TGF-β、rhBMP-2体外诱导下颌突外胚间充质细胞向平滑肌细胞分化

目的 :探讨TGFβ、rhBMP - 2体外诱导外胚间充质细胞向平滑肌细胞分化的能力。 方法 :取妊娠 12 .5d胎鼠第三代下颌突外胚间充质细胞 ,分别在含 60、10 0mmol/L的TGF - β和 1.6、3 .2mmol/L的rhBMP- 2的DMEM/F12中培养。相差显微镜下观察细胞的形态变化 ,免疫组化鉴定细胞性质。结果 :培养 2d ,60pmol/L的TGF - β组细胞形态发生明显变化 ,细胞变得大而扁平 ,培养 4d ,免疫组化鉴定约 70 %的细胞分化为平滑肌细胞。rhBMP - 2组细胞形态未见明显改变 ,1.6nmol/L组免疫组化鉴定约 5 %的细胞分化为平滑肌细胞 ,未能诱导分化出神经元细胞。未加LIF的对照组细胞出现向平滑肌细胞的自然分化。结论 :TGFβ、rhBMP

低氧诱导因子-1α对骨形态发生蛋白2诱导的干细胞成软骨、成骨分化的影响

目的探讨低氧通路中关键转录调控因子低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)对骨形态发生蛋白2(bone morpho-genetic protein 2,BMP2)诱导干细胞骨、软骨分化的影响,阐明HIF-1α在干细胞成骨、软骨分化中的作用。方法构建相应腺病毒AdBMP2、AdHIF-1α、AdGFP,单独或共同感染干细胞,Western blot法检测成软骨、成骨分化关键转录调控因子Sox9、Runx2的表达,Real-time PCR法检测成软骨、成骨分化标志物COL2A1、aggrecan、COL1A1和ALP mRNA表达,Alcian blue、ALP及Alizarin red S染色检测软骨细胞外基质及骨基质钙盐沉积情况。进行干细胞裸鼠皮下移植,观察不同处理组形成骨块的组织结构情况,探讨HIF-1α对BMP2诱导干细胞成骨、软骨分化的影响。结果诱导分化后第1、3天,BMP2+HIF-1α组Sox9蛋白表达明显高于BMP2单独处理组,而BMP2+HIF-1α组Runx2蛋白表达明显低于BMP2单独处理组。诱导分化后第7、9天,BMP2+HIF-1α组COL2A1、aggrecan mRNA相对表达明显高于BMP2单独处理组(P<0.05),而BMP2+HIF-1α组COL1A1、ALP mRNA相对表达明显低于BMP2单独处理组(P<0.05)。Alcian blue染色发现BMP2+HIF-1α组软骨细胞外基质分泌多于BMP2单独处理组,染色更深;ALP染色发现BMP2+HIF-1α组ALP的活性弱于BMP2单独处理组;茜素红染色发现BMP2+HIF-1α组较BMP2单独处理组骨基质钙盐沉积更少;体内试验组织学观察见BMP2+HIF-1α组软骨成分更多,骨化不明显,BMP2单独处理组软骨成分少,软骨内骨化更明显。结论HIF-1α明显增强了BMP2诱导的干细胞成软骨分化,抑制了成骨分化及软骨内骨化,维持了软骨分化表型。

2型糖尿病外周血内皮祖细胞的诱导分化及影响因素的研究

目的观察2型糖尿病(T2DM)外周血内皮祖细胞(endothelialprogenitorcell,EPC)在体外的分化增殖能力及影响因素。方法取20例T2DM无并发症患者、19例T2DM合并血管并发症患者和21例对照人群外周血EPC培养,观察细胞形态学变化并计数,用流式细胞仪检测贴壁细胞的特异性标志。结果糖尿病血管并发症组培养获得的EPC和EPC集落低于糖尿病无并发症组(P<0.05)和对照组(P<0.01)。EPC数量与SBP及FPG呈负相关(R=-0.266,P<0.05;R=-0.619,P<0.01),糖尿病人EPC集落生成数量与HbA1c水平呈负相关(R=-0.749,P<0.05),与糖尿病病程年呈负相关(R=-0.406,P<0.01)。结论FPG和SBP与EPC的增殖分化有关,T2DM外周血EPC数目减少,与HbA1c、SBP及病程相关。

