一种商用固定化诺维信脂肪酶435的活性表征

利用分光光度法以对硝基月桂酸酯为底物溶液对诺维信脂肪酶435进行活性表征。结果表明:诺维信脂肪酶435作用的最适温度为40~60℃,最适pH为8.00~11.00,Ba^2+、K^+,Tween-20,EDTA和PMSF都可以适当提高酶的活性,而去污剂Triton X-100以及Cu^2+、Ca^2+、Zn^2+则会使酶活性有不同程度的降低。另外反复使用10次后诺维信脂肪酶的活性仍然在80%左右。该研究可以为该酶的在生物柴油制备等应用提供一定的数据参考。

响应面法优化酶促脂肪酸甲酯化工艺条件

为了获得菜籽油脂肪酸酶促甲酯化合成生物柴油的最佳反应条件,首先采用Plackett-Burman法对影响酯化率的5个因素进行筛选,发现酶质量分数、反应温度、摇床转速和反应时间4个因素显著影响酯化率。基于该4因素的最陡爬坡试验、Box-Behnken设计及响应面分析结果表明:反应温度是影响酯化率的最显著因子,反应时间的作用效果相对较弱,反应温度和摇床转速具有明显的互作效应。在优化条件下,醇/脂肪酸摩尔比1.25∶1、酶质量分数11.5 g/kg脂肪酸、反应温度42.2℃、摇床转速199 r/min,反应6 h后,酯化率可达95.67%,与响应面拟和方程的预测值(96.52%)吻合良好。