辅助性T细胞17/调节性T细胞及维甲酸相关孤儿受体γt/叉头框转录因子P3失衡在妊娠相关疾病中的研究进展

在免疫学领域,妊娠相当于一次成功的半同种移植现象,母体对半异体胎儿的免疫耐受情况关乎妊娠的结局。辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)是最新发现的CD^(+)_(4)T淋巴细胞亚群,相关转录因子维甲酸相关孤儿受体γt和叉头框转录因子P3的表达水平与Th17/Treg之间的平衡密切相关。Th17/Treg免疫失衡会导致母体对胎儿的异常攻击,造成母胎耐受紊乱,并与复发性流产、先兆子痫、妊娠糖尿病等病理妊娠有关。

HPV DNA负荷量、辅助性T细胞17、FoxP3+调节性T细胞及炎症因子与高危型HPV感染的相关性分析

目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)DNA、辅助性T细胞17(Th17)、叉头状转录因子3阳性(FoxP3^(+))调节性T细胞(Treg)及宫颈灌洗液中炎症因子与高危型HPV感染的相关性,为高危型HPV感染防治提供新思路。方法将2020年9月至2021年2月该院收治的高危型HPV感染患者100例纳入研究作为研究组,然后将其中50例高危型HPV16/18阳性患者作为HPV16/18组,50例其他12种高危型阳性病例作为其他亚型组。另外,选取同期体检的健康女性作为对照组(n=50)。比较研究组和对照组HPV DNA负荷量、Th17、FoxP3^(+)Treg及宫颈灌洗液中炎症因子[白细胞介素(IL)-10、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-17A]水平,比较HPV16/18组和其他亚型组各项指标水平,比较不同宫颈病变患者各项指标水平。分析各项指标与高危型HPV感染、宫颈病变的相关性,以及对宫颈病变患者高危型HPV感染的诊断价值。结果研究组HPV DNA负荷量、Th17、FoxP3^(+)Treg及宫颈灌洗液中IL-10、TNF-α、IL-17A水平均高于对照组(P<0.05),HPV16/18组各项指标水平均高于其他亚型组(P<0.05)。不同宫颈病变患者各项指标水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。HPV DNA负荷量、FoxP3^(+)Treg、Th17及宫颈灌洗液中IL-10、TNF-α、IL-17A水平与高危型HPV感染分型(HPV16/18=1,其他亚型=2)均呈负相关(P<0.05),与宫颈病变(宫颈上皮内瘤变Ⅰ级=1,宫颈上皮内瘤变Ⅱ级=2,宫颈上皮内瘤变Ⅲ级=3,宫颈癌=4)均呈正相关(P<0.05)。各项指标联合诊断高危型HPV16/18阳性的曲线下面积(AUC)为0.911(95%CI:0.837~0.959),大于各指标单独诊断。结论高危型HPV感染患者HPV DNA负荷量、Th17、FoxP3^(+)Treg及炎症因子水平异常,与高危型HPV感染分型、宫颈病变密切相关,而且HPV DNA负荷量与Th17、FoxP3^(+)Treg、炎症因子相关,各项指标联合检测可为临床防治高危型HPV持续感染提供可靠依据。

慢性光化性皮炎患者外周血T细胞亚群及皮损白细胞介素-17、叉头状螺旋转录因子3的表达

目的:检测慢性光化性皮炎(Chronic Actinic Dermatitis,CAD)患者外周血辅助性T细胞(T Helper Cells,Th)17、调节性T细胞(Regulatory T Cells,Treg)、Th1、Th2细胞百分比以及皮损中白细胞介素(Interleukin,IL)-17、叉头状螺旋转录因子3(Forkhead Helix Transcription Protein 3,FOXP3)的表达,探究其变化趋势及相关临床意义。方法:外周血T细胞亚群的检测:以大理大学第一附属医院皮肤科符合CAD诊断标准的患者20例为试验1组,以健康体检科符合研究标准的20例健康体检者作为对照1组。通过流式细胞分析仪检测外周血中Th1、Th2、Th17、Treg细胞的百分比,计算Th1/Th2和Th17/Treg值。采用相应统计学方法进行统计分析。皮损IL-17、FOXP3的检测:选取大理大学第一附属医院皮肤科符合CAD诊断标准的患者20例作为试验2组,以手术门诊切痣患者切下的痣组织周围正常皮肤组织20例作为对照2组。通过石蜡切片免疫荧光实验检测CAD皮损和正常皮肤组织中IL-17、FOXP3的表达。采用相应的统计学方法进行统计分析。结果:①试验1组外周血Th1、Th2、Th17、Treg百分比分别为(25.81±6.52)%、(42.79±9.66)%、(12.34±5.15)%、(8.32±3.06)%;对照1组外周血Th1、Th2、Th17、Treg百分比分别为(12.59±2.69)%、(50.88±9.06)%、(12.74±5.09)%、(10.42±2.07)%;②试验1组Th1/Th2和Th17/Treg值分别为0.58(0.48,0.74)和1.65(1.00,2.21);对照组Th1/Th2和Th17/Treg值分别为0.26(0.21,0.31)和1.23(0.82,1.45);③试验2组皮损中IL-17和FOXP3的阳性率分别为(85.91±11.73)%和3.60(1.97,4.83)%;对照1组皮损中IL-17和FOXP3的阳性率分别为(89.85±8.18)%和1.32(0.85,2.79)%。结论:CAD患者非急性发作期外周血中Treg低表达、Th1高表达,皮损中FOXP3高表达,其发病可能与外周血Th17/Treg、Th1/Th2表达失衡及皮损IL-17/FOXP3的表达失衡有关,而Th17/Treg、Th17百分比及皮损中IL-17表达的差异无统计学意义。