2,4-D和干燥处理对小麦成熟胚愈伤组织诱导与分化的影响

为解决西北地区小麦栽培品种高频再生体系建立过程中的瓶颈问题,以不同品种、不同2,4-D浓度及对愈伤组织的不同干燥处理时间为变量,研究不同处理对小麦栽培品种成熟胚愈伤组织诱导与分化的影响。结果表明,甘春24、甘春20、西旱1号在2,4-D浓度为2.0～5.0mg·L-1时,愈伤组织诱导与分化较好,2,4-D浓度为5.0mg·L-1以上愈伤组织容易褐变,分化能力减弱,成苗率低;在转入胚性诱导培养基前,12h的干燥处理能促进各品种愈伤组织分化;通过正交设计分析,甘春24在2,4-D浓度为2.5mg·L-1,12h干燥处理条件下所建立的再生体系最好,是转基因中良好的受体;甘春20在2.0mg·L-1 2,4-D、12h干燥处理下愈伤组织形成与分化较好;西旱1号经3.0mg·L-1 2,4-D、12h干燥处理,能显著提高其愈伤组织的分化。

猪脂肪源间充质干细胞诱导成脂分化及Krüppel样因子2的表达

目的旨在阐明猪脂肪源间充质干细胞(AMSCs)在诱导成脂分化过程中Krüppel样因子2(KLF2)的表达模式。方法采用I型胶原酶消化法处理猪脂肪组织,经原代和传代培养分离、纯化和扩增AMSCs,用流式细胞仪检测AMSCs纯度,在倒置显微镜下用形态学和油红O染色法检测AMSCs的成脂分化,用实时定量PCR检测KLF2的表达模式,并与过氧化物酶体增殖物激活受体2(PPARγ2)的表达进行了比较。结果分离、纯化的AMSCs,其间充质干细胞表面抗原CD29、CD44和CD105表达量分别为91.7%、95.1%和95.6%,而造血干细胞表面抗原CD34表达量仅为3.39%;在诱导分化2d后,个别细胞质中出现小脂滴,且含脂滴的细胞数量和脂滴量随诱导时间的延长而增加,在诱导分化第18天成脂分化率达48.2%;在诱导分化第2天、第8天和第16天,KLF2的表达量分别为1.84±0.206、1.07±0.072和0.83±0.095,而PPARγ2 mRNA的表达量分别为3.06±0.542、13.22±0.5736和15.11±1.073。结论获得纯度较高的AMSCs,具有良好的成脂分化潜能,KLF2的表达量在成脂分化早期的前脂肪细胞阶段增加,成脂分化开始后逐步减少,KLF2作为脂肪分化负调控转录因子而发挥作用。

人参皂甙Rh_2体外对小鼠黑色素瘤细胞的分化诱导作用

体外实验证明人参皂甙Ｒｈ＿２在１０μｇ·ｍｌ￣（－１）的浓度下能明显抑制Ｂ＿（１６）细胞的生长，并呈浓度依赖性，其ＩＣ＿（５０）为４．１μｇ·ｍｌ￣（－１）。Ｒｈ＿２在１０μｇ·ｍｌ￣（－１）浓度下对Ｂ＿（１６）细胞有较强的分化诱导作用，表现为黑色素生成能力明显增加；形态向上皮样细胞分化；细胞呈网状结构；黑色素颗粒增多，生长变缓慢。细胞动力学研究结果表明，Ｒｈ＿２可使Ｂ＿（１６）细胞阻断在Ｇ＿１期。

三七总皂苷对TGF-β_1诱导的HK-2细胞表型转分化的影响

目的:探讨三七总皂苷(PNS)对转化生长因子- β1(TGF - β1)诱导的人肾小管上皮细胞(HK - 2 )转分化的影响。方法:采用流式细胞仪(FCM )结合免疫荧光法(IF)检测PNS对TGF - β1诱导的HK - 2细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)阳性细胞百分率的影响;逆转录-聚合酶链反应(RT -PCR)检测PNS对TGF - β1诱导的HK - 2细胞α-SMA信使核糖核酸(mRNA)表达。结果:流式细胞仪(FCM )结合免疫荧光法(IF)示:PNS 2 0 0～80 0mg/L可使TGF - β1诱导的HK - 2细胞增加的α-SMA阳性细胞百分率回降;RT -PCR示:PNS 2 0 0～80 0mg/L剂量和时间依赖性地使TGF - β1诱导的HK - 2细胞增加的α-SMAmRNA的基因表达回降。结论:PNS可通过抑制TGF - β1诱导的肾小管上皮细胞表型转分化,从而参与延缓肾间质纤维化的进程。

