光诱导转化法制备片状三角形银纳米粒子的表面增强喇曼散射

采用柠檬酸三钠化学还原法制备球形Ag纳米粒子溶胶,并用高压球形氙灯对球形Ag纳米粒子溶胶进行光诱导实验.利用透射电子显微镜、紫外-可见吸收光谱研究了不同光照时间下的银胶纳米粒子的光谱特性和表面形貌,并以结晶紫为探针分子测量了银胶纳米粒子的表面增强喇曼散射光谱.实验结果表明:随着光照时间的增多,Ag纳米粒子溶胶颜色变化显著;紫外-可见吸收光谱吸收峰从单一峰渐渐显示出多个峰;透射电子显微镜图显示Ag纳米粒子由球形逐渐转变成片状三角形银纳米粒子、截角的片状三角形银纳米粒子;表面增强喇曼散射的增强效应随着光照时间的变化先逐渐增大,然后逐渐减小.

光诱导转化法制备单晶Ag纳米三棱体和立方体

分别以柠檬酸三钠 (TSC)及N 聚乙烯吡咯烷酮 (PVP)为稳定剂 ,首先采用KBH4化学还原法制得球形Ag纳米粒子溶胶 (粒径 12～ 18nm) ;再将两种溶胶置于 5 0 0W卤钨灯下进行光诱导转化实验 ,一定转化时间后 ,球形Ag纳米粒子分别转化为单晶Ag纳米三棱体 (边长 80～ 12 0nm)和立方体 (边长 90～ 2 0 0nm) .利用透射电子显微镜 (TEM )、电子衍射 (ED)和紫外 可见吸收光谱 (UV Vis)等手段对单晶Ag纳米三棱体和立方体进行了表征 ,对光转化过程中Ag粒子由球形到三棱体和立方体的转变原因进行了初步的分析和探讨 .认为主要原因在于不同种类稳定剂在Ag的不同晶面吸附作用不同 ,从而形成沿某一晶面取向生长的Ag单晶体 .

实时震荡诱导转化技术在α-突触核蛋白谱系病中的作用研究进展

神经元和神经胶质细胞内α-突触核蛋白(α-syn)异常沉积形成的路易小体是α-syn谱系病的诊断标志物,但因目前脑活检困难致其早期诊断存在滞后,而鉴于病理条件下α-syn可发生朊蛋白样复制并播散至外周,故利用实时震荡诱导转化(RT-QuIC)技术进行颅外组织病理性α-syn的超微量检测,可为α-syn谱系病的早期诊断提供依据。本文主要围绕RT-QuIC技术在检测α-syn谱系病患者不同组织中α-syn播种活性的应用进展进行综述,拟初步总结其在α-syn谱系病早期诊断和鉴别诊断中的潜在价值。

转化生长因子β诱导蛋白在胶质瘤中的表达及生物学功能

目的:探讨转化生长因子β诱导蛋白(TGFBI)在胶质瘤中的表达及其生物学功能。方法:通过从癌症基因组图谱(TCGA)、中国脑胶质瘤图谱(CGGA)和脑肿瘤分子数据库(Rembrandt)下载胶质瘤的转录组数据和相应的临床资料,分析在不同级别胶质瘤中TGFBI mRNA的表达水平,及其表达变化与胶质瘤患者预后的关系。免疫组织化学染色法检测35例胶质母细胞瘤组织和5例正常脑组织中TGFBI蛋白的表达水平。通过用慢病毒转染U87和U373细胞株构建TGFBI表达下调的胶质母细胞瘤细胞系,检测TGFBI对胶质瘤细胞增殖、侵袭、凋亡和细胞周期的影响。通过基因集富集分析(GSEA)预测TGFBI在胶质瘤发生发展中可能参与并调控的相关通路。结果:TCGA、CGGA和Rembrandt数据库的结果分析显示随着胶质瘤级别的增加,TGFBI mRNA的表达水平升高(P<0.05)。此外,TGFBI m RNA的高表达与胶质瘤患者不良预后显著相关(P<0.01)。免疫组化检测结果显示,与正常脑组织相比,胶质母细胞瘤组织中TGFBI蛋白表达水平显著增加(P<0.05)。细胞学实验结果显示,TGFBI表达下调可显著抑制胶质母细胞瘤细胞增殖和侵袭能力,同时能够促进细胞凋亡,促使细胞从G1期转向S期。GSEA分析结果显示高表达TGFBI可能通过TOLL样受体信号通路、NOD样受体信号通路和JAK-STAT信号通路参与调控胶质瘤恶性生物学行为。结论:TGFBI在胶质母细胞瘤组织中表达升高,可促进肿瘤细胞的增殖、侵袭,抑制细胞凋亡并诱导细胞周期重排,推测其可能在胶质瘤发生发展中扮演着癌基因的角色。

