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不同品种大枣对DNFB诱导小鼠超敏反应的抑制作用
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作者 王淑萍 张静泽 +2 位作者 张志丹 高文远 陈虹 《天津药学》 2016年第6期1-3,共3页
目的:研究不同品种大枣对二硝基苯(DNFB)诱导的小鼠迟发型超敏反应(DTH)的影响;评价不同品种大枣在免疫抑制作用上的差异。方法:将昆明小鼠随机分为对照组、DTH组与不同品种大枣给药组,通过致敏剂DNFB诱发DTH模型,检测不同品种大枣给药... 目的:研究不同品种大枣对二硝基苯(DNFB)诱导的小鼠迟发型超敏反应(DTH)的影响;评价不同品种大枣在免疫抑制作用上的差异。方法:将昆明小鼠随机分为对照组、DTH组与不同品种大枣给药组,通过致敏剂DNFB诱发DTH模型,检测不同品种大枣给药后模型小鼠耳廓重量的变化,同时测定肝指数、脾指数、胸腺指数进行综合评价。结果:实验表明行唐大枣、山东长枣、诺羌大枣、宁夏滩枣能够明显抑制DNFB引起的超敏反应,同时,还可对免疫器官胸腺起到保护作用。结论:不同产地大枣的免疫活性存在差异。 展开更多
关键词 大枣 DNFB诱导小鼠 超敏反应
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心肌营养素-1诱导小鼠诱导性多能干细胞心肌细胞定向分化的实验研究 被引量:1
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作者 刘通 卜庆婷 +4 位作者 马珂 金岩 孙冬冬 李秀娟 曹丰 《心脏杂志》 CAS 2013年第3期307-310,322,共5页
目的:观察心肌营养素-1(CT-1)对小鼠诱导性多能干细胞(miPSCs)心肌细胞定向分化的诱导作用。方法:实验分为对照组与CT-1处理组。miPSCs经悬滴法诱导形成拟胚体,第3天培养基中加入1μmol/ml CT-1(CT-1组),对照组采用普通培养基。于第4、7... 目的:观察心肌营养素-1(CT-1)对小鼠诱导性多能干细胞(miPSCs)心肌细胞定向分化的诱导作用。方法:实验分为对照组与CT-1处理组。miPSCs经悬滴法诱导形成拟胚体,第3天培养基中加入1μmol/ml CT-1(CT-1组),对照组采用普通培养基。于第4、7、10和14天,收取细胞样本,采用实时PCR检测心脏特异标志物基因的表达。用免疫荧光染色及流式细胞术检测干细胞标志物Oct4和心肌特异性分化标志物肌钙蛋白I(cTnI)的表达。用透射电镜观察心肌样细胞的超微结构。结果:CT-1组第10天,样本中心肌特异性肌钙蛋白T(cTnT)基因表达的水平为同期对照组的1.75倍,有显著性差异(P<0.05)。免疫荧光染色法检测显示,两组均有cTnI表达。流式细胞术鉴定的结果显示,对照组与CT-1组cTnI的阳性率分别为28.5%和56.4%,有显著性差异(P<0.05)。电镜观察显示,CT-1组肌原纤维及胞内线粒体明显增多,肌纤维排列规则,可见细胞间桥粒连接和缝隙连接。结论:CT-1可显著提高miPSC向心肌细胞定向分化的效率。 展开更多
关键词 心肌营养素-1 小鼠诱导性多能干细胞 心肌细胞定向分化
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辣木叶多糖对STZ诱导糖尿病小鼠的降糖效果及其机制
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作者 张世奇 王睿 +4 位作者 李成良 李佳倩 陶虹利 邓雨洁 张卫国 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第19期357-365,共9页
为探讨辣木叶多糖(Moringa oleifera leaf polysaccharide,MOLP)对糖尿病小鼠的降糖效果及其机制,通过建立链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)诱导糖尿病小鼠模型,将实验小鼠设为正常空白组、模型组、MOLP低剂量组(100 mg/kg·bw)、中... 为探讨辣木叶多糖(Moringa oleifera leaf polysaccharide,MOLP)对糖尿病小鼠的降糖效果及其机制,通过建立链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)诱导糖尿病小鼠模型,将实验小鼠设为正常空白组、模型组、MOLP低剂量组(100 mg/kg·bw)、中剂量组(200 mg/kg·bw)、高剂量组(400 mg/kg·bw)和阳性药物组(盐酸二甲双胍200 mg/kg·bw),每组8只,灌胃28 d,测定空腹血糖、血清糖化蛋白、血清胰岛素、肝/肌糖原等生化指标,对肝脏和胰腺中糖代谢关键基因(肝X受体(Liver X Receptor,LXR)、胰腺十二指肠同源异形盒1(Pancreatic duodenal homeobox-1,PDX-1)、葡萄糖激酶(Glucoskinase,GK)、磷酸烯醇丙酮酸羧激酶(Phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK)、葡萄糖6磷酸酶(Glucose-6-phosphatase,G6Pase)、葡萄糖转运载体2(Glucose transporter type 2,GLUT2)、胰岛素受体底物1/2(Insulin receptor 1/2,IRS1/2))进行测定,并对各组小鼠肝脏和胰腺组织进行HE染色,观察其组织形态。结果表明:MOLP降糖效果显著,且呈现一定的量效反应关系,MOLP高剂量组(400 mg/kg·bw)的血糖降低水平最为接近阳性药物组,其相关机制为表达显著上调的LXR和PDX-1通过调控其下游基因PEPCK、G6Pase、GK、GLUT2和IRS1/2 mRNA表达,从而改善糖尿病小鼠的糖代谢紊乱,使其损伤的肝脏组织和胰腺组织得到有效改善,血清胰岛素和肝糖原含量增加,最终达到降血糖作用。 展开更多