急性早幼粒细胞白血病患者诱导分化治疗前后血清IL-2受体的变化及意义

ELISA 法检测27例急性早幼粒细胞白血病患者(APL)血清白细胞介素2受体(sIL-2R)水平.结果表明APL 患者血清sIL-2R 高于正常对照(P<0.01),经维甲酸治疗后逐渐降低,但治疗中期患者血清sIL-2R 仍高于正常和治疗后(缓解期)患者血清sIL-2R(P<0.05)。治疗后血清sIL-2R 虽略高于正常对照。却已恢复正常范围(P<0.05)。同时发现治疗中WBC 却明显升高,治疗后又下降,L-CFU 数随治疗逐渐降低并与病情同步变化。经相关分析,L-CFU 与血清sIL-2R 成正向相关(r=0.737)(P<0.01),而与WBC总数无明显相关性(P>0.05)。

Id2从核迁移到细胞质后通过调节凋亡诱导因子表达促进骨骼肌细胞分化

目的探讨Id2在骨骼肌再生中的作用机制。方法用绿色荧光蛋白(GFP)-Id2-C2表达载体转染C2C12成肌细胞,对转染组和非转染组进行H2 O2处理和2%马血清处理,用RT-PCR法观察两组细胞Id2基因表达的差异;Western blotting观察两组细胞的成肌分化相关蛋白的表达情况;免疫荧光显微镜观察正常组、纤维损伤组以及去神经支配组大鼠的骨骼肌中Id2和凋亡诱导因子(AIF)蛋白的表达情况。结果与非转染组相比,Id2转染组细胞成肌分化明显增强。免疫荧光染色法显示,50μmol/L H2O2能增加核Id2蛋白的表达。在氧化应激条件下,Id2能抑制成肌调节因子(MyoD)而活化肌浆蛋白(myogenin)。2%马血清能引起大多数Id2从细胞核迁移到细胞质,从而抑制活性氧(ROS)诱导的线粒体AIF表达。免疫荧光分析显示,去神经支配组大鼠的骨骼肌中细胞内的Id2和AIF蛋白表达增多。结论 Id2从细胞核迁移到细胞质后能促进骨骼肌细胞分化,其作用与AIF表达水平相关。

1,25(OH)_2VD_3诱导小鼠胚胎干细胞向成骨细胞分化的研究

目的探讨1,25(OH)2VD3在诱导小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)向成骨细胞分化过程中的重要作用。方法取2d龄昆明小白鼠颅盖骨进行成骨细胞分离培养;参照并改进zur Nieden等的方法制备拟胚体(embryoid bodies,EBs)。将EBs根据培养液不同分为4组:A组:不含白血病抑制因子EBs培养液;B组:EBs培养液中添加50μg/mL维生素C、50mmol/Lβ-磷酸甘油;C组:培养液同B组,另每孔接种5×104个第3代成骨细胞;D组与C组相同,另添加4×10-9mol/L1,25(OH)2VD3。检测ALP活性,实时定量PCR检测骨钙素mRNA的表达,茜素红S染色进行矿化骨结节计数。结果EBs贴壁后前5d,各组ALP表达未发生明显变化,5d后ALP表达逐渐增加,其中D组在第20天表达水平最高。光镜下可见轮廓清晰大小不等的红色结节。茜素红S染色测得A、B、C、D组骨结节数分别为(20±8)、(18±5)、(31±1)、(50±1)个;实时定量PCR测得A、B、C、D组骨钙素mRNA分别为10.18±1.17、20.29±1.03、18.84±4.07、32.15±5.23;C、D组与A、B组比较差异均有统计学意义(P<0.05),A、B组间比较差异无统计学意义(P>0.05),C、D组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论在浓度为4×10-9mol/L1,25(OH)2VD3和维生素C、β-磷酸甘油共同作用下,有效促进了ESCs源性成骨细胞的产生。

