基于网络药理学探讨调脂通络胶囊防治心肌梗死的作用机制

目的:基于网络药理学探究调脂通络胶囊的活性成分、作用靶点及治疗心肌梗死可能的作用机制。方法:通过TCMSP、TCMIP、SwissTargetPrediction数据库及文献检索获得调脂通络胶囊的活性成分及作用靶点,通过TTD、DisGeNET、OMIM数据库获得心肌梗死的疾病靶点。将药物靶点与疾病靶点取交集后,获得调脂通络胶囊治疗心肌梗死的潜在作用靶点。应用STRING数据库获得蛋白质-蛋白质相互作用关系,导入Cytoscape 3.7.2软件构建蛋白互作网络及“药物-活性成分-靶点-疾病”调控网络,采用David数据库对潜在作用靶点进行基因本体(GO)生物过程分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果:本研究筛选出共31个调脂通络胶囊活性成分、138个治疗心肌梗死的潜在作用靶点,其中,抑癌基因(TP53)、蛋白激酶(AKT1)、促分裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)可能是调脂通络胶囊治疗心肌梗死的核心靶点。GO富集分析共获得104个结果,主要涉及基因表达、细胞凋亡、缺氧等方面。KEGG通路富集分析结果显示与脂质和动脉粥样硬化、流体剪切力和动脉粥样硬化、TNF、IL-17、细胞凋亡、p53等149条信号通路相关。以上结果表明,调脂通络胶囊治疗心肌梗死具有多成分、多靶点、多通路协同作用的特点。此结果预测了其治疗心肌梗死的可能机制,不仅佐证了本课题组前期对调脂通络胶囊的研究结论,也为进一步实验研究提供了新的思路与方向。

调脂通络胶囊对高脂模型心肌缺血再灌注大鼠氧自由基和抗氧化酶的影响

目的:测量心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemic reperfusion injury,MIRI)后大鼠血清中的血脂、心肌酶和心肌匀浆中的丙二醛(malondialdehyde,MDA)和相关抗氧化酶的含量。观察调脂通络胶囊可能的心肌保护作用和相关的机制。方法:本实验在高脂血症模型的基础上建立MIRI模型,将56只大鼠分为调脂通络胶囊高、中、低剂量组(8.64,4.32,2.16 g·kg-1·d-1)、高脂模型组、非高脂模型组、阿托伐他汀阳性对照组和高脂假手术组,每组8只大鼠。喂食4周高脂饲料(非高脂模型组正常饮食)后药物干预或生理盐水灌胃4周,结扎左冠状动脉前降支30 min(假手术组只穿线不结扎),松线再灌注24 h后采血测定血清血脂(TC,TG,HDL,LDL)含量,血清心肌酶(LDH,CK-MB)活性;取缺血区心肌组织测定大鼠心肌匀浆中抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),过氧化氢酶(CAT)]活性,MDA的含量。结果:与正常饮食组相比,高脂模型组的血脂、心肌酶、MDA明显升高,抗氧化酶含量明显降低;各药物组均可以明显降低心肌酶和MDA含量、升高抗氧化酶SOD,CAT,GSH-Px的活性,调脂通络胶囊各剂量组与他汀组无统计学差异。结论:调脂通络胶囊和阿托伐他汀具有减少自由基聚集,提高抗氧化酶活力的作用。