关键词 辣木叶多糖 STZ 诱导小鼠 降血糖 糖代谢 胰岛素
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青蒿琥酯对Con A诱导小鼠自身免疫性肝损伤的保护作用研究 被引量:12
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作者 曹婕 赵昕 +2 位作者 刘明江 郑卉 李金贵 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期2123-2128,共6页
免疫性肝病是临床上难治性疾病,目前没有特效性药物,因此,研发新的有效干预药物,对防治免疫性肝病有重要的临床价值。为探讨青蒿琥酯(artesunate,Art)对免疫性肝损伤的保护作用,该研究采用不同质量浓度(27,54,108 mg·kg-1)Art... 免疫性肝病是临床上难治性疾病,目前没有特效性药物,因此,研发新的有效干预药物,对防治免疫性肝病有重要的临床价值。为探讨青蒿琥酯(artesunate,Art)对免疫性肝损伤的保护作用,该研究采用不同质量浓度(27,54,108 mg·kg-1)Art灌胃小鼠连续7 d,然后尾静脉注射伴刀豆球蛋白A(concanavalin A,Con A)诱导小鼠肝损伤模型。于造模后8 h采血液和肝组织进行血清转氨酶(ALT,AST)、组织病变、炎性细胞因子以及NF-κB关键蛋白表达水平的检测。结果表明,与模型组相比,Art高浓度组显著降低了模型小鼠的肝指数、ALT和AST水平(P〈0.01),组织病变也明显减轻,同时降低了促炎细胞因子TNF-α,IFN-γ,IL-6,IL-17的水平而增加了炎性抑制因子IL-10的表达(P〈0.05),并呈现明显的剂量-效应关系。Western blot法检测结果显示108 mg·kg-1Art可显著抑制NF-κB关键蛋白p-p65和p-IκBα的表达(P〈0.01)。NF-κB特异阻断剂吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)也可显著抑制p-p65和p-IκBα表达并减轻肝损伤。以上结果说明Art主要通过抑制NF-κB信号通路而对Con A诱导的小鼠免疫性肝损伤发挥保护作用。该研究为青蒿琥酯用于自身免疫性肝损伤的防治提供了参考。 展开更多
关键词 青蒿琥酯 ConA诱导小鼠免疫性肝损伤 细胞因子 NF-ΚB
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茵陈蒿汤通过抑制Kupffer细胞活化对刀豆蛋白A诱导小鼠急性肝炎的防治作用 被引量:9
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作者 胡旭东 叶(目亭)杰 +2 位作者 王晓玲 李伯勤 刘平 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1340-1343,共4页
目的观察茵陈蒿汤对Kupffer细胞活化的抑制效应以及对刀豆蛋白A(ConA)诱导小鼠急性肝炎的防治作用。方法采用ConA尾静脉注射诱导小鼠急性肝炎,分别测定各组脾体比、血清ALT活性以及肝组织病理损伤,同时利用ELISA法测定血清TNF-α、INF-... 目的观察茵陈蒿汤对Kupffer细胞活化的抑制效应以及对刀豆蛋白A(ConA)诱导小鼠急性肝炎的防治作用。方法采用ConA尾静脉注射诱导小鼠急性肝炎,分别测定各组脾体比、血清ALT活性以及肝组织病理损伤,同时利用ELISA法测定血清TNF-α、INF-γ含量,荧光定量PCR法测定肝组织中TNF-α、CD68、CD163、F4/80 mRNA表达。结果与模型对照组比较,YCHT显著下调了脾体比、血清中ALT活性以及INF-γ、TNF-α含量,减轻了肝细胞损伤程度,并显著下调了肝组织中TNF-α、CD68、CD163、F4/80 mRNA的表达。结论茵陈蒿汤可通过抑制Kupffer细胞活化起到较强的防治急性肝炎作用。 展开更多
关键词 茵陈蒿汤 ConA诱导小鼠急性肝炎 KUPFFER细胞
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Cdyl基因敲除的小鼠诱导多能干细胞系的建立及鉴定 被引量:1
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作者 胡晓俊 赖文玉 +4 位作者 万利 王涛 张秀明 李伟强 项鹏 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期146-154,共9页