乏氧诱导因子-1α和生长分化因子-15与脂质运载蛋白-2在急性左心衰竭病程中表达的意义及对预后预测价值分析

目的 探讨乏氧诱导因子(HIF)-1α、生长分化因子(GDF)-15及脂质运载蛋白(LCN)-2在急性左心衰竭(ALHF)病程中表达的意义,并分析其对预后的预测价值.方法 回顾性分析2016年9月至2018年8月呼和浩特市第一医院心内科收治的90例ALHF患者的临床资料,设为观察组;另回顾性分析同期45名健康受试者的临床资料,设为对照组;对比两组性别、年龄、左心室射血分数(LVEF)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)及血清HIF-1α、GDF-15、LCN-2水平,并采用Pearson相关系数法分析ALHF患者HIF-1α、GDF-15、LCN-2与LVEF、LVEDD、NT-proBNP水平的相关性;根据ALHF患者1年内生存情况将其分为生存组和死亡组,对比两组血清HIF-1α、GDF-15、LCN-2水平,并通过绘制受试者工作特征曲线(ROC),评估HIF-1α、GDF-15、LCN-2水平对ALHF患者1年内发生不良结局的预测价值.结果观察组LVEF水平低于对照组[(49.62±8.30)%比(67.42±7.25)%,P<0.05],LVEDD、NT-proBNP水平高于对照组[(60.38±9.70)mm比(44.16±3.19)mm,(2130.55±312.47)ng/L比(125.84±14.02)ng/L,P<0.05];观察组血清HIF-1α、GDF-15、LCN-2水平高于对照组,差异均有统计学意义[(28.62±5.61)ng/L比(5.20±1.12)ng/L,(2352.60±344.36)ng/L比(1052.89±150.18)ng/L,(156.47±27.10)μg/L比(32.50±6.19)μg/L,P<0.05];HIF-1α、GDF-15、LCN-2与LVEF呈负相关(P<0.05);HIF-1α、GDF-15与LVEDD、NT-proBNP均呈正相关(P<0.05);LCN-2与NT-proBNP呈正相关(P<0.05),与LVEDD无相关性(P>0.05).ALHF出院1年内病死率为15.56%,死亡组血清HIF-1α、GDF-15、LCN-2水平高于生存组,差异均有统计学意义[(47.19±7.30)ng/L比(25.20±4.21)ng/L,(4562.50±534.28)ng/L比(1945.51±210.42)ng/L,(243.18±33.17)μg/L比(140.50±22.93)μg/L,P<0.05];HIF-1α、GDF-15、LCN-2预测ALHF患者1年内发生不良结局的最佳截断点分别为39.05 ng/L、4390.21 ng/L、206.80μg/L,敏感度分别为71.43%、57.14%、64.29%,特异度分别为88.16%、80.26%、75.00%,准确度分别为85.56%、76.67%、73.33%,AUC分别为0.750、0.706、0.648.结论 HIF-1α、GDF-15、LCN-2在ALHF患者中异常高表达,三者对评估ALHF预后有一定临床价值,可作为评估ALHF的参考指标.

4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231诱导分化作用及可能的机制研究

目的观察4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯(4-anino-2-trifluoromethyl-phenyl retimate,ATPR)对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231抑制增殖诱导分化作用,探讨其可能的作用机制。方法体外培养人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,MTT检测细胞增殖,绘制细胞生长曲线,瑞氏-吉姆萨染色观察细胞形态变化,酶联免疫法检测粘蛋白MUC-1活性,流式细胞术检测细胞周期,实时荧光定量PCR法和Western blot法检测维甲酸受体(retinoic acid receptors,RAR)RARα、RARβ、RARγ和维甲类受体(retinoid X receptors,RXR)RXRα、RXRβ、RXRγ基因和蛋白的表达。结果 ATPR能够抑制MDA-MB-231细胞的增殖,具有浓度-时间依赖性,染色后镜下观察MDA-MB-231细胞生长密度降低,形态趋于正常。ELISA结果显示,ATPR作用后明显降低MDA-MB-231细胞培养上清中MUC-1的浓度;流式细胞术结果显示,MDA-MB-231细胞中G0/G1期表达量增加,S期表达量减少,细胞阻滞在G0/G1期比例增加。q-RT-PCR和Western blot结果显示,ATPR作用后,RARγ的mRNA和蛋白表达水平降低,RXRs mRNA和蛋白水平无明显变化。结论 ATPR可以抑制人乳腺癌细胞株MDA-MB-231增殖并诱导其分化,其机制可能与RARγ的表达有关。

