许氏平鲉幼鱼对人工鱼礁模型不同阴影情况的行为响应

阴影效应是影响人工鱼礁诱集效果的主要因素之一,为研究许氏平鲉(Sebastes schlegelii)对人工鱼礁不同阴影情况的行为响应,采用室内模拟实验方法,在实验水槽顶部固定光源,共设计3组实验:A组实验探究不同阴影面积的鱼礁模型对实验鱼的诱集效果;B组实验探究不放置鱼礁模型、悬挂不同开孔率顶板对实验鱼的诱集效果;C组实验探究阴影面积相同但开孔数量不同的鱼礁模型对实验鱼的诱集效果;对照组实验水槽中不放置鱼礁模型、不悬挂顶板。观察并记录许氏平鲉幼鱼(体长(5.06±0.09)cm,体质量(3.22±0.16)g)在水槽中的行为与分布特征。研究表明:3个实验组中许氏平鲉在鱼礁放置区域的出现率均显著高于对照组和其他区域;A组实验中,许氏平鲉在鱼礁放置区的平均出现率随着鱼礁阴影面积的增大而上升;B组实验中,许氏平鲉在顶板放置区的平均出现率显著高于对照组,但不同水平组之间差异不显著;C组实验中,开孔数为1时许氏平鲉在鱼礁放置区的平均出现率与开孔数为9时相近且高于开孔数为4和6时。研究结果表明,阴影面积越大的人工鱼礁对许氏平鲉的诱集效果越好,阴影面积相同时开孔数较多的人工鱼礁能够在提供良好庇护所的同时保证诱集效果。

斑石鲷(Oplegnathus punctatus)、云龙石斑鱼(Epinephelus moara♀×E.lanceolatus♂)、许氏平鮋(Sebastes schlegelii)游泳行为对比分析研究

水流是影响鱼类生存和繁衍的重要的环境因子之一,通过比较分析三种深远海适养鱼类斑石鲷(Oplegnathus punctatus)、云龙石斑鱼(Epinephelus moara♀×E.lanceolatus♂)和许氏平鮋(Sebastes schlegelii)的游泳行为变化规律,以期为深远海养殖科学放养和大型养殖设施精准选址提供理论依据和技术支撑。以同一规格[(250.00±14.00)g]的三种适养鱼类为研究对象,利用鱼类游泳行为检测装置,在(24.00±1.08)℃条件下,观察分析三种鱼类的摆尾频率(TBF)、摆尾幅度(TBA)、运动步长(SL)和摆尾时间百分比。结果发现,许氏平鮋的TBF最大,SL最小;云龙石斑鱼的TBA最小;斑石鲷的摆尾时间百分比最大;且三种鱼类的TBF和SL在1~5 BL/s流速下均存在显著性差异(P<0.05),1、3和5 BL/s流速下摆尾时间百分比和2~4 BL/s流速TBA存在显著性差异(P<0.05)。三种鱼类的TBF、TBA和SL同流速均呈显著的线性正相关关系(P<0.05),摆尾时间百分比均随着流速增加先升高再降低。斑石鲷和云龙石斑鱼在1~4 BL/s流速下的TBF、TBA、SL之间均存在显著相关性(P<0.05),许氏平鮋在3~4 BL/s流速下三种指标存在显著相关性(P<0.05);但三种鱼类的摆尾时间百分比与其他指标之间均没有显著的相关性。以上结果表明,三种鱼类伴随着流速增加,其游泳行为指标皆呈现显著规律性变化,许氏平鮋TBF、TBA和SL之间只在高流速呈现显著相关性,预示相较于斑石鲷和云龙石斑鱼,其采取了不同于其他两种鱼类的游泳行为策略来应对低流速的水流环境。

