生物制品试验数据保护制度根源与价值——以专利保护为比较视角

作为超出《与贸易有关的知识产权协议》(TRIPS)条款,生物制品试验数据保护制度已成为近年来国际多边或双边贸易协定和国内产业政策制定的热点。通过回溯制度根源、比较制度价值发现,一方面,创新生物制品的试验数据对生物类似药产生了正外部性,即允许后者依赖前者的试验数据,仅证明其与前者相似即可获批上市,这成为该项制度产生的根源。另一方面,从比较角度,作为规制外部性的手段,试验数据保护已成为专利保护的有益补充,且在生物制品领域尤为明显,诸如在保护对象、保护力度、实质保护期限等方面。基于上述发现,建议我国未来在制度建构时更好地平衡“创新激励”与“药品可及”这一知识产权保护的原始命题,结合我国国情设置相匹配的制度强度,同时需要注重与生物制品注册分类及审批制度、专利保护制度的协同与衔接。

桥梁索体钢丝外加电流阴极保护机理试验研究

拉吊索在侵蚀环境作用下易受氯离子、氧气、水等物质的腐蚀作用,严重影响了缆索系统的耐久性。本文通过开展镀锌平行钢丝外加电流阴极保护(Impressed Current Cathodic Protection,ICCP)试验,研究外加电流对桥梁索体钢丝的阴极保护效果,根据钢丝在侵蚀过程中的微观损伤演化以及腐蚀速率、抗拉强度、延伸率、瞬断电位、开路电位、极化曲线、疲劳性能等力学性能指标的变化规律,从而确定ICCP电压的施加范围。结果表明:随着保护电压的负向偏移,ICCP的保护效果更佳,当保护电压位于-1.3 V时对延缓钢丝腐蚀的效果最好,腐蚀速率最低,抗拉强度、延伸率和疲劳寿命的损失率最低,且延性得到显著提升。

不同鸡马立克病疫苗的免疫保护效果比较

【目的】对国内外共7个批次/品种(A~D,F~H)的CVI988或CVI988+HVT商品疫苗进行免疫保护分析,以期了解不同马立克病(MD)疫苗的保护效果,为该病的防控提供参考。【方法】将140只1日龄SPF鸡随机分为9组,G01~G09组,其中G01~G07组(15只/组)分别按推荐剂量免疫A~D及F~H马立克病疫苗,G08(攻毒对照组,15只)和G09(空白对照组,20只)组不免疫,7日龄时G01~G08组分别经腹腔注射马立克病病毒(MDV)超强毒Md5株(1000 PFU/只),所有鸡隔离饲养120 d。通过检测疫苗毒蚀斑数、疫苗毒复制情况、攻毒后体重差异、临床表现和病理变化综合评估各疫苗的保护力。【结果】7个批次疫苗的病毒蚀斑数均符合国家标准(2000 PFU/羽份),疫苗F的病毒蚀斑数最高(6467 PFU/羽份)。以1羽份剂量免疫1日龄SPF鸡后,疫苗F的复制速率相对较快。用Md5株攻毒后,攻毒对照组鸡体重减轻,且有93.3%(14/15)的鸡死亡,100%(15/15)剖检出现MD典型病变;G01~G07各免疫组鸡体重与空白对照组鸡相比,均无显著差异(P>0.05),死亡比例分别为0/14、3/15、5/15、0/14、0/13、0/15和1/15,剖检出现MD典型病理变化的比例为5/14、8/15、7/15、5/14、3/13、3/15和5/15,攻毒保护试验结果显示,7个批次的马立克病疫苗对鸡均具有一定保护力,保护指数为45.7%~73.3%。【结论】不同厂家生产的鸡马立克病疫苗对MDV超强毒Md5株的攻击具有相似的保护效果,二价苗的保护力(73.3%)高于单价疫苗。

H9亚型禽流感重组鸡痘病毒疫苗的免疫保护试验

应用表达H9亚型禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)基因的重组鸡痘病毒疫苗及其传代后第20、30代疫苗免疫5日龄无特定病原(SPF)鸡群,于免疫后采血测定HI抗体效价,并于免疫后第21天攻毒,攻毒后2～13d进行泄殖腔棉拭子采样,接种鸡胚测排毒情况。各免疫组在免疫后7～20d的HI抗体效价逐渐上升,但不同剂量组间、不同传代代次间有差异;攻毒后第5天各免疫组排毒的鸡数与对照组相比显著减少,且不同攻毒毒株组间无差异。重组苗组在攻毒后第2天仅有8%排毒,第5天则无排毒;灭活油苗组在攻毒后第2、5、7天分别有52%、12%、4%排毒,直到第9天才不排毒;空白攻毒组在攻毒后2～13d排毒率由92%缓慢降至8%。结果表明:研制的表达H9亚型禽流感病毒HA基因的重组鸡痘病毒载体疫苗具有较高的免疫保护效力,不低于灭活油苗,且在抑制早期排毒、防止群内传播方面优于灭活油苗。

