肾上腺髓质素调节诱导型一氧化氮合酶对缺氧肺动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨缺氧对肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖和凋亡的影响以及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的蛋白表达变化及肾上腺髓质素(ADM)在缺氧影响PASMC增殖和凋亡中的作用与意义。方法:离体缺氧培养大鼠PASMC,采用MTT比色法和PCNA的免疫组化法测定细胞增殖反应,采用流式细胞仪法检测细胞凋亡情况,采用Westenblot蛋白印迹法检测iNOS的蛋白表达。结果:①MTT法发现,缺氧24h组的A值明显高于常氧组(P<0.01),而缺氧+ADM组明显低于缺氧组(P<0.01),与常氧组比较差别无显著性(P>0.05),缺氧+L NAME组A值明显高于缺氧组和常氧组(P<0.01)。②免疫组化法发现,常氧组PCNA呈弱阳性表达,而缺氧24h组PCNA呈阳性表达(P<0.01)。ADM明显抑制了缺氧24h组PCNA的表达(P<0.01);而L NAME则促进了缺氧24h组PCNA的表达(P<0.01)。③流式细胞仪分析发现,常氧组、缺氧组、缺氧+ADM组、缺氧+L NAME组,在缺氧培养24h后,其凋亡指数比较差别无显著性(P均>0.05)。④Westenblot发现常氧组大鼠PASMC见少量iNOS表达,缺氧4h后,表达明显增多(P<0.01),8h,24h持续高表达(P<0.01);L NAME对iNOS蛋白的表达没有影响。ADM促进iNOS蛋白的表达。结论:①缺氧能促进肺动脉平滑肌细胞低氧性增殖,对肺动脉平滑肌细胞的凋亡无影响。

缺血再灌注大鼠肾脏诱导型一氧化氮合酶表达的意义

目的观察缺血及缺血再灌注(IR)大鼠肾脏诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达变化的规律。方法制作大鼠肾脏缺血及IR模型,不同时间摘取肾脏,免疫组织化学法检测iNOS表达变化。HE染色观察肾脏损伤程度。结果缺血时及IR后iNOS表达均明显增强(P<0.05),且随时间呈一定的变化规律,呈先升高后下降趋势,24 h达峰值,72 h时降至2 h水平。结论肾脏缺血早期iNOS即起损伤作用,并于再灌注后加重损伤。

益气活血健脾补肾法对结肠炎小鼠iNOS及其mRNA表达的影响

目的:观察益气活血健脾补肾法对结肠炎小鼠iNOS及其mRNA表达的影响。方法:雌性BALB/C小鼠100只,随机分为7组,分别为正常对照组、模型组、柳氮磺胺吡啶(SASP)对照组、益气法组、活血法组、健脾法组及补肾法组,以葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠形成结肠慢性炎症,用免疫组织化学、原位分子杂交方法观察iNOS及其mRNA的表达。结果:模型组结肠组织iNOS的表达(染色积分6.3±1.6、平均光密度0.32±0.05、平均灰度80.3±3.9)高于正常对照组(相应值分别为1.6±0.4、0.16±0.03、113.3±6.9);活血组(3.2±1.4、0.12±0.03、134.5±7.2)、健脾组(3.3±1.3、0.13±0.04、128.7±6.3)及补肾组(2.9±1.5、0.17±0.07、119.4±6.7)结肠组织iNOS的表达低于模型组(均为P<0.05)。结论:iNOS参与DSS诱导UC小鼠的形成,降低iNOS的表达是活血、健脾及补肾法方药桃红四物汤、参苓白术散、金匮肾气丸的作用机制之一。

初发、复发性高原肺水肿血清NO、NOS、iNOS研究

目的:了解初发、复发性高原肺水肿(pHAPE、rHAPE)在治疗前、后的一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的变化.方法:实验分为三组:①对照组(C组、16例),②pHAPE组(18例),③rHAPE组(10例);紫外线分光光度计测定NO、NOS、iNOS.结果:C组高于pHAPE和rHAPE组,P＜0.05～P＜0.01;两组治疗前低于治疗后,P＜0.01;NO两组前前相比,P＞0.05,两组后后相比,P＜0.05;NOS、iNOS两组前前、后后相比,P＜0.01.结论:缺氧引起了NO、NOS、iNOS的下降,以rHAPE更明显,治疗后分泌增加.这些改变提示它们在HAPE的发病机理中起了重要作用.