百草枯中毒小鼠肺组织转化生长因子β和缺氧诱导因子1α的表达

目的探讨百草枯中毒小鼠肺组织转化生长因子β(TGF-β)和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达变化。方法将30只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组(n=10)和百草枯组(n=20)。百草枯组腹腔注射百草枯20 mg/kg,对照组腹腔注射等体积生理盐水。在染毒后第7天处死10只百草枯组小鼠,第28天处死其余小鼠。通过苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色进行肺组织病理学观察;免疫组织化学法检测肺组织TGF-β和HIF-1α蛋白的表达。采用Pearson相关分析法分析TGF-β蛋白与HIF-1α蛋白表达的相关性。结果 HE染色和Masson染色结果均显示:在染毒后第7天,百草枯组可见肺纤维化表现;染毒后第28天,肺纤维化程度加重。染毒后第7天百草枯组小鼠肺组织TGF-β蛋白的表达明显高于对照组,染毒后第28天TGF-β蛋白的表达高于染毒后第7天,差异均有统计学意义(P<0.05)。染毒后第7天和第28天,百草枯组小鼠肺组织HIF-1α蛋白的表达均明显高于对照组(P<0.05);染毒后第28天的HIF-1α蛋白的表达高于第7天,但差异无统计学意义(P>0.05)。在染毒后第7天和第28天,百草枯组TGF-β蛋白与HIF-1α蛋白的表达均无相关性(r=0.295,P=0.630;r=0.218,P=0.725)。结论百草枯中毒可上调小鼠肺组织的TGF-β和HIF-1α蛋白,TGF-β和HIF-1α可能通过不同途径参与了肺纤维化的形成。

胰腺癌组织中转化生长因子β诱导蛋白表达及临床意义

目的:探讨胰腺癌组织中转化生长因子β诱导蛋白(TGFBIp/βig-h3)mRNA和蛋白表达水平及其意义方法:收集15例胰腺癌术后的患者癌组织、癌旁组织以及4例正常胰腺组织标本,提取胰腺组织标本总RNA,利用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测胰腺组织标本TGFBIp mRNA水平;应用Western blot检测TGFBIp蛋白表达水平。结果:胰腺癌组织TGFBIpmRNA及蛋白表达水平明显高于癌旁胰腺组织及正常胰腺组织(P<0.01)。在不同分化程度的胰腺癌组织中,TGFBIp mRNA及蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05);Ⅲ～Ⅳ期及有淋巴结转移胰腺癌组织中TGFBIp mRNA及蛋白表达水平明显高于Ⅰ～Ⅱ期及无淋巴结转移胰腺癌组织,差异有统计学意义(P<0.05)结论:TGFBIp高表达与胰腺癌的发生发展相关,其可能的调控机制及生物学效应有待进一步研究。