标准鸭肝炎Ⅰ型血清对鸭肝炎野毒株的免疫保护试验

为探讨珠江三角洲及其附近地区鸭肝炎免疫失败的原因 ,对从该地区分离到的鸭肝炎野毒 SN株等 6个毒株在 7日龄雏鸭、1 0日龄鸭胚及 9日龄鸡胚上作免疫保护试验、交叉中和试验。试验结果表明 ,标准鸭肝炎 型 ( DH- )血清对部分野毒株 ( SN株、Z株、SF株 )的免疫保护指数较低 ,明显低于相应野毒株血清的保护指数 ,表明该疫区部分鸭肝炎野毒的抗原性已发生改变。这一免疫保护试验结论得到了交叉中和试验结果的支持。根据试验结果 ,采取若干有代表性鸭肝炎野毒与标准 DH- 型毒株 ,制备鸭肝炎高免血清或高免卵黄抗体用于临床免疫防治 ,并注意排除一些其他因素的干优 ,使临床免疫保护率达到 96%。

FQS—110对雏鸡人工感染鸡大肠杆菌的保护试验

用 FQS- 110对雏鸡人工感染鸡大肠杆菌进行了保护试验。于感染后 1、6、12、2 4 h给药 ,0 .335mg/ kg为 10 0 %保护率最小剂量 ,0 .16 0 mg/ kg的保护率为 90 %、0 .12 2 mg/ kg的保护率为50 %、0 .0 75mg/ kg的保护率为 10 %。经统计 ,ED50 95%可信限为 (0 .111± 0 .0 19) mg/ kg。试验结果提示 FQS- 110对雏鸡人工感染鸡大肠杆菌病有保护作用。

番鸭新病——花肝病的研究 Ⅱ分离毒的致弱及灭活苗的保护试验

文章通过试验找出能适合于花肝病分离毒生长和繁殖的胚 ,并检测了自制灭活苗对雏番鸭的保护作用。将病料匀浆液接种到番鸭胚、鸭胚和鸡胚上分离病毒 ,并作病毒适应性试验 ,检测继代病毒对雏番鸭的致病性 ;制备了普通灭活苗、油佐剂灭活苗、左旋咪唑灭活苗 ,并分别进行了几种灭活苗的保护试验。结果表明 :分离毒在番鸭胚上能较好地适应并继代 ,随着代次增加 ,其毒力逐步下降 ;灭活疫苗对雏番鸭的保护试验表明 ,灭活疫苗有一定的保护作用 。

两个中等毒力IBDV疫苗免疫鸡对超强毒攻毒的保护试验

应用 SPF鸡分别比较研究了两个国内厂家生产的中等毒力 IBDV疫苗接种后对法氏囊和胸腺的影响和对超强毒 GX-8/99攻毒后的免疫保护力。结果表明 ,用于试验的两个中等毒力疫苗虽然在 SPF鸡可引起法氏囊和胸腺不同程度的萎缩 ,但确实能够 1 0 0 %保护已经免疫的SPF鸡免于超强毒 IBDV人工感染造成的死亡 ,而且 ,还能减缓和预防超强毒感染合并诱发的法氏囊的炎症、出血和变性。从而说明 ,在不受母源抗体干扰条件下 ,中等毒力的 IBDV疫苗能诱发对超强毒 IBDV中国株 GX-8/99攻毒的有效免疫保护力。

鸡传染性支气管炎强毒分离株遗传进化分析和免疫保护试验

从山东省发病鸡群中分离鉴定了一株鸡传染性支气管炎病毒（Infectious bronchitis virus,IBV）强毒株SDIB821/2012,对其进行S1基因序列测定分析和免疫保护试验。S1基因遗传进化分析结果显示,SDIB821/2012属于以QXIBV为代表的基因型,与同属一个基因型的IBV参考株氨基酸同源性为91.6%～98.5%,与疫苗株491同源性为77.6%,与H120和MA5同源性均为74.8%。免疫保护试验结果显示,根据试验鸡临床症状和发病死亡情况,弱毒活疫苗491对SDIB821/2012的保护率为90%,而H120和MA5对SDIB821/2012的保护率分别仅为40%和33%。攻毒后各免疫组喉头、泄殖腔棉拭样品以及气管、肺脏和肾脏组织均可检测到病毒,表明3种IB疫苗均不能对SDIB821/2012提供完全的免疫保护。

