缺氧诱导因子脯氨酰羟化酶抑制剂在慢性肾脏病血管钙化中的研究进展

缺氧诱导因子脯氨酰羟化酶抑制剂(HIF-PHI)是治疗慢性肾脏病(CKD)肾性贫血的新型药物。HIF-PHI作为缺氧诱导因子(HIF)稳定剂,可提高HIF表达水平,HIF的持续升高促进血管平滑肌细胞的成骨转分化和钙化,加大血管钙化的风险,长期使用HIF-PHI可能存在血管钙化的潜在风险。血管钙化是CKD患者心血管事件发病率和病死率增加的主要危险因素,因此应充分了解HIF-PHI潜在的危害性并加以重视。该文就HIF-PHI在CKD血管钙化中的研究进展进行综述。

细胞色素P450酶诱导/抑制的研究方法及在药物研究中的应用

细胞色素P450(CYP450)在外源及内源物质的生物转化过程中发挥着至关重要的作用,是肝脏中重要的药物代谢酶。CYP450酶活性/含量的改变直接影响了经其代谢的药物在体内的有效量和作用时间,与药效和用药安全性有密切的联系。因此,了解药物对CYP450酶可能存在的诱导或抑制作用是药物研究过程中不可缺少的研究内容。本文综述了近年来研究CYP450酶诱导/抑制水平和机制的试验方法以及在药物、尤其是在天然产物研究中的应用。

肝移植后诱导免疫抑制药物的选择

诱导免疫抑制是指在器官移植术后几天到几周内进行的初始免疫抑制。理想的诱导方案应该能够预防急性排斥反应的发生,而导致发生微生物感染和药物毒性的可能性较小。对接受肝移植的患者,术后常应用钙调磷酸酶抑制药、抗增殖药和抗体制剂。对于特殊情况如肾功能不全、丙型病毒性肝炎和爆发性肝衰竭患者,在实施肝移植术后诱导免疫抑制时,则应综合考虑,对于这类患者,目前尚没有疗效确切的治疗方案。

缺氧条件下缺氧诱导因子-1α抑制剂YC-1对人卵巢癌Skov3干细胞耐药的逆转作用

目的:探讨缺氧诱导因子-1α抑制剂YC-1在缺氧条件下逆转人卵巢癌干细胞Skov3耐药的机制。方法:选用人卵巢癌Skov3细胞通过无血清悬浮培养法富集肿瘤干细胞。分别于常氧及缺氧条件下检测不同浓度顺铂干预Skov3贴壁细胞及干细胞后测定顺铂对于两种细胞的抑制作用,及缺氧后干性指标、耐药指标ABCG2及HIF-1α的表达。当给予HIF-1α抑制剂YC-1后,测定顺铂对Skov3干细胞的抑制作用。并且检测干细胞干性指标、ABCG2及HIF-1α的mRNA表达。结果:悬浮培养的Skov3干细胞的干性指标CD44、NANOG、OCT-4及耐药指标ABCG2较贴壁细胞升高,且缺氧培养后,随着HIF-1α表达的升高,CD44、NANOG、OCT-4及ABCG2的表达也明显升高,P<0.05。干细胞的耐药性高于贴壁细胞,且缺氧培养耐药性增加。当给予YC-1后,干细胞耐药性下调,HIF-1α出现抑制,同时其干性指标CD44、NANOG、OCT-4、耐药ABCG2明显下调,P<0.05。结论:YC-1在缺氧条件下通过抑制HIF-1α下调ABCG2的表达逆转Skov3干细胞耐药。

磷酸二酯酶-4抑制剂对烟雾诱导的COPD大鼠肺组织中MUC5AC表达的影响及其作用机制的研究

目的:探讨磷酸二酯酶-4抑制剂罗氟司特对吸烟鼠肺组织MUC5AC表达的影响及其分子机制。方法:将Wistar大鼠随机分为对照组、烟雾组、罗氟司特组、烟雾+罗氟司特组。对照组和罗氟司特组大鼠置于无烟环境中饲养,烟雾组和烟雾+罗氟司特组大鼠暴露于有烟环境,免疫组化法检测各组大鼠肺组织MUC5AC的表达,PCR法检测MUC5AC mRNA表达量,WesternBlot检测MUC5AC蛋白的表达情况。结果:与对照组相比,烟雾组大鼠肺组织MUC5AC的mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05),而烟雾+罗氟司特组MUC5AC的表达水平较烟雾组显著降低(P<0.05)。结论:磷酸二酯酶-4抑制剂罗氟司特通过抑制吸烟鼠肺组织MUC5AC的表达,改善COPD。

