诺丽发酵果汁化学成分及抗氧化活性研究

采用多种色谱技术从诺丽(Morinda citrifolia)发酵果汁中分离得到10个化合物,并应用波谱学方法进行结构鉴定,分别鉴定为6,7-二羟基香豆素(1)、7-羟基香豆素(2)、东莨菪亭(3)、6-羟基-7-甲氧基香豆素(4)、7-羟基-4-甲基香豆素(5)、1,2,3,4-四氢-β-咔啉-3-羧酸(6)、(1S,3S)-1-甲基-1,2,3,4-四氢-β-咔啉-3-羧酸(7)、(1R,3S)-1-甲基-1,2,3,4-四氢-β-咔啉-3-羧酸(8)、对羟基苯甲酸(9)、龙胆酸(10)。利用DPPH和ABTS+·自由基清除能力法进行抗氧化活性测定,其中化合物1、3、4、10抗氧化活性较强,化合物1和10清除DPPH和ABTS+·自由基能力的IC50值分别为160.87、8.32和6.17、9.71μmol/L。化合物2、5~8均系首次从该植物中分离,本研究得到诺丽发酵果汁中香豆素、有机酸和生物碱三类成分,并且化合物1、3、4、10抗氧化活性良好。

诺丽发酵果汁中抗氧化物质的研究

本实验针对茜草科植物诺丽的发酵果汁中抗氧化物质进行了定性和定量研究。采用系统预实验法对其不同极性的洗脱部位可能含有的化学成分进行预实验,探索了各个部位的化学成分。采用DPPH·自由基清除、ABTS＋·自由基清除和FRAP三种实验方法对各部位洗脱物的抗氧化活性进行了测定,结果显示50%~90%乙醇洗脱部位抗氧化能力最强,此部位主要含有多酚类、黄酮类、香豆素内酯类和蒽醌类成分,并且研究表明抗氧化能力与多酚成分的含量成极显著相关。本研究结果表明多酚类物质是诺丽发酵果汁发挥抗氧化作用的主要功能成分。

诺丽发酵果汁中总香豆素质量浓度的测定

以东莨菪内酯为对照品,建立诺丽发酵果汁中总香豆素的质量浓度测定方法,结果显示东莨菪内酯在0~0.020 mg/m L线性范围良好,r=0.999 2;平均回收率为102.44%,RSD=1.81%(n=9)。采用紫外分光光度法对不同发酵时间的诺丽果汁中总香豆素成分进行质量浓度测定,质量浓度在0.176~0.243 mg/m L范围内。本实验建立的质量浓度检测方法简单、迅速、准确、重复性好,适用于液体样品中香豆素成分质量浓度的测定。检测结果表明:随着发酵时间的增长,诺丽果汁中香豆素类成分的质量浓度变化不大。

诺丽发酵果汁抗氧化实验研究

研究诺丽发酵果汁对溴代苯所致小鼠急性肝损伤的抗氧化功能。将小鼠随机分组,高、中、低剂量组分别经口给予不同浓度受试样品,空白对照组则给予同体积溶剂,连续给药30 d后取血测抗氧化酶活力。并在第31天,给予受试样品或溶剂1 h后,用溴代苯油造模致肝损伤,测肝组织抗氧化酶活力和过氧化脂质含量。结果表明,受试样品高、中、低三剂量组中全血谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力均高于空白对照组,但无显著性差异;中剂量组血清总超氧化物歧化酶(SOD)活力显著高于空白对照组(P<0.05)。中剂量组肝组织中过氧化脂质(MDA)含量显著低于模型对照组(P<0.05)。结论显示,发酵诺丽果汁具有一定的抗氧化功能,对肝组织脂质过氧化损伤具有一定保护作用。

诺丽发酵果汁润肠通便作用效果观察

目的:观察发酵诺丽果汁对小鼠的通便作用。方法:将动物小鼠随机分为阴性对照组、模型对照组、低、中、高剂量组5组,经口给予3.3、6.6、13.2 m L/kg剂量的受试样品15 d后,测定小肠墨汁推进率及排首粒黑便时间,6 h内排便粒数和粪便重量。结果:与模型对照组相比,受试样品不能增加小鼠的小肠墨汁推进率(P>0.05),不能缩短便秘小鼠的首便时间及增加排粪便量。结论:发酵诺丽果汁不具有润肠通便的作用。