遗传性Avellino角膜营养不良一家系转化生长因子β诱导基因的突变研究

背景研究发现角膜营养不良与位于染色体5q31区域转化生长因子β诱导基因（TGFBI）的突变有关，目前发现Avellino角膜营养不良的TGFBI基因突变位点为R124H。目的检测中国遗传性Avellino角膜营养不良一家系的致病基因并进行分子遗传学分析，探讨其TGFBI的基因突变类型。方法本家系先证者在北京大学第三医院确诊，共调查连续4代27名成员，收集遗传性Avellino角膜营养不良患者8例和表型正常成员2名的外周血3ml提取DNA，合成TGFBI第4、11、12外显子的特异性引物，采用聚合酶链反应（PCR）进行扩增，对PCR产物直接进行DNA测序分析并与正常GenBank中的TGFBI基因序列比对。结果该家系中Avellino角膜营养不良的遗传模式符合常染色体显性遗传，8例患者的TGFBI基因第4外显子均显示CGC〉CAC（R124H）突变杂合子，家系中的2名表型正常成员无此基因位点突变。8名家系成员存在第11外显子的472密码子CTC〉CTT的杂合性同义单核苷酸多态性（SNP），9名家系成员存在第12外显子的540密码子TTT〉TTC的杂合性同义SNP，且SNP与疾病表现型无关。结论该Avellino角膜营养不良家系存在TGFBI基因突变，为R124H杂合突变类型。

麦冬多糖对转化生长因子-β1诱导心肌细胞凋亡的影响

目的探讨麦冬多糖(MDG-1)对转化生长因子(TGF)-β1诱导的心肌细胞活力、凋亡的影响及机制。方法大鼠H9c2心肌细胞分为对照组(不经特殊处理)、TGF-β1组(20ng/ml TGF-β1处理细胞)和MDG-1组(100mg/LMDG-1及20ng/mlTGF-β1处理细胞),噻唑蓝(MTT)及流式细胞术分别检测细胞活力及凋亡率;2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)探针检测活性氧(ROS)水平;Western印迹检测增殖细胞抗原(PCNA)、B淋巴细胞瘤(Bcl)-2、p53、核因子(NF)-κB p65、KB抑制蛋白激酶(IKK)α和β-catenin的蛋白表达。结果与对照组比较,TGF-β1组细胞活力显著降低,PCNA和Bcl-2蛋白表达显著降低,细胞凋亡率显著升高,ROS水平显著升高,p53、NF-κB p65、IKKα和β-catenin蛋白表达显著升高(P<0.05)。与TGF-β1组比较,MDG-1组细胞活力显著升高,PCNA和Bcl-2蛋白表达显著升高,细胞凋亡率显著降低,ROS水平显著降低,p53、NF-κB p65、IKKα和β-catenin蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论MDG-1可增强心肌细胞活力,抑制心肌细胞凋亡,其机制可能与降低细胞内ROS水平及抑制Wnt/β-catenin信号和NF-κB信号有关。

乙型肝炎病毒剪接特异性蛋白HBSP与TGFβ1诱导蛋白1相互作用促进TGFβ1诱导的肝癌细胞上皮间质转化

目的探讨乙型肝炎病毒剪接特异性蛋白(Hepatitis B spliced protein,HBSP)与转化生长因子1诱导蛋白1(transforming growth factor-β1-induced transcript 1,TGFβ1I1)相互作用对TGFβ1诱导的肝癌细胞上皮间质转化(epithelialmesenchymal transition,EMT)的影响。方法构建HBSP慢病毒表达载体,利用293T细胞包装慢病毒颗粒,感染Huh7肝癌细胞株。以5ng/mLTGFβ1分别诱导稳定表达HBSP的慢病毒细胞株及其对照细胞株,观察细胞形态的变化,并提取细胞蛋白,Westernblot检测上皮间质转化标志物E-钙黏素(E-cadherin,E-cad)、紧密连接蛋白(Claudin-1)、β-链蛋白(β-catenin)、N-钙黏素(N-cadherin,N-cad)的变化。进而以TGFβ1I1特异性siRNA转染上述细胞,Westernblot观察以上指标变化情况。最后以侵袭小室实验和划痕实验分别检测TGFβ1诱导的细胞侵袭与迁移能力的变化。结果筛选获得稳定表达HBSP的慢病毒细胞株Huh7-HBSP-flag-HIV及其对照细胞株Huh7-flag-HIV。以TGFβ1诱导后在显微镜下观察到细胞形态由紧密的上皮形态变为松散的间质形态;特异性抗体检测表明上皮标志物E-cad、Claudin-1、β-catenin表达量下降,而间质标志物N-cad表达上升。侵袭小室实验和划痕实验表明TGFβ1诱导的HBSP表达株侵袭及迁移能力增强。而转染TGFβ1I1特异性siRNA可逆转以上现象。结论 HBSP与TGFβ1I1相互作用可促进TGFβ1诱导的肝癌细胞上皮间质转化并增强其侵袭迁移能力,提示HBSP在HBV相关性肝细胞肝癌发生发展中具有重要的致病意义。

