牛布鲁氏菌抗体荧光快速检测试纸卡的研制

为研制一种快速检测牛布鲁氏菌抗体的便捷试纸卡,采用间接荧光免疫层析技术,以荧光微球为标记物,与兔抗牛IgG偶联,以布鲁氏菌脂多糖(LPS)抗原包被硝酸纤维素膜,通过反应条件优化,研制牛布鲁氏菌抗体荧光微球快速检测试纸卡。结果显示:该试纸卡灵敏度可达0.8 IU/mL,与牛口蹄疫病毒O型、牛口蹄疫病毒A型、牛病毒性腹泻病毒、牛传染性鼻气管炎病毒的抗体阳性血清均无交叉反应;对469份临床牛血清进行检测,同时与荧光偏振方法进行比较,发现两种方法的符合率为100%。结果表明,本次研制的牛布鲁氏菌抗体荧光微球检测试纸卡灵敏度高,特异性好,适用于临床样品的快速检测。本试纸卡的成功研制为牛布鲁氏菌病免疫效果评估和准确诊断提供了一种简便的血清学诊断方法。

一种快速检测氟喹诺酮类药物的胶体金试纸卡的研制

利用胶体金免疫层析技术研制了一种快速检测牛奶中的氟喹诺酮类药物试纸卡,并配合胶体金试纸卡读数仪使用。结果表明,该试纸卡对恩诺沙星、沙拉沙星、双氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、培氟沙星、氟甲喹、达氟沙星的检测限为20μg/L,对依诺沙星、恶喹酸的检测限为40μg/L,检测时间为10 min,假阳性率和假阴性率均为0。该试纸卡能够准确、可靠、简便地检测牛奶中残留的氟喹诺酮类药物,适合大量样品的现场检测。

一种快速检测氟喹诺酮类药物的胶体金试纸卡——配合胶体金试纸卡读数仪使用

利用胶体金免疫层析技术研制了一种快速检测牛奶中的氟喹诺酮类药物试纸卡,并配合胶体金试纸卡读数仪使用,结果显示,该试纸卡对恩诺沙星、沙拉沙星、双氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、培氟沙星、氟甲喹、达氟沙星的检测限为20μg/L,对依诺沙星、恶喹酸的检测限为40μg/L,检测时间为10 min,假阳性率和假阴性率均为0。该试纸卡能够准确、可靠、简便地检测牛奶中残留的氟喹诺酮类药物,适合大量样品的现场检测。

胶体金检测试纸卡在检测非洲猪瘟病毒抗体上的应用

本研究采用非洲猪瘟病毒抗体检测试纸卡检测倍比稀释后的非洲猪瘟病毒标准阳性血清,将标准阳性血清倍比稀释至1∶256时,试纸卡检测线仍呈现清晰的、肉眼可见的红色沉淀线;标准阴性血清、空载体血清及其他无关病毒阳性血清各稀释度均无沉淀线。检测已知感染猪血清时,最早感染后第8天即能查出阳性抗体,与ELISA检测结果一致。用非洲猪瘟病毒抗体检测试纸卡对230份送检猪血清中的非洲猪瘟抗体进行检测,并与西班牙INGENASA非洲猪瘟病毒阻断ELISA抗体检测试剂盒进行比较试验。试验结果显示,阳性符合率为80%,阴性符合率为89.2%,总符合率为84.8%,说明本试验所制备的试纸卡在检测非洲猪瘟病毒抗体的临床应用中特异性强、准确度高,与常规ELISA试剂盒比较,能更快、更便捷地查出猪群中非洲猪瘟病毒抗体阳性猪,更适合于普通实验室及养殖单位现场临床应用。

犬狂犬病毒抗体胶体金检测试纸卡的研制

为快速检测犬狂犬病毒IgG抗体,应用狂犬病毒G蛋白作为捕获抗原,鼠抗狂犬病毒G蛋白单克隆抗体和羊抗犬IgG分别作为胶体金标记物和诊断抗体,羊抗鼠IgG作为质控线,制备胶体金免疫层析抗体检测试纸。该试纸卡具有良好的特异性、敏感性、重复性和稳定性,与快速荧光灶抑制实验检测值对比总符合率为82.1%。研究显示,本试纸卡能够快速、准确检测犬狂犬病毒IgG抗体,可为临床诊断和宠物犬狂犬疫苗免疫效果的评价提供参考。

酶联免疫试剂盒与胶体金试纸卡评价方法研究

通过对市售酶联免疫检测试剂盒和胶体金试纸卡进行一般性检查、标准曲线、准确度和精确度、检测限和定量限、交叉反应、稳定性、失效率、假阳性率、假阴性率、清晰度、复核试验等指标检测试验,建立简便、快捷、切实可行的酶联免疫试剂盒与胶体金试纸卡评价方法。

