检验本科诊断分子生物学课程建设的体会

培养掌握一定的诊断分子生物学理论知识,并具有较强实际工作能力的检验工作者,是医学检验专业学科建设发展的重要课题。该文旨在总结探讨诊断分子生物学的课程改革方案,就如何提高医学检验专业本科生的创新意识和实践能力,浅谈笔者的见解。

在检验医学专业开设《诊断分子生物学》课程

二十一世纪将是生命科学的世纪。随着人类基因组计划(Human Genome Project,HGP)的实施和完成,人们对生命的认识将从感性认识进入到一个全新的理性认识阶段。近二十年来,生命科学取得了惊人的进展,分子生物学已成为生命科学的带头学科,并迅速渗透到医学的各个领域。医学检验与诊断学也不例外,分子生物学技术在医学检验诊断中的广泛应用,逐步形成诊断分子生物学(Diagnosis Molecular Biology)这一学科分支。

蛋鸡J亚群禽白血病的分子生物学诊断

根据J亚群白血病病毒(ALV-J)原型株HPRS-103的序列设计了一对针对外源性ALV-J引物H5和H7,从发生ML病死鸡的肿瘤、骨髓、肝脏、脾脏和输卵管组织中提取DNA作为模板,经PCR扩增得到长度为545bp的片段,对其序列进行测定后,与ALV-J原型株HPRS-103的序列进行了比较,发现其核苷酸同源性为97.4%,所编码氨基酸的同源性为96.1%。该片段含有ALV-Jgp85编码基因的部分序列和ALV-Jpol基因的部分序列,从分子水平上证实了蛋鸡发生J亚群禽白血病,进一步证明了此前根据病理学观察、免疫组化及免疫荧光诊断的结果。这是首次从分子水平上证明蛋用型鸡发生J亚群禽白血病。

猪瘟分子生物学诊断新进展

猪瘟是养猪业常见的一种烈性传染病,尽管中国很早就研制成功了猪瘟兔化弱毒疫苗,但近年来猪瘟的流行和发病特点发生了很大的变化,很多地区和猪场不断出现非典型猪瘟、温和型猪瘟,给该病的诊断带来困难。因此,尽早对猪瘟进行确诊是减少该病造成损失的有效措施。近年来,猪瘟的分子生物学诊断方法研究进展迅速,为猪瘟的诊断起到了重要作用。作者着重对最新的猪瘟分子生物学诊断方法(如RT-PCR、RT-LAMP等方法)加以综述。

猪瘟的分子生物学诊断

采用RT PCR方法 ,从经临床和血清学初步诊断为猪瘟的病料中扩增了猪瘟病毒 (CSFV)的E2基因某一片段 ;对扩增片段进行序列测定 ,通过DNAsis软件构建了系统发生树 ,确定了这一流行株 (IPI株 )在系统发生树中的位置。结果表明 ,从IPI株和石门株 (Shimen)中均扩增出 2 71bp目标片段 ,这一流行株与我国 2 0世纪 90年代以来流行的绝大多数CSFV毒株同属于基因 2群中的 2 .1基因亚群 ,与YN1、YN2、GX4、GZ1的关系较近 ,而与Shimen株、兔化弱毒株 (HCLV)等我国传统的标准毒株相距较远。这一结果为猪瘟的诊断和检疫提供了一种特异。

鸡传染性支气管炎分子生物学诊断研究

综述寡核苷酸指纹图谱分析、RT-PCR、RFLP、核酸探针、单克隆抗体技术,及基因表达技术在鸡传染性支气管炎(IB)分子生物学诊断方面的研究与应用。

重视结核分枝杆菌分子生物学诊断

结核病是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)感染引起的慢性传染性疾病,是全世界十大死因之一,被列为我国重大传染病之一。2010年第五次全国结核病流行病学抽样调查报告显示,我国15岁及以上人群中,活动性肺结核患病率为459/10万,其中痰涂片阳性率为66/10万[1]。

猪传染性胃肠炎分子生物学诊断研究进展

对国内现代分子生物学理论及TGEV的核酸性质建立的核酸探针、PCR、限制性酶切片段长度多态性 (RFLP)分析等检测TGEV的研究进展进行了综述。

PRRS分子生物学诊断技术的研究进展

猪生殖与呼吸系统综合征(PRRS)是由PRRSV导致的以母猪繁殖障碍和仔猪严重的呼吸道症状及高死亡率为特征的猪病毒性传染病。持续感染是PRRSV的一大特征,为了防制PRRS和优良种畜的推广熏兽医学者不断努力研制各种分子生物学方法诊断检测技术。该文就核酸探针杂交、反转录聚合酶链式反应以及重组蛋白分子诊断技术等在该病的研究应用方面予以综述。