【目的】建立Cdyl基因敲除的小鼠诱导多能干细胞系(iPSC)。【方法】通过组织块贴壁法培养Cdyl-/-的胚胎成纤维细胞(MEF)。将pMx-Oct3/4、Sox2、c-Myc、Klf4和hrGFP五种质粒分别转染Plat-E细胞,收集病毒上清,感染Cdyl-/-MEF获得Cdyl-/-iP... 【目的】建立Cdyl基因敲除的小鼠诱导多能干细胞系(iPSC)。【方法】通过组织块贴壁法培养Cdyl-/-的胚胎成纤维细胞(MEF)。将pMx-Oct3/4、Sox2、c-Myc、Klf4和hrGFP五种质粒分别转染Plat-E细胞,收集病毒上清,感染Cdyl-/-MEF获得Cdyl-/-iPSC,并对Cdyl-/-iPS细胞的分子标记及体内外分化能力进行检测。【结果】取Cdyl-/-胎鼠皮肤,培养得到增殖旺盛的Cdyl-/-MEF。成功包装逆转录病毒并感染Cdyl-/-MEF,得到胚胎干细胞样的Cdyl-/-iPS细胞。该细胞表达AKP、Oct3/4、SSEA-1,在体内外可以分化为三胚层的细胞类型。【结论】Cdyl-/-iPS细胞具有自我更新和多向分化能力的特性。Cdyl-/-iPS细胞系的建立为研究Cdyl在小鼠早期胚胎发育中的功能提供一个良好的细胞模型。 展开更多
关键词 小鼠诱导多能干细胞 Cdyl 基因敲除 小鼠胚胎成纤维细胞
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维生素C明显提高小鼠诱导多能干细胞分化为心肌细胞的诱导效率 被引量:3
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作者 穆军升 许士俊 +1 位作者 张健群 伯平 《心肺血管病杂志》 2016年第1期59-64,共6页
目的:将维生素C作为诱导剂,观察其对小鼠诱导多能干细胞(miPSC)分化为心肌细胞效率的影响,寻找一种更安全、更高效的诱导方法。方法:复苏miPSC,传代培养后,利用悬滴培养法使miPSC形成拟胚体(EBs),用含维生素C的分化培养基对其进行诱导分... 目的:将维生素C作为诱导剂,观察其对小鼠诱导多能干细胞(miPSC)分化为心肌细胞效率的影响,寻找一种更安全、更高效的诱导方法。方法:复苏miPSC,传代培养后,利用悬滴培养法使miPSC形成拟胚体(EBs),用含维生素C的分化培养基对其进行诱导分化,对照组不添加诱导剂,记录两组拟胚体出现搏动的时间、数量,计算分化率,观察维生素C作为诱导剂,对miPSC分化为心肌细胞效率的影响。结果:在用含10^(-4)mmol/m L维生素C的分化培养基时,大概有62.5%的拟胚体出现搏动,而不加任何诱导剂组约有8.3%的拟胚体出现搏动。各组搏动拟胚体cTnT,a-actinin免疫染色阳性。结论:维生素C作为一种诱导剂,能显著提高miPSC分化为心肌细胞的效率,并且心肌特异性蛋白cTnT,a-actinin染色阳性,应用维生素C作为诱导剂,诱导miPSC向心肌细胞分化是一种非常理想的诱导方法。 展开更多
关键词 维生素C 心肌细胞 诱导分化 小鼠诱导多能干细胞
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PcG蛋白EZH2在全反式维甲酸诱导的小鼠iPS细胞系分化过程中的作用 被引量:1
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作者 张艳敏 漆正宇 +2 位作者 郭新 崔光辉 秦洁 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第7期787-792,共6页
目的探讨组蛋白甲基转移酶EZH2在小鼠iPS细胞系IP14D-1向生殖细胞分化过程中的作用。方法将小鼠iPS细胞系IP14D-1通过悬浮培养分化形成拟胚体(iEBs)作为向生殖细胞分化的启动步骤,1μmol/L全反式维甲酸(atRA)持续诱导iEBs 2、4和7 d,采... 目的探讨组蛋白甲基转移酶EZH2在小鼠iPS细胞系IP14D-1向生殖细胞分化过程中的作用。方法将小鼠iPS细胞系IP14D-1通过悬浮培养分化形成拟胚体(iEBs)作为向生殖细胞分化的启动步骤,1μmol/L全反式维甲酸(atRA)持续诱导iEBs 2、4和7 d,采用实时RT-PCR、荧光定量RT-PCR、免疫荧光检测atRA处理前后EZH2和生殖细胞分化标志性基因Stra8在iEBs中的表达。结果在atRA诱导IP14D-1来源的iEBs中,EZH2表达在诱导后2 d达到高峰,伴随atRA诱导,EZH2表达减弱;而生殖细胞分化标志性基因Stra8其变化特点与EZH2相反,无atRA诱导时EBs表达Stra8较弱,伴随atRA诱导,Stra8表达增强。EZH2和Stra8阳性信号分别定位于胞膜和胞质,其变化特点与PT-PCP结果相一致。结论 atRA诱导使EZH2低水平表达时期提前出现,伴随Stra8增强表达,启动了小鼠iPS细胞向生殖细胞的分化进程。 展开更多
关键词 小鼠诱导性多能干细胞 生殖细胞 EZH2 全反式视黄酸
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小鼠骨生成诱导因子基因逆转录病毒载体的构建及其在293T细胞中的表达 被引量:2
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作者 郑翠侠 张晓娜 +2 位作者 韩兵 宋怀东 马勤耘 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1501-1504,共4页