大鼠心肌梗死后心肌中转化生长因子β诱导基因-22蛋白表达的变化规律及白细胞介素-6对其表达的诱导作用

目的:检测大鼠心肌梗死(心梗)后心肌组织中转化生长因子β诱导基因-22(TSC-22)蛋白水平表达的动态变化,并在细胞水平上研究白细胞介素-6(IL-6)是否对其蛋白表达有诱导作用。方法:雄性Sprague-Dawley大鼠,通过结扎左冠状动脉前降支制备心梗模型。分为心肌梗死模型组(心梗组)和假手术对照组(假手术组),于术后1天、3天、7天、2周、4周进行心脏标本取材,酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠左心室心肌组织中TSC-22蛋白的表达。胰酶消化法分离培养乳鼠原代心肌细胞,随机分为心肌细胞对照组和心肌细胞实验组,心肌细胞对照组正常培养,心肌细胞实验组分别在2.5、5.0、10.0 ng/ml浓度的IL-6刺激下培养24 h。采用ELISA法、免疫细胞化学法和免疫印迹法(Western blot)等方法检测TSC-22蛋白表达。结果:ELISA法结果表明,大鼠心肌梗死1天、7天心梗组比假手术组左心室心肌组织中TSC-22蛋白含量显著升高,4周时则显著降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。心肌细胞实验的ELISA法结果表明,在10.0 ng/ml的IL-6刺激24 h后,心肌细胞实验组比心肌细胞对照组TSC-22蛋白表达水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),在2.5、5.0 ng/ml IL-6刺激24 h后,心肌细胞实验组与心肌细胞对照组比较差异无统计学意义;免疫细胞化学法和蛋白免疫印迹法结果显示,10.0 ng/ml的IL-6刺激24 h后,TSC-22在细胞核中的染色明显加深。结论:大鼠心梗后的急性期,如梗死1天、7天后,左心室心肌组织中TSC-22蛋白水平迅速升高。炎症细胞因子IL-6可能是其在心梗后上调的诱导因素之一。

转化生长因子β诱导基因在人角膜组织及细胞中的表达

背景临床研究表明多数角膜营养不良的发病与转化生长因子β诱导（TGFBI）基因突变有关，但其发病的分子机制尚不完全清楚。目的研究TGFBI基因在人角膜组织及体外培养的角膜上皮细胞和基质细胞中的表达，为进一步研究角膜营养不良的发病机制奠定基础。方法对人角膜上皮细胞和基质细胞进行培养和传代，应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法检测TGFBImRNA在人角膜组织及细胞中的表达，将供体角膜组织制成石蜡包埋切片，利用免疫组织化学法检测TGFBI蛋白在角膜组织、人角膜上皮细胞和角膜基质细胞中的表达，采用免疫荧光技术检测TGFBI蛋白在细胞爬片的表达。结果RT—PCR检测显示人角膜组织和基质细胞中在1274bp处可见TGFBImRNA的清晰条带，而角膜上皮细胞中亦有TGFBImRNA表达。免疫组织化学检测显示，TGFBI蛋白在人角膜组织中基质细胞的细胞质中呈阳性表达，但人角膜上皮细胞中未见TGFBI蛋白表达。免疫荧光检测技术显示，人角膜基质细胞胞质中TGFBI蛋白呈红色荧光，而角膜上皮细胞未见TGFBI蛋白表达。结论TGFBI主要在人角膜基质层表达，而在上皮层几乎不表达，有助于进一步研究TGFBI在角膜营养不良发病机制中的作用。