EtMIC-2表达产物对鸡三种艾美耳球虫的保护试验

鸡艾美耳球虫病由隶属顶复门7种艾美耳球虫（E.tenella、E.necatrix、E.acervulina、E.maxima、E.brunetti、E.praecox、E.mitis）引起,常混合感染,有很高的发病率和死亡率,轻者则影响鸡的增重和饲料转化率。微线是顶器的结构之一,位于子孢子和裂殖子前端,EtMIC-2是其50 kDa左右的酸性蛋白,在虫体入侵时表达,该蛋白可能在虫体入侵时起重要作用。用Pet载体经原核表达该蛋白,7、14日龄经口服、肌注不同剂量工程活菌和菌体裂解蛋白二次免疫鸡,免疫后1周用3种艾美耳球虫（E.tenella、E.acervulina、E.maxima）攻虫,发现相对增重率随菌体蛋白含量增加呈现增强趋势,E.tenella攻虫表现最有效的是口服PBS200μg活菌组为96％,E.ac-ervulina、E.maxima分别为96％、87％。从攻虫后7～14 d卵囊排出曲线看,每天排卵囊数和相对卵囊产量均低于红对照;相对卵囊产量,E.tenella攻虫后,口服PBS 200μg活菌组最低,为17％,E.acervulina、E.maxima攻虫后,口服PBS 200μg裂解菌组最高,分别为90％、93％。从增重与卵囊产量来看,EtMIC-2对E.tenella、E.ac-ervulina和E.maxima这3种球虫有一定的免疫保护作用,尤其口服200μgPBS活菌时,对E.tenella保护作用最明显。说明来源于E.tenella子孢子的Etmic-2基因的表达产物对E.tenella、E.

核酸酶保护试验在黄瓜花叶病毒株系鉴定中的初步应用

采用黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）亚组Ⅰ株系Ｆｎｙ－ＣＭＶＲＮＡ＿２的１２０９～１６２６核苷酸片段和亚组Ⅱ株系Ｌｓ－ＣＭＶＲＮＡ＿２的２００２～２４３３核苷酸片段的ｃＤＮＡ克隆，体外转录，同时掺入￣（３２）Ｐ获得负链ＲＮＡ探针，与纯化的番茄和甜椒上的ＣＭＶ中国分离物的ＲＮＡ杂交，结果表明：ＣＭＶ番茄和甜椒中国分离物与Ｆｎｙ－ＣＭＶ的核苷酸有高度同源性，隶属于Ｆｎｙ－ＣＭＶ为代表的亚组Ⅰ株系。并利用Ｋ－ＣＭＶ株系（亚组Ⅰ，源于中国）的ＲＮＡ＿２全长ｃＤＮＡ克隆的两个ＥｃｏＲＩ位点间的核苷酸序列（１６５７～２１２５ｎｔ）作探针，与上述两种ＣＭＶ中国分离物的ＲＮＡ杂交，进一步比较分析了这两个分离物和Ｋ－ＣＭＶ株系的关系。讨论了核酸酶保护法在ＣＭＶ株系鉴定中的作用。

流行性出血热病毒浙10株对野鼠型和家鼠型毒株的交叉保护试验

本文将流行性出血热(EHF)病毒Z_(10)株制成灭活疫苗免疫沙鼠和活毒感染沙鼠这两种方法使沙鼠获得免疫。经一个月后,用EHF病毒野鼠型毒株(A_9、Z_5)和家鼠型毒株(Z_(30)、K_(24))进行攻击,以观察免疫沙鼠对其它EHF病毒株的交叉保护情况。结果表明,经上述两种方法获得免疫的沙鼠,对家鼠和野鼠型毒株的攻击均具有良好的保护作用。

不同地区分离的霍乱0139菌株交叉保护力试验

本文对得自不同地区的四株０１３９菌株做了毒力、免疫力及交叉免疫力试验；四个地区０１３９菌株免疫小鼠后血清ＩｇＧ、肠液ｓＩｇＡ抗体滴度的比较以及０１群霍乱与０１３９型霍乱的交叉保护力试验。结果表明：０１群霍乱与０１３９型霍乱无交叉免疫力。０１群霍乱菌苗对０１３９型霍乱弧菌基本无保护作用；四株菌株的自身毒力基本相同。３＃株免疫力高于其它株，用３＃株免疫后能抵抗２＃、３＃及５＃株的感染。四株菌株免疫小鼠后的血清ＩｇＧ、肠液ｓＩｇＡ抗体滴度亦无明显差异。

