2阳性的急性乙型肝炎患者的外周血，流式细胞仪检测病毒特异性CTL上免疫抑制性分子PD-1、记忆性分子（CCR7、CD45RA、CD127）和活化标志物CD38的表达情况，并分析其相关性。同时进行肝功能、HBsAg、抗HBs和血清HBVDNA载量检测。结果所有急性自限性乙型肝炎患者发病早期均表现出高频度、病毒抗原多表位的特异性CTL反应，而晚期各表位CTL频率均明显下降。CTL上PD-1表达在早期明显上调；与早期比较，晚期PD-1分子的表达明显降低（t=4．314，P〈0．01）。同时CTL高表达记忆性分子CCR7、CD45RA和CD127，而低表达活化标志物CD38。提永病毒清除后记忆性CD8T淋巴细胞形成。结论在急性自限性乙型肝炎发病过程中，HBV特异性CTL上PD1分子表达的动态变化与记忆性T淋巴细胞的形成密切相关。

通过小鼠皮肤移植后心脏移植模型观察记忆性T淋巴细胞的变化和作用

目的建立小鼠皮肤移植后心脏移植模型，观察记忆性T淋巴细胞的变化和作用，及其与皮肤移植后同种反应性记忆性T淋巴细胞过继转移模型的差异和机理。方法应用显微外科技术及血管套管法，建立小鼠皮肤移植后心脏移植模型（实验组），并以心脏移植前输注或未输注记忆性T淋巴细胞的2个组作为对照（移植对照组和输注对照组），两对照组均未进行皮肤移植。心脏移植后每天触摸各组供心的搏动情况，观察各组移植心的存活情况及组织病理学改变，并对排斥反应进行分级；采用流式细胞仪检测各组受鼠体内CD3＋CD44highCD62L-记忆性T淋巴细胞表型的分布，应用体外混合淋巴细胞反应体系综合评价各组记忆性T淋巴细胞体外增殖程度。结果皮肤移植前受鼠体内CD4＋记忆性T淋巴细胞的比例为2．7％，移植后升至72．0％（P〈0．05）。移植对照组、输注对照组及实验组移植心脏的平均存活时间分别为7．33、4．83和3．5d，排斥反应评分分别为1B～2级、3A级和4级，体内CD3＋CD44highT淋巴细胞的比例分别为29％、55％和75％，CD3＋CD62L—T淋巴细胞群落中CD44荧光强度分别为215、274和380，以及MLR强度（吸光度值）分别为0．29、0．45和1．0，与两对照组相比，实验组移植心存活时间明显缩短、记忆性T淋巴细胞比例明显升高、MLR强度均明显增强及排斥反应程度更严重（P〈0．05或P〈0．01）。结论同种小鼠皮肤移植后心脏移植模型是一个更为贴近临床实际的动物模型，其同种抗原反应能力明显强于过继输注同种记忆性T淋巴细胞的小鼠心脏移植模型，有利于免疫记忆的相关研究。

记忆性CD8^+T淋巴细胞维持的细胞与分子基础

记忆性CD8+T细胞在抗病毒、抗胞内菌感染及抗肿瘤等方面发挥重要作用。其维持不需要B细胞、CD4 +T细胞及抗原的存在 ;MHC份子、IL 15、IFN I、IL 2等在维持中起重要的作用。CD8+T记忆细胞长期存在的基因机制仍不详。

记忆性CD8细胞产生、维持及CD4细胞的辅助作用

记忆性T淋巴细胞的形成及其在体内的长期维持 ,是一个复杂的多层次调控过程 ,CD4细胞及相关的细胞因子通过间接和直接作用 ,对CD8记忆细胞的形成起到重要的促进作用。CD8记忆细胞需要不同信号的刺激以保证其在体内的长期维持 。

痹痛定联合来氟米特对类风湿关节炎患者外周血记忆性CD4^+ T细胞表达CXCR4的影响

目的分析痹痛定胶囊联合来氟米特片对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血记忆性CD4^+T淋巴细胞表达CXC趋化因子受体4(CXC chemokine receptor 4,CXCR 4)的影响。方法选取2017-04/2017-09月就诊于武汉市中医院风湿疼痛科门诊及住院RA患者60例,根据患者用药情况分为治疗组、对照组、空白组,每组20例,治疗组服用痹痛定胶囊和来氟米特片,对照组服用来氟米特片,两组治疗时间为12周,空白组为初次确诊尚未给予药物的RA患者,选取同期健康体检者为正常组(n=20)。评估RA患者的临床28个关节的疾病活动度评分(disease activity score 28joints,DAS 28)并检测其红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、C反应蛋白(c-reactive protein,CRP)、抗环瓜氨酸肽抗体(antibodies against cyclic citrullinated peptide,anti-CCP)、类风湿因子(rheumatoid factor,RF)等实验室指标;分离各组清晨空腹采集的外周血单个淋巴细胞,通过流式分析仪检测RA患者外周血记忆性CD4^+T淋巴细胞表达CXCR4比例。对4组记忆性CD4^+T淋巴细胞(CD45RO+CD4^+T细胞)表达CXCR4比例及其与RA疾病活动度的关系进行比较分析。结果RA患者3个组CXCR4CD45RO+CD4^+T淋巴细胞表达水平高于正常健康组(P<0.05),治疗组、对照组较空白组的表达有所下降组间比较差异具有统计学意义(P<0.05),且治疗组与对照组下降比例比较有显著差异(P<0.05);CXCR4CD45RO+CD4^+T细胞表达与DAS28、ESR、CRP、anti-CCP均呈正相关(P<0.05),与RF无相关性(P>0.05)。结论 RA患者外周血高表达记忆性CXCR4+CD4^+T淋巴细胞,其表达与疾病活动度及炎症生化指标相关,痹痛定胶囊联合来氟米特片对RA患者表达记忆性CXCR4+CD4^+T淋巴细胞有抑制作用。