结核病分子生物学诊断研究进展

早期、特异的诊断对于结核病(Tuberculosis,TB)患者的及时治疗以及切断TB传播链、保护易感人群等至关重要[1].WHO在全球TB控制规划中指出,TB主要应通过实验室诊断获得确诊.这一文件确立了实验室诊断在TB控制中的重要作用.传统的TB实验室检查主要是涂片抗酸染色检查和结核分枝杆菌(Mvcobacterium tuberculosis,MTB)培养法.抗酸染色检查敏感性差,细菌量至少要大于5×106/L才能检测到阳性结果,而且无法区分MTB和非MTB感染.MTB培养阳性是TB诊断的金标准,但报告周期过长(2～8周),很难满足临床需要[2].因此,临床迫切需要更为快速、特异和敏感的TB的诊断方法.……

卡氏肺孢子虫病免疫学和分子生物学诊断的研究

1980年代,通过基因及基因表达产物分析,发现卡氏肺孢子虫与真菌中的子菌高度同源,被认为是一种真菌[1].PC是条件致病菌,可引发卡氏.肺孢子虫肺炎(PCP).PCP是AIDS患者及其它免疫缺陷病人重要的致死原因之一,因此PCP的早期诊断是减少病死率的关键.传统的PCP的实验室诊断依赖细胞化学染色法,但染色及镜检技术要求较高,故灵敏度受到限制.近年来,随着免疫学分子生物学发展,越来越多的新技术应用于PCP的诊断.本文仅就国内外有关PCP的免疫学诊断及分子生物学诊断的研究作一综述.

猪附红细胞体病分子生物学诊断技术研究进展

猪附红细胞体病是养猪业常见的一种传染病,本文对最新的猪附红细胞体病的分子生物学诊断方法研究加以综述。以期对该病的病原学诊断及综合防控研究提供参考。

猪瘟病毒分子生物学诊断的研究进展

猪瘟是由猪瘟病毒引起的猪的急性、热性、高度接触性传染病,严重危害我国养猪业。尽管中国很早就研制成功了猪瘟兔化弱毒疫苗,但近年来猪瘟的流行和发病特点发生了很大的变化,很多地区和猪场不断出现非典型猪瘟、温和型猪瘟,给该病的诊断带来了困难。近年来,猪瘟病毒分子生物学诊断方法的研究进展迅速,为猪瘟的快速、准确诊断起到了重要的作用。从聚合酶链式反应技术、核酸探针技术、DNA芯片技术等方面对猪瘟病毒的分子生物学诊断方法进行了综述。

Q热分子生物学诊断技术研究进展

Q热(query fever)是由贝纳柯克斯体(Coxiella burnetii)感染所致的一种人兽共患的自然疫源性疾病。早在1935-1937年间于澳大利亚发生一种不明热疾病,当时称之为Q热。迄今Q热疫区几乎遍及全球所有国家,成为当前分布最广的人兽共患病之一。贝纳柯克斯体能以气溶胶的形式传播,一旦流行将难以控制,因此对人类危害极大。文章对Q热贝纳柯克斯体的流行病学、诊断技术的研究进展做了详细的介绍。

猪细小病毒分子生物学诊断技术的研究进展

猪细小病毒是引起母猪繁殖障碍性疾病的主要病原之一。它广泛分布于世界各地,给我国乃至全世界的养猪业造成了巨大的经济损失。近年来,猪细小病毒的分子生物学诊断方法的研究进展迅速,为猪细小病毒的快速、准确的诊断起到了重要的作用。从聚合酶链式反应技术、核酸探针技术、DNA芯片技术等方面对猪细小病毒的分子生物学诊断技术进行综述有助于我们进一步了解这项技术。

分子生物学诊断技术的应用(二)

3核酸扩增技术-聚合酶链反应（PCR）核酸扩增包括聚合酶链反应、连接酶链反应和Qβ复制酶技术等,根据实际应用情况,主要介绍聚合酶链反应。