维甲酸对小型猪牙周膜干细胞成骨诱导能力的比较研究

目的分离、培养、鉴定小型猪牙周膜干细胞(PDLSCs)并使用不同浓度的维甲酸(RA)对其进行成骨方向诱导,观察各浓度RA诱导后小型猪PDLSCs的碱性磷酸酶活性、相关成骨基因表达的差异。方法采用组织块法获得小型猪PDLCs,有限稀释法纯化小型猪PDLSCs,免疫荧光法检测STRO-1、免疫细胞化学法检测波形蛋白、角蛋白鉴定小型猪PDLSCs。分别使用0.5μm、1μm、2μm RA对小型猪PDLSCs进行成骨诱导,14 d后行ALP染色,诱导21 d后,茜素红染色检测矿化结节。诱导14 d后对比各组细胞ALP活性。Real-time PCR定量分析各组RA诱导小型猪PDLSCs第21天ALP、OPN、OCN、Col I基因表达情况。结果纯化后小型猪PDLSCs STRO-1,波形蛋白阳性表达,角蛋白阴性表达,各组RA诱导14 d后,ALP染色阳性,诱导21 d后各诱导组细胞茜素红染色阳性。ALP活性检测显示,小型猪PDLSCs诱导至第14天,ALP活性随RA浓度增高而增高(P<0.001)。Real-time PCR分析成骨相关基因表达结果显示,ALP、OCN基因表达与RA浓度呈剂量依赖关系。结论0.5μm、1μm、2μm三种浓度的RA均可诱导小型猪PDLSCs分化为成骨样细胞,并且其成骨诱导的能力在一定范围内随着RA浓度增高而增强,可以认为RA可能是一种更优秀的成骨诱导剂。

不同脱矿时间对异体骨诱导能力的影响

缩短脱矿处理时间,使异体骨保留一定的矿质含量而具有相应的机械强度,对于修复受力区骨缺损具有重要意义。本实验将不同脱矿时间处理的异体骨植入SD大鼠肌肉内,观察其诱导新骨生成的情况。结呆表明,保留一定矿质含量的部分脱矿异体骨具有与全脱矿异体骨相同的骨诱导能力,全脱矿异体骨移植后有纤维化趋势,而部分脱矿异体骨则逐渐被新生骨所代替。

聚乙烯醇对大鼠牙髓细胞矿化诱导能力的实验研究

目的:观察聚乙烯醇(polyvinyl alcohol,PVA)对大鼠牙髓细胞的矿化诱导能力。方法:制备PVA涂层24孔板,分别以PVA、矿化诱导液对第4代SD大鼠牙髓细胞进行矿化诱导,通过定量的茜素红染色分析和碱性磷酸酶(ALP)活性检测比较二者的矿化诱导能力。结果:经PVA诱导的大鼠牙髓细胞,其ALP活性和茜素红分析在7 d的培养过程中,显示明显持续增高的趋势(P<0.01)。结论:PVA可诱导大鼠牙髓细胞矿化分化,有望成为组织工程化人工牙研究的支架材料。

氯原子光诱导能级移动和增宽

应用半经典的微扰论方法计算出了氯原子光诱导能级移动和增宽 ,其大小与光强成正比 .光频率为410 18cm-1时 ,氯原子初态 3p52 P03 /2 和 3p52 P01/2 在非共振情况下 ,光移动分别为 6 7.6和 2 6 .9MHz/Wμm-2 .当激光频率ν接近 3p52 P03 /2 → 4s2 P3 /2 的跃迁频率时 ,氯原子基态 3p52 P03 /2 的 |MJ,MI〉 =- 12 ,32 〉→ 12 ,32 〉超精细ESR谱线发生近共振频率光移动 ,大小量级为 0 .1MHz/Wμm-2 ,能级增宽一般远小于光移动 .

表面梯度涂层纯钛植入体骨结合和骨诱导能力的动物实验研究

目的:观察纯钛植入体表面用低温烧结技术生成羟基磷灰石/生物玻璃(nHA/BG)梯度涂层植入动物体内的骨结合和骨诱导能力。方法:将nHA/BG按比例混合,应用低温烧结技术在圆柱形纯钛植入体表面形成梯度涂层,模拟体液浸泡后产生活性纳米结构。将梯度涂层实验植入体和纯钛对照植入体分别植入12只新西兰兔股骨髁。术后不同时间行X线摄片,切取标本;硬组织切片,用四环素荧光标记观察植入体周围新生骨形成量;苦味酸-品红染色观察植入体-骨界面骨沉积和结合情况。结果:低温烧结和模拟体液浸泡制备的nHA/BG梯度涂层为纳米化多孔粗糙结构,动物实验示,梯度涂层植入体与周围新生骨明显增多,骨整合良好。结论:梯度涂层和模拟体液浸泡制备的植入体涂层有良好的骨结合和骨诱导能力。