目的构建小鼠骨生成诱导因子(OIF)基因重组逆转录病毒载体,鉴定其在293T细胞中的表达。方法 PCR法扩增OIF-3FLAG基因,测序后克隆入逆转录病毒载体pMSCV PIG(Puro-IRES-GFP)的相应位点,构建重组逆转录病毒表达载体pMSCV PIG-OIF-3FLAG,... 目的构建小鼠骨生成诱导因子(OIF)基因重组逆转录病毒载体,鉴定其在293T细胞中的表达。方法 PCR法扩增OIF-3FLAG基因,测序后克隆入逆转录病毒载体pMSCV PIG(Puro-IRES-GFP)的相应位点,构建重组逆转录病毒表达载体pMSCV PIG-OIF-3FLAG,并对重组体进行测序鉴定。应用脂质体分别将PMSCV PIG-OIF-3FLAG和VSVG、GAG-POL辅助病毒包装载体共转染至293T包装细胞,48h后荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)表达;收集包装细胞上清液,进一步用含有包装病毒的上清液再感染293T细胞,48 h后加入3μg/mL嘌呤霉素(puromycin),连续7d,筛选病毒感染的稳定表达pMSCVPIG-OIF-3FLAG的293T细胞株,分别采用Real-time PCR技术和Western blotting方法检测293T细胞OIF mRNA及其蛋白表达。结果构建OIF基因逆转录病毒表达载体PMSCV PIG-OIF-3FLAG,经酶切及测序鉴定证实目的基因插入位点和读码框架正确;病毒感染293T细胞,经嘌呤霉素筛选稳定表达小鼠OIF的293T细胞株;Real-time PCR和Western blotting鉴定证实OIF mRNA和蛋白在该细胞株中呈高表达。结论成功构建小鼠OIF基因的逆转录病毒载体,并获得稳定高表达OIF基因的293T细胞株。 展开更多
关键词 逆转录病毒载体 小鼠骨生成诱导因子 293T细胞
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小鼠诱导性共刺激分子-Ig在小鼠树突状细胞中的表达及其效应研究
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作者 王国华 李曼君 +4 位作者 廖雯君 朱慧芬 张悦 邵静芳 沈关心 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期339-341,共3页
目的 获得mICoS-Ig基因修饰的小鼠DC,分析表达产物mICOS-Ig对T细胞活化的影响。方法 采用电转染方法将mICOS-Ig表达载体转入小鼠DC,通过ELISA法检测转染小鼠DC 60和96 h以及稳定表达的培养上清;观察mICOS-Ig对同种混合细胞培养反应的影... 目的 获得mICoS-Ig基因修饰的小鼠DC,分析表达产物mICOS-Ig对T细胞活化的影响。方法 采用电转染方法将mICOS-Ig表达载体转入小鼠DC,通过ELISA法检测转染小鼠DC 60和96 h以及稳定表达的培养上清;观察mICOS-Ig对同种混合细胞培养反应的影响。结果 ELISA法检测证明将mICOS-Ig表达载体转入小鼠DC,获得瞬时表达及稳定表达,mICOS-Ig可抑制单向混合淋巴细胞反应,抑制率达40%,其效应呈剂量依赖性。结论 获得了稳定表达mICOS-Ig融合蛋白的小鼠DC,mICOS-Ig表达产物对同种细胞刺激的增殖反应有抑制作用。 展开更多
关键词 小鼠诱导性共刺激分子-Ig 树突状细胞 转染 单向混合淋巴细胞反应
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TREM-2在DSS诱导小鼠肠炎中的作用 被引量:2
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作者 陆诗淼 吴永坚 黄曦 《热带医学杂志》 CAS 2016年第5期547-550,564,F0004,共6页
目的探讨髓样细胞触发受体-2(TREM-2)对小鼠肠炎模型肠道炎症发生发展的影响。方法构建葡萄糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠实验性肠炎模型,采用流式细胞术检测TREM-2在炎症肠道细胞的表达,采用TREM-2敲除小鼠构建小鼠肠炎模型,检测体重、临床... 目的探讨髓样细胞触发受体-2(TREM-2)对小鼠肠炎模型肠道炎症发生发展的影响。方法构建葡萄糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠实验性肠炎模型,采用流式细胞术检测TREM-2在炎症肠道细胞的表达,采用TREM-2敲除小鼠构建小鼠肠炎模型,检测体重、临床评分以及结肠长度,采用荧光定量PCR检测小鼠脾脏(SPs)和肠系膜淋巴(MLNs)细胞因子的表达。结果肠炎小鼠肠道TREM-2表达显著高于正常小鼠,TREM-2基因敲除肠炎小鼠体重以及结肠长度均显著高于野生型对照组,疾病临床评分(DAI)以及肠道病理评分显著低于野生型对照组小鼠,脾脏和肠系膜淋巴结的促炎性细胞因子(IFN-γ和IL-17a)表达显著低于野生型对照组小鼠(P<0.05)。结论 TREM-2增强肠道炎症反应和病理损伤,增强促炎性细胞因子分泌,从而调控炎症性肠病的发生发展,TREM-2有望成为治疗炎症性肠病的一个有效靶点。 展开更多
关键词 炎症性肠病 髓样细胞触发受体-2 DSS诱导小鼠肠炎模型 促炎性细胞因子
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抑瘤素M促进小鼠诱导多能干细胞向心肌分化 被引量:1
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作者 王记 陆玉琴 +1 位作者 徐鑫 纪召娟 《基础医学与临床》 CSCD 2017年第10期1401-1406,共6页
