化学药物临床药动学试验样品再分析的一般要求及解读

化学药物临床药动学试验的生物样品再分析(incurred sample reanalysis,ISR)于1990年水晶城生物分析方法研讨会上首次被提出,经过20余年的发展已成为生物样品分析方法学确证的重要组成部分。2009年欧盟发布的生物分析方法学确证指南、2013年美国FDA发布的生物分析方法学确证指导原则草案均对ISR提出了明确要求,我国2015版药典附录也对ISR提出了相应要求。本文拟重点讨论ISR的试验设计及实施过程中的相关问题,包括ISR策略的背景、ISR的试验设计及ISR的结果评价与分析,以期为临床研究工作者提供参考。

生物样品定量分析方法验证中试验样品再分析的意义和对策

目的介绍试验样品再分析(incurred sample reanalysis,ISR)的法规要求、意义和对策。方法综述国际上关于试验样品再分析的指导原则、研究论文和统计数据,通过实例来总结试验样品再分析失败的原因及预防措施。结果与结论试验样品再分析有助于改善生物分析方法的重现性,已经成为法规生物样品分析的一项重要内容。采取适当的对策,可以防止试验样品再分析失败造成的损失。

LC-MS/MS生物分析中试验样品再分析失败后的调查和解决方案

试验样品再分析(ISR)如今已普遍用于法规依从的生物分析实验室,是评估生物分析方法的重现性、可靠性和准确度的基本措施之一。虽然统计数据显示,LC-MS/MS生物分析中95%以上的ISR符合接受标准,然而失败时依然值得进行充分的科学调查与评估,以发现其根本原因。本文从稳定性问题、人为因素、样品处理过程、方法固有缺陷等方面对小分子化学药物的ISR失败原因进行分类分析,并举例讨论ISR影响因素及改进措施,列出ISR失败后需查根溯源,重测ISR,撰写调查报告并分享讨论等调查流程,并就如何降低ISR失败率提出法规依从,充分了解化合物特性,使用真实样品考察稳定性的解决方案,最后对其前景进行展望。

生物样品分析中的试验样品再分析研究进展

生物样品分析中,由于基质成分的不同、蛋白结合的差异、已知和未知代谢物的转化、样品的不均一性和伴随服用的其他药物等原因,方法验证过程中使用的标准曲线和质控(QC)样品不能完全地模拟试验样品。这些因素在试验样品的储存、处理及检测过程中,可能会影响试验样品中待测物测定的准确度和精密度,因此需要采用试验样品再分析评估生物样品分析方法的重现性和准确性。本文首先介绍试验样品再分析的概念及在生物样品分析中发展的历程。然后对其重要性、实施规范、应用范围、样品选择、可接受标准、结果调查等方面进行综述,并对其失败原因进行分析和讨论,举例具体分析其主要的影响因素及如何利用其结果改进生物分析方法的质量,最后对其应用前景和发展方向进行展望。

LC-MS/MS生物样品分析方法的应用与评价

选择9个已验证的LC-MS/MS方法,从分析批、试验样品再分析(ISR)角度,对生物样品分析方法在实际样品检测应用过程中的QC样品合格率、ISR偏差进行分析和评价,以期发现潜在问题,建立合适评价方法,为日后方法建立、应用和质量管理及质量控制提供依据。结果表明,通过精心实验设计、严格过程管理、科学方法验证的生物分析方法在实际应用中的偏差是可控的。从质量管理和质量控制的角度,应重视生物分析方法在实际应用时的QC样品合格率、ISR样品的合格率和偏差平均值。对于合格率低或偏差大的方法应积极探究原因。

生物样品分析中常见的代谢物反向转化及避免策略

已知和未知代谢物的反向转化可能影响到生物分析的准确度和精密度,由于这种反向转化是由代谢物引起的,而方法学考察的研究样品是由空白基质制备的,其中不存在代谢物,最终不能反映出是否存在代谢物反向转化的情况。生物样品中分析物的不稳定性将使分析验证复杂化,有些原形药物/代谢物的不稳定性是不容易预测的,这就需要在方法开发和验证的早期阶段进行必要的评估,以确认代谢物逆转为母体分析物的可能性。

LC-MS生物分析过程中内标变异度的建议及案例分析

采用液相色谱串联质谱(LC-MS)方法进行生物分析时,通常基于分析物与内标响应的比值进行定量,内标预期能够补偿生物分析操作流程中目标分析物的变异,因此内标响应变异度对于确保LC-MS生物分析的准确性和可靠性至关重要。本文综述了美国食品药品监督管理局、欧洲药品监督管理局、中国药品监督管理局以及欧洲生物分析论坛对液相色谱串联质谱生物分析过程中内标响应变异度的基本要求和建议,并收集相关审评案例和研究文献,希望对生物分析方法开发和优化提供建议和参考。