仔猪黄痢K88-K99-987p-F41多价菌毛混合油乳剂灭活疫苗的制备及小鼠免疫保护试验

根据我国仔猪大肠杆菌性腹泻流行的实际情况 ,用产菌毛粘附因子的野生分离菌株HN2 0 0 1(K88ab)、HN2 0 0 2 (K88ac)、HN2 0 0 3(K88ad)、HN2 0 0 4 (K99)、C83915 (987p)及C836 2 1(F4 1)提取菌毛制成 5批多价菌毛混合油乳剂灭活苗 ,5批多价灭活疫苗对小鼠的平均保护率达 95 0 % (38 4 0 )。

特高压直流输电工程单极保护降压试验研究

在向家坝至上海(简称向上)工程系统调试期间,针对送端(复龙站)系统较弱的情况,对送端系统电压控制进行研究,对单极大负荷运行可能发生的事故及防止对策提出预案。对单极额定负荷运行保护降压试验过程中直流电压、电流和触发角等参量地变化过程进行分析,剖析试验过程中直流控制的调节特性,对交/直流过电压进行分析,提出送端(向家坝侧)无功功率和电压控制参数,并进行临时整定,以确保单极大负荷运行期间送端系统电压的稳定和单极额定负荷70%降压运行试验的成功。通过实测的直流参数,对换流站无功功率和母线电压的计算分析,验证了试验前系统计算结果的正确性,并对送端电压稳定行进行分析,指出整流侧直流电压和电流剧烈波动不会危及系统的安全稳定运行。

反向遗传操作技术产生全禽源致弱的H5N1亚型禽流感病毒的免疫保护性试验

利用反向遗传操作技术产生致弱的8基因全禽源的H5N1亚型禽流感病毒rgF-H5△N1,经甲醛灭活制成油苗免疫SPF鸡和有母源抗体的商品鸡。比较拯救的重配病毒rgF-H5△N1和野毒H5N1亚型禽流感病毒油苗免疫后的抗体应答水平、攻毒后发病率和死亡率等指标,评价其免疫和交叉免疫保护作用。结果表明:反向遗传操作技术为构建新型的流感疫苗株提供了更好的方法。

鸭疫里默氏杆菌菌种保存试验及蜂胶苗的保护试验

鸭疫里默氏杆菌感染已成为危害养鸭业最严重的 细菌性疾病之一，其病原生长营养 要求较高，普通方法不易保存；目前防制该病主要采用药物和（或）疫苗。本文对几种保存 方式鸭疫里默氏杆菌的活力和毒力进行初步试验，并检测了自行研制的蜂胶苗的保护率。结 果表明将带菌鸭血放于－２０ ℃冰箱，鸭疫里默氏杆菌的活力和毒力可保持１７个月以上； 应用研制的蜂胶苗对雏鸭免疫两次可获得较好的保护力，达１００％（１０／１０）。

岩体锚固及安全保护试验研究——以库木吐拉千佛洞为例

岩体严重风化、垮塌和裂隙发育是库木吐拉千佛洞普遍存在的地质环境病害,风化岩体锚固机理的研究和灌浆材料的优选是对洞窟实施有效安全保护的关键。现场试验结果表明:锚固体的破坏产生于岩体与灌浆体的接触面,抗拔力与锚固长度无明显线性关系,存在最佳锚固参数;风化岩体具有良好的可灌性,实现裂隙灌浆的重点只在于材料性能的确定。笔者认为在此基础上进行保护施工必须综合考虑特定环境条件,充分比较材料的优劣,恰当地选择锚固技术和引用PS及PS复合材料。

地鼠保护力试验检测流行性出血热疫苗的效力研究

应用金黄地鼠作动物模型测定国内外四种流行性出血热灭活疫苗的保护率，并测定相应的中和抗体进行比较，发现四种疫苗对动物的保护率均较明显优于其中和抗体水平。说明保护力试验能较全面反映ＥＨＦ疫苗的效力和质量水平。

恶性疟原虫多次部分换血猕猴模型的建立及在疫苗宿主保护性试验中的初步应用

本实验以多次部分换血的方法 ,使恶性疟原虫在猕猴体内进行短期的生长发育 ;并以此模型进行了抗疟疫苗保护性试验 ,以探索此猴模在疟原虫研究中的应用。结果显示 ,恶性疟原虫在多次部分换血猕猴模型中生长良好 ;在猴模外周血中可以见到除疟原虫配子体外的各种虫体形态 ;原虫生存期为 13～ 14d;3只实验猴最高感染率分别达到 8.6 %、6 .5 %和 5 .4% ;接种了恶性疟原虫复合多价疫苗 -痘苗病毒的猕猴 ,在疟原虫的攻击试验中受到了保护。结果表明 ,通过多次部分换血的方法可建立起供短期实验的恶性疟原虫 -猕猴模型 ;