黄芩素诱导体紫外吸收清除O_2^-和抑制酪氨酸酶性能的研究

从中药黄芩中提取了黄芩素诱导体（SD），并经纯化后对其紫外吸收、清除超氧阴离子自由基（O2-）和抑制酪氨酸酶的作用进行试验。结果为：在190nm～400nm范围内各波长都有强吸收，清除（O2-）的C50为0．13mg／L,抑制酪氨酸酶的C50为0．06g／L。提示SD可作为一种高效多功能的防晒添加剂。

黄芩素诱导体抑制酪氨酸酶作用的动力学研究

黄芒素诱导体对酪氨酸酶的抑制作用是竞争性抑制，其ｋｉ为０．０５８ｍｍｏｌ／Ｌ。对Ｏ＾－２的清除作用和作为竞争性底物是黄芒素诱导体竞争性抑制酪氨酸酶的两个重要机制。提示清除Ｏ＾－２而抑制酪氨酸酶是多羟基黄酮的共性，Ｏ＾－２的清除剂也将都是酪氨酸酶的抑制剂。

洛伐他汀对醛固酮诱导体外新生大鼠心肌成纤维细胞NO的调控

心肌成纤维细胞（cardiac fibroblasts,CFs）增殖在心肌纤维化中起重要作用。已有报道CFs具有诱导型一氧化氮合酶——一氧化氮（i NOS-NO）系统,其合成的NO是一种重要的抗心肌纤维化因子[1]。他汀类药物对醛固酮诱导的CFs的i NOS-NO系统活性是否有调控作用？尚未见报道。本文实验观察了洛伐他汀干预条件下大鼠CFs的i NOS-NO系统活性的变化，为心肌纤维化的防治提供新的思路。

肝素诱导体外低密度脂蛋白沉淀疗法的护理

目的 分析肝素诱导体外低密度脂蛋白-载脂蛋白-a-纤维蛋白原沉淀(Heparin-induced Extracorporeal LDL-LP(a)-fibringen Precipitation,HELP),在治疗难治性高脂血症中的疗效。方法采用HELP系统治疗226例难治性高脂血症患者,检测治疗前后血脂水平,进行术前心理护理、术后健康宣教。结果 所有患者均能良好耐受HELP治疗,治疗后总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)下降了30％～50％,对高密度脂蛋白(HDL)影响不大。结论HELP系统对治疗难治性高脂血症,不仅安全而且有效。

诱导体对304不锈钢化学镀Ni-P合金镀层的影响

为研究诱导体在304不锈钢化学镀镍磷合金中的作用,采用对比试验,对镀层的机械性能进行研究。在施镀过程中用铝丝和铜丝作为诱导体,分别与不锈钢试样发生接触,诱导氧化还原反应发生,使镍磷合金在基体上不断沉积。试验测试了镀层的显微硬度和耐蚀性能,并通过金相观察镀层的微观形貌。结果表明:铝丝、铜丝作为诱导体都能使不锈钢基体获得厚度均匀、表面平整光洁的N i-P镀层;但分析两种诱导体作用下的镀层硬度和耐腐蚀时间,可以得出由铝丝诱导作用得到的镀层比铜丝作用得到的镀层耐蚀性能好,镀层膜厚较大,硬度较高。

大花蕙兰类原球茎薄切片高频诱导体系的建立

通过对大花蕙兰离体诱导类原球茎几个主要影响因素的研究,构建优良、高效的离体诱导体系。研究表明,不同外植体类型再生能力有显著差异,其中以类原球茎(protocorn-like body,PLB)横切片(transverse thincell layers,tTCLs)为外植体可获得最高的PLB再生频率,叶片再生频率及数量最低。不同激素配比影响tTCLs的再生能力,其中在1/2 MS+TDZ 1.0 mg/L+KT 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L上最高诱导频率为91.20%。在上述培养基中添加3.0 mg/L AgNO3可提高tTCLs上PLBs的形成,但作用不显著。可见,以tTCLs为外植体诱导大花蕙兰PLBs切实可行。

根管水门汀诱导体外培养成骨细胞周期的改变

牙髓组织严重损伤途径有外伤、医源性操作不当,更主要是由龋导致牙髓的细菌感染.为了保护很尖周组织和保留牙齿,去除坏死和感染组织是非常必要的.这个过程包括把自发产生的脓毒腐败根管的有机物去除,而后消毒,在不损伤根尖组织的情况下,用根充剂填充.根管封闭剂阻断了根尖周组织和口腔的通路,使根组织得以恢复正常及骨样牙骨质形成生理性封闭.因此,水门汀除了有粘固性、容量稳定性、不溶性、抗菌性外,还必须有良好的耐受性,以防止其达到根尖组织,且不能防碍牙周组织的治愈过程,所含有的抗菌物质无论如何不可损伤宿主细胞.根据大多数生产厂家声明,由于技术上的原因或解剖上的因素(如开放根尖),万一水门汀泄出根管外,巨噬细胞会完全将其吞噬而不会产生任何副作用.