BMP-2促进人炎症牙髓干细胞骨向诱导分化的体外研究

目的:研究人骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein,BMP-2)对人炎症牙髓组织来源的牙髓干细胞(dental pulp stem cells from inflamed pulps,DPSCs-IPs)体外骨向诱导分化的影响。方法:取第三代DPSCs-IPs,按是否于培养基中加入BMP-2分成:BMP-2+DPSCs-IPs组(实验组)和DPSCs-IPs组(对照组)。无成骨诱导条件培养1周后,对各组分泌的胶原基质行Trichrome染色,观察并比较实验组和对照组之间的骨向诱导分化情况;实时定量RT-PCR检测二者的Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ,COL-Ⅰ)mRNA表达情况。在成骨诱导条件下,培养3周后对各组分泌的钙化基质行Von Kossa染色,通过实时定量RT-PCR检测转录因子及成骨相关基因的表达。结果:无成骨诱导培养1周后,实验组DPSCs-IPs分泌的胶原基质Trichrome染色较对照组深,COL-ⅠmRNA的表达水平显著上调(P<0.05),说明BMP-2可诱导DPSCs-IPs沉积更多的胶原基质;成骨诱导培养3周后,相对于对照组,实验组DPSCs-IPs沉积了更多的钙化基质,Nanog、八聚体结合转录因子4(octamer-binding transcription factor 4,Oct4)、性别决定区因子(SRY-related high-mobility group box 2,Sox2)等转录因子表达升高,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨钙素(osteocalcin,OCN)、骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP),牙骨质蛋白1(cementum protein 1,CEMP-1)、COL-Ⅰ等成骨相关基因表达水平显著上调(P<0.05)。结论:BMP-2在成骨诱导条件下可促进DPSCs-IPs进行体外骨向诱导分化。

辐射防护剂DMSO、As_2O_3及其作为肿瘤诱导分化剂、凋亡剂的研究

目的用量子生物学从头算方法(abinitio)和密度泛函理论(DFT)研究了辐射防护剂DMSO和As2O3及其作为肿瘤细胞诱导分化剂和凋亡剂的电子结构、光谱和量子作用机理。方法量子生物学从头算方法(abinitio)和密度泛函理论(DFT)计算。结果提出了具有双向作用的自由基的适度氧化应激可选择性诱导细胞分化和凋亡的假说。并用其代表物DMSO和As2O3的量子水平的研究结果予以验证。同时研究了DMSO和As2O3双向得失电子形成的自由基的几何结构、电子结构、光谱性质、前线轨道、布居分析、自旋分析等微观结构数据,探讨选择性诱导分化、凋亡肿瘤细胞可能的量子机理。

As_2O_3诱导KB和Tca8113细胞分化与包壳蛋白表达的关系

目的探讨As2O3对人口腔鳞癌KB和Tca8113细胞诱导分化的作用与包壳蛋白(involucrin)表达的关系。方法用免疫荧光技术观察As2O3诱导KB和Tca8113细胞分化前后包壳蛋白的表达和变化。结果包壳蛋白在As2O3对人口腔鳞癌KB和Tca8113细胞诱导分化后比其诱导分化前包壳蛋白表达增高。结论As2O3诱导口腔鳞癌分化可导致包壳蛋白表达增高,其作用机理尚不清楚。

人参皂甙Rh_2对小鼠黑色素瘤B_(16)的诱导再分化作用

本文首次采用人参皂甙Rh_2观察其对小鼠黑色素瘤B_14的抑止作用.结果表明,人参皂甙Rh_2对小鼠黑色素瘤B_16.的抑止作用明显高出国家规定的指标,表明人参皂甙Rh_2对小鼠黑色素瘤B_16具有诱导再分化作用,这对于人参皂甙Rh_2的临床研究具有重要意义.

