常温下缺血预处理对肝细胞凋亡调节基因表达影响的临床研究

目的 探讨常温下肝脏缺血预处理后细胞凋亡调节基因C -jun和bcl -XL 的表达及其临床意义。方法 16例肝癌患者随机分成缺血再灌注组 (IR组 )和缺血预处理组 (IP组 ) ,每组 8例。在肝门阻断前和再灌 30min时抽血查肝损害标记酶 ,同时取肝组织切片行肝细胞凋亡、C -jun和bcl -XL 基因及PCNA表达检测 ,并行光镜和电镜检查。结果 IR组和IP组ALT ,AST ,LDH及凋亡指数 (AI值 )在再灌注 30min时均较阻断前明显升高 (P <0 .0 5或P<0 .0 1) ,IR组升高更显著 (P <0 .0 1) ,且IR组再灌注 30min时有肝细胞坏死和超微结构不可逆性改变 ;与IP组比较 ,IR组再灌注 30min时凋亡诱导基因C -jun和PCNA表达明显增强(P >0 .0 5或 P <0 .0 1) ;与IR组比较 ,IP组再灌注 30min时凋亡抑制基因bcl -XL 表达明显增强 (P <0 .0 1)。结论 (1)常温下缺血预处理对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用可能是通过调节肝细胞凋亡调节基因C -jun和bcl -XL 表达而实现的 ;(2 )肝脏IR损伤可能与激活C -jun基因表达促发肝细胞凋亡发生有关 ;(3)IP可能通过激活bcl -XL

蜕膜细胞条件培养液对滋养细胞侵袭调节基因表达的影响

目的 探讨蜕膜细胞条件培养液（DCM）对滋养细胞侵袭调节基因表达的影响。方法 用体外培养早孕、晚孕蜕膜细胞的方法制备DCM,然后将其处理体外培养的早孕滋养细胞。用半定量反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）分析早孕滋养细胞侵袭调节基因表达的变化。结果 正常培养的早孕滋养细胞中基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9、基质金属蛋白酶抑制物（TIMP-1）、尿激酶型纤溶酶原激活因子（u-PA）mRNA均有表达;而TIMP-2、纤溶酶原激活因子抑制因子（PAI-1）mRNA未见表达。早孕和晚孕DCM均能下调滋养细胞MMP-2、MMP-9、u-PAmRNA的表达,而上调TIMP-1mRNA的表达。早孕、晚孕DCM均能诱导滋养细胞PAI-1mRNA的表达,但对TIMP-2mRNA的表达未见有影响。结论 蜕膜细胞可能通过调节滋养细胞中MMP-2、MMP-9与TIMP-1之间的平衡以及u-PA与PAI-1之间的平衡,而影响滋养细胞的侵袭能力。

黄金艳课题组在组织特异性的插入/缺失短片段调节基因表达研究中取得新进展

上海交通大学医学院附属瑞金医院血液学研究所的研究使得对血液和皮肤组织中indel和snp对基因表达的调节有更深入的了解上海交通大学医学院附属瑞金医院血液学研究所黄金艳课题组在血液中的全基因组表达数量性状基因座研究中取得新进展。研究揭示了血液和其他组织中短的缺失/插入片段对基因表达的调控机制。

植物病原真菌附着胞形成及其基因表达调节

植物病原真菌附着胞形成及其基因表达调节林福呈李德葆（浙江农业大学生物技术研究所，杭州３１００２９）ＡＰＰＲＥＳＳＯＲＩＵＭＦＯＲＭＡＴＩＯＮＢＹＰＬＡＮＴＰＡＴＨＯＧＥＮＩＣＦＵＮＧＩＡＮＤＴＨＥＲＥＧＵＬＡＴＩＯＮＯＦＧＥＮＥＥＸＰＲＥＳＳＩＯＮ...