两种人工合成骨形态发生蛋白活性多肽的骨诱导能力

背景:根据骨形态发生蛋白氨基酸序列中诱导成骨的核心功能区,课题组采用人工固态合成法合成了骨形态发生蛋白活性多肽Ⅰ与骨形态发生蛋白活性多肽Ⅱ。目的:初步评价骨形态发生蛋白多肽Ⅰ和骨形态发生蛋白活性多肽Ⅱ在动物体内的骨诱导能力。方法:将42只SD大鼠随机均分为7组,分别在臀部肌肉内植入载0.2,0.4,0.8 g/L骨形态发生蛋白多肽Ⅰ的羟基磷灰石/聚乳酸材料、载0.2,0.4,0.8 g/L骨形态发生蛋白多肽Ⅱ的羟基磷灰石/聚乳酸材料及羟基磷灰石/聚乳酸材料。植入后3,5周进行X射线、CT及组织学检测,观察7组成骨情况。结果与结论:载骨形态发生蛋白多肽羟基磷灰石/聚乳酸材料植入后3,5周的局部成骨均高于羟基磷灰石/聚乳酸材料组,说明两种多肽均具有一定的诱导成骨能力,且随着时间的增长效果更强;植入5周后,载0.4,0.8 g/L骨形态发生蛋白多肽Ⅰ组成骨效果高于载0.2 g/L骨形态发生蛋白多肽Ⅰ组、载0.2,0.4,0.8 g/L骨形态发生蛋白多肽Ⅱ组(P<0.05);载0.4 g/L骨形态发生蛋白多肽Ⅰ组与载0.8 g/L骨形态发生蛋白多肽Ⅰ组成骨效果无差异,表明骨形态发生蛋白多肽Ⅰ的诱导成骨能力强于骨形态发生蛋白多肽Ⅱ。

激素性股骨头坏死模型大鼠骨髓间充质干细胞增殖及定向诱导能力均降低

背景:近年来,干细胞治疗股骨头早期骨坏死已经成为一种可选的方法,但干细胞质量影响治疗效果。目的:评价激素性股骨头坏死模型大鼠骨髓间充质干细胞的增殖能力以及定向诱导分化能力。方法:20只SD大鼠随机分为对照组和观察组,每组10只,观察组构建激素性股骨头坏死模型,分离培养两组大鼠骨髓间充质干细胞。采用CCK-8法检测第3代骨髓间充质干细胞增殖情况。选择第3代骨髓间充质干细胞进行成骨、成脂定向诱导分化。成骨诱导7,14 d行碱性磷酸酶染色和茜素红染色,成脂诱导21 d行油红O染色。结果与结论:培养第1,3,5天观察组细胞吸光度值均低于对照组,差异均无显著性意义(P>0.05);但第7天时观察组吸光度值显著低于对照组,差异有显著性意义(P<0.05)。观察组碱性磷酸酶活性显著低于对照组(P<0.05)。与对照组比较,观察组的钙结节和脂滴数量较少。以上结果表明激素性股骨头坏死模型大鼠骨髓间充质干细胞的增殖能力和成骨成脂诱导分化能力均减弱。

一品红不同外植体愈伤组织诱导能力的研究

分别用一品红(EuphorbiapulcherrimaWilld)自然植株的叶片、叶柄、休眠芽、顶芽、带皮茎段、去皮茎段,以及经一段时间组织培养的试管苗相应器官作外植体,进行愈伤组织诱导能力的研究.结果表明,在所有试验过的外植体中,以试管苗的幼茎、幼叶为最好,自然植株上所取的幼茎、幼叶次之,愈伤组织诱导率分别为100%和95.0%;叶柄的愈伤组织诱导率极低,为15.0%左右;休眠芽、顶芽均未能诱导成功.