目的以小鼠诱导多能干细胞(mi PSCs)为模型探讨抑瘤素M(OSM)在心肌细胞分化中的作用。方法用拟胚体分化法,在分化前中期(0~6 d)加入OSM培养分化15 d,实时荧光定量PCR、Western blot与免疫荧光染色法检测心肌细胞特异性标志物。结果 OSM... 目的以小鼠诱导多能干细胞(mi PSCs)为模型探讨抑瘤素M(OSM)在心肌细胞分化中的作用。方法用拟胚体分化法,在分化前中期(0~6 d)加入OSM培养分化15 d,实时荧光定量PCR、Western blot与免疫荧光染色法检测心肌细胞特异性标志物。结果 OSM诱导mi PSCs分化为心肌细胞的最佳浓度为20 pmol/L,此时心肌肌钙蛋白T(cTnT)表达为对照组的7倍(P<0.05);诱导组心肌细胞特异性基因和蛋白全面高于对照组(P<0.05);心肌特异性标志物cTnT染色显阳性,且与对照组相比,诱导组cTnT阳性细胞比率明显增高(P<0.05)。结论抑瘤素M促进了mi PSCs向心肌细胞的高效分化,为干细胞的心肌分化提供了一种有效的分化策略。 展开更多
关键词 抑瘤素M 小鼠诱导多能干细胞 心肌细胞 分化
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TPA致小鼠耳肿胀模型的中性粒细胞聚集及IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-17A的表达水平研究 被引量:7
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作者 周娟 张梦军 +4 位作者 郭嘉伟 杨超 田阳 张惠静 李滨 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期872-876,共5页
目的从蛋白水平和mRNA水平探讨佛波酯(TPA)诱导的小鼠炎症耳组织中IL-1β、IL-6、TNF-α和IL-17A的表达情况。方法通过HE染色观察TPA致小鼠耳组织的炎症水肿和淋巴细胞浸润,测定髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性判断中性粒细胞的... 目的从蛋白水平和mRNA水平探讨佛波酯(TPA)诱导的小鼠炎症耳组织中IL-1β、IL-6、TNF-α和IL-17A的表达情况。方法通过HE染色观察TPA致小鼠耳组织的炎症水肿和淋巴细胞浸润,测定髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性判断中性粒细胞的聚集情况,ELISA法检测IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-17A的蛋白含量以及实时荧光定量PCR法检测它们的mRNA水平。结果与正常组相比,模型组小鼠耳组织有明显的炎症水肿和淋巴细胞浸润,中性粒细胞聚集严重,并且该组小鼠耳组织中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量和mRNA水平显著地增高,而IL-17A没有明显地变化;阳性药物组与模型组相比,能有效地抑制小鼠耳组织的炎症水肿,淋巴细胞浸润,中性粒细胞聚集以及下调各炎症细胞因子的蛋白含量和mRNA水平。结论 TPA诱导的小鼠耳肿胀严重程度除了与淋巴细胞浸润和中性粒细胞聚集有关外,还与靶组织中显著上调的IL-1β、TNF-α和IL-6蛋白含量和mRNA水平有关。 展开更多
关键词 佛波酯诱导小鼠耳肿胀模型 白细胞介素-1Β 白细胞介素-6 肿瘤坏死因子-α 白细胞介素-17A
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血管内皮生长因子对诱导多能干细胞向心肌细胞分化的影响 被引量:2
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作者 赵霞 张晓刚 +1 位作者 熊挺淋 马红芬 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期755-758,共4页
目的观察血管内皮生长因子(VEGF)对小鼠诱导多能干细胞(iPSCs)向心肌细胞分化的诱导作用。方法采用悬滴培养法,分别以10、20、50 ng/ml的VEGF对iPSCs细胞进行诱导分化,自然分化作为阴性对照组,加入1%二甲亚砜诱导剂为阳性对照组,倒置显... 目的观察血管内皮生长因子(VEGF)对小鼠诱导多能干细胞(iPSCs)向心肌细胞分化的诱导作用。方法采用悬滴培养法,分别以10、20、50 ng/ml的VEGF对iPSCs细胞进行诱导分化,自然分化作为阴性对照组,加入1%二甲亚砜诱导剂为阳性对照组,倒置显微镜下观察细胞生长情况,记录跳动的拟胚体出现的时间和数目,计算心肌细胞分化率,细胞免疫荧光检测心肌细胞cTnT的表达,RT-PCR检测心肌发育基因α-MHC和β-MHC mRNA的表达。结果与自然分化组相比,三个浓度组的VEGF均可提高iPSCs的心肌细胞分化率(P<0.05),浓度为20 ng/ml时,iPSCs的心肌细胞分化率最高;与二甲亚砜组相比无统计学差异(P>0.05)。分化的心肌细胞可自发搏动,同时表达心肌特异蛋白cTnT和调控心肌发育的基因α-MHC和β-MHC;VEGF可上调α-MHC和β-MHC的表达(P<0.05)。结论 VEGF可以促进诱导iPSCs向心肌细胞分化。 展开更多
关键词 小鼠诱导多能干细胞 血管内皮细胞生长因子 诱导 心肌细胞
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钠钙交换体启动子促进诱导多能干细胞向心肌细胞转化 被引量:1
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作者 戴波 李洪涛 +7 位作者 刘泽 肖定璋 余细勇 陈斌 何建新 向定成 邱健 Wang Yi-gang 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第19期3069-3074,共6页
