人白细胞抗原DQB_1 5'-调控区序列与I型糖尿病的关联

应用聚合酶链反应（PCR）、PCR/SSCP 和克隆测序等方法比较分析汉族1-型糖尿病患者与正常对照者HLA-DQB 1 5'-调控区多态性。结果显示携带不同等位基因的患者与对照者DQB 1 5'-调控区y s box 核苷酸序列相同，且与白种人基因结构一致；y box 核苷酸序列存在二种结构，CCTAGAGACAGATT 序列常常与DQB 1 *0302 等位基因在同一单倍型；转录起始位点至y box 间-44 至-61 位存在多态性，-59 至-61 位AAG等位基因可能与1-型糖尿病易感相关联，在2 例携带DQB 1 *0601 等位基因患者的-131 至-128 位间发现CACCACA A 单个碱基取代突变。表明HLA-DQB 1 基因5'-调控区主要作用元件旁侧核苷酸变异可能参与1-型糖尿病的病因学。

绵羊角蛋白关联蛋白KAP6-1基因5′端调控区的分子克隆及测序结果比较

根据绵羊毛囊角蛋白关联蛋白(KAP 6-1)基因已知DNA序列设计合成了两个特异性引物,以绵羊基因组DNA为模板,PCR扩增出1 042 bp的特异性片段,连接到pM D 19T载体中获得该片段克隆.经过快速提质粒法筛选、限制性内切酶分析表明该克隆包含所需的目的片段.DNA测序结果也证明该克隆片段与原基因5′端调控区序列相比具有很高的一致性.研究结果为今后制备转基因克隆动物,在毛囊细胞中特异性表达绒毛生长调控基因奠定了基础.

柞蚕Dsx基因的体外扩增

依据已测知的天蚕卵黄原基因5’端调控区序列设计特异性引物以柞蚕基因组DNA为模板对柞蚕卵黄原基因5’端调控区序列进行克隆并测序,成功获得了柞蚕卵黄原基因5’端调控区部分序列并在其中找到了柞蚕Bm dsx性别决定位点(ACATTGT)及CdxA,CREB,和GATA等昆虫基因调控元件。

玉米黑粉菌cyp51基因上游调控区克隆及生物信息学分析

为探明玉米黑粉菌cyp51基因的表达调控机制,根据玉米黑粉菌cyp51基因cDNA的5′-序列,采用染色体步移技术,获得其5′-上游调控区序列,总长为490bp。利用NNPP分析软件预测转录起始位点,并采用TFSEARCH1.3软件分析转录因子结合位点。结果显示:转录起始位点位于上游134bp处;上游调控区不仅包含启动子的核心结构序列TATA盒(分别位于-30、-58、-318和-348bp处)和CAAT盒(分别位于-150、-161和-191bp处),亦包含多个转录因子结合位点,如AP-4、GATA-1、CdxA、Dfd和Oct-1等;在上游调控序列中嘌呤含量高,而且从-222bp处开始存在4个连续高嘌呤含量的热激转录因子特异性结合位点(HSE)。