免疫性不孕症患者外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞、叉头状转录因子3、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4的水平研究

目的探讨外周血CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)、叉头状转录因子3(Foxp3)、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)与免疫性不孕的关系,为免疫性不孕的诊断和治疗提供依据。方法用流式细胞仪检测60例免疫性不孕妇女(研究组)和60例正常妊娠的育龄妇女(对照组)外周血中CD4+CD25+Treg、Foxp3、CTLA-4水平,并对检测结果进行统计学分析。结果研究组外周血中CD4+CD25+Treg、Foxp3、CTLA-4水平值分别为:(3.66±0.59)%、(2.97±0.63)%、(3.17±0.36)%,均低于对照组[(8.17±0.63)%、(7.17±0.53)%、(8.21±0.56)%],两组比较差异均有高度统计学意义(均P<0.01)。结论免疫性不孕症患者外周血中CD4+CD25+Treg、Foxp3、CTLA-4的表达水平比正常妊娠的育龄妇女少,CD4+CD25+Treg、Foxp3、CTLA-4表达的降低可能是免疫性不孕的重要原因。

不同分级慢性阻塞性肺疾病患者调节性T细胞核转录因子叉头状转录因子3表达水平及与炎性因子相关性研究

目的探讨不同分级慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者调节性T细胞核转录因子叉头状转录因子3(Foxp3)的表达水平及与炎性因子相关性。方法选取2015年1月至2017年1月来院就诊的120例COPD患者纳入观察组,按照病情严重程度分为COPD1~2级组53例、COPD3~4级组67例,并选择同期进行健康体检的健康志愿者50例为对照组。对3组受试者的Foxp3水平、炎性因子[C-反应蛋白(CRP)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、B型脑尿钠肽(BNP)]水平进行检测对比,并采用Pearson检验对COPD患者Foxp3水平与炎性因子水平间相关性进行分析探讨。结果观察组患者的Foxp3水平低于对照组,炎性因子CRP、IL-6、TNF-α、血浆BNP水平均高于对照组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。观察组内COPD3-4级组患者Foxp3水平低于COPD1-2级组,而CRP、IL-6、TNF-α、BNP水平均高于COPD1-2级组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。经Pearson相关性检验,Foxp3水平与CRP、IL-6、TNF-α、BNP呈负相关性(r值分别为-0.571、-0.534、-0.593、-0.516,P<0.05)。结论在COPD患者体内调节性T细胞核转录因子Foxp3的表达水平有降低趋势,并随着患者病情分级加重而进一步降低,且Foxp3与炎性因子水平呈负相关性,通过对COPD患者Foxp3、炎性因子水平监测,对于疾病的临床治疗评估有一定的指导作用。

雷帕霉素对自发性系统性红斑狼疮小鼠外周血调节性T细胞叉头框家族转录因子P3表达量的影响

系统性红斑狼疮、银屑病及白癜风等是临床常见的皮肤疾病,机体免疫功能失调是其发生的重要原因。调节性T细胞（regulatory T cells,Tregs）是一类可以调节其他免疫细胞功能的T细胞亚型,可以通过多种机制抑制免疫效应从而维持体内免疫稳态[1]。近年来研究发现叉头框家族成员P3（forkhead box P3,Foxp3）是调节性T细胞的特异性分子。