MS-222对许氏平鲉幼鱼麻醉效果的研究

本研究测试了不同浓度MS-222对许氏平鲉(Sebastes schlegelii)幼鱼的麻醉效果,确定了3种规格幼鱼在不同浓度MS-222作用下达到深度镇静期(A2)和麻醉期(A4)的效应时间及最佳镇静、麻醉浓度和适宜运输浓度。结果显示,在水温为(14.5±0.5)℃、pH为7.85、盐度为30、溶解氧浓度大于7.5 mg/L条件下,平均体质量为(10.11±2.13) g (W10)、(42.38±5.19) g (W40)和(80.79±6.65) g(W80)的3种规格幼鱼达到A2期和A4期的效应时间随麻醉剂浓度升高逐渐缩短,同一麻醉浓度下效应时间随体质量增加逐渐延长,通过二次曲线回归分析各规格幼鱼达A2期和A4期的效应时间与MS-222浓度的关系,效应时间为180s时,W10、W40和W80组达A2期对应的MS-222浓度分别为27.38、29.94和40.39 mg/L,达A4期对应的MS-222浓度分别为95.32、107.32和116.58 mg/L;A2期不同规格幼鱼的呼吸频率与对照组无显著差异,A4期幼鱼呼吸频率随麻醉剂浓度升高逐渐下降,且显著低于对照组(P<0.05);MS-222浓度为30~50mg/L时,8h模拟运输中W10、W40和W80幼鱼存活率均为100%,显著高于对照组,60mg/L时,幼鱼运输存活率分别为60%、80%和100%,W10、W40和W80适宜运输浓度范围建议为27.38~50.00、29.94~50.00、40.39~60.00 mg/L。相关结果可为许氏平鲉不同规格幼鱼的安全转运、生物学实验的抗应激操作提供指导。

许氏平鲉Myomaker通过调控成肌细胞融合促进肌肉肥大生长的调控机制

为探究Myomaker在硬骨鱼肌肉生长过程中调控作用,本研究以肌肉具有无限生长能力的许氏平鲉(Sebastes schlegelii)为研究对象,证明Myomaker在其肌肉生长过程中发挥重要作用。许氏平鲉myomaker基因全长5386 bp,编码序列长870 bp,编码289个氨基酸。胚胎整体原位杂交实验结果表明,myomaker的表达始于体节期,信号主要集中在体节位置,而在孵化前期和仔鱼期信号主要集中在头部和躯干前部。用myomaker过表达质粒投喂仔鱼30 d后,myomaker表达量显著升高,且过表达组小面积肌纤维(500~1000μm^(2))数目显著少于对照组,而大面积肌纤维(>1000μm^(2))数目显著多于对照组。之后停止投喂myomaker过表达质粒,继续培养90 d,过表达组大面积肌纤维(>5000μm^(2))占比仍大于对照组,这说明Myomaker在促进许氏平鲉肌肉肥大生长方面发挥了重要作用。此外,体外细胞实验证明许氏平鲉Myomaker可以促进小鼠C2C12成肌细胞发生融合,这说明Myomaker促进许氏平鲉肌纤维面积增大可能是通过调控成肌细胞融合实现的。本研究结果丰富了Myomaker调控非模式动物肌肉生长发育的资料,为进一步加深对大体型硬骨鱼类肌肉无限生长调控分子机理的理解奠定了基础。

许氏平鲉(Sebastes schlegelii)TRAF基因的鉴定及其响应杀鱼爱德华氏菌侵染的表达模式研究

TRAF是机体内一种具有信息传导作用的胞内因子,承担多个受体家族的信号转导工作,在固有免疫以及获得性免疫方面都发挥出重要作用。TRAF作为一类胞内接头蛋白,对多条信号途径的活化具有一定的影响,包括细胞的增殖、生存、凋亡、炎症反应、免疫反应等。目前已有研究表明鱼类中的TRAF基因也发挥重要的免疫防疫作用。以许氏平鲉为研究对象,基于基因组和转录组的数据库,进行了许氏平鲉TRAF基因家族的系统鉴定。在许氏平鲉中共鉴定到9个TRAF基因,并对这些TRAF基因的长度和氨基酸个数进行了统计分析。同时,分析了这9个TRAF基因的结构特征。选取了包括许氏平鲉在内的6种鱼类进行了TRAF基因的共线性分析。结果显示,TRAF基因在硬骨鱼类中具有保守的共线性。通过系统发育分析,更好地解析了TRAF家族基因的进化关系,同时也证明了对其鉴定及命名的准确性。此外,还进行了TRAF家族基因的蛋白质相互作用网络预测以及表达模式分析。通过蛋白质相互作用的网络分析,得到TRAF基因与其互作蛋白的关联状况。在杀鱼爱德华氏菌侵染许氏平鲉后的不同时间点,探究TRAF基因在杀鱼爱德华氏菌刺激下的表达模式。定量结果显示,除TRAF4.1外,其他TRAF基因在感染后均存在不同程度的上调。综上所述,从分子水平上揭示了许氏平鲉TRAF家族基因的结构和功能,揭示了TRAF可能依赖的免疫通路,为进一步探究TRAF家族基因在许氏平鲉先天免疫过程中的作用奠定了基础。