背景:诱导多能干细胞治疗缺血性心脏病被认为是极具前景的方法,但目前仍未找到一种理想的诱导方式。目的:探讨钠钙交换体(NCX1)启动子诱导多能干细胞体外分化为心肌细胞的作用。方法:构建含钠钙交换体1启动子的pLVX-IRES-ZsGreen1慢病... 背景:诱导多能干细胞治疗缺血性心脏病被认为是极具前景的方法,但目前仍未找到一种理想的诱导方式。目的:探讨钠钙交换体(NCX1)启动子诱导多能干细胞体外分化为心肌细胞的作用。方法:构建含钠钙交换体1启动子的pLVX-IRES-ZsGreen1慢病毒质粒,使用ViraPowerTM慢病毒包装系统共转染293FT细胞。收集病毒测定病毒滴度后感染小鼠诱导多能干细胞,并使用嘌呤霉素进行筛选。观察胚状体数量以及诱导多能干细胞的分化效率,使用RT-PCR、免疫荧光分析法检测心肌特异标记物。结果与结论:成功构建了含钠钙交换体1启动子的pLVX-IRES-ZsGreen1慢病毒,感染小鼠诱导多能干细胞后使用流式细胞仪分选NCX1+/GFP+细胞。与NCX1-/GFP-细胞相比,NCX1+/GFP+细胞在4 d即出现细胞分化和跳动,NCX1+细胞GATA4/MEF2c/Nkx2.5基因表达分别是NCX1-细胞的4.2,7.5,2.5倍,免疫荧光显示CX43和心肌肌钙蛋白I呈阳性表达。结果表明,钠钙交换体1启动子可以促进小鼠诱导多能干细胞向心肌细胞分化。 展开更多
关键词 干细胞 诱导 小鼠诱导多能干细胞 钠钙交换体启动子 慢病毒 国家自然科学基金
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N-nitro-L-arginine Attenuates Morphine and Dihydroetorphine-induced Place Preference in Mice
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作者 万兴旺 黄矛 +4 位作者 何雅琴 李万亥 万莉 由振东 路长林 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 CAS 2002年第4期162-165,共4页
Opiate dependence has become one of the most urgent problems of modernsociety. Opiate dependence involves physical and psychical dependence. Although many addicts can bedetoxified, the relapse ratio of 95% in 5 a demo... Opiate dependence has become one of the most urgent problems of modernsociety. Opiate dependence involves physical and psychical dependence. Although many addicts can bedetoxified, the relapse ratio of 95% in 5 a demonstrates that opiate psychical dependence is aproblem more troublesome. It has been reported that acute and chronic administration of L- NNA canmarkedly retard the development of tolerance to physical dependence on morphine, and suppress theabstinence syndromes precipitated by naloxone in opiate dependent rodents, and even reverse theexisting morphine tolerance. However, the effect of L-NNA on the positive reinforcement ofpsychically active substances and its possible mechanism have not yet been reported. In presentstudy, the effect of L- NNA en the psychical dependence induced by opiates was evaluated on thebasis of conditioned place preference. 展开更多
关键词 Psychical dependence MORPHINE Dihydroetrophine Nitric oxide
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牙龈卟啉菌外膜蛋白ragB-GITRL真核共表达载体的构建及免疫原性研究 被引量:1
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作者 孔凡芝 郑东 +6 位作者 苏兆亮 佘鹏 徐鑫鑫 田莎莎 张盼 陈建国 许化溪 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期588-591,共4页