呕吐毒素荧光定量快速检测试纸卡及仪器技术性能优化的研究报告

基于时间分辨荧光微球制备的呕吐毒素荧光定量快速检测试纸卡,通过两线及三线试纸卡灵敏度与重复性的对比,筛选出效果更优的三线试纸卡,并对三线试纸卡不同性能要求进行检测验证。结果表明,呕吐毒素三线试纸卡检出限与定量限符合要求,准确度、重复性、稳定性等均达到更优的效果,更能满足快速定量检测要求。

2种鸡白痢检疫方法的对比试验

为比较快速检测试纸卡和全血平板凝集试验检测鸡白痢的结果符合情况,从湖北省荆州市某屠宰点随机取样40份,分别用鸡白痢全血平板凝集试验和快速检测试纸卡进行检测比较,结果表明阳性符合率为86.84%,阴性符合率为50%。由此显示,鸡白痢快速检测试纸卡基本能替代平板凝集试验,可以在生产实践中广泛应用。

动物组织中莱克多巴胺残留胶体金免疫层析和LC-MS/MS检测方法的比较

采用胶体金试纸卡法和LC-MS/MS法分别对猪肉、猪肝样品进行检测,鉴定胶体金试纸卡法和LC-MS/MS法检测结果的符合率。结果表明:应用胶体金试纸卡法检测样品中莱克多巴胺的最低检测限为5.0μg/kg,LC-MS/MS检测方法的检测限为0.25μg/kg;2种方法的检测结果一致。胶体金试纸卡法特异性较高,样品前处理简单,检测快速,成本低,适用于动物组织中莱克多巴胺残留的定性筛查;LC-MS/MS灵敏度高,适合于阳性样品的确证和精确定量。

一例牛病毒性腹泻病例的血清学诊断

牛病毒性腹泻病毒是危害养牛业健康发展的瘟病毒属成员。文章对图们市长安镇畜牧兽医站接待病例的诊断过程进行了描述,通过猪瘟胶体金快速检测试纸卡检测患病牛体内"牛病毒性腹泻抗体"水平,从而为诊断牛病毒性腹泻病例提供了一种有意义的检测手段。

农药醚菊酯荧光定量免疫层析检测试纸研制

目的建立一种基于荧光微球的定量免疫层析检测试纸卡,用于农药醚菊酯(etofenprox)的快速定量检测,并对所制备的试纸卡性能进行评价。方法采取竞争抑制免疫层析模式,通过优化试纸各要素,研制醚菊酯检测试纸,并对其标准曲线、检测限、定量限、特异性、准确度、精密度等方面进行性能评价。结果所制备的试纸卡标准曲线回归方程R;值达0.980 1,检测限达1.057 ng/ml;定量限达1.890 ng/ml;与类似农药交叉反应率小于0.10%;添加回收率为98.60%~106.50%;批内和批间变异系数均小于10.00%。结论所研制的醚菊酯荧光定量免疫层析试纸卡各项指标均达到要求,具有特异性好、灵敏度高、检测快速、简便的优点,可以应用于醚菊酯残留检测。

猪伪狂犬病病毒gE抗原时间分辨荧光免疫层析检测方法的建立

为建立一种简便、快速、特异、可定量检测样品中猪伪狂犬病病毒(PRV)gE抗原的时间分辨荧光微球免疫层析检测方法,采用单克隆抗体技术和荧光微球免疫层析技术,以羧基荧光微球和NC膜为载体将单克隆抗体进行标记和包被,制备PRV gE抗原检测试纸卡。优化了标记抗体、包被抗体的工艺,并通过试纸卡线性范围、最低检出限、特异性等性能指标对其进行评价。最终确定20μL荧光微球的标记抗体量为20μg,检测线包被抗体质量浓度为2 g/L时,检测时间为15 min,线性范围为1∶6.25~1∶200.00倍稀释的TCID50为1×10^8.6/0.1 mL的PRV抗原,最低检出限为1∶800倍稀释的TCID50为1×10^8.6/0.1 mL的PRV抗原,精密性小于10%,与猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)及PRV Batha-K61株、PRV-HB2000株等均无交叉反应,室温干燥条件下至少保存10个月。该试纸卡与PRV gE与gD二重实时荧光PCR平行检测134份临床样本,两者总符合率为89.55%。初步建立了定量检测样品中PRV gE抗原时间分辨荧光免疫层析检测方法,有良好的临床应用价值。