卵胎生硬骨鱼许氏平鲉繁殖生物学研究进展

卵胎生作为卵生向胎生进化的中间状态,具有子代成活率高的特性。因此,卵胎生许氏平鲉成为我国重要的北方海水养殖对象之一。然而,大量养殖该物种又带来了一些繁殖过程中的实际问题。比如,网箱养殖的亲鱼出现明显的交配失败,导致其子代出生率极低;妊娠期亲鱼母胎器官发育障碍,导致仔鱼胎死腹中;早产、难产导致的亲鱼、仔鱼大量死亡等。本综述将针对上述问题,分别探讨许氏平鲉交配发生、妊娠维持及分娩启动相关的内分泌调控机制,以期为后续研究提供潜在思路,最终实现水产养殖问题的解决。

植物乳杆菌LP-37和氟苯尼考对许氏平鲉(Sebastes schlegelii)肠道形态、消化酶及免疫酶活性的影响

为分析植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)LP-37和氟苯尼考对许氏平鲉(Sebastes schlegelii)肠道形态的影响,在水温(14±1)℃条件下,将体质量为(32.23±9.38)g的许氏平鲉饲养在约5 m^(3)的循环水圆桶中45 d,分别投喂4种饲料:喷洒去离子水的基础饲料(对照组C0);前30 d投喂喷洒1×10^(7)CFU/g植物乳杆菌的饲料,后15 d投喂对照饲料(植物乳杆菌组,P1);前30 d投喂喷洒20 mg/L氟苯尼考的饲料,后15 d投喂对照饲料(氟苯尼考组,F1);前15 d投喂喷洒氟苯尼考的饲料,中间15 d投喂喷洒植物乳杆菌的饲料,最后15 d投喂对照饲料(植物乳杆菌和氟苯尼考组,G1)。在第30 d和第45 d解剖许氏平鲉的肠道,通过HE染色和Image J软件分析肠道形态结构的变化,并测定血清中α-淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶、碱性磷酸酶和超氧化物歧化酶活性的变化。结果显示,1×10^(7)CFU/g植物乳杆菌和20 mg/L的氟苯尼考可以改善肠道结构,显著提高肠道绒毛长度、肌层厚度、隐窝深度(P<0.05);1×10^(7)CFU/g植物乳杆菌LP-37可以显著提高许氏平鲉血清中α-淀粉酶、碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶活性(P<0.05);20 mg/L的氟苯尼考可以显著提高许氏平鲉血清α-淀粉酶、胰蛋白酶活性、碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶的活性,显著降低脂肪酶活性(P<0.05);组合使用1×10^(7)CFU/g植物乳杆菌LP-37和20 mg/L氟苯尼考可以显著提高许氏平鲉血清α-淀粉酶、超氧化物歧化酶的活性(P<0.05),显著降低脂肪酶、胰蛋白酶的活性(P<0.05)。综上所述,植物乳杆菌LP-37和氟苯尼考均可以改善许氏平鲉肠道结构,调节许氏平鲉消化酶和免疫酶的活性。