目的:构建牙龈卟啉菌外膜蛋白ragB和小鼠糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体的配体(mGITRL)真核共表达载体,在体内研究其免疫原性。方法:应用PCR扩增技术,从pMD18-T-ragB中获得ragB基因编码序列片段,克隆至真核共表达载体pIRES及pIRES-mG... 目的:构建牙龈卟啉菌外膜蛋白ragB和小鼠糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体的配体(mGITRL)真核共表达载体,在体内研究其免疫原性。方法:应用PCR扩增技术,从pMD18-T-ragB中获得ragB基因编码序列片段,克隆至真核共表达载体pIRES及pIRES-mGITRL。对重组质粒进行双酶切与测序鉴定后,以脂质体介导法转染至COS7细胞,通过Western blot检测其在COS7细胞中的表达。将成功构建的重组质粒免疫小鼠,应用ELISA法检测免疫后小鼠血清中抗RagB的水平。结果:PCR扩增目的基因,酶切和测序证实重组质粒pIRES-ragB及pIRES-ragB-mGITRL成功构建,Westernblot结果显示目的基因在COS7细胞及骨骼肌细胞中均过表达。小鼠血清中检测出高滴度的抗RagB的抗体。结论:pIRES-ragB-mGITRL表达载体的构建,为牙龈卟啉菌疫苗研究、预防和牙周炎治疗提供了实验依据。 展开更多
关键词 牙龈卟啉菌 RagB 小鼠糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体的配体 免疫原性
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(E)-苯乙基-3-(3,5-二羟基-4-异丙基苯基)丙烯酸酯的抗炎作用及抗炎初步机制研究 被引量:7
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作者 曹雯 刘欢 +7 位作者 韩清娟 管潇 冯志强 曹文轩 秦建波 李滨 张梦军 张惠静 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期12-16,共5页
目的研究(E)-苯乙基-3-(3,5-二羟基-4-异丙基苯基)丙烯酸酯(THCA354)化合物的抗炎作用及抗炎初步机制。方法通过二甲苯和佛波酯诱导的小鼠耳肿胀模型来评价THCA354的抗炎作用;进一步通过佛波酯诱导的小鼠耳肿胀模型来评价该化合物对小... 目的研究(E)-苯乙基-3-(3,5-二羟基-4-异丙基苯基)丙烯酸酯(THCA354)化合物的抗炎作用及抗炎初步机制。方法通过二甲苯和佛波酯诱导的小鼠耳肿胀模型来评价THCA354的抗炎作用;进一步通过佛波酯诱导的小鼠耳肿胀模型来评价该化合物对小鼠耳组织中髓过氧化酶(MPO)的活性和IL-1β、IL-6、TNF-α炎症细胞因子的抑制作用。结果与模型组相比,局部涂抹THCA354化合物的小鼠耳朵厚度,淋巴细胞的浸润,耳组织中髓过氧化物酶活性和IL-1β、IL-6、TNF-α炎症细胞因子的表达均显著降低。结论 THCA354化合物可能通过抑制中性粒细胞的活化和IL-1β、IL-6、TNF-α炎症细胞因子的释放从而有效地缓解小鼠耳组织炎症水肿和淋巴细胞的浸润,发挥抗炎作用。 展开更多
关键词 多酚类化合物 抗炎作用 TPA诱导小鼠耳肿胀模型 二甲苯诱导小鼠耳肿胀模型
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甲状腺素促进miPS细胞向心肌细胞分化的非基因机制的作用
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作者 燕松 欧东波 +4 位作者 赵佩 李晓莉 魏婷 陈焱 郑强荪 《心脏杂志》 CAS 2016年第5期518-522,共5页
目的探讨三碘甲腺原氨酸(thyroxine,T3)在诱导小鼠诱导多能干细胞(mi PSC)向心肌细胞分化过程中非基因的机制作用。方法培养Oct4-GFP+mi PS细胞,利用悬滴培养形成拟胚体(embryoid body,EB)的方法诱导mi PSC向心肌细胞分化,在诱导过程中... 目的探讨三碘甲腺原氨酸(thyroxine,T3)在诱导小鼠诱导多能干细胞(mi PSC)向心肌细胞分化过程中非基因的机制作用。方法培养Oct4-GFP+mi PS细胞,利用悬滴培养形成拟胚体(embryoid body,EB)的方法诱导mi PSC向心肌细胞分化,在诱导过程中分别添加甲状腺素T3和甲状腺素类似物三碘甲腺乙酸(triiodothyroacetic acid,Triac)。实验共分对照组、T3处理组、T3+Triac处理组。分别在诱导分化第4、6和12天,在倒置显微镜下观察细胞的分化情况,采用免疫荧光染色法检测分化第12天心肌细胞特异性结构蛋白α-actinin及肌钙蛋白(cardiac troponin,c Tn)T的表达,Western blot法检测c Tn T和p-JNK/JNK的表达情况。结果诱导分化第4、6和12天,T3处理组跳动EB数量明显多于对照组和T3+Triac组(P<0.05);免疫荧光染色显示T3处理组的α-actinin和c Tn T表达量较对照组和T3+Triac组明显增强(P<0.05);Western blot结果表明T3显著提高c Tn T的表达量(P<0.05);细胞内信号分子JNK蛋白的磷酸化水平明显大于对照组和T3+Triac组(P<0.05)。结论甲状腺素通过的非基因机制促进mi PS细胞向心肌细胞分化,这种作用机制可能跟JNK信号通路有关。 展开更多
关键词 甲状腺素 心肌细胞 小鼠诱导多功能干细胞 JNK