不同品种一品红愈伤组织诱导能力初步研究

以MS为基本培养基、一品红花序轴为外植体,通过不同植物生长调节剂,诱导不同品种愈伤组织的发生。结果表明一品红不同品种对培养基中不同植物生长调节剂的浓度及其组合的反应不一,同一品种在不同浓度的植物生长调节剂的培养基上以及不同品种在相同浓度植物生长调节剂的培养基上培养时,愈伤组织的诱导率差异较大,从而筛选出适合一品红不同品种花序轴愈伤组织诱导的配方。

珍珠层生物性能及成骨诱导能力研究进展

珍珠层作为骨修复材料,具有诱导成骨作用、合适的降解性能以及良好的力学性能。文章综述了珍珠层的结构及成分、细胞相容性和生物降解性及对前成骨细胞和骨髓间充质干细胞的成骨诱导作用,同时展望了其作为骨缺损修复材料的应用前景。

3D打印多孔磷酸镁生物陶瓷支架的制备及其体外骨诱导能力的研究

目的:应用3D打印技术及致孔剂浸出法制备具有两种不同尺度孔隙的磷酸镁多孔支架,研究其物理化学性能及骨诱导能力。方法:通过间接打印法制备多孔磷酸镁(MgP)支架,利用Na Cl(粒径25~50μm)作为致孔剂引入微孔,制备MgPNa微孔支架;通过扫描电镜、压汞仪、通用材料试验机及X线衍射仪检测支架的物理及化学性能;应用CCK8和DAPI染色检测人骨髓间充质干细胞(h BMSC)在支架上的增殖和黏附;采用茜素红染色和碱性磷酸酶(ALP)定量实验评估支架促h BMSC成骨分化的能力。结果:MgP-Na支架具有更高的孔隙率(P<0.05),同时微孔的存在明显降低了MgP-Na支架的压缩强度(P<0.05)。两组支架均具有良好的生物相容性,h BMSC可在支架上黏附与增殖,并且微孔结构更有利于细胞的黏附(P<0.05)。MgP-Na支架对于h BMSC的钙沉积和成骨分化具有更加积极的作用(P<0.05)。结论:磷酸镁多孔支架有望成为修复骨缺损的新型骨组织工程支架,MgP-Na支架的微孔结构在体外骨诱导中起到了积极有效的作用。

4.4′-亚甲基双(2-氯苯胺)对大鼠肝脏生物转化酶诱导能力的研究

用化学致癌剂4.4′-亚甲基双(2-氯苯胺)[MOCA]处理雄性大鼠后,可引起呈剂量依赖关系的乙氧基异吩恶唑酮O-脱乙基酶活性升高,同时伴有艾氏剂环氧化酶的活性下降MOCA还能引起几种其它生物转化酶的活性改变。本文结果表明,细胞色素P-448活性的诱导与化学物的致癌潜力有关。

幼年和成年猪松质骨脱细胞基质有机成分和成骨诱导能力的比较

目的:比较幼年和成年猪松质骨脱细胞基质(DCBM)的成骨特性。方法:制备幼年和成年猪DCBM并验证脱细胞效果。胶原和糖胺聚糖(GAGs)定量检测、Masson三色和阿利新蓝染色评估脱细胞前后胶原和GAGs含量及分布。免疫组化检测松质骨基质中骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)和骨钙蛋白(OCN)的分布情况。q PCR检测幼年和成年DCBM诱导复植间充质干细胞(MSC)的I型胶原(ColI)、碱性磷酸酶(ALP)、BMP-2和OCN等成骨分化指标的基因表达。纳米液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析DCBM的蛋白组成。结果:定量分析显示,幼年松质骨较成年松质骨在脱细胞前后胶原和GAGs含量更高。幼年松质骨脱细胞前后BMP-2、MMP-13、OCN等的表达均高于成年松质骨。成骨诱导实验显示复植于幼年DCBM的MSC,ALP、Col-I等的m RNA的表达量高于复植于成年DCBM。蛋白质谱GO分析和丰度分析显示幼年DCBM较成年DCBM肽链种类丰富,包含成纤维细胞生长因子、转化生长因子、胰岛素样生长因子等促骨生长细胞因子。结论:同等条件下制备的幼年DCBM与成年猪DCBM比较含有更丰富的促骨生长细胞因子,具有更强的成骨诱导性能。

鸡胚早期发育中组织者的起源及其诱导能力

本研究利用活性荧光染料ＤｉＩ，对鸡胚的期和期胚盘进行标记，以确定组织者的部位。并将组织者区域的细胞移植到宿主胚胎中，验证其诱导次级胚胎的能力。结果表明，期、期胚盘的组织者细胞位于胚盘中轴的后端，其细胞的性质已被决定，能够诱导次级胚胎的发育，本研究结果支持原条的发育与组织者细胞性质不是受下胚层诱导的观点。