人转化生长因子β诱导基因真核表达载体的构建及其对人角膜上皮细胞增生的影响

背景人转化生长因子-β诱导（TGFBI）基因是第一个被确定的角膜营养不良的致病基因，而TGFBI引起角膜营养不良的机制目前尚不清楚，研究TGFBI的功能对于揭示角膜营养不良的发病机制及了解角膜生理及病理功能都具有重要意义。目的构建人TGFBI基因的真核表达载体并将其转染于人角膜上皮细胞，探讨其对角膜上皮细胞增生及相关基因表达的影响。方法从角膜移植后剩余的供体角膜中提取人正常角膜组织总RNA，经逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）合成TGFBI cDNA，将TGFBI胶回收产物与载体pCMV—N-HA分别进行双酶切，取连接产物10μl转化100μl大肠杆菌感受态DH5α克隆入真核表达载体pCMV—N—HA，以菌落PCR和EcoRV、XhoI双酶切法测序鉴定。设置重组质粒pCMV—N—HA—TGFBI转染组、空质粒pCMV—N—HA转染组、阴性对照组及pGFP—C2转染对照组，以测定重组质粒转染率。重组质粒pCMV-N—HA—TGFBI转染人角膜上皮细胞，激光共焦显微镜下观察转染pGFP—C2后增强型绿色荧光蛋白（EGFP）的表达，用细胞计数试剂盒8（CCK-8法）检测转染细胞的增生情况，SYBR荧光实时定量PCR和Western blot法检测TGFBI、基质金属蛋白酶（MMPs）、组织金属蛋白酶抑制剂（TIMP）蛋白及其mRNA在转染后角膜上皮细胞的表达。结果pCMV—N-HA—TGFBI阳性克隆质粒进行经EcoRV和XhoI双酶切鉴定测序结果显示，扩增的TGFBI cDNA以正确序列和方式插入载体，pGFP—C2载体转染人角膜上皮细胞后48h共焦显微镜下可见EGFP的表达，转染效率为70％。重组质粒pCMV—N—HA-TGFBI转染组TGFBI mRNA的表达明显高于空质粒pCMV—N—HA转染组和阴性对照组，TGFBI蛋白仅在pCMV—N-HA．TGFBI转染组表达。CCK-8法显示重组质粒pCMV—N-HA-TGFBI转染组、空质粒pCMV—N—HA转染组和阴性对照组间角膜上皮的吸光度（A450）值的差异无统计学意义（F=3．34，P〉0．05）。荧光实时定量PCR结果显示，重组质粒pCMV-N—HA-TGFBI转染组中MMP，mRNA、MMP，mRNA转录水平比空质粒pCMV—N—HA转染组和阴性对照组均升高（P〈0．05），而TIMP，mRNA则明显下降（P〈0．05）；Western blot结果证实MMP1、MMP3、TIMP1蛋白表达规律相同（P〈0．05）。结论人TGFBI基因真核表达载体可被成功构建并在人角膜上皮细胞中呈过表达。TGFBI可能是通过MMP1、MMP3及TIMP1的表达变化来增加细胞外基质的降解，从而参与角膜的某些生理病理过程。

