改良试剂瓶提高生化试剂开瓶稳定性的应用研究

目的研究改良试剂瓶对于提高生化试剂开瓶稳定性的应用价值。方法在全自动生化分析仪上使用改良试剂瓶对Cre，ALP，TBA，Lp（a），Na^＋等生化试剂进行开瓶稳定性、精密度及校准周期试验，并以普通试剂瓶设为对照组，观察测定结果的差异显著性。结果监测期内在相同条件下使用改良试剂瓶及普通试剂瓶保存Cre，ALP，TBA，Lp（a），Na^＋试剂，观察实验结果：①监测期末测定结果下降的偏差（％）分别为-3．84／-24．23，-2．47／-11．99，-1．75／-25．58，4．25／-7．35，1．17／8．6；②开瓶后的有效期（d）分别为15／7，30／15，60／15，72／30，7／4；③检测结果的日间变异CV（％）分别为1．57／5．14，1．10／4．41，4．01／9．51，3．4／3．55，1．0／3．18；④检测项目的校准周期（d）分另q为15／7，26／18，60／16，68／30，15／4；⑤改良试剂瓶在监测期内的测定结果与对照组有显著性差异，5组项目检测结果中除Lpa正常值水平差异无统计学意义（P〉0．05）外，其余差异均有统计学显著性意义（P〈0．01）。结论改良试剂瓶对于提高Cre，ALP，TBA，Lp（a），Na^＋等不同类型生化试剂开瓶后的稳定性、延长效期及减小室内检测结果日问变异效果显著，因此在实验室检验成本控制和检验质量控制方面具有较高的应用价值，可替代普通试剂瓶广泛应用于生化自动化分析。

改良斑氏试剂法与醋酸铅法用于粪乳糖检测的比较

目的:探讨改良斑氏试剂法对粪乳糖检测的准确性。方法:同时采用改良斑氏试剂法和醋酸铅法对60例健康儿、60例非腹泻患儿及200例腹泻患儿同一份大便标本进行粪乳糖检测。结果:200例腹泻患儿采用改良斑氏试剂法检测时,粪便还原糖阳性者138例,占69%,粪便还原糖阴性者62例,占31%;采用醋酸铅法检测时,粪便还原糖阳性者136例,占68%,粪便还原糖阴性者64例,占32%,两者比较,无显著性差异(P>0.05)。结论:两种检测方法对乳糖吸收不良的诊断及治疗同样有一定的价值。

改良试剂瓶提高循环酶法总胆汁酸试剂稳定性的性能评价

目的对改良试剂瓶提高总胆汁酸试剂开瓶后稳定性的性能评价。方法在全自动生化分析仪上分别使用普通试剂瓶和改良试剂瓶贮存循环酶法总胆汁酸试剂,观察高、中值混合血清以及试剂空白检测结果的日间变异CV及趋势性变化,并对两种试剂瓶的检测结果进行差异显著性t检验。结果 (1)改良试剂瓶测定结果趋势性变化较普通试剂瓶明显减缓。(2)普通试剂瓶测定值在监测期前后累计偏差分别为中值-20.37%和高值-22.09%;而改良试剂瓶测定值在监测期前后累计偏差分别为中值3.77%和高值-1.16%。(3)普通生化试剂瓶检测结果日间变异CV分别为中值混合血清9.27%和高值混合血清9.32%;长效试剂瓶分别为中值混合血清3.38%和高值混合血清2.03%。(4)改良试剂瓶贮存TBA试剂的空白值下降低幅度较普通试剂瓶明显减慢。(5)两种试剂瓶在监测期内的测定结果经差异显著性配对t检验,差异有统计学意义(t=4.889,P<0.01)。结论改良试剂瓶对于减缓循环酶法总胆汁酸试剂衰变的性能良好,有利于延长试剂效期,且可显著降低测定结果的日间变异。