恶臭假单胞菌HB3S-20在棉花中的定殖及诱导抗性研究

植物内生菌是防治植物病害的重要生防资源。恶臭假单胞菌Pseudomonas putida HB3S-20是本实验室从棉花内生细菌中所筛选到的一株对棉花黄萎病具有显著防效的潜在生防菌株。本研究采用利福平抗性标记技术和绿色荧光蛋白(GFP)标记技术检测了菌株HB3S-20在棉花组织中的定殖动态和定殖位点,并检测了菌株HB3S-20接种棉花植株后植物防御相关酶SOD、POD和CAT酶活性的变化。利福平标记试验结果表明,菌株HB3S-20主要定殖于根部,棉株接种菌株HB3S-20后第3~30 d检测到棉花根部内的菌量范围为2.2×10^(4)~6.7×10^(4)cfu/g,检测到棉花茎部内的菌量为0.04×104~2.7×10^(4)cfu/g,棉花茎部内的菌量低于根部,但在叶片中未被分离到。GFP标记试验结果表明,菌株HB3S-20不仅能附着在棉花根系表面,还能定殖在根部维管组织中。此外,菌株HB3S-20能够提高棉花中植物防御相关酶SOD和POD的活性,说明菌株HB3S-20能够诱导棉花植株的系统抗性,增强棉花抗病性。本研究初步揭示了恶臭假单胞菌HB3S-20在棉花组织内的定殖规律及其对棉株产生的诱导抗性,为菌株HB3S-20的防病机制研究提供了理论依据。

便携式激光诱导击穿光谱仪测定土壤中重金属

土壤重金属污染对农作物生长和人体健康都有严重危害,现场快速检测对土壤重金属污染调查、应急监测具有重要意义。采用自主研发的土壤重金属激光诱导击穿光谱现场快速检测仪对矿区周边土壤进行现场检测分析,以835个不同基质土壤的光谱数据建立定标数据库,通过支持向量机建立回归模型对土壤重金属元素含量进行定量反演。现场检测获取的全波段光谱波动在15%以内,Cd、Cr、Cu、Ni、Pb和Zn等6种元素光谱强度相对标准偏差平均值为6.31%。将检测结果与实验室电感耦合等离子体质谱法分析对比,6种元素的皮尔逊相关系数r在0.8501~0.9829,检测结果80%以上处于±30%相对误差区间分布。对比结果表明自主研发的土壤重金属激光诱导击穿光谱现场检测仪可以满足现场快速检测需求。

激光诱导击穿光谱技术对钕铁硼永磁材料中多元素的定量表征

“磁王”钕铁硼是现今性能最为优异的永磁体,因其优异的磁性能被广泛应用于工业互联网、新能源、 5G通讯等诸多高新科技领域。目前研究钕铁硼材料中元素成分的主要分析方法有电感耦合等离子体发射光谱(ICP-OES)和X射线荧光光谱(XRF),其中ICP-OES是湿法分析,样品前处理复杂,测试周期长,而XRF法可实现直接分析,但受制于其轻元素的检测能力很难满足对钕铁硼材料中主要轻元素B的分析需求。激光诱导击穿光谱(LIBS)技术具有分析效率高,样品前处理简单,多元素直接分析,适用于现场分析、在线分析等技术优点,使其在快速定量表征方面展现出其独有的优势。运用LIBS分析技术开展对钕铁硼材料中多元素定量表征的直接、快速分析的方法研究,首先针对钕铁硼材料中定量表征的九个元素Nd、 Co、 B、 Dy、 Tb、 Pr、 Cu、 Al、 Ga完成特征谱线的筛选,通过对系统激光器电压、激光剥蚀方式等因素在不同条件下对钕铁硼材料光谱信号稳定性的影响分析,优化并确立了分析条件,最终选用720V的激光器电压,15个预剥蚀脉冲15个剥蚀脉冲的激光剥蚀方式为钕铁硼样品的分析条件;其次,选取8个通过ICP-OES法定值的烧结钕铁硼样品,样品具有元素成分的梯度差异化特征,作为建立分析方法的标准样品,采用标准曲线法通过相对强度与浓度的关联方式,建立钕铁硼样品中Nd、 Co、 B、 Dy、 Tb、 Pr、 Cu、 Al、 Ga九个元素的定量分析校准曲线;最后选取两个烧结钕铁硼试样,运用建立的定量分析方法完成九个元素的定量表征,分析时间小于30 s,其定量结果与ICP-OES法测定结果的比对,具有较好的一致性。运用激光诱导击穿光谱分析技术实现了对钕铁硼材料中多元素成分的直接、同时、快速定量表征,为钕铁硼材料的快速定量表征提供了新的技术思路和表征方法。