g-C_(3)N_(4)/TiO_(2)-PVDF光响应膜界面实现高效油水分离:不同暴露晶面诱导的渗透性和选择性差异及性能

油滴堵塞导致的膜污染问题限制了膜技术在油水分离中的应用,构建选择性分离油水混合液的功能界面是实现高效油水分离的重要途径.本文制备了TiO_(2)(001)和(101)晶面暴露的g-C_(3)N_(4)/TiO_(2)-PVDF(聚偏氟乙烯膜)光催化膜,研究了不同暴露晶面对油水分离效果的影响及作用过程.结果显示,光照射下,TiO_(2)(001)晶面赋予了g-C_(3)N_(4)/TiO_(2)(001)-PVDF膜优异的超亲水和水下超疏油特性,与TiO_(2)(101)晶面暴露的膜相比,g-C_(3)N_(4)/TiO_(2)(001)-PVDF膜具有更优异的油水分离性能.g-C_(3)N_(4)/TiO_(2)(001)PVDF膜在可见光照射下,纯水通量达到2002.9 L·m^(-2)·h^(-1),较g-C_(3)N_(4)/TiO_(2)(101)-PVDF膜提升了60.8%,较黑暗条件下提升了47.1%;对5种不同油类物质的截留效率均>99%,且保持420.4~665.2 L·m^(-2)·h^(-1)的高渗透通量.而g-C_(3)N_(4)/TiO_(2)(101)-PVDF膜截留效率最高仅有61.8%,且渗透通量不足200 L·m^(-2)·h^(-1).通过瞬态光电流响应和电子顺磁共振技术探究了不同晶面暴露光催化膜的作用机理.结果表明,g-C_(3)N_(4)/TiO_(2)(001)-PVDF膜的光响应电流更强且羟基自由基产量更多.g-C_(3)N_(4)/TiO_(2)(001)-PVDF膜经过长达360 min的连续实验,渗透通量依然有264 L·m^(-2)·h^(-1);8次循环再生实验中始终保持高截留效率和渗透通量.

转化生长因子β诱导蛋白研究进展

转化生长因子β诱导蛋白（transforming growth factor-β-induced protein,TGFBIp/βig-h3）是1个多功能细胞外基质分子,作为转化生长因子β（TGFβ）诱导基因已在肺腺癌细胞系A549中克隆成功。TGFBIp在细胞黏附、迁移、增殖、分化中起十分重要作用,其表达与细胞黏附、迁徙、角膜营养不良、肿瘤侵犯与转移、血栓、风湿性关节炎、动脉粥样硬化、

转化生长因子β诱导蛋白与胰腺癌的研究进展

胰腺癌(pancreatic cancer)是一种高度恶性的肿瘤,因起病隐匿,早期常无明显的症状及体征,常难被临床医生发现,且在大多数患者确诊时,往往早已发现远处脏器的转移,因而错失了最好手术时间,且常规化疗、放疗效果不佳,导致其预后极差。胰腺癌肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)包含癌症细胞、免疫细胞、基质细胞、细胞外基质以及其中的多种可溶性分子。并且在胰腺癌的细胞外基质中存在一些结合点,可以与微环境中的细胞因子进行相互结合,通过调节微小血管生成,抑制化疗药物和促进肿瘤转移等方式,使得肿瘤微环境朝着有利于癌症细胞生长的方向发展。随着肿瘤相关微环境研究的不断进展,转化生长因子β诱导蛋白(βig-H3)作为一种细胞外基质蛋白,其在肿瘤组织中发挥的作用受到了研究者们的广泛关注。本文拟对近年来在βig-H3的结构功能、其在胰腺癌中的表达作用以及参与胰腺癌免疫抑制机制等方面的相关研究进展进行综述。

上皮-间质转化诱导转录因子在肺癌诊断和预后预测中的作用

背景与目的:上皮-间质转化诱导转录因子(epithelial-mesenchymal transition-inducing transcription factor,EMTTF)可调节肿瘤增殖、转移和肿瘤干细胞活化,在肺癌远处转移和复发中起重要作用,拟通过公共数据库来分析EMT-TF用于肺癌早期诊断及治疗方面的前景。方法:应用Oncomine和GEPIA数据库分析EMT-TF在肺癌组织及正常组织间的表达差异,及其与肺癌肿瘤分期的相关性;随后,使用Kaplan-Meier Plotter分析EMT-TF表达量与肺癌预后的关系;最后,通过STRING和Mentha数据库分析EMT-TF间的蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络及与之相互作用的分子。结果:肺癌组织Twist家族BHLH转录因子1(Twist family BHLH transcription factor 1,Twist1)表达明显增加,且其表达量越高,肺癌病理分期越重、预后越差;锌指E盒同源结合蛋白1(zinc finger E-box binding homeobox 1,ZEB1)和ZEB2在肺腺癌和肺鳞癌中表达降低,并与预后不良密切相关;Snail超家族锌指转录因子2(Snailfamilyzincfinger2)在肺癌中的表达水平增加,和肺癌临床分期具有明显相关性,但和肺癌的预后没有相关性。结论:Twist1、SNAI2、ZEB1和ZEB2在肺癌中的表达量和正常组织不同,Twist1和SNAI2的表达量与肿瘤的分期及预后相关,ZEB1和ZEB2在肺癌中表达量降低与肺癌患者的预后不良相关。因此,Twist1和SNAI2可能是肺癌诊断和研究潜在的生物标志物,ZEB1和ZEB2可作为肺癌预后的预测分子。