应用改良试剂瓶对提高生化试剂开瓶稳定性的影响

目的探讨并分析应用改良试剂瓶对提高生化试剂开瓶稳定性的影响。方法将试剂分为观察组与对照组,其中观察组为生化试剂,对照组为普通试剂,利用全自动生化分析仪使用改良试剂瓶对生化试剂钠(Na+),肌酐(Cre),脂蛋白a[Lp(a)],碱性磷酸酶(ALP),总胆汁酸(TBA)等进行开瓶稳定性等试验,观察其实验结果。结果经检测,Na+1的正常值混合血清及病理值混合血清分别为(134.6±4.23)mL和(154.8±5.54)mL,Na+2为(129.1±1.5)mL和(149.1±1.35)mL,TBA l为(4.66±0.43)mL和(36.67±3.17)mL,TBA 2为(5.53±0.21)mL和(41.67±1.13)mL,Cre l为(108.5±5.9)mL和(336.8±19.0)mL,Cre 2为(115.1±1.9)mL和(349.7±4.12)mL,ALP l为(148.3±6.7)mL和(324.7±11.9)mL,ALP 2为(153.6±1.6)mL和(331.2±4.6)mL,Lp(a)1为(183.0±5.4)mL和(401.9±21.4)mL,Lp(a)2为(201.1±6.5)mL以及(429.1±10.2)mL。结论改良试剂瓶对于提高Na+,Cre,Lp(a),ALP,TBA等生化试剂开盖后的稳定性、有效期等效果显著,试剂配方成分无改变,不会产生负面影响,可替代传统试剂瓶并广泛应用于生化自动化分析,前景广阔。

Wittig试剂及其反应在精细合成中众多的新应用

Wittig试剂及其反应和改良型Wittig-Horner试剂及其反应,在合成最新系列的高级的不同种类的精细有机化学品中,比如在合成各种昆虫信息素、绿色的除菌与除草农药、乙烷类液晶、新型医药及其中间体、重要的抗生素、有机发光材料和光到体等中,都得到了众多的应用。

壮药白花蛇舌草不同部位总DNA提取方法的比较研究

目的:比较改良试剂盒法和改良CTAB法对白花蛇舌草不同部位总DNA提取的效果。方法:以白花蛇舌草的新鲜叶片、茎、花、果及干燥全草为实验材料,采用改良试剂盒法和改良CTAB法两种DNA提取方法提取上述材料的总DNA,将提取到的DNA经凝胶电泳和超微量分光光度计检测,比较两种方法对白花蛇舌草不同部位总DNA的提取效果。结果:提取浓度方面,使用改良试剂盒法提取叶、茎、花的总DNA浓度能达到0.3μg/mL以上,使用改良CTAB法提取叶、茎的总DNA浓度能达到0.3μg/mL以上;提取纯度方面,改良试剂盒法对花DNA的提取纯度最高(A260/A280=1.80),其余部分次之,改良CTAB法对叶DNA的提取纯度最高(A260/A280=1.79),其余部分次之。结论:当提取白花蛇舌草新鲜叶片和茎的DNA时,改良试剂盒法和改良CTAB法均能较好的效果;当提取白花蛇舌草的新鲜花、果和干燥全草的DNA时,改良试剂盒法能满足实验要求。

一种适合沙棘叶片总RNA的提取方法

针对沙棘组织中多糖、多酚、粗蛋白等次生代谢产物含量高的特点,采用RNAplant Plus总RNA提取试剂改良法,成功地提取了沙棘叶片总RNA。所提取的沙棘叶片总RNA凝胶电泳显示28s和18s条带清晰完整,A260/A280和A260/A230比值分别为1.79和2.07,且平均得率为298.1μg/g(鲜叶)。试验结果表明,RNAplant Plus总RNA提取试剂改良法具有方便快捷、提取RNA纯度高、有效排除多种次生代谢产物影响的特点,用该方法提取的沙棘叶片总RNA可以用于后续的分子生物学研究中。

改良斑氏试剂法对粪便还原糖的检测

小儿乳糖不耐受症在婴幼儿腹泻中较常见。测定粪便还原糖,国外通常应用Clinitest Tablet还原糖检测法。鉴于该试剂需进口且较昂贵,本院消化实验室试用改良斑氏试剂代替;其敏感性,特异性均佳,且操作迅速简便。现总结报道如下。 1.对象:健康小儿60例:来自本市幼儿园,年龄13～28个月(平均19.5±5.2个月),课问均服牛奶1瓶/天,取次日清晨新鲜粪便为样本。