内含子的进化及基因表达调节

由于内含子(intron)的进化目前还没有一致的观点,一般认为内含子的进化是基因进化的重要部分,是与物种形成相适应的过程。内含子参与基因的组织特异性表达、蛋白质变异、基因转录等多种生物学过程。

单、双子叶植物的代谢物调节农杆菌Vir区基因表达的研究

本文研究了六种植物(三种单子叶植物、三种双子叶植物)愈伤组织的渗出物和抽提物对农杆菌Vir基因表达的调节作用。其调节水平随植物的不同而明显不同,但单、双子叶植物的代谢物对Vir基因表达的调节作用并非截然分开。即使在双子叶植物(如大豆)的抽提物与渗出物中也存在着抑制Vir基因表达的因子,而在单子叶植物(如玉米等)的抽提物与渗出物中也存在着促进Vir基因表达的调节因子。Vir位点的调节反应随渗出物与抽提物的种类不同而明显不同,不同Vir位点对同类渗出物或抽提物的反应也不同。渗出物对Vir基因表达的正调节效应优于抽提物。植物渗出物与AS对Vir区基因表达的调节并不表现简单的累加效应或协同作用。相反,在渗出物中还存在着不同程度阻抑AS对Vir基因表达正调节的因子。

OmpR与PhoP高渗应激下交叉调节伤寒沙门菌基因表达

为了探寻OmpR和PhoP之间的交叉调节关系,构建了ompR-phoP双缺陷变异株,运用基因芯片分析技术比较了伤寒沙门菌ompR缺陷株、phoP缺陷株及ompR-phoP双缺陷株之间基因表达谱的差异.结果显示OmpR与PhoP共同激活11个基因的转录,主要为外膜孔蛋白相关基因、脂多糖修饰相关基因等,两者在调节特定的膜蛋白、孔蛋白及表面结构成分的表达水平方面发挥着协同作用,OmpR与PhoP对未知功能蛋白基因t0563、t0564也具有协同激活效应,值得进一步关注.OmpR与PhoP共同抑制nanT的转录,阻止唾液酸的转运.另外,ompR缺陷株和phoP缺陷株中未见变化,而ompR-phoP双缺陷变异株中差异表达基因也可能是OmpR和PhoP的共同调节元,但需要进一步验证.

15-脂氧酶-1基因表达调节研究进展

15-脂氧酶-1(15-LOX-1)是脂质过氧化物酶,分别以亚油酸、花生四烯酸为底物氧化生成13-羟基-十八碳二烯酸(13-HODE)、15-羟基-二十碳四烯酸(15-HETE)。15-LOX-1基因表达在转录、翻译、翻译后修饰各个水平都受到多种因素的调节,影响着15-LOX-1的表达量和酶催化活性。本文就15-LOX-1转录、翻译、翻译后修饰各个环节的调节因素作一简要介绍。

免疫球蛋白基因表达的调节

本文主要概述了Ig基因增强子、启动子以及特异性DNA结合蛋白对Ig基因在B淋巴细胞中特异性转录的调节作用。同时也讨论了B淋巴细胞分化过程中所发生的Ig基因转录后调节作用。

Fis对伤寒沙门菌基因表达的系统调节作用

目的:探讨伤寒沙门菌调节因子fis对基因表达的系统调节作用。方法:用自杀质粒介导的同源重组方法制备伤寒沙门菌fis基因缺陷变异株,用脉冲场凝胶电泳分析fis缺陷变异株的基因组结构。利用伤寒沙门菌全基因组DNA芯片分析技术,比较伤寒沙门菌野生株和fis基因缺陷变异株的基因表达谱差异。用重组载体pBADfis回补fis缺陷变异株,选择部分差异表达基因进行qRT-PCR验证,用半固体平板培养观察野生株、fis缺陷变异株和回补株的动力。结果:fis基因缺陷变异株含有二相鞭毛素编码基因的线性质粒缺失,且动力消失;基因表达谱比较分析结果表明,伤寒沙门菌fis基因缺陷变异株在对数生长期94个基因出现表达差异;qRT-PCR分析所选基因表达的结果与芯片分析结果相符;fis缺陷变异株在回补fis基因后,动力及差异表达基因都获得明显恢复。结论:Fis在伤寒沙门菌中对动力、侵袭及多种代谢相关基因的表达发挥重要调节作用。