转化生长因子β诱导基因在胃癌中的表达及与幽门螺杆菌感染的关系

目的探讨转化生长因子β诱导基因(TGFβI)在胃癌中的表达及与幽门螺杆菌(Hp)感染的关系。方法取50例胃癌患者的胃癌组织,取52例慢性萎缩性胃炎(CAG)患者及54例慢性浅表性胃炎(CSG)患者的胃黏膜组织,采用定量聚合酶链反应(qPCR)检测TGFβI mRNA的相对表达量,分析TGFβI与Hp感染及患者临床特征的关系。结果胃癌组织中TGFβI mRNA相对表达量高于CAG组织和CSG组织,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。采用_(13)C呼气实验来判定Hp的感染状态,Hp阳性患者中,胃癌组织中TGFβI mRNA相对表达量高于CAG组织和CSG组织,胃癌组织、CAG组织和CSG组织中TGFβI mRNA相对表达量均高于Hp阴性患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。中低分化、浸润深度为T_(3~4)、TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期胃癌患者胃癌组织中TGFβI mRNA的相对表达量分别高于高分化、浸润深度为T_(1~2)、TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论胃癌组织中TGFβI高表达,且其表达可能与胃癌患者分化程度、浸润深度、TNM分期有关,Hp感染可能通过一定的机制促进TGFβI的表达,进而促进胃癌的发生发展过程。

普伐他汀和洛沙坦联合应用对慢性环孢素A肾毒性模型大鼠转化生长因子诱导基因h3的抑制作用

[目的]探讨普伐他汀和洛沙坦联合应用对慢性环孢素A(CsA)肾毒性模型大鼠抗纤维化作用的分子机制.[方法]取Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为对照组(橄榄油1mg/kg)、CsA毒性组(皮下注射CsA 15mg/kg)、洛沙坦治疗组(洛沙坦10mg/kg+CsA)、普伐他汀治疗组(普伐他汀20mg/kg+CsA)、联合治疗组(CsA+洛沙坦+普伐他汀),均每日给药1次,持续4周.检测各组大鼠肾功能、收缩期血压、血脂水平;利用三色染色观察肾组织纤维化程度;利用Northern杂交、RNA原位杂交、免疫印迹法分别检测转化生长因子β1(TGF-β1)和TGF-β诱导基因h3(βig-h3)的表达.[结果]与CsA毒性组比较,普伐他汀和洛沙坦单独治疗组肾小管间质纤维化明显减轻(洛沙坦24.1%±4.0%,普伐他汀30.3%±5.2%,P<0.01,2.0%±3.0%),同时TGF-β1(洛沙坦230%±20%,普伐他汀240%±15%,P<0.01)和βig-h3(洛沙坦178%±21%,普伐他汀167%±10%,P<0.01)表达均明显降低,联合治疗进一步降低上述指标水平(肾小管间质纤维化程度13.5%±2.5%,TGF-β1 150%±28%,βig-h3 126%±9%,P<0.01).直线相关分析结果显示,βig-h3表达与TGF-β1(r=0.787,P<0.001)和肾小管间质纤维化程度(r=0.688,P<0.001)呈正相关.但是各组收缩期血压和血脂水平间差异均无统计学意义(P>0.05).[结论]在慢性CsA肾毒性中,普伐他汀和洛沙坦联合应用通过抑制βig-h3表达起到抗纤维化协同作用,而不依赖于降低血压或降低血脂作用.