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Hepatoprotective effects of baicalein against CCl 4-induced acute liver injury in mice 被引量:22
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作者 Hai-Li Huang Ya-Jing Wang +4 位作者 Qing-Yu Zhang Bin Liu Fang-Yuan Wang Jing-Jing Li Run-Zhi Zhu 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2012年第45期6605-6613,共9页
AIM:To investigate the hepatoprotective effect of baicalein against carbon tetrachloride(CCl 4)-induced liver damage in mice.METHODS:Mice were orally administered with baicalein after CCl 4 injection,and therapeutic b... AIM:To investigate the hepatoprotective effect of baicalein against carbon tetrachloride(CCl 4)-induced liver damage in mice.METHODS:Mice were orally administered with baicalein after CCl 4 injection,and therapeutic baicalein was given twice a day for 4 d.The anti-inflammation effects of baicalein were assessed directly by hepatic histology and serum alanine aminotranferease and aspartate aminotransferase measurement.Proliferating cell nuclear antigen was used to evaluate the effect of baicalein in promoting hepatocyte proliferation.Serum interleukin(IL)-6,IL-1β and tumor necrosis factor-α(TNF-α) levels were measured by enzyme-linked immunosorbent assay and liver IL-6,TNF-α,transforming growth factor-α(TGF-α),hepatocyte growth factor(HGF) and epidermal growth factor(EGF) genes expression were determined by quantitative real-time polymerase chain reaction.RESULTS:CCl4-induced acute liver failure model offers a survival benefit in baicalein-treated mice.The data indicated that the mRNA levels of IL-6 and TNF-α significantly increased within 12 h after CCl 4 treatment in baicalein administration groups,but at 24,48 and 72 h,the expression of IL-6 and TNF-α was kept at lower levels compared with the control.The expression of TGF-α,HGF and EGF was enhanced dramatically in baicalein administration group at 12,24,48 and 72 h.Furthermore,we found that baicalein significantly elevated the serum level of TNF-α and IL-6 at the early phase,which indicated that baicalein could facilitate the initiating events in liver regeneration.CONCLUSION:Baicalein may be a therapeutic candidate for acute liver injury.Baicalein accelerates liver regeneration by regulating TNF-α and IL-6 mediated pathways. 展开更多
关键词 BAICALEIN Carbon tetrachloride Liver injury Liver regeneration Hepatocyte proliferation
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