低氧诱导因子脯氨酰羟化酶抑制剂治疗慢性肾脏病并肾性贫血的研究进展

低氧诱导因子脯氨酰羟化酶抑制剂(HIF-PHI)作为一种新型小分子口服药物,开辟了治疗肾性贫血的新途径。目前罗沙司他等HIF-PHI已陆续上市,本文通过分析HIF-PHI类药物治疗慢性肾脏病并肾性贫血的效果,以期为HIF-PHI的临床应用提供参考。

小鼠抗内质网相关的干扰素诱导病毒抑制蛋白(viperin)多克隆抗体的制备

目的以纯化的内质网相关的干扰素诱导病毒抑制蛋白(viperin)免疫小鼠制备其多克隆抗体并鉴定其特异性。方法对BALB/c小鼠颅内注射鸭坦布苏病毒,刺激小鼠脑组织产生viperin,通过反转录PCR从小鼠大脑组织克隆viperin,并将其插入至pGEX-6P-1原核表达载体,转化至大肠杆菌Rosetta。用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)对重组蛋白诱导表达,对其进行可溶性分析,以氯化钾染色切胶法对大量表达蛋白进行纯化;将纯化的重组viperin蛋白经腹部皮下免疫小鼠制备多克隆抗体,利用间接ELISA测定多抗效价,Western blot法和间接免疫荧光法(IFA)检测BHK-21仓鼠肾成纤维细胞瞬时表达的viperin蛋白鉴定viperin抗体的特异性和敏感性。结果成功克隆并表达小鼠viperin基因,制备的抗体效价可达1∶25600,小鼠抗viperin多克隆抗体可特异性识别BHK-21细胞表达的viperin蛋白。结论成功制备特异性较好的小鼠抗viperin多克隆抗体。

免疫抑制诱导性暴发性肝衰竭／纤维淤胆性肝炎1例

免疫抑制诱导性暴发性肝衰竭／纤维淤胆性肝炎（fibrosing cholestatic hepatits，FCH）不仅可出现于乙型肝炎病毒（HBV）相关性严重慢性肝病而接受原位肝移植的患者，也可出现原先慢性无症状HBV携带者或仅有轻度慢性乙型肝炎的患者，在接受肝外器官移植如肾移植、骨髓移植并进行免疫抑制治疗后。本文报道一例“大三阳”老年患者，肾移植3年后长期口服免疫抑制剂出现暴发性肝衰竭／纤维淤胆性肝炎。

低氧诱导因子抑制药在抗肿瘤方面的研究进展

低氧诱导因子抑制药(YC-1)是一种小分子物质,最初研究主要集中在心血管系统,如抗血小板聚集、收缩血管等方面。研究发现,YC-1能抑制低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达,从而开启YC-1在抗肿瘤方面的研究。YC-1抗肿瘤作用是多方面的,包括细胞周期抑制和诱导肿瘤细胞凋亡、抗血管生成、抗炎性反应及抑制金属蛋白酶类(MMPs)等。

缺氧诱导因子抑制剂YC-1对缺氧肝癌细胞生物钟基因和蛋白表达及增殖的影响

目的观察缺氧诱导因子(HIF)抑制剂YC-1对缺氧肝癌细胞生物钟基因、生物钟蛋白表达及细胞增殖的影响。方法将肝癌细胞Huh7置于乏氧培养箱中培养,分为实验组和对照组,实验组加入50μmol/L的YC-1,对照组加入DMSO,培养48 h后分别提取mRNA和蛋白。采用real-time PCR法检测两组细胞中的Per1、Per2、Per3、Cry1、Cry2、Clock、Bmal1 mRNA,采用Western blotting法检测Per1、Per2、Per3、Cry1、Cry2、Clock、Bmal1蛋白。取对数生长期的Huh7细胞,分为实验组和对照组,实验组加入50μmol/L的YC-1,对照组加入等量生理盐水,在乏氧条件下培养细胞,采用克隆形成实验观察两组克隆形成情况,计算克隆形成率。结果实验组细胞中Clock、Per1、Per3、Cry1 mRNA及蛋白相对表达量低于对照组,Bmal1、Per2、Cry2 mRNA及蛋白相对表达量高于对照组(P均<0.05)。实验组克隆形成个数为83个、克隆形成率为27.67%,对照组分别为191个、63.67%,实验组克隆形成个数及克隆形成率均低于对照组(P均<0.05)。结论 YC-1作用后,缺氧环境下的肝癌细胞中Clock、Per1、Per3、Cry1基因及蛋白表达下调,Bmal1、Per2、Cry2基因及蛋白表达上调,细胞增殖和克隆形成能力减弱。