肼屈嗪与丙戊酸对胆管癌细胞QBC_(939)中SIRT1基因表达调节机制的研究

表观遗传学改变在肿瘤的发生中起着重要的作用,大量研究发现联合甲基化酶抑制剂（DNA methylation inhibitor DNMTi）肼屈嗪（Hydralazine）和组蛋白脱乙酰化酶抑制剂（histone deacetylase inhibitor HDACi）丙戊酸（Valproate）可恢复肿瘤细胞中沉默抑癌基因的表达,对多种肿瘤有较好治疗效果,但其作用机制尚不完全明确。

诱导型一氧化氮合酶基因的表达与调控

哺乳动物体内存在组成型与诱导型两种类型的一氧化氮合酶，前者在生理状态下恒定表达，由其催化产生的一氧化氮作为信使分子，在免疫、神经和心血管系统中发挥多种生理作用；后者只有在致炎细胞因子或脂多糖作用下才表达，其催化合成的一氧化氮参与脓毒性休克、高血压和动脉粥样硬化等多种疾病的病理生理过程。因此，揭示诱导型一氧化氮合酶基因的表达调控机制，具有重要的理论意义和潜在的临床应用价值。

子宫颈疾病中P^(21WAF1/CIP1)和P^(53)基因的表达及其意义

目的 :探讨抑癌基因 P2 1WAF1/CIP1(简称 P2 1)和 P53 与子宫颈疾病发生、发展的关系。方法 :用原位杂交组织化学技术检测 P2 1与 P53 基因在 50例子宫颈疾病组织和 1 0例正常宫颈组织标本中表达状况 ,并进行相关性分析。结果 :正常宫颈组织 P2 1与 P53阳性表达均为90 %。宫颈疾病组织中 P2 1阳性表达为 3 8% ,P53 阳性表达为 46%。宫颈癌组织中 P2 1与 P53 两基因阳性表达与宫颈慢性炎和正常宫颈组织阳性表达有显著性差异 ( P<0 .0 1 ) ,而与宫颈上皮非典型增生组织中阳性表达无差异 ( P>0 .0 5)。两基因在正常宫颈组织和宫颈疾病组织中表达有相关性 ( P<0 .0 1 )。结论 :P2 1的突变或缺失可能与宫颈癌、宫颈上皮非典型增生的发生、发展有关 ,野生型 P53基因对细胞增殖的抑制作用可能是通过 P2

大鼠野生型钾通道亚基Kir2.3基因真核表达载体的构建及其在PC12细胞中的表达

目的:克隆大鼠野生型钾通道亚基基因Kir2.3并构建真核表达载体pcDNA3-flag/Kir2.3,观察其在大鼠嗜铬细胞瘤(PC12)细胞中的表达。方法:从成年大鼠纹状体中提取总RNA,用RT-PCR方法获得大鼠野生型Kir2.3基因的全长cDNA,经限制性内切酶双酶切后,克隆至真核表达载体pcDNA3-flag质粒中。Kir2.3基因测序结果与基因库登录序列比对,序列正确的重组质粒用脂质体转染PC12细胞,Western blot和荧光显微镜观察基因表达情况。结果:Kir2.3基因测序结果与基因库登录序列比对显示完全一致。Western blot证实pcDNA3-flag/Kir2.3转染PC12细胞24 h后有Kir2.3的过表达,且至少持续72 h。结论:成功构建了大鼠野生型Kir2.3基因的真核表达载体,获得了瞬时表达大鼠野生型Kir2.3基因的PC12细胞克隆,为进一步研究Kir2.3的生物学功能以及Kir2.3在帕金森病发病机制中的作用奠定了良好的基础。