基于变流速游泳训练的许氏平鲉幼鱼野化训练

为提升许氏平鲉鱼类资源,探究游泳训练对其生长的影响,以该物种为试验对象,开展了不同运动强度的游泳野化训练。以运动强度0为对照,设置4种运动强度,分别为50%、75%、125%和150%,训练30 d后测定其生长性能和生化指标,其中生长性能包括成活率、增重率、脏体比、肥满度和特定生长率;生化指标包括碱性磷酸酶(AKP)、过氧化氢酶(CAT)、谷草转氨酶(GOT)和溶菌酶(LMZ)活性及总氨基酸含量。生长性能结果显示,运动强度对幼鱼的成活率影响不大;与对照相比,不同运动强度明显提升了幼鱼的增重率、肥满度和特定生长率,降低了幼鱼的脏体比(P<0.05)。生化指标结果表明,与对照相比,50%运动强度明显增强了AKP、GOT和LMZ的活性,提高了总氨基酸含量(P<0.05);75%运动强度明显增强了AKP、CAT和LMZ的活性,提高了总氨基酸含量(P<0.05);125%和150%运动强度明显抑制了AKP和CAT的活性,增强了GOT和LMZ的活性,降低了总氨基酸含量(P<0.05)。综合以上结果表明,适度的游泳运动训练可以提高许氏平鲉幼鱼的生长性能和生化指标,改善肌肉品质,提高抗氧化和调节能力,促进幼鱼健康生长,以75%运动强度表现效果最佳。

流速对许氏平鲉群体行为和生理机能的影响

为探究许氏平鲉幼鱼在不同流速条件下的群体行为及生理响应机制,在恒流(0、0.2、0.4、0.6和0.8 Ucrit)条件下对许氏平鲉幼鱼群体行为及生理变化进行研究。结果表明,在0.2 Ucrit流速条件下,许氏平鲉幼鱼群体凝聚力较强,群体整体协调性较强;流速到达0.6、0.8 Ucrit时,许氏平鲉幼鱼以维持游泳为主,个体不断调节在群体中的位置,群体凝聚力和协调性较差,抗氧化能力及非特异性免疫能力较弱。研究结果为许氏平鲉资源增殖过程中的群体行为的有效管理提供参考,为提高海洋牧场建设的经济效益提供参考。

大长山岛海域许氏平鲉生长特征和资源动态分析

为了解黄海北部大长山岛海域许氏平鲉(Sebastes schlegelii)的资源动态,确定资源可持续利用策略,根据2011—2019年大长山岛海域现场调查数据,分析了许氏平鲉体长与体质量的关系,建立了体长生长和体质量生长方程,评估了大长山海域该种类的资源量,模拟分析了不同管理策略下许氏平鲉的单位补充量怀卵量(Egg Production per Recruitment,EPR)与单位补充量产卵亲体生物量(Spawning Biomass per Recruitment,SBR)的变化。结果表明:大长山岛海域许氏平鲉的体长体质量关系式为W=4×10^(-5)L 2.9344(R^(2)=0.9189),渐进体长L_(∞)=425 mm,渐进体质量W_(∞)=2064.5 g,生长参数K=0.23 a^(-1),t_(0)=-0.58 a,体质量生长的拐点年龄为4.1 a;资源群体的总死亡系数、自然死亡系数和捕捞死亡系数分别为1.34、0.2089和1.3111 a^(-1),临界年龄为5.7 a,资源生物量为1084.68 t;休渔期设为3—5月较合理,此时EPR值将恢复到67.54%、SBR值为85.35%。研究表明,大长山岛海域许氏平鲉资源处于过度捕捞状态,群体低龄化明显,产卵亲体的产卵量严重不足,亟需进行科学管理。

