浅谈用于广东蔬菜有机磷农药残留检测的几种生物识别酶

针对广东省蔬菜农药施用的特点,对几种可用于有机磷类农药检测的酶进行阐述,对几种酶抑制效果及应用前途进行比较分析,指出了各种酶抑制法检测手段的利弊。

基于核衣壳蛋白的欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒双重识别酶联免疫吸附早期检测方法的建立

精确并快速地检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染对猪场至关重要。提高改善防控程序,如检测引入后备母猪、监测血清阴性猪群等,需要更加快速、敏感的检测方法。标准的血清学检测技术主要检测IgG抗体,本研究建立一种双重识别酶联免疫吸附试验(DR-ELISA)方法用于检测针对欧洲型PRRSV的特异性抗体。这种新检测方法能同时检测到PRRSV的IgM和IgG抗体,对识别猪群早期感染及因只能检测到IgG抗体的常规试验方法而造成的漏检有所帮助。DR-ELISA的基础是抗体对抗原的双重识别。本研究以PRRSV重组的核衣壳蛋白(N蛋白)作为包被和酶联抗原。为评估该方法在检测PRRSV早期感染的敏感性,连续采集并检测69头感染PRRSV猪的血清。标准检测方法的试验结果表明,其对感染后14d血清的检测敏感性很低,而DR-ELISA在感染7d可检测到阳性血清率可达88.4%,表明DR-ELISA方法在检测感染早期有很强的敏感性。为评估新检测方法的效力,进一步的研究结果表明,DR-ELISA检测欧洲型PRRSV早期感染敏感并精确。

浅谈用于广东蔬菜有机磷农药残留检测的几种生物识别酶

本研究针对广东省蔬菜农药施用的特点,对几种可用于有机磷类农药检测的酶进行阐述,对几种酶抑制效果及应用前途进行比较分析,指出了各种酶抑制法检测手段的利弊。

荧光标记-酶识别-高效液相色谱法测定婴儿配方乳粉中反式低聚半乳糖

目的建立荧光标记-酶识别-液相色谱法的婴儿配方乳粉中反式低聚半乳糖(transgalactooligosaccharides,TGOS)的测定方法。方法利用还原氨化反应将奶粉中的TGOS进行荧光标记,利用β-半乳糖苷酶专一性水解TGOS的特性识别样品中的荧光标记TGOS,采用高效液相色谱-荧光检测器进行分离检测,通过分析β半乳糖苷酶处理与非酶解处理组样品色谱图中各相同聚合度TGOS保留时间区间的峰面积差异,计算TGOS含量,并用液相质谱联用法进行了验证。结果在本研究色谱条件下,乳糖和另外3种低聚半乳二糖实现了分离,通过质谱验证表明,低聚麦芽糖(DP2～DP6)与各聚合度TGOS呈现规律性出峰顺序。昆布三糖和实验中各聚合度TGOS的摩尔灵敏度无显著差异(P>0.05)。在0.032～0.321μmol添加范围内,荧光标记昆布三糖摩尔量和色谱峰面积呈现出良好的线性关系(r=0.9992)。以已知含量的TGOS糖浆做加标实验,回收率为90.0%～99.1%,满足实验要求。结论该方法能实现高乳糖含量样品中乳糖和TGOS的色谱分离,适用于高乳糖含量样品中TGOS的定性定量检测。

m^(6)A甲基化修饰在肿瘤耐药中的作用机制研究进展

N^(6)-甲基腺嘌呤(m^(6)A)甲基化是哺乳动物体内最常见、规模最大的一类RNA修饰过程,属于表观遗传学修饰之一,在甲基化酶、去甲基化酶、识别酶等调控下参与RNA转录、核输出、翻译和微RNA的加工处理等,因此m^(6)A甲基化修饰可调控基因的表达。肿瘤耐药性是肿瘤临床治疗的主要障碍,在细胞癌变过程中,m^(6)A甲基化修饰可通过调控基因的表达、激活或抑制信号转导通路等引发相应信使RNA翻译改变,促进肿瘤进展,导致再次使用靶向药物时产生耐药性。因此,深入研究m^(6)A甲基化修饰在肿瘤耐药中的作用机制,可以为肿瘤的治疗提供新思路。

基于共现流增强双向金字塔卷积网络的密集液滴识别

基于深度学习的数字聚合酶链式反应(PCR)液滴识别对PCR图像中的目标进行高阶语义建模,能够减少人工参与特征设计和筛选带来的误差,但忽略了目标的低层物理结构和几何外观细节信息,且在特征建模的过程中重复使用了大量冗余信息,对特征的表征能力有待改善。提出一种共现流增强双向金字塔卷积网络(CoFBiPCN)框架用于PCR液滴识别和统计。为增强金字塔的内部和层间相关性,设计具有时空分支的双向金字塔卷积网络,从正反2个方向对金字塔卷积网络得到的多尺度特征进行聚合,模拟PCR图像中液滴的上下文语义以及不同层级的细节信息,以捕获液滴的物理外观等低层信息。同时,设计切片的共现注意力(SCo-AN)模块,将不同尺度的高低层信息在不同的切片子空间中进行共享聚合,并交叉传递到不同分支的BiPCN中,强化高低层特征信息的交互和依赖关系,进一步增强信息流对PCR图像上液滴的表征,实现低层和高阶信息流的共享与交叉聚合。实验结果表明,CoF-BiPCN具备良好的识别性能,准确率和平均精度均值分别达到84.74%和45.09%,与Cascade RCNN模型相比分别提高4.3和3.12个百分点。