人源肝癌细胞系中甲胎蛋白基因表达及甲基化的研究

目的:了解不同人源肝癌细胞系甲胎蛋白(AFP)基因表达及不同区域甲基化状态,探讨肝癌发生的表达遗传学调控机制。方法:采用亚硫酸氢盐-基因组测序(bisulfite-assisted genomic sequencing,BAGS)技术,检测人源HepG2、SMMC-7721肝癌细胞系和人成纤维细胞中AFP基因启动子区及CpG岛区的甲基化水平,RT-PCR检测基因的表达,并分析相关性。结果:HepG2细胞高表达AFP,SMMC-7721细胞低表达AFP,成纤维细胞不表达AFP;在启动子区,HepG2细胞的非甲基化修饰位点发生率较高,尤其是第一个和第二个CG位点,SMMC-7721细胞的甲基化程度较之高,而成纤维细胞甲基化程度整体很高;在CpG岛区,成纤维细胞的非甲基化修饰位点发生率较高,主要是第6个和第7个CG位点,SMMC-7721、HepG2细胞的甲基化程度较之高。结论:AFP基因启动子甲基化程度与基因表达水平存在负相关,AFP基因CpG岛甲基化程度与基因是否表达有关,AFP基因启动子低甲基化可能是AFP高表达的分子机制。

乙酰肝素酶基因表达对人卵巢癌细胞系侵袭转移能力的影响

目的:探讨乙酰肝素酶的基因表达,对卵巢癌细胞转移侵袭能力的影响。方法:用Boyden小室体外侵袭实验比较两株卵巢癌细胞HO-8910和HO8910-PM的体外侵袭能力强弱;采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和原位杂交检测细胞乙酰肝素酶mRNA的表达情况;用MTT观察细胞生长能力的变化。结果:MTT检测结果显示卵巢癌细胞HO8910-PM细胞生长速度较快,而HO-8910细胞生长速度较慢。RP-PCR提示及原位杂交结果提示乙酰肝素酶在高转移性HO8910-PM细胞中表达强于转移性HO-8910细胞。Boyden小室体外侵袭实验表明,卵巢癌细胞HO8910-PM体外侵袭力较强,其穿膜细胞数为20.1±0.312,而HO-8910细胞体外侵袭力较弱,其穿膜细胞数为11.3±0.024。两者差异具有显著性意义(P<0.05)。结论:乙酰肝素酶基因的表达,能促进瘤细胞的生长和转移能力。

氧自由基与原癌基因表达

原癌基因在心脑血管疾病研究中的应用是一个活跃的领域。氧自由基与原癌基因之间存在某种必然的联系，氧自由基能诱导一些原癌基因的表达．

人和鼠源性RANTES基因的克隆和腺病毒表达载体的建立

目的 :克隆人和小鼠的活化T细胞表达与分泌调节基因 (RANTES基因 )并分别构建腺病毒表达载体。方法 :利用RT -PCR方法从人的扁桃体组织和小鼠的脾细胞中克隆RANTES基因并将其克隆入T -easy保存载体中 ,使用Stratagene公司的ADEasy -XL腺病毒载体组装试剂盒建立表达该基因的腺病毒表达载体并使用CsCl2 密度梯度离心法浓缩病毒悬液。空斑试验显示病毒的滴度为2×1011cfu/ml。结果 :该实验成功地克隆了人和小鼠的RANTES基因并分别建立了表达该基因的腺病毒表达载体。结论

白细胞介素1刺激系膜细胞IL—1转化生长因子β基因表达

本文应用分子生物学技术证明培养的肾小球系膜细胞有 TGFβmRNA 基因表达。并且 IL—1可促进系膜细胞 IL—1、TGFβ基因表达,提示细胞因子的自分泌和旁分泌在肾小球炎症硬化过程中起着重要作用.