植物乳杆菌对许氏平鲉生长、免疫功能、消化能力及肠道菌群结构的影响

【目的】分析植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum,LP37)对许氏平鲉(Sebastes schlegelii)生长、免疫功能、消化能力及肠道菌群结构的影响。【方法】实验选取初始体质量为(32.23±9.38)g的许氏平鲉1200尾,随机分为4组,记为对照组、LP37实验组、FF实验组、FF-LP37实验组,实验周期为45 d;其中对照组投喂基础饲料,LP37实验组在基础饲料中添加107 CFU/g LP37,FF实验组添加20 mg/kg氟苯尼考(Florfenicol,FF),FF-LP37实验组于1~15 d添加20 mg/kg FF,16~30 d添加107 CFU/g LP37;实验30 d采集各组鱼血清、肝脏、肠道内容物,分析生长性能、消化酶活性、免疫功能、肠道菌群结构。【结果】(1)与对照组比较,各实验组许氏平鲉增重率和特定生长率均显著提高(P<0.05),FF-LP37实验组效果最好;各实验组血清蛋白酶(PPS)和α-淀粉酶(AMS)活性均显著提高(P<0.05),而脂肪酶(LPS)活性下降;肠道内容物中PPS活性升高,且LP37实验组和FF-LP37实验组差异显著(P<0.05),AMS活性升高,仅LP37实验组差异显著(P<0.05)。(2)与对照组比较,LP37实验组血清和肝脏中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性均显著降低(P<0.05),碱性磷酸酶(AKP)和超氧化物歧化酶(SOD)活性升高且微量丙二醛(MDA)含量降低(P<0.05);FF实验组AST活性降低但ALT活性升高,AKP和SOD活性无显著差异(P>0.05),而MDA含量增加(P<0.05);FF-LP37实验组ALT和AST活性均显著降低(P<0.05),SOD活性升高(P<0.05)且MDA含量无显著差异(P>0.05)。(3)微生物高通量测序结果显示,与对照组比较,FF-LP37实验组肠道菌群多样性、丰富度和OTU数量最高,FF实验组肠道菌群敏感性升高;LP37实验组变形菌门、厚壁菌门、拟杆菌门相对丰度增多,乳杆菌属、乳球菌属相对丰度显著增加;FF实验组厚壁菌门相对丰度增多,但乳杆菌属相对丰度降低;FF-LP37实验组变形菌门相对丰度增加,但乳杆菌属相对丰度增加;各实验组假单胞菌属和弧菌属相对丰度均呈现降低现象;这些均与Bugbase预测分析结果相呼应。(4)功能预测分析表明,LP37和FF对许氏平鲉肠道菌群功能未产生显著影响,菌群功能集中表现在代谢方面。【结论】LP37对许氏平鲉养殖具有益生作用,LP37可发挥正向调控促进鱼体健康。

许氏平鲉蛋白激酶B(SsAkt)基因的克隆及其mRNA在细菌胁迫后的表达规律

为研究蛋白激酶B(Akt)在许氏平鲉(Sebastes schlegelii)应答细菌胁迫过程中的作用,本研究应用PCR技术对许氏平鲉Akt基因(SsAkt)的编码区序列进行了克隆和特征分析,并应用实时荧光定量PCR技术检测了健康许氏平鲉各组织和细菌胁迫后肾脏、血液和肝脏中SsAktm RNA的表达规律。结果显示,SsAkt的开放阅读框(ORF)的长度为1440 bp,编码479个氨基酸,预测其蛋白的相对分子质量为55.80 k Da,理论等电点(p I)为5.64。SMART分析显示,Ss Akt蛋白含有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族的3个特征性保守结构域和2个磷酸化位点。同源比对发现,Ss Akt与鱼类的同源性较高,与尖嘴鲈(Lates calcarifer)的相似度最高,为99.37%。组织表达分析显示,SsAkt在许氏平鲉健康组织(血液、鳃、肝脏、肌肉、肾脏、脾脏、肠、脑和心脏)中均有表达,在肾脏、脑和血液中的相对表达量较高。许氏平鲉响应细菌胁迫的表达结果显示,藤黄微球菌(Micrococcus luteus)感染后,SsAkt在3种组织中的表达明显上调,呈先上升后下降的趋势;鳗弧菌(Vibrio anguillarum)感染后,SsAkt在3种组织中呈现不同的表达趋势:在肾脏中,SsAkt的表达趋势为先上升后下降又上升再下降,而在血液和肝脏中的表达趋势为先上升后下降。以上研究表明,SsAkt响应了外源微生物对许氏平鲉的胁迫,在抵御外源微生物免疫应答过程中发挥重要作用。本研究结果为许氏平鲉的免疫机理研究奠定了基础。