负荷侧需求中家庭用电诱导性抑制模式自动匹配方法

为了提高家庭用电的断路器性能和用电安全性,本文提出一种负荷侧需求中家庭用电诱导性抑制模式自动匹配方法。首先,评测诱导性抑制模式下用电元素,得到离散化最优组合,并评测目标用电向量中是否存在对应的元素值。通过进制转换把离散的最优组合转换成连续的最优拟合问题,同时进行求解,凭借求解结果,利用特征抽取器以随机抽样法收集用电样本实例,凭借凝聚层次聚类法处理用电诱导性抑制源的特征向量聚类,得到用电元素的特征向量相似度,并进行模式自动匹配,最后依靠用电用户对匹配结果的反馈数据对匹配质量作出测评。实验结果表明,本文方法能够有效地对负荷侧需求中家庭用电诱导性抑制模式自动匹配,且匹配的结果较为精准。

低氧诱导因子脯氨酰羟化酶抑制剂对非透析慢性肾脏病合并肾性贫血患者血脂的影响

探讨低氧诱导因子脯氨酰羟化酶抑制剂对非透析慢性肾脏病合并肾性贫血患者血脂的影响。方法 60例研究对象全均为我院收治的非透析慢性肾病合并肾病贫血患者,纳入时间为2021年1月到2021年12月,通过数字双盲法将其分为对照组和研究组,分别给予皮下注射重组人红细胞生成素、加用低氧诱导因子脯氨酰羟化酶抑制剂治疗,分析治疗情况。结果 对照组显效8例(26.67%)、有效19(63.33%)、无效3(10.00%),临床疗效90.00%,研究组显效10(33.33%)、有效18(60.00%)、无效2(6.67%),临床疗效93.33%,组间对比无明显差异(P>0.05);对照组Hb水平(89.28±9.57)g/L、RBC水平3.10×1012/L、Hct26.80%、MCV89.60L,研究组Hb水平(105.40±15.40)g/L、RBC水平3.60×1012/L、Hct31.90%、MCV89.61L,研究组Hb、RBC、HCT水平均高于对照组(P<0.05),组间MCV水平无明显差异(P>0.05);对照组TG1.68mmol/L、TCHO(4.59±1.10)mmol/L、HDL-C(1.25±2.05)mmol/L、LDL-C2.75mmol/L、LDL-c/HDL-c2.45±0.92,研究组TG1.30mmol/L、TCHO(4.00±0.80)mmol/L、HDL-C(1.00±0.20)mmol/L、LDL-C2.00mmol/L、LDL-c/HDL-c2.00±0.50,研究组上述指标水平均低于对照组(P<0.05)。结论 非透析CKD合并慢性肾脏病患者使用低氧诱导因子脯氨酰羟化酶抑制剂治疗,疗效同皮下注射重组人红细胞生成素相当,但前者在改善贫血指标、血脂指标方面效果更为出色。

缺氧诱导因子抑制剂对去卵巢大鼠骨质疏松症治疗效果的研究

目的研究缺氧诱导因子抑制剂对卵巢切除(ovariectomized,OVX)雌性Sprague-Dawley大鼠的治疗效果,比较缺氧诱导因子抑制剂对骨密度的影响。方法在大鼠卵巢切除12周后,使用缺氧诱导因子抑制剂进行治疗。治疗8周后,在实验结束时将大鼠进行安乐死处理,获取大鼠血清、股骨和胫骨。通过生物力学测试,Micro-CT扫描和血清生化分析进行评估。结果与未给药的OVX大鼠相比,缺氧诱导因子抑制剂的全身给药显著降低了骨代谢指标Ⅰ型前胶原氨基末端前肽(type I collagen N terminal peptide,PINP)和Ⅰ型胶原羧基端肽(type I collagen carboxy-terminal peptide,CTX-I),增加了大鼠胫骨骨密度(bone mineral density, BMD),增强了股骨极限载荷、能量和刚度,差异比较有统计学意义(P<0.05)。结论缺氧诱导因子抑制剂能有效改善OVX诱导的骨质疏松症。