美国科学家利用重组蛋白诱导体细胞生成干细胞

近日，美国Scripps研究所、ProteomTech公司和德国马克斯·普朗克分子生物医学研究所等机构的科研人员成功利用重组蛋白诱导体细胞生成多能干细胞。业内专家预测：这项技术将来会被广泛应用于白血病造血干细胞移植、糖尿病胰岛细胞移植以及各种坏死脏器的自体器官移植等领域。这项科研成果发表在近期出版的《细胞-干细胞》杂志。

奶牛日粮中补饲诱导体RU应用效果观察

奶牛日粮中补饲诱导体ＲＵ应用效果观察○北京市饲料科学技术研究所（１０００５４）刘忠贤李兴胜○中国农业机械化研究院中试奶牛场（北京１０２２０６）段虎卿○鸿恩国际贸易有限公司（北京１０００２７）徐茂挥石小军由于各国在引进奶牛改良的同时，同步改善饲养管理，...

人诱导多能干细胞来源功能性胰岛β细胞的体外定向分化方法的建立

1型糖尿病是由胰岛β细胞功能受损、胰岛素分泌不足所致,目前,主要通过外源性胰岛素补充来治疗,但外源性胰岛素无法精准调控血糖,严重低血糖可危及生命。胰岛移植是一种替代疗法,但面临器官供体不足和异种来源胰岛β细胞存在人畜共患病交叉感染风险的问题。因此,获得足量且安全的胰岛β细胞是1型糖尿病细胞治疗面临的难题。本研究旨在通过人诱导多能干细胞(human induced pluripotent stem cells,hiPSCs)在体外向胰岛β细胞分化,提供一种潜在的1型糖尿病治疗新策略。为实现这一目标,我们采用了结合2D和3D培养系统的分化策略,模拟胰岛β细胞的体内发育环境,并使用多种生长因子调节在胰腺发育和β细胞分化中发挥重要作用的关键信号包括Notch信号通路(Notch signaling pathway)、Wnt信号通路(Wnt signaling pathway)、TGF-β/Smad信号通路(TGF-β/Smad signaling pathway)等,在体外将hiPSC定向诱导分化至胰岛β细胞。结果显示,在2D、3D结合的培养条件下,分化过程中定型内胚层细胞,胰腺祖细胞,胰腺内分泌细胞及胰岛β细胞阶段的特异性基因的表达显著提高(P<0.05),并在胰岛素含量及葡萄糖刺激后表现出显著增强的胰岛素分泌能力(P<0.05)。总之,本研究成功建立了一种从hiPSC到功能性胰岛β细胞的分化策略,为1型糖尿病提供了一种新的细胞治疗途径。这种方法不仅为研究胰岛β细胞的发育生物学提供了新的工具,也为临床应用提供了一种潜在的胰岛β细胞来源,有望解决现有治疗方法的局限性。

体外诱导小鼠胚内生血内皮细胞向造血分化的不同培养体系的比较研究

目的:比较二维平铺法和三维悬滴法两种培养体系对小鼠胚胎期生血内皮细胞体外诱导生成造血产物的支持作用。方法:分别利用二维平铺法和三维悬滴法将流式细胞术分选的造血干细胞潜能的生血内皮细胞PK44(CD41-CD43-CD45-CD31^(+)CD201^(+)Kit^(+)CD44^(+))群体与OP9-DL1-GFP基质细胞共孵育6 d后,在显微镜下观察两种培养体系产生造血产物的形态特点;利用流式细胞术分析两种培养体系孵育后的造血产物,并统计分析造血产物的比例和绝对数量;分别对两种培养体系共孵育后的造血产物进行造血细胞集落形成单位培养(colony-forming unit culture,CFU-C)实验,并对不同形态的细胞集落进行计数。结果:(1)利用二维平铺法形成的造血细胞平铺或悬浮于基质细胞上,而利用三维悬滴法共孵育后的产物形成了以基质细胞为中心,造血细胞黏附在周围的细胞聚集体。(2)二维平铺法产生更多CD45^(+)造血细胞;三维悬滴法对造血产物的分化具有谱系偏向性,更有利于肥大细胞的分化。(3)二维平铺法诱导生血内皮的分化产物在体外CFU-C实验中可以产生更多的造血集落。结论:二维平铺法更支持小鼠胚内生血内皮细胞体外诱导产生CD45^(+)的造血细胞以及有集落形成能力的造血干祖细胞。