许氏平鲉5-HT1A基因单核苷酸多态性与攻击行为表型相关性研究

以许氏平鲉(Sebastes schlegelii)幼鱼为研究对象,旨在探究5-HT1A受体基因在攻击行为调控中的作用。首先,通过注射8-OH-DPAT(特异性5-HT1A受体激动剂)对许氏平鲉幼鱼的攻击行为进行了分析,评估了受体对幼鱼攻击行为的影响;其次,对不同攻击表型的许氏平鲉幼鱼进行了5-HT1A受体基因的多态性位点筛选,以期获得与许氏平鲉攻击行为显著相关的潜在SNP标记。结果显示:(1)8-OH-DPAT处理组幼鱼攻击行为的频率和时间显著低于对照组(P<0.05),但攻击潜伏期显著高于对照组(P<0.05);(2)在5-HT1Aα启动子区域中发现了7个与攻击表型差异显著相关的多态性位点(P<0.05),分别为SNP 1236、SNP 1245、SNP 1260、SNP1301、SNP 1302、SNP 1309和SNP 1330位点;在5-HT1Aβ启动子区域中发现了2个与攻击表型差异显著相关的多态性位点(P<0.05),分别为SNP 892和SNP 1147位点,但在5-HT1A基因CDS编码区并未发现与攻击差异表型显著相关的多态性位点(P>0.05)。综上所述,研究结果证明了5-HT1A受体的激活能够显著抑制许氏平鲉的攻击行为,筛选了与攻击性差异个体相关的5-HT1A受体基因SNP位点。

不同添加剂对越冬后许氏平鲉生长、抗氧化及免疫性能的影响

【目的】探究饲料中添加复合益生菌、抗菌肽、植物多酚对越冬后许氏平鲉(Sebastes schlegelii)生长、抗氧化、非特异性免疫性能、血清生化指标的影响及炎症反应的快速恢复作用。【方法】设计4组等氮等能的实验饲料,以普通饲料为对照组,对照组外裹复合益生菌为复合益生菌组,对照组配方中分别添加质量分数0.5%抗菌肽和0.05%植物多酚为抗菌肽组和植物多酚组。挑选144尾初始体质量为(249.13±0.58)g的许氏平鲉,随机分为4组,每组3个重复,每个重复12尾鱼,进行21 d的养殖实验。【结果】各组许氏平鲉中,抗菌肽组、植物多酚组增重率显著高于对照组、复合益生菌组(P<0.05);抗菌肽组血清总抗氧化能力显著高于对照组、复合益生菌组(P<0.05),各组丙二醛含量显著低于对照组(P<0.05);植物多酚组溶菌酶活性显著高于对照组、复合益生菌组(P<0.05);抗菌肽组、植物多酚组免疫球蛋白M显著高于复合益生菌组(P<0.05);植物多酚组超氧化物歧化酶活性、补体3、总蛋白、白蛋白显著高于其他组(P<0.05);植物多酚组白介素15(IL-15)mRNA表达量及抗菌肽组、植物多酚组Toll样受体8(TLR8)mRNA表达量显著下调(P<0.05),抗菌肽组IL-12b mRNA表达量显著上调(P<0.05);各组间存活率、酸性磷酸酶活性、谷丙转氨酶活性、谷草转氨酶活性及IL-1β表达量差异均不显著(P>0.05)。【结论】本实验条件下,相比较对照组饲料,植物多酚和抗菌肽能显著提高越冬后许氏平鲉生长及非特异性免疫性能,调节炎症因子和抗炎因子基因表达,复合益生菌则效果不明显。

精氨酸对许氏平鲉豆粕型肠炎的修复作用研究

为研究精氨酸(Arg)对患有豆粕型肠炎(SBMIE)的许氏平鲉(Sebastes schlegelii)生长性能、Arg代谢、肠道组织结构、抗氧化性能、肠道紧密连接蛋白基因(occludin、clnd15和zo-1)及炎症因子基因(il-1β、il-8、il-15和tlr8)和抗炎因子基因(il-12b)表达量的影响,以(54.97±0.12)g已诱导出SBMIE的许氏平鲉为研究对象,基础配方中添加30%豆粕,以Arg 0添加为对照组(D0),添加1%、2%和3%Arg为处理组(D1、D2和D3),配制4组等氮等能的实验饲料,每组3个重复,每个重复40尾鱼,进行为期6周的养殖实验。结果显示,D2和D3组实验鱼增重率显著升高(P<0.05),各处理组肝体比和脏体比均显著低于D0组,肥满度显著高于D0组(P<0.05);处理组血清二胺氧化酶(DAO)、诱导型一氧化氮合成酶(i NOS)活性及一氧化氮(NO)含量显著降低(P<0.05),D2和D3组总一氧化氮合成酶(T-NOS)活性显著降低(P<0.05);Arg显著提高了实验鱼肠道皱襞高度(P<0.05);处理组肠道总抗氧化能力显著升高,并以D2组最高(P<0.05),D2和D3组丙二醛含量显著降低(P<0.05);相比较D0组,各处理组occludinm RNA相对表达量显著上调,D2组clnd15和D1组zo-1 mRNA相对表达量显著上调(P<0.05);处理组肠道il-1β、il-15和tlr8 mRNA相对表达量显著下调,il-12bm RNA相对表达量显著上调(P<0.05)。综上所述,在本实验条件下,高豆粕饲料中添加Arg能显著提高SBMIE-许氏平鲉的生长性能和抗氧化性能,改善Arg代谢和肠道组织结构,上调肠道紧密连接蛋白和抗炎因子基因相对表达量,下调炎症因子基因相对表达量。Arg(2%最佳)对许氏平鲉SBMIE具有修复作用。本研究为Arg修复SBMIE的机制提供了理论依据。

