葛根素对噪声慢性应激大鼠行为学及脑内记忆相关蛋白表达的影响

目的探讨葛根素对噪声刺激下慢性应激大鼠行为学及脑内记忆相关蛋白的影响。方法生长期SD雄性大鼠32只,随机分为正常对照组、模型对照组和葛根素小、大剂量(100,200 mg·kg^(-1))组,每组8只。通过噪声连续刺激60 d建立慢性应激大鼠模型。采用糖水消耗实验、水迷宫实验观察大鼠行为学变化;使用免疫印迹法(Western blotting)和酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测脑海马组织的记忆相关蛋白香草酸受体亚型1(TRPV1)、蛋白激酶C(PKC)、磷酸化环磷腺苷效应元件结合蛋白(p-CREB)、脑源性神经营养因子(BDNF)表达变化。结果与正常对照组比较,模型对照组和葛根素给药组大鼠体质量增加较缓慢,糖水消耗量下降;水迷宫实验中,与正常对照组比较,模型对照组逃避潜伏期明显延长,在目标象限游泳总路程明显下降,TRPV1、PKC表达显著上调,p-CREB、BDNF表达显著下调(P<0.05)。葛根素小剂量组大鼠逃避潜伏期明显缩短,在目标象限游泳总路程有所上升,TRPV1、PKC表达显著下调,p-CREB、BDNF表达显著上调(P<0.05)。结论长期噪声应激影响生长期大鼠的学习记忆能力,葛根素可部分改善慢性应激大鼠的学习记忆能力,其作用机制可能与调节脑海马记忆相关蛋白表达水平有关。

益肾化浊方对阿尔茨海默病模型大鼠海马区Ca^(2+)浓度及钙相关记忆蛋白表达的影响

目的观察益肾化浊方对AD模型大鼠海马区Ca^(2+)浓度及钙相关记忆蛋白表达的影响,初步探讨益肾化浊方治疗AD的部分作用机制。方法将30只雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组和益肾化浊方组。采用右侧侧脑室注射Aβ25-35建立AD模型,造模成功后益肾化浊方组大鼠按照4.32g·kg^(-1)·d^(-1)剂量给予药液灌胃,假手术组和模型组给予等体积蒸馏水灌胃,持续4周。采用Rhod 2-AM荧光探针法和Western blot检测各组大鼠海马区突触Ca^(2+)浓度及Ca MKⅡ、NR2B、CREB、BDNF和Trk B蛋白的表达。结果 (1)Rhod 2-AM荧光探针法检测结果显示:与假手术组比较,模型组大鼠钙离子浓度显著升高(P<0.01);与模型组相比,益肾化浊方组钙离子浓度显著减低(P<0.01),差异具有统计学意义。(2)Western blot检测结果显示:与假手术组比较,模型组大鼠海马区NR2B、Ca MKⅡ、CREB、BDNF和Trk B蛋白的表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,益肾化浊方组NR2B、Ca MKⅡ、CREB、BDNF和Trk B蛋白显著升高(P<0.01),差异具有统计学意义。结论益肾化浊方治疗AD的作用机制可能与调节海马突触体内Ca^(2+)浓度,减轻Aβ诱发的神经毒性;同时增加钙相关记忆蛋白的表达有关。

熟地黄有效成分5-HMF对皮质酮损伤型海马神经元GCR、BDNF、SGK表达的影响

目的:观察熟地黄中有效成分5-羟甲基糠醛(5-HMF)对高浓度皮质酮(CORT)致海马神经元损伤及学习记忆相关蛋白学习记忆相关蛋白(GCR)、脑源性神经营养因子(BDNF)、血清和糖皮质激素调节蛋白激酶(SGK)蛋白表达的影响。方法:用24h新生大鼠原代培养海马神经细胞。第8天细胞用药处理,将细胞分为3组:正常对照组、模型组及5-HMF组。24h后,通过MTT法测定细胞活性,生化方法检测衰老特异性指标β-半乳糖苷酶活性,Western Blot检测学习记忆相关蛋白GCR、BDNF、SGK的基因表达。结果:与正常组相比,模型组细胞活力显著下降,β-半乳糖苷酶活性显著升高,GCR、BDNF、SGK蛋白表达显著性降低;0.5mg/L的5-HMF明显提高细胞活力,降低β-半乳糖苷酶活性,提高模型细胞GCR、BDNF、SGK基因表达(P<0.05,P<0.01)。结论:0.5mg/L 5-HMF可以保护大鼠海马神经细胞免遭高浓度皮质酮的损伤,通过调节GCR、BDNF、SGK的基因表达,可能在延缓学习记忆功能退化中发挥作用。