缺氧诱导因子脯氨酰羟化酶抑制剂对血管钙化的作用

肾性贫血是慢性肾脏病(CKD)常见的并发症,近年来,低氧诱导因子脯氨酰羟化酶抑制剂(HIF-PHIs)已被开发作为肾性贫血的新型口服治疗药物。血管钙化是CKD患者心血管事件发病率和病死率增加的主要危险因素,研究表明HIF-PHIs有促进血管钙化的可能,因此充分了解HIF-PHIs潜在的危害性并加以重视非常重要。该文就HIF-PHIs在血管钙化中的作用进行综述,为临床治疗提供思路。

低氧诱导因子脯氨酸羟化酶抑制剂治疗透析患者肾性贫血的疗效和安全性Meta分析

目的通过Meta分析比较低氧诱导因子脯氨酸羟化酶抑制剂(hypoxia-inducible factor prolyl hydroxylase inhibitors,HIF-PHIs)和红细胞生成刺激剂(erythropoiesis-stimulating agents,ESAs)治疗透析患者肾性贫血的疗效和安全性。方法通过计算机检索PubMed、Embase和Cochrane Library数据库,检索时间截止到2020年9月15日。纳入比较HIF-PHIs和ESAs治疗透析患者肾性贫血的随机对照试验。从中提取血红蛋白、铁代谢相关指标和不良反应等数据,使用Review Manager 5.3软件对提取的数据进行Meta分析。结果共有8篇文献纳入研究,包括1512名肾性贫血的透析患者。HIF-PHIs组和ESAs组在改善血红蛋白[MD=-0.15,95%CI(-0.35,0.05),P=0.14]、铁蛋白[MD=14.61,95%CI(-3.80,33.02),P=0.12]、铁调素[MD=-16.46,95%CI(-37.77,4.85),P=0.13]方面无统计学差异。HIF-PHIs组在改善转铁蛋白[MD=0.27,95%CI(0.08,0.46),P=0.02]、血清铁[MD=3.29,95%CI(1.22,5.37),P<0.01]、转铁蛋白饱和度[MD=4.15,95%CI(3.88,4.42),P<0.01]和总铁结合力[MD=7.59,95%CI(3.68,11.50),P<0.01]方面的疗效较ESAs组更优。两组总不良反应发生率[OR=1.31,95%CI(0.99,1.74),P=0.06]差异无统计学意义,而HIF-PHIs组恶心发生率[OR=1.85,95%CI(1.05,3.27),P=0.03]较高。结论初步证实低氧诱导因子脯氨酸羟化酶抑制剂在改善透析患者肾性贫血的疗效与安全性不亚于红细胞生成刺激剂。

维持性腹膜透析患者应用低氧诱导因子-脯氨酰羟化酶抑制剂治疗肾性贫血的临床疗效分析

肾性贫血是指各种肾脏疾病导致红细胞生成素(EPO)绝对或相对生成不足及尿毒症毒素影响红细胞生成与其寿命所致的贫血[1]。自红细胞生成刺激剂(ESAs)应用于慢性肾脏病(CKD)患者,其在治疗贫血、预防并发症等方面都表现出一定疗效,但近年研究显示大剂量ESAs使用导致心血管事件及死亡风险增加[2]。低氧诱导因子脯氨酰羟化酶抑制剂(HIF-PHI)是一种治疗肾性贫血的新型口服药物,通过抑制HIF降解,调控其信号通路下游靶基因转录与表达.

低氧诱导因子脯氨酰羟化酶抑制剂治疗肾性贫血的研究进展

低氧诱导因子脯氨酰羟化酶(HIF-PHD)通路被证实负责调节促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)生成及维持铁平衡。HIF-PHD抑制剂(HIF-PHIs)是针对HIF-PHD途径研究的药物,有望成为治疗慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)贫血的替代方法。HIF-PHI是口服的活性小分子,与传统外源性补充EPO的给药途径相比,可通过稳定HIF来刺激内源性EPO生成并改善铁代谢。综述了HIF-PHI的作用机理,临床开发的新进展及未来前景,以期为临床提供参考。