体外诱导耐药及相关基因检测

[目的]了解常见致病菌产生耐药性后耐药基因和毒力基因的变化。[方法]采用微量肉汤二倍稀释法测定21种临床常见抗生素对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等5种标准菌株的最小抑菌浓度,选取敏感药物进行体外诱导耐药试验,采用PCR法检测耐药基因和毒力基因。[结果]5个标准菌株均对氨基糖苷类药物敏感;大肠杆菌对四环素类药物敏感;鼠伤寒沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌和肺炎链球菌对喹诺酮类药物敏感;金黄色葡萄球菌对克林霉素敏感。与标准菌株相比,氨基糖苷类和四环素类耐药菌株中均检测出新出现的相关耐药基因;喹诺酮类耐药基因parE在多杀性巴氏杆菌的标准菌株和耐诺氟沙星菌株中检测出,gyrB基因仅在肺炎链球菌的标准菌株和耐氧氟沙星菌株中检测出。在大肠杆菌中均检测出CS31A毒力基因,此外标准菌株中检测出fimH基因,耐多西环素菌株中检测出afa基因;多杀性巴氏杆菌标准菌株未检测出毒力基因,耐药菌株中均检测出oma87和tbpA基因;而鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌仅在标准菌株中检测出毒力基因。[结论]说明氨基糖苷类抗生素更容易诱导菌株产生耐药基因,而毒力基因与耐药基因无明显的相关性。细菌获得耐药性后,其毒力基因变化因菌株不同存在差异。

前体物质和化学诱导子对云南红豆杉细胞生长和产生紫杉醇的影响

研究了几种前体物质和化学诱导子对云南红豆杉细胞生长和产生紫杉醇的影响 .结果表明 ,在培养第 1 2d向培养基中添加 1mmol·L-1或 2mmol·L-1苯丙氨酸、5mmol·L-1丙酮酸钠和 1g·L-1牛儿醇可显著提高细胞中紫杉醇的含量 ,同对照相比 ,紫杉醇产量分别增加了 4 0 .0 %、95.7%和 1 2 1 .3 % ;使用高盐渗透胁迫剂 ( 3 0 0mmol·L-1)、高糖渗透胁迫剂 ( 2 5g·L-1蔗糖和 2 5g·L-1甘露醇 )、桂皮酸 ( 3mmol·L-1)和硫酸钒酰( 1 0mg·L-1)可显著促进细胞中紫杉醇的合成 ,同对照相比 ,紫杉醇产量分别增加了 2 3 .0 %、88.0 %、4 2 .8%和 1 0 3 .0 % .

金冠苹果成熟胚离体诱导四倍体的研究

以自然授粉的‘金冠’苹果种子为材料,研究了秋水仙素处理成熟胚离体诱导四倍体技术和嵌合体分离方法。结果表明:将完整胚在0.5%秋水仙素+1%二甲基亚砜的混合溶液中暗处理48h,然后接种在MS+TDZ 1.0 mg·L^(-1)+IBA 0.5 mg·L^(-1)+蔗糖30 g·L^(-1)+琼脂6g·L^(-1)的再生培养基中,变异率高达10.6%。与二倍体相比,四倍体试管苗生长缓慢,节间变短,叶片增大,叶形指数趋小化,气孔密度降低,保卫细胞增大。经压片法鉴定茎尖染色体数和流式细胞仪分析DNA含量,表明多数变异植株为同质四倍体。利用叶片离体再生器官技术,从诱导获得的嵌合体植株中分离出同质突变体。

非洲菊未授粉胚珠的离体诱导和植株再生

通过不同培养基及培养条件的筛选,离体诱导12个品种的非洲菊未授粉胚珠的结果表明:MS中的大量元素+ Heller中的微量元素+1/2铁盐+0.2mg·L^(-1)6-BA+0.1mg·L^(-1)IAA较适宜于非洲菊未授粉胚珠愈伤组织的诱导和芽的再生,8个品种中以品种‘E19’诱导愈伤组织的诱导率最高(为23.1%);5个品种可再生形成不定芽,再生率为4.8%-19.6%。用根尖染色体鉴定法鉴定再生的23个植株的倍性的结果显示,21.7%为二倍体,43.5%为单倍体,34.8%为混倍体.