哈茨木霉UN⁃2β⁃葡聚糖酶诱导及对水稻纹枯病的抑菌防病作用

【目的】优化哈茨木霉UN⁃2菌株产β⁃葡聚糖酶的培养基组分及发酵参数,提高其产酶能力,研究β⁃葡聚糖酶粗酶液对水稻纹枯病病原菌的拮抗作用及田间防效,阐明哈茨木霉菌株UN⁃2在水稻纹枯病生物防治中的应用潜力。【方法】采用单因素试验考察不同碳源、氮源和金属离子对哈茨木霉菌株UN⁃2产β⁃葡聚糖酶的影响,利用正交试验确定木霉菌株产β⁃葡聚糖酶的最适温度、pH、接种量、瓶装量、摇床转速和发酵时间,优化哈茨木霉菌株UN⁃2产β⁃葡聚糖酶诱导发酵条件;通过体外拮抗试验和田间防效试验研究β⁃葡聚糖酶粗酶液对水稻纹枯病的抑菌防病作用。【结果】哈茨木霉菌株UN⁃2发酵产β⁃葡聚糖酶最佳碳源和氮源分别为麦麸和硫酸铵,金属离子Ca^(2+)和Mg^(2+)对木霉产β⁃葡聚糖酶活性具有明显的促进作用。哈茨木霉UN⁃2菌株以10.0 g/L麦麸、0.5 g/Lβ⁃葡聚糖、4.0 g/L硫酸铵、1.5 mmol/L Ca^(2+)、0.5 mmol/L Mg^(2+)为培养基,在温度32℃、起始pH 6.5、接种量8 mL(10^(6) cfu/mL)、瓶装量30 mL/250 mL、摇床转速160 r/min条件下发酵64 h获得β⁃葡聚糖酶活性最高。木霉菌株UN⁃2产β⁃葡聚糖酶粗酶液对立枯丝核菌和禾谷丝核菌的菌丝生长和菌核萌发具有明显的抑制作用,对由立枯丝核菌引起的水稻纹枯病的田间防效达70.45%,与5%井冈霉素处理相当,β⁃葡聚糖酶粗酶液处理可提高水稻结实率和稻粒充实度。【结论】哈茨木霉菌株UN⁃2在最优发酵条件下产酶活性达97.68 U/mL,β⁃葡聚糖酶粗酶液对水稻纹枯病具有较强的抑菌防病效果,并对水稻植株具有一定的促生作用。

日本科学家用诱导能干细胞(iPS细胞)培育出癌症干细胞

据新华社东京4月13日电，日本冈山大学教授妹尾昌治领导的研究小组13日在美国《科学公共图书馆·综合卷》上报告，他们先用小鼠细胞培育出诱导多能干细胞（iPS细胞），然后向培养液中添加曾培育过肺癌、皮肤癌等癌细胞的液体，4周后将其中未分化的iPS细胞移植到小鼠皮下。结果显示，小鼠全部患上了癌症，且部分癌细胞不断分化，甚至有一些向肺转移。此结果提示，所使用的未分化的iPS细胞就是癌症干细胞。

煤液化残渣诱导缩聚制备冶金焦的影响因素

煤液化残渣所含沥青质和重油在热解时可产生大量自由基,如不能被及时稳定和缩聚将转化为大量焦油和气体,形成孔隙结构,从而影响所制冶金焦密度。为此,拟引入添加剂诱导其高效缩聚,提高聚合物密度,再经炭化后制备优质冶金焦。通过系统研究不同添加剂(糠醛、甲醇、呋喃和羟基丙酮)、温度(350、400、450、500和550℃)、停留时间(0、30、60和120 min)和添加量(0、4、8和16 g)对所制聚合物缩聚率、结构性质、密度、热稳定性和表面性质影响,获得煤液化残渣诱导缩聚的最优试验条件。在最优条件下,分别探讨所制聚合物和炭化物的表面形貌、微晶结构和元素变化情况,获得煤液化残渣诱导缩聚机理。结果表明,添加剂(糠醛)的诱导缩聚效果最佳,其次是羟基丙酮,因而理想添加剂至少应含有1个醛基或酮基。不同添加剂可促进煤液化残渣缩聚,提高所制聚合物比表面积、孔容、平均孔径和真密度。温度和停留时间对煤液化残渣/糠醛聚合物热稳定性和表面性质影响较大,温度升高和停留时间延长可促进煤液化残渣所含酚类基团和芳香物中H参与缩聚反应,提高聚合物的缩聚程度。煤液化残渣/糠醛(焦炭)整体呈片层密实状,并含更多无定形碳。