诺丽发酵果汁中总木脂素含量测定

[目的]建立诺丽发酵果汁中总木脂素的含量测定方法。[方法]以鬼臼毒素为对照品,采用紫外分光光度法建立总木脂素含量的分析测定方法。[结果]鬼臼毒素对照品在0~0.100 mg/m L线性关系良好;平均回收率为99.61%,RSD为1.85%。采用此方法对不同发酵时间的诺丽果汁中总木脂素成分进行含量测定,含量为0.401 9~0.582 7 mg/m L。[结论]该试验建立的含量检测方法简单、迅速、准确、重复性好,适用于液体样品中总木脂素成分含量的测定。随着发酵时间的增长,诺丽果汁中木脂素类成分的含量变化不大。

诺丽发酵果汁泡腾片的研制

筛选诺丽发酵果汁喷雾干粉的泡腾片的制备工艺。采用单因素试验筛选诺丽喷干粉、泡腾剂、黏合剂、润滑剂、矫味剂等的用量;以p H、崩解时间和口感为指标,正交试验法优选喷干粉、泡腾剂、矫味剂用量和泡腾剂酸碱比例。泡腾片的最优配方为枸橼酸和碳酸氢钠的质量比为1︰0.8,诺丽果汁喷干粉的用量为400 mg,矫味剂三氯蔗糖的使用量为1%,以无水乙醇作为黏合剂,5%的PEG 6000作为润滑剂。该工艺经过三批试验验证,操作简单方便,压片过程中不易黏冲,具有一定实用性。

发酵诺丽果汁对高尿酸血症细胞模型的保护作用及其机制研究

目的:探究发酵诺丽果汁(fermented noni(Morinda citrifolia)fruit juice,FNJ)对高尿酸血症人肾皮质近曲小管上皮细胞(Human renal proximal tubular epithelial cells,HK-2)的保护作用并阐述其机制。方法:制备诺丽果浆,果胶酶和植物乳杆菌发酵处理后获得发酵诺丽果汁。利用腺苷联合黄嘌呤氧化酶(Xanthine oxidase,XO)建立HK-2细胞高尿酸血症模型;通过CCK-8实验检测发酵诺丽果汁对HK-2细胞的细胞毒性;检测发酵诺丽果汁干预后HK-2细胞培养液上清中尿酸含量以及通过Western blot法检测细胞中尿酸盐转运蛋白1(Urate anion transporter 1,URAT1)和葡萄糖转运蛋白9(glucose transporter 9,GLUT9)的表达水平,验证发酵诺丽果汁对高尿酸血症HK-2细胞的降尿酸作用;通过检测HK-2细胞中白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达水平,确定发酵诺丽果汁对高尿酸血症HK-2细胞中炎症反应的作用;通过检测HK-2细胞中磷酸化核转录因子-κB(Nuclear transcription factor kappa B,NF-κB)p-p65/p65的表达水平,验证发酵诺丽果汁对NF-κB信号通路的抗炎作用。结果:处理浓度低于60μL/mL时,发酵诺丽果汁不表现细胞毒性;发酵诺丽果汁干预后细胞培养液上清中的尿酸含量显著下降并呈剂量依赖性;发酵诺丽果汁干预组的URAT1、GLUT9表达较模型组显著降低;发酵诺丽果汁可以显著抑制高尿酸血症HK-2细胞模型中IL-1β和TNF-α的表达水平;发酵诺丽果汁可以显著抑制疾病模型中p-p65/p65的表达。结论:发酵诺丽果汁对高尿酸血症HK-2细胞起到降尿酸作用,进而通过调控NF-κB信号通路抑制了炎症反应,从而发挥保护作用。

诺丽果控温发酵过程中理化性质和活性物质的变化规律

采用密封静置发酵的方式生产诺丽发酵果汁。选择p H值、可溶性固形物、有机酸等理化指标,总糖、总酚、环烯醚萜等活性物质及挥发性物质探究诺丽果发酵过程中的理化指标和活性物质变化情况。研究发现,诺丽果发酵具有阶段性。前60 d,p H值、总酚含量逐渐下降,总滴定酸度、可溶性固形物含量逐渐上升,多糖和环烯醚萜含量呈波动变化。发酵60 d后,诺丽果汁性质稳定。随发酵时间延长,己酸、辛酸等特征风味物质无变化,2-甲基丁酸等刺激性风味物质增加,丁酸甲酯等果香风味物质减少。因此,建议缩短发酵时间,保证产品品质。