低氧诱导因子-脯氨酰羟化酶抑制剂治疗慢性肾脏病合并肾性贫血的疗效

目的探讨低氧诱导因子-脯氨酰羟化酶抑制剂治疗慢性肾脏病合并肾性贫血的有效性和安全性。方法将2020年1月至2021年1月在延安大学咸阳医院接受治疗的慢性肾脏病合并肾性贫血的162例患者按照随机数字表法分为4组,分别为罗沙司他低剂量组(n=38)、中剂量组(n=40)、高剂量组(n=42)与对照组(n=42);对照组患者静脉注射重组人促红细胞生成素(rhEPO),使用低氧诱导因子-脯氨酰羟化酶抑制剂各组患者分别口服不同剂量的罗沙司他,各组连续给药4周,并进行16周的随访;从治疗前基线期(入院后,未用药前)开始定期对比4组患者治疗肾性贫血的有效率、血红蛋白(Hb)、红细胞计数(RBC)、铁代谢指标及不良反应发生率。结果治疗后,对照组及低、中、高剂量组治疗肾性贫血的总有效率分别为73.81%、81.58%、87.50%、97.62%,4组患者总有效率差异有统计学意义(P<0.05),且高剂量组明显高于其余3组(P<0.05);治疗后,各组患者Hb、HCT、RBC水平及血清铁蛋白(SF)、转铁蛋白(TF)、转铁蛋白饱和度(TSAT)较治疗前均有升高(P<0.05),铁调素水平(Hepc)降低(P<0.05),且治疗后高剂量组Hb、HCT、RBC及铁代谢指标改善情况优于其他组,差异有统计学意义(P<0.05)。服用罗沙司他的3组患者无严重不良反应发生,4组患者不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P=0.742)。结论低氧诱导因子-脯氨酰羟化酶抑制剂治疗慢性肾脏病合并肾性贫血有一定疗效,可明显改善Hb、RBC、HCT水平及铁代谢相关指标。

低氧诱导因子-脯氨酰羟化酶抑制剂治疗肾性贫血的临床疗效分析

目的探讨肾性贫血患者给予低氧诱导因子-脯氨酰羟化酶抑制剂治疗的临床疗效。方法随机选取2020年7月—2021年6月在鄂尔多斯市中心医院治疗的90例肾性贫血患者作为研究对象,按照随机数表法分成A组(45例)和B组(45例)。B组给予红细胞生成素刺激剂治疗,A组给予低氧诱导因子-脯氨酰羟化酶抑制剂治疗,比较两组患者临床疗效、实验室检查指标、铁代谢指标。结果A组治疗总有效率(95.56%)较B组(80.00%)明显更高,差异有统计学意义(χ^(2)=5.075,P=0.024);治疗后A组的血红蛋白(Hb)、红细胞计数(RBC)、红细胞比容(HCT)水平明显较B组更高,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后A组的血清铁(SI)、血清总铁结合力(TIBC)、转铁蛋白(TRF)水平较B组明显更高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论肾性贫血患者给予低氧诱导因子-脯氨酰羟化酶抑制剂治疗,能够提高临床疗效,改善实验室检查指标、铁代谢指标。

生长抑制和DNA损伤诱导基因45β在足细胞损伤中的作用及机制

目的:研究生长抑制和DNA损伤诱导基因45β(GADD45B)在足细胞损伤中的作用及机制。方法:微分离37例肾活检证实的局灶节段性肾小球硬化(FSGS)患者肾小球,qRT-PCR检测肾小球GADD45B基因表达,同时进行免疫组化检测GADD45B蛋白表达。进一步利用模式动物斑马鱼研究GADD45B基因功能,Podocin启动子驱动和UAS/GAL4系统构建足细胞上特异性表达GADD45B转基因斑马鱼,硝基还原酶/甲硝唑(NTR/MTZ)系统特异性诱导足细胞损伤,观察斑马鱼水肿发生率,定量检测蛋白尿及足细胞凋亡。结果:FSGS患者肾小球GADD45B基因和蛋白表达水平显著高于正常对照组,并与FSGS患者白尿、血白蛋白及血肌酐水平密切相关;斑马鱼研究结果显示,足细胞上高表达GADD45B能够显著加重MTZ诱导的足细胞损伤,GADD45Ba/b转基因鱼的水肿发生率和蛋白尿水平均显著高于野生型斑马鱼。活性caspase染色结果显示,GADD45B转基因鱼发生凋亡的足细胞数显著高于非转基因鱼。吗啉环寡聚核苷酸注射斑马鱼抑制GADD45B基因表达,则MTZ诱导的斑马鱼水肿发生率和蛋白尿水平显著降低。结论:高表达GADD45B显著加重足细胞受损,而抑制GADD45表达则能有效改善足细胞损伤,提示其可作为治疗足细胞损伤药物靶点。