新型靶向药物研究的重要分子:可变淋巴细胞受体

自从2004年可变淋巴细胞受体(variable lymphocyte receptor, VLR)在七鳃鳗中首次发现以来,因VLR能识别多种抗原、具有简单的分子结构、物理化学性质稳定、对蛋白质以及聚糖的高亲和力和强特异性等多方面优点,学术界对于VLR的研究和改造十分火热。近年来,随着研究的不断深入,由VLR构建的重组分子广泛用于各领域的基础研究和应用研究。本文对近年来VLR面向下游的最新应用研究进行综述。在肿瘤研究中,VLR可特异性地精准识别碳水化合物,并能够区分只有1个官能团不同的多糖,可作为灵敏抗多糖试剂,用于识别肿瘤细胞上独特的糖复合物,为肿瘤的靶向治疗提供新的策略;VLR也可与其他经典的治疗方法进行结合。例如,将嵌合抗原受体进行改造,经过改造后可表达一种合成受体。这种合成受体可将T细胞的细胞靶向杀伤作用重新定位到所选择的靶点;VLR经重组改造后,也可用于改良分离纯化试剂或在水生生物疾病上发挥作用。这些新开发的VLR的作用有可能作为新型的识别、诊断和治疗试剂。本文将从VLR多样性产生的机制、VLR与糖生物学和生物医药研究上的关系、VLR用于改良分离纯化试剂的作用、VLR在水生生物疾病研究等方面进行阐述,以期为VLR用于疾病药物研发等相关应用提供参考。

适合金银花不同组织总RNA提取方法的筛选

对Trizol法、CTAB法、十二烷基磺酸钠(SDS)法、多糖多酚试剂盒法、改良多糖多酚试剂盒法5种RNA提取方法提取金银花叶片、茎、根、花蕾组织RNA的效果进行比较,以期获得质量较好的金银花不同器官的RNA,为后续分子生物学试验奠定基础。结果表明:改进后的多糖多酚试剂盒法能够克服金银花中RNA提取难度大的问题,能够提取到质量、产量都很高的RNA,且稳定性好、无DNA污染,可以满足进一步的半定量反转录PCR(RT-PCR)等试验需要。

灰毡毛忍冬花蕾总RNA提取方法的研究

目的:探讨灰毡毛忍冬花蕾总RNA提取的有效方法。方法:采用SDS法、Trizol法、普通试剂盒法、改良CTAB法、多糖多酚试剂盒法、改良多糖多酚试剂盒法提取灰毡毛忍冬花蕾总RNA并比较其效果。结果:SDS法、Trizol法和普通试剂盒法均不适用于本样品总RNA的提取;改良CTAB法、多糖多酚试剂盒法、改良多糖多酚试剂盒法均能有效去除蛋白质、多糖多酚及DNA,OD260/280为1.86-2.00,OD260/230为1.96-2.63,电泳条带清晰,RNA完整性好,且通过RT-PCR扩增能获得特异性条带。但以多糖多酚试剂盒法提取效果最佳。结论:改良CTAB法、多糖多酚试剂盒法、改良多糖多酚试剂盒法均适合灰毡毛忍冬花蕾总RNA提取,完全满足后续RT-PCR等分子生物学研究。

第三代测序细菌基因组DNA提取方法的比较

为筛选有效提取细菌菌株总DNA的方法,分别采用SDS法、CTAB-SDS法、试剂盒法和改良试剂盒法对苏云金芽胞杆菌、粘细菌和放线菌进行总DNA的提取、电泳检测、NanoDrop 2000测定、PCR扩增.对放线菌和苏云金芽胞杆菌,用改良试剂盒法所提取的总DNA纯度较高,电泳条带清晰,DNA主带位于23 kb,单位体积菌液所提取到的总DNA较SDS法和CTAB-SDS法高,能满足下游的PCR扩增等分子操作.对待测样品所做的质检报告也证实样品合格,可用于后续建库、测序.而粘细菌提取到的总DNA由于它们的OD260/230在2.0以下,没有达到第三代测序样品的要求.改良试剂盒法所提取到的总DNA大多数可以满足第三代测序技术样品制备的要求.