玉米蛋白粉的发酵及其在许氏平鲉饲料中的应用研究

玉米蛋白粉是玉米加工行业的副产物,是一种高能量和高蛋白的饲料原料。为了将玉米蛋白做成水产动物的饲料,对玉米蛋白粉进行了固态发酵研究并应用于海洋鱼类许氏平鲉的饲喂。研究表明,采用市售的菌酶协同饲料发酵剂,在料液比1∶0.7,发酵剂添加量0.7%,发酵温度35℃,物料初始pH值为6.5的条件下,恒温发酵72 h后,玉米蛋白粉中的粗蛋白含量提高至76%,相比于原始蛋白含量(58%)提高了29.6%,而且可溶性蛋白和多肽的比例增加,能够提高其在动物肠道中的消化率。结果表明,用发酵玉米蛋白饲喂海洋鱼类许氏平鲉,其替代鱼粉的最大占比达到25%,在此范围内对幼鱼的生长性能,如增重率、饲料系数和肥满度等,没有发生显著影响。研究为玉米蛋白粉在水产饲料中的可利用性及其高值化利用提供了新途径。

盐度驯化对许氏平鲉钠钾ATP酶活性及鳃中AQP3基因表达量的影响

为探究盐度驯化对许氏平鲉钠钾ATP酶(NKA)活性及鳃中AQP3基因表达量的影响,将140尾该鱼分为急性盐度驯化和慢性盐度驯化两部分试验。急性盐度驯化将其放入盐度为32‰、27‰、24‰、21‰、18‰、15‰、12‰和9‰的试验组中进行盐度胁迫,取鳃、肠及肾组织样测定NKA活性;慢性盐度驯化将其放入盐度为32‰、25‰、20‰、15‰、10‰和5‰的试验组中进行盐度胁迫,取鳃组织样测定AQP3的表达量。急性盐度驯化结果表明,除对照组外,鳃中NKA活性均明显高于肠和肾中NKA的活性(P<0.05),各个盐度组中肠和肾中NKA的活性差异无统计学意义(P>0.05)。慢性盐度驯化结果显示,在盐度胁迫达到4 h时,AQP3的表达量在25‰和20‰组出现峰值,随着盐度下降,表达量也随之下降;96 h时25‰组AQP3表达量逐渐恢复,而20‰组表达量仍为峰值,而后随盐度下降逐渐下降。综上,许氏平鲉可通过NKA和AQP3调节机体的渗透压平衡。