胃癌组织中HBO1的表达变化及其意义

目的观察胃癌组织中组蛋白乙酰转移酶结合至起源识别复合物1(HBO1)的表达变化,并探讨其意义。方法 125例胃癌患者,均行胃癌切除手术,术中留取胃癌组织、癌旁组织及正常胃组织标本。采用免疫组化法检测胃癌组织、癌旁组织及正常胃组织HBO1蛋白,采用qRT-PCR法检测HBO1 mRNA。分析HBO1表达与胃癌患者临床病理参数的关系,Kaplan-Meier分析HBO1表达与胃癌患者预后的关系。结果胃癌组织、癌旁组织及正常胃组织HBO1蛋白阳性表达率分别为78.4%、16.0%、14.4%,两两比较,P均<0.05。胃癌组织、癌旁组织及正常胃组织HBO1 mRNA相对表达量分别为3.69±0.16、1.72±0.29、1.36±0.15,两两比较,P均<0.05。HBO1表达与胃癌肿瘤分化程度、TNM分期、浸润程度、淋巴结转移及术前血CEA水平有关(P均<0.05)。HBO1高表达患者的总生存率降低(P<0.05)。HBO1表达、肿瘤分化程度、TNM分期、肿瘤浸润深度、淋巴结转移及术前血CEA值与胃癌患者预后有关(P均<0.05)。结论 HBO1在胃癌组织中高表达,其可能与胃癌的发生发展有关。HBO1高表达提示胃癌患者预后不良。

关于DNA方向性问题之刍议

DNA复制、转录以及限制酶识别等过程都离不开“方向”的指引,这一问题在高中生物学教学中屡被提及。本文尝试通过例题对高中阶段涉及到的DNA方向性问题进行探讨,为生物学教学提供参考。

RNA m^(6)A甲基化修饰在肿瘤放疗和辐射损伤修复中的关键作用

N^(6)-甲基腺苷(N^(6)-methyladenosine,m^(6)A)是真核信使RNA(mRNA)中最丰富的表观遗传学修饰。m^(6)A甲基化修饰的发生由m^(6)A甲基转移酶(Writers)催化;通过去甲基化酶(Erasers)去除;此外,m^(6)A甲基化修饰被甲基化识别酶(Readers)识别。m^(6)A甲基化修饰可调节RNA的剪接、翻译和稳定性。m^(6)A甲基化修饰参与细胞活动中多种重要功能基因的生物学调控,重要的是,m^(6)A水平异常变化可影响肿瘤的发生、发展、转移以及复发等过程。电离辐射对m^(6)A水平及m^(6)A甲基化修饰相关酶的水平产生影响。在肿瘤放射治疗过程中,m^(6)A修饰通过影响DNA损伤、肿瘤细胞辐射敏感性等,进而影响放射治疗疗效。此外,电离辐射影响m^(6)A甲基化水平,进而调控辐射损伤修复等过程。本文就RNA的m^(6)A甲基化修饰在肿瘤放疗和辐射损伤修复中作用机制的研究进展进行综述,旨在为临床肿瘤放射增敏剂及放射防护剂的研发提供新的思路。

m^(6)A RNA甲基化修饰在植物中的研究进展

N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m^(6)A)修饰是发生在RNA分子上最广泛的化学修饰之一,在转录后调控中发挥着重要作用。m^(6)A甲基转移酶和去甲基化酶协同调控m^(6)A修饰的动态变化,而识别酶特异性地结合m^(6)A修饰位点,影响RNA的代谢和加工,从而产生不同的生物学功能。本文对植物中m^(6)A甲基化元件、m^(6)A修饰对mRNA的影响,以及检测技术进行了综述,并着重总结了m^(6)A修饰在调控植物生长发育和逆境应答等方面的研究进展,以期为深入开展植物m^(6)A相关研究提供理论参考。

RNA的m^(6)A修饰在恶性肿瘤及其放疗中作用机制的研究进展

N^(6)-甲基腺苷(N^(6)-methyladenosine,m^(6)A)是哺乳动物中最丰富的RNA碱基修饰,尤其是在真核信使RNA(mRNA)中。m6A修饰可调节RNA的剪接,易位和稳定性,进而影响蛋白质的合成。m6A修饰被RNA甲基转移酶(writers)催化;通过去甲基酶(erasers)还原;还可以被甲基化识别酶(readers)识别。基因的m6A水平异常变化与肿瘤的发生和发展密切相关,即包括增殖、生长、侵袭和转移等。在肿瘤的放射治疗过程中,m6A修饰通过影响DNA损伤、肿瘤干细胞生成、以及肿瘤细胞辐射敏感性等,进而影响放疗疗效。本文就RNA的m6A修饰的表观遗传调控在恶性肿瘤中的作用以及在肿瘤放疗中作用机制的研究进展进行了综述,旨在为临床肿瘤分子靶向疗法和放射增敏剂的研发提供新的思路。