茶多酚体外诱导人肺癌细胞凋亡的机理研究

目的探讨茶多酚诱导人肺癌细胞的凋亡作用及其相关机理。方法采用MTT法、激光共聚焦显微镜和流式细胞仪技术 ,体外观察茶多酚对肺癌细胞凋亡及相关蛋白表达的影响。结果不同浓度的茶多酚 (5 0、10 0、2 0 0、4 0 0 μg/ml)对肺癌细胞均有抑制作用 ,呈剂量依赖关系 ,抑制率 (% )分别为 2 8.6 9± 1.2 7、4 6 .19± 1.79、6 4.6 1± 1.2 9、75 .90± 1.96。在细胞增殖受到明显抑制时 ,细胞被阻滞于G0 /G1期 ,不能进入S期及G2 /M期 ,同时诱导肺癌细胞凋亡 ,凋亡率 (% )分别为 4 .76± 0 .11、5 .78± 0 .38、10 .0 6± 0 6 7、2 4 .4 4± 0 .4 4。激光共聚焦显微镜双荧光标记可见细胞凋亡的形态学改变 ,与对照组比较 ,随着茶多酚浓度的增高 ,细胞内Ca2 +浓度、AnnexinV表达和蛋白酪氨酸磷酸酶基因 (PTEN)蛋白表达逐渐增高 ,细胞周期调控蛋白D1蛋白表达水平则呈逐渐下降。结论茶多酚可诱导人肺癌细胞的凋亡 ,其作用机制与改变细胞内Ca2 +浓度。

盾叶薯蓣组织培养及微块茎的离体诱导

用 3种不同的繁殖技术进行盾叶薯蓣组织培养 ,其中以离体诱导微块茎的形成为最有效的方法 .BA与 KT质量浓度分别为 4.0～ 8.0 ,1 .0～ 2 .0 mg/ L时 ,最有利于盾叶薯蓣微块茎的形成 ,将之接种到含有

花生体细胞胚胎诱导和植株再生研究

以花生成熟种胚为外植体 ,在 MS附加不同激素 ( 2 0 mg/ L 2 ,4 -D或 5mg/ L Picloram)的培养基上黑暗培养 ,胚性愈伤组织发生率和产胚量无明显差异。在 MS+5mg/ L Picloram培养基上 ,胚性愈伤组织发生率和产胚量与品种类型有关 ,珍珠豆型花生品种胚性愈伤组织发生率和产胚量高于普通型花生品种。体胚在MS+1 0 mg/ L BA培养基上小苗再生达 36.3%～ 77.8%。再生小苗在 MS+0 .3mg/ L NAA培养基上生根后 ,移栽温室能正常生长并开花。

华东葡萄广西-2花药胚状体诱导与再生植株的研究

为了提供葡萄转抗病基因功能验证及遗传转化研究的再生技术体系,以中国野生华东葡萄(V.pseudoretic-ulata)感白粉病株系广西-2的花药为试材,进行了体细胞胚诱导与再生体系的建立,并探讨了次生胚的诱导与畸形萌发胚状体正常成苗的方法。结果表明,广西-2花药在B5+6-BA4.0mg·L-1+2,4-D0.7mg·L-1+CH1.0g·L-1+PVP1.0g·L-1+蔗糖30.0g·L-1培养基上继代3个月,可诱导胚性愈伤组织产生;B5+6-BA4.0mg·L-1+CH1.0g·L-1+PVP1.0g·L-1+蔗糖15.0g·L-1培养基有利于胚状体形成;胚状体在1/2B5+CH1.0g·L-1+PVP1.0g·L-1+蔗糖15.0g·L-1的液体培养基比相同成分固体培养基中早萌发14d左右;已萌发胚状体在WPM+IBA0.15mg·L-1+AC0.5g·L-1+蔗糖15.0g·L-1培养基上可以生根成苗;MS+6-BA1.5mg·L-1+IBA0.2mg·L-1+蔗糖30.0g·L-1培养基有利于畸形萌发胚状体正常成苗。发育早期胚状体在B5+6-BA1.0mg·L-1+2,4-D0.5mg·L-1+CH1.0g·L-1+PVP1.0g·L-1+蔗糖30.0g·L-1培养基上可形成次生胚。

石榴田间愈伤组织诱导及芽再生体系的建立

【目的】建立高效的石榴田间愈伤组织途径芽再生技术体系。【方法】以‘突尼斯’软籽石榴为材料,研究不同激素浓度、激素组合和枝条粗度等对石榴田间愈伤组织形成及芽再生的影响。【结果】4 mg·L-1TDZ+2 mg·L-1AgNO3+0.5mg·L-1GA3+1 mg·L-1KT+3 mg·L-16-BA+0.3 mg·L-1IBA处理效果最佳,出芽较早,出芽数较多。另外,枝条粗度对出芽影响不大。因此,可在减少树体伤害的前提下,选择茎粗1.0~2.0 cm的枝条诱导愈伤组织形成及芽再生。【结论】成功建立了石榴田间愈伤组织形成及芽再生技术体系,为石榴嫁接扩繁、遗传转化、诱变育种等提供良好的材料基础。