乳酸脱氢酶同工酶第6条带检测的临床研究

在临床工作中应用改良乳酸脱氢酶（LDH）同工酶试剂盒,检测到乳酸脱氢酶同工酶6（LDH6）条带,对出现LDH6的患者进行追踪检测,发现患者血清LDH总活性都很高,均大于520U/L。同时,当血清LDH6所占总活性比例大于7.9%时,患者2周内即死亡。因此,我们通过改良LDH同工酶试剂检测LDH6酶。可尽快检测出患者肝损伤程度,使其及时得到治疗。

台湾牛樟总DNA提取方法研究及其PCR验证

采用Biospin(Cat#BSC13S1、Cat#BSC13S1B)和"TIANGEN"(Cat#DP305-03)植物基因组DNA提取试剂盒,对台湾牛樟总DNA的提取方法进行了研究。结果表明:Cat#BSC13S1普通试剂盒比专门提取多糖多酚植物DNA的Cat#BSC13S1B试剂盒的效果更好,且博日Cat#BSC13S1试剂盒的DNA提取效果优于天根Cat#DP305-03试剂盒。经PCR验证,试剂盒法提取的牛樟叶总DNA可满足后续分子生物学实验的要求。

水牛全血基因组抽提方法优化

[目的]通过比较三种提取水牛全血基因组DNA的方法,获得一种安全、高效、快速的DNA提取方法,为水牛基因功能的研究奠定基础。[方法]收集43头水牛抗凝血样,每份血样随机分为等量3份,每份血样2mL,分别使用试剂盒改良法、试剂盒说明书法及酚仿抽提法提取全血基因组DNA。比较分析三种方法提取的同一头牛三份血样DNA的含量、OD260/280值、琼脂糖凝胶电泳和基因扩增结果。[结果]三种方法提取DNA的含量由高到低依次为试剂盒改良法、酚仿抽提法、试剂盒说明书法,各组间差异显著(1376.72±127.54VS 1121.32±81.64VS 326.18±21.17,P<0.05)。三种方法提取DNA的OD-260/280值依次增加,试剂盒改良法与试剂盒说明书法OD260/280值差异不显著(1.85±0.0017 VS1.86±0.0021,P>0.05),与酚仿抽提法OD260/280值有显著差异(1.85±0.0017VS 1.88±0.0029,1.86±0.0021VS 1.88±0.0029,P<0.05)。三种方法提取DNA琼脂糖凝胶电泳结果显示,试剂盒改良法和试剂盒说明书法DNA条带清晰、光密度高,酚仿抽提法条带模糊有拖带现象。三种方法所提取的基因组PCR扩增stat5基因获得较清晰准确的条带,扩增效果良好。[结论]试剂盒改良法用于水牛全血基因组的提取比试剂盒说明书法和酚氯仿法更安全、高效、便捷。

石斛属植物茎部总RNA提取方法的研究

获得快速提取高质量石斛属植物茎总RNA的方法,为深入开展分子生物学研究奠定基础。采用7种方法提取铁皮石斛茎总RNA,凝胶电泳和紫外分光光度法检测质量,筛选最佳方法,并对方法进行验证。结果显示,经过比较,用改良华越洋多糖多酚试剂盒法(M7)提取的铁皮石斛茎总RNA的完整性、浓度和纯度均最好。用M7提取铁皮石斛、金钗石斛、鼓槌石斛、球花石斛和重唇石斛的茎总RNA,以及提取不同生长条件(温室和大棚种植)和不同生长时间(大棚生长3个月、1年和2年)铁皮石斛的茎总RNA,所获样品的完整性、浓度和纯度均符合质量要求。M7操作简便,结果重复性好,适于石斛属植物茎总RNA的提取。

昆明小鼠不同组织RNA提取方法的比较

利用改良的异硫氰酸胍法、改良的SDS法和改良的TRlpure试剂盒法对昆明小鼠心脏、肝脏以及肾脏进行组织总RNA的提取,比较其提取效果,结果显示,试剂盒提取效果普遍明显优于其它方法且适用于肝脏总RNA的提取,传统方法的改良适用于肾脏总RNA的提取,心脏总RNA的提取效果均不理想。

不同加工工艺果汁DNA提取方法的比较

为了建立一种不同加工工艺果汁DNA提取方法的通用方法,比较了改良CTAB法、试剂盒法和改良试剂盒法3种方法提取鲜榨果汁、浓缩果汁、非浓缩果汁、含果肉饮料4种类型果汁中DNA。结果表明:3种方法提取的DNA纯度相似,但提取的复原果汁DNA纯度高于2.0,可能是DNA降解造成;质量浓度由高到低分别为改良试剂盒法、改良CTAB法、试剂盒法,改良试剂盒法提取的DNA可以用作后续的一系列PCR反应。通过比较果汁DNA提取的3种方法,针对鲜榨果汁、浓缩果汁、非浓缩果汁、含果肉饮料中DNA,改良试剂盒法可以作为果汁中DNA提取的通用方法。