许氏平鲉低氧耐受能力及血液学和鳃组织学变化

为探明许氏平鲉低氧耐受能力及低氧胁迫过程中其血液生理生化指标和鳃组织形态结构变化,本研究分析了许氏平鲉临界氧分压(Pcrit)和失去平衡点(LOE)时溶解氧含量,观察了低氧胁迫和恢复溶解氧过程中呼吸行为和呼吸频率的变化,分析了血液生理[红细胞数目(RBC),白细胞数目(WBC),血红蛋白(Hb),红细胞积压(HCT)]、生化[葡萄糖、皮质醇]指标以及鳃组织形态学和鳃组织气体交换率(PAGE)变化。结果显示,在温度18℃、盐度30,pH值7.85的条件下,许氏平鲉[(88.01±5.34)g]Pcrit和LOE溶解氧含量分别为(3.96±0.11)和(2.60±0.21)mg/L。随着水体中溶解氧含量下降,血浆皮质醇和葡萄糖分别在LOE和Pcrit达到最高。许氏平鲉血液RBC、Hb和HCT在LOE达到最高。低氧过程中,许氏平鲉呼吸频率和PAGE分别于Pcrit和LOE达到最高,且低氧导致许氏平鲉鳃小片长度(SLL)、间距(ID)、周长显著增加;鳃小片宽度(SLW)则随水中溶解氧含量下降而变窄,在LOE处达到最小值。许氏平鲉鳃小片末端膨大、基质肥大、增生比例在低氧过程中显著增加。恢复正常溶解氧24 h后,上述各项检测指标恢复正常,与对照组无显著差异。实验中对照组各项指标无显著变化。研究表明,许氏平鲉对水体低溶解氧变化反应敏感,低氧应激导致其血液生理生化相关指标和鳃小片形态发生显著改变,恢复正常溶解氧24 h后可以显著缓解低氧胁迫应激。相关结果为研究许氏平鲉低氧耐受生理调控机制和高效健康养殖提供了理论依据和技术支撑。

绿鳍马面鲀与许氏平鲉杀鲑气单胞菌病原的分离和鉴定

2018年和2019年,山东省烟台市蓬莱市一养殖场工厂化养殖的绿鳍马面鲀(Thamnaconus septentrionalis)和许氏平鲉(Sebastes schlegeli)发病死亡,主要症状为嘴部溃疡、红肿和出血。从发病鱼内脏中均可分离到大量形态一致的优势菌,分别命名为2018TS-1和2019SS-1,分离菌株经16S rRNA测序、生理生化鉴定和vap A基因分析确定为杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种(Aeromonas salmonicida subsp. masoucida)。人工感染结果显示,2018TS-1和2019SS-1分别能引起绿鳍马面鲀和许氏平鲉的死亡,被感染鱼呈嘴部红肿症状,与自然发病症状一致,其半数致死量分别为1.78×10^(5)和0.89×10^(5) CFU/尾。本研究首次报道了国内工厂化养殖绿鳍马面鲀和许氏平鲉感染杀鲑气单胞菌的病例,是目前人工养殖绿鳍马面鲀的首个疾病报道,也是继大西洋鲑(Salmo salar)、大菱鲆(Scophthalmus maximus)和裸盖鱼(Anoplopoma fimbria)等品种后,在山东省海水养殖鱼类中再次发现杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种的感染。本研究结果丰富了杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种的感染宿主范围,也为绿鳍马面鲀和许氏平鲉养殖的病害防控提供依据。

金属编码标签对许氏平鲉放流苗种的标记效果

利用金属编码标签(coded wire tag, CWT)对不同规格许氏平鲉(Sebastes schlegelii)放流苗种的不同部位(鳃部鄂弓提肌和背部肌肉)进行了标记实验,从标记苗种成活率、标签保持率、标记后苗种抗氧化酶活性及生长应激相关基因表达等方面评价了CWT的标记效果。结果显示,CWT标记30 d后,不同规格苗种成活率均为100%,小规格苗种鄂弓提肌标记组(SLM组)的实验鱼标签保持率为87%,大规格苗种鄂弓提肌标记组(LLM组)的实验鱼标签保持率为97%,苗种背部肌肉标记的标签保持率均为100%。CWT标记实验鱼特定生长率低于对照组。标记鱼暂养后,SLM组和大规格背部肌肉标记组(LDM)实验鱼肝脏过氧化氢酶(CAT)活性显著高于对照组,所有组实验鱼肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活性均显著高于对照组。除SDM组外,其他实验组肝脏中IGF-1m RNA表达水平显著高于对照组,LDM组肝脏HSP70 m RNA表达水平最低。从存活率与标签保持率的角度考虑,CWT适宜于许氏平鲉苗种的标记放流,但CWT标记的苗种生长慢于对照组,且在免疫相关酶活性和生长及应激基因方面存在显著的表达差异,表明CWT标记操作对许氏平鲉苗种造成了一定的生理胁迫。因此,利用CWT标记的许氏平鲉苗种应有一个相对较长的室内暂养或野性驯化时间,有利于提高标记放流苗种成活率和放流后生长及回捕。