调脂通络胶囊对心肌IRI大鼠炎症反应的影响

目的:通过测定调脂通络胶囊对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)后髓过氧化物酶(MPO)、心梗面积和心肌组织结构形态的变化等,观察调脂通络胶囊对MIRI后的心肌保护作用及可能的机制。方法:将大鼠分为调脂通络胶囊高、中、低(8.64,4.32,2.16 g·kg-1·d-1)剂量组,高脂模型组、非高脂模型组和阿托伐他汀阳性对照组。喂食高脂饲料4周后药物干预或生理盐水灌胃4周,之后结扎左状动脉前降支30 min后再灌注24 h,采血检测总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)和乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK-MB),各组一半动物取心肌组织缺血部分测定髓过氧化物酶(MPO),并于靠近心尖部取约0.5 cm2的心肌组织行HE染色,另一半动物伊文思蓝(Evans blue)和氯化三苯基四氮唑(TTC)双染色后,测定心脏缺血和梗死范围质量比率。结果:高脂模型组与非高脂模型组相比较梗死范围质量比率、血脂水平和心肌酶含量明显升高(P<0.01)。各药物治疗组与高脂模型组相比可以明显降低MPO和心肌酶含量,减少梗死范围质量比率(P<0.01)。结论:调脂通络胶囊和阿托伐他汀可以通过减轻炎性细胞浸润以达到保护心肌细胞的目的,二者的心肌细胞保护作用可能与降低血脂、保护内皮功能有关。调脂通络胶囊无明显剂量依赖性。

调脂通络胶囊对动脉粥样硬化大耳白兔血脂及炎性因子水平的影响

目的探讨调脂通络胶囊对动脉粥样硬化大耳白兔总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triacylglycerol,TG)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)、高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)、一氧化氮(nitric oxide,NO)、C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)水平的影响。方法日本大耳白兔36只,随机分为对照组6只和实验组30只。实验组饲喂高脂饲料制备动脉粥样硬化模型,对照组饲喂等体积普通饲料。模型制备成功后,实验组随机分为调脂通络高、中、低剂量组和血脂康组及模型组各6只,分别给予调脂通络胶囊浸膏4.92g/(kg·d)、2.46g/(kg·d)、1.23g/(kg·d),血脂康胶囊1mL/(kg·d)及等体积生理盐水灌胃,均2次/d,共30d。药物干预90d时处死白兔,光镜下观察主动脉壁病理变化;耳缘静脉采血,测定血清TC、TG、LDL、HDL、NO、CRP水平,并进行比较。结果对照组主动脉形态正常,动脉内膜光滑;模型组动脉粥样硬化斑块几乎布满血管腔,内皮细胞脱落,平滑肌细胞增生、迁移均较重,出现部分钙化、动脉瘤及大块粥样瘤;血脂康组和调脂通络低、中、高剂量组动脉粥样硬化斑块呈间断分布,内皮细胞脱落,平滑肌细胞增生、迁移均较模型组轻;TC、TG、LDL、CRP水平在调脂通络低剂量组[(14.50±1.36)mmol/L、(5.52±0.16)mmol/L、(13.73±0.51)mmol/L、(14.93±0.56)mg/L],中剂量组[(15.75±0.81)mmol/L、(5.58±0.12)mmol/L、(14.12±0.58)mmol/L、(14.81±0.69)mg/L],高剂量组[(15.73±1.93)mmol/L、(5.53±0.37)mmol/L、(14.03±0.55)mmol/L、(14.53±0.98)mg/L]和血脂康组[(15.21±0.85)mmol/L、(5.43±0.08)mmol/L、(13.56±0.83)mmol/L、(14.71±0.84)mg/L]均低于模型组[(18.59±1.34)mmol/L、(8.78±1.01)mmol/L、(21.35±2.52)mmol/L、(17.13±1.29)mg/L],且高于对照组[(1.23±0.13)mmol/L、(1.30±0.05)mmol/L、(1.28±0.03)mmol/L、(3.21±0.09)mg/L](P<0.05),调脂通络低、中、高剂量组和血脂康组TC、TG、LDL、CRP水平比较差异无统计学意义(P>0.05);调脂通络低、中、高剂量组和血脂康组NO水平[(86.25±1.90)、(87.23±3.81)、(87.84±2.61)、(87.09±2.84)mmol/L]均低于对照组[(105.40±4.63)mmol/L](P<0.05),高于模型组[(83.12±2.58)mmol/L](P<0.05);调脂通络低、中、高剂量组和血脂康组NO水平比较差异无统计学意义(P>0.05);6组HDL水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论动脉粥样硬化大耳白兔应用调脂通络胶囊可能通过促进NO表达,抑制TC、TG、LDL、CRP表达来发挥抗动脉粥样硬化作用。