IL-6对大鼠急性髓系白血病R2细胞的增殖抑制及分化诱导作用

重组人白细胞介素６（ｒｈＩＬ－６）可抑制大鼠急性髓系白血病（ＡＭＬ）Ｒ２细胞的体外生长（ＩＣ５０１００ｎｇ／Ｌ），并在１０ｎｇ／Ｌ～１μｇ／Ｌ的剂量范围内诱导Ｒ２细胞向终末方向分化。诱导后的Ｒ２细胞具有单核巨噬细胞的形态特征；且非特异性酯酶（ＮＳＥ）及酸性醋酸酯酶（ＡＮＡＥ）的活性增强，而过氧化物酶（ＰＯＸ）的活性却一直很低。经典型的ＤＮＡ梯状条带及凋亡小体证实，≥１μｇ／ＬｒｈＩＬ－６亦可诱导Ｒ２细胞凋亡。我们认为，Ｒ２细胞是研究ＩＬ－６信号转导通路及ＡＭＬ细胞分化机制的一个很好模型。

二甲基亚砜(DMSO)对人肝癌HepG2细胞的诱导分化作用的实验研究

目的:探讨二甲基亚砜(DMSO)对人肝癌HepG2细胞的诱导分化作用。方法:体外培养人肝癌HepG2细胞,用DMSO干预细胞,MTT法检测药物对细胞增殖活力的影响;倒置相差显微镜和瑞氏-姬姆萨染色观察细胞形态学的变化;放射免疫法检测细胞甲胎蛋白(AFP)和清蛋白(ALB)的分泌量;酶促反应试剂盒检测细胞中γ-谷胺酰转肽酶(γ-GT)、碱性磷酸酶(ALP)的活性。结果:用DMSO处理HepG2细胞72h后,能显著抑制细胞的增殖(P<0.05);细胞的形态向成熟细胞分化;细胞AFP的分泌量和γ-GT酶的活性明显降低,ALP活性和ALB含量则显著升高(P<0.05)。结论:DMSO具有诱导人肝癌HepG2向正常细胞分化的作用并抑制细胞增殖。

骨形成蛋白2在神经干细胞诱导分化中的作用

神经干细胞的多向分化潜能 ,使其成为替代治疗的内源性和外源性潜在细胞源 ,为治疗神经系统退行性疾病和中枢神经系统损伤带来了希望。神经干细胞的定向诱导分化 ,是当前神经干细胞研究领域的难点和热点。生长因子TGF beta超家族成员BMP2在骨发育形成中的重要作用已为许多研究所证实。近年来国内外对BMP2在神经系统发育中的作用进行了广泛研究 ,证实BMP2在诱导神经干细胞分化中发挥重要的作用 ,表现为一种多效性神经诱导因子。

新生大鼠大脑皮质O-2A祖细胞的体外诱导分化

目的 :探索新生大鼠大脑皮质O -2A祖细胞的体外分离纯化的培养条件 ,并观察其在体外增殖、分化的规律 ;鉴定体外培养的O -2A祖细胞、2型星形胶质细胞及少突胶质细胞。方法 :根据 1型星形胶质细胞、O -2A祖细胞的生长时间差异及细胞的粘附特性不同 ,采用振荡法和差速贴壁法 ,并结合使用生长因子 (PDGF ,bFGF )刺激O -2A祖细胞增殖 ,从而分离纯化、扩增O -2A祖细胞 ;观察O -2A祖细胞在有血清 (D/F + 2 0 %FCS)和无血清 (CDM )培养条件下的分化情况。免疫细胞化学法鉴定O -2A祖细胞(A2B5 )和分化成熟的 2型星形胶质细胞 (GFAP ,A2B5 )及少突胶质细胞 (CNPase)。结果 :①分离纯化的O -2A祖细胞胞体呈椭圆形 ,具有典型的双极或三极突起 ;经免疫细胞化学染色鉴定 ,A2B5抗体标记阳性 ,细胞纯度达 95 % ;②应用有血清的培养基诱导O -2A祖细胞定向分化为 2型星形胶质细胞 ,2型星形胶质细胞的胞体较大 ,突起多而细长 ,GFAP和A2B5抗体标记均为阳性 ;③应用无血清的化学条件培养基诱导O -2A祖细胞定向分化为少突胶质细胞 ,少突胶质细胞的胞体小 ,突起短而细 ,相互交织呈“蜘蛛网”样 ,CNPase抗体标记阳性。结论 :①采用振荡法和差速贴壁法 ,并结合使用生长因子 ,建立了分离纯化O -2A祖细胞的方法 ;②分离纯化的O