汉族 、藏族胃癌患者胃癌组织中转化生长因子β诱导基因的表达及其临床意义

目的探讨汉族、藏族胃癌(GC)患者GC组织中转化生长因子β诱导基因(TGFBI)的表达及其临床意义。方法选择GC患者(汉族30例,藏族30例)、慢性萎缩性胃炎(CAG)患者(汉族30例,藏族30例)及慢性非萎缩性胃炎(CNAG)患者(汉族30例,藏族30例),收集胃黏膜组织,其中汉族GC组织及其癌旁组织、藏族GC组织及其癌旁组织、汉族CAG组织、藏族CAG组织、汉族CNAG组织、藏族CNAG组织各30例。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TGFBI mRNA相对表达量,分析汉族、藏族不同胃黏膜组织中TGFBI mRNA相对表达量,比较不同临床特征GC患者GC组织中TGFBI mRNA相对表达量。结果在汉族和藏族患者中,GC组织中TGFBI mRNA相对表达量均高于癌旁组织、CAG组织、CNAG组织,癌旁组织中TGFBI mRNA相对表达量均高于CNAG组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。汉族、藏族间同一类型胃黏膜组织中TGFBI mRNA相对表达量比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05)。在不区分民族的情况下,GC组织中TGFBI mRNA相对表达量高于癌旁组织、CAG组织、CNAG组织(P<0.05),癌旁组织和CAG组织中TGFBI mRNA相对表达量均高于CNAG组织(P<0.05)。浸润深度为T3-T4、有淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ-Ⅳ期的GC患者GC组织中TGFBI mRNA相对表达量分别高于浸润深度为T1-T2、无淋巴结转移、TNM分期为Ⅰ-Ⅱ期的GC患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论GC组织、癌旁组织、CAG组织、CNAG组织中TGFBI mRNA相对表达量逐渐下降,但其在汉族、藏族间同一类型胃黏膜组织中的表达无差异。TGFBI表达情况与浸润深度、淋巴结转移情况及TNM分期有关,因此动态检测TGFBI对GC患者的早期诊断、治疗及预后评估具有一定的帮助。

lncRNA ZNRD1-AS1通过抑制转化生长因子β诱导基因表达抑制膀胱癌细胞的侵袭和增殖

目的 探讨膀胱癌组织中长链非编码RNA (long-chain non-coding RNA,lncRNA) ZNRD1-AS1的表达水平,以及ZNRD1-AS1对膀胱癌5637细胞侵袭和增殖的影响及机制。方法 采用实时定量PCR(RT-qPCR)检测53例膀胱癌患者肿瘤组织和癌旁组织中ZNRD1-AS1的表达水平。以携带ZNRD1-AS1的慢病毒或阴性对照慢病毒感染5637细胞,分别命名为实验组和对照组。RT-qPCR检测感染效率。Transwell侵袭实验和四甲基偶氮唑蓝(MTT)法分别检测感染后5637细胞的侵袭能力和增殖能力。RT-qPCR和Western blot检测感染后5637细胞中转化生长因子β诱导基因(transforming growth factorβinduced gene,TGFBI)在mRINA和蛋白水平的表达量。结果 膀胱癌组织和癌旁组织中ZNRDI-ASI的表达分别为1.43±0.38和5.84±0.82(P<0.01)。与对照组比较,实验组5637细胞中ZRD1-AS1的表达明显增加(P<0.01)。对照组和实验组中5637穿膜细胞数分别为83.40±8.65和40.19±7.32,实验组5637细胞的侵袭能力明显被抑制(P <0.01)。实验组5637细胞的增殖能力从第3天开始明显被抑制(P<0.05)。实验组5637细胞株中TGFBI基因在mRNA和蛋白水平的表达量均明显降低(P<0.01)。结论 ZNRD1-AS1在膀胱癌中呈低表达水平,过表达ZNRD1-AS1可能通过上调TGFBI基因的表达,抑制膀胱癌5637细胞的侵袭和增殖能力。