乙型肝炎肝硬化患者辅助性T淋巴细胞17和调节性T淋巴细胞及维甲酸相关核孤儿受体γt和叉状头/翅膀状螺旋转录因子3 mRNA表达水平的变化及其临床意义研究

目的通过对乙型肝炎肝硬化患者外周血辅助性T淋巴细胞17(Th17)、调节性T淋巴细胞(Treg)及其特异性转录因子维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)和叉状头/翅膀状螺旋转录因子3(Foxp3)mRNA表达水平的检测探讨其临床意义。方法选取2015年7—12月昆明医科大学第一附属医院诊治的慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者64例,其中慢性乙型肝炎(CHB)患者21例(CHB组)、代偿期肝硬化(CLC)患者21例(CLC组)、失代偿期肝硬化(DCLC)患者22例(DCLC组)。同期选取本院体检健康者20例为对照组。收集研究对象一般资料〔性别、年龄及丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)〕;应用流式细胞术检测研究对象外周血Th17、Treg表达率,计算Th17/Treg比值;应用实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(RT-q PCR)法测定外周血RORγt、Foxp3 mRNA表达水平。结果 4组年龄、ALT、AST、TBIL比较,差异有统计学意义(P<0.05)。CHB组、CLC组、DCLC组Th17、Treg表达率及Th17/Treg比值均高于对照组(P<0.05);DCLC组Th17、Treg表达率及Th17/Treg比值均高于CHB组,Th17表达率及Th17/Treg比值均高于CLC组(P<0.05)。CHB组、CLC组、DCLC组RORγt mRNA及Foxp3 mRNA表达水平均高于对照组(P<0.05);DCLC组RORγt mRNA及Foxp3 mRNA表达水平均高于CHB组、CLC组(P<0.05)。CHB组、CLC组、DCLC组外周血Th17表达率与RORγt mRNA表达水平均呈正相关(P<0.05);CHB组、CLC组、DCLC组外周血Treg表达率与Foxp3 mRNA表达水平均呈正相关(P<0.05);CHB组、CLC组、DCLC组外周血Th17表达率、RORγt mRNA表达水平与ALT呈正相关(P<0.05);CHB组外周血Foxp3mRNA表达水平与ALT呈正相关(P<0.05);CHB组RORγt mRNA表达水平、Foxp3 mRNA表达水平与AST、TBIL呈正相关(P<0.05)。结论 Th17、Treg及其特异性转录因子RORγt、Foxp3可能与乙型肝炎肝硬化患者的疾病进展与肝功能有关。

CircFoxo3调节miR-130a-5p/TEAD1轴对心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡影响的实验研究

目的探讨环状RNA叉头框蛋白O3(CircFoxo3)调节miR-130a-5p/TEA域转录因子1(TEAD1)轴对心力衰竭(HF)大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法将SD大鼠分为对照组、HF组、si-NC组、si-CircFoxo3组、agomir NC组、miR-130a-5p agomir组、si-CircFoxo3+antagomir NC组、si-CircFoxo3+miR-130a-5p antagomir组,每组18只。除对照组外,其他组大鼠均通过腹腔注射盐酸阿霉素的方法构建HF大鼠模型。建模成功后进行药物处理,每3 d给药一次,持续3周。应用反转录实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测心肌组织中CircFoxo3、miR-130a-5p表达水平。应用彩色多普勒超声仪检测大鼠左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室射血分数(LVEF)水平。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测大鼠血清人基质裂解素2(ST_(2))、N端脑钠肽前体(NT-pro BNP)水平。应用HE染色、Masson染色检测大鼠心肌组织病理变化和心肌纤维化情况。通过TUNEL染色检测心肌细胞凋亡水平。应用Western blot法检测大鼠心肌组织TEA域转录因子1(TEAD1)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、裂解的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)蛋白表达水平。通过双荧光素酶报告基因实验验证CircFoxo3与miR-130a-5p、miR-130a-5p与TEAD1的关系。结果与对照组比较,HF组大鼠心肌组织病理损伤、心肌纤维化严重,LVESD、LVEDD水平上升,心肌组织CircFoxo3及TEAD1、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平升高,血清ST_(2)、NT-pro BNP水平升高,心肌细胞凋亡率升高,LVEF、miR-130a-5p和Bcl-2蛋白水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与HF组、si-NC组比较,si-CircFoxo3组大鼠心肌组织病理损伤减轻,LVESD、LVEDD水平降低,心肌组织CircFoxo3及TEAD1、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平降低,血清ST_(2)、NT-pro BNP水平降低,心肌细胞凋亡率降低,LVEF、miR-130a-5p及Bcl-2蛋白水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与HF组、agomir NC组比较,miR-130a-5p agomir组大鼠心肌组织病理损伤、心肌纤维化有所改善,LVESD、LVEDD水平降低,心肌组织TEAD1、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平降低,血清ST_(2)、NT-pro BNP水平降低,心肌细胞凋亡率降低,LVEF、miR-130a-5p及Bcl-2蛋白水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与si-CircFoxo3组、si-CircFoxo3+antagomir NC组比较,si-CircFoxo3+miR-130a-5p antagomir组大鼠心肌组织病理损伤、心肌纤维化加剧,LVESD、LVEDD水平升高,心肌组织TEAD1、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平升高,血清ST_(2)、NT-pro BNP水平升高,心肌细胞凋亡率升高,LVEF、miR-130a-5p、Bcl-2蛋白水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。CircFoxo3与miR-130a-5p、miR-130a-5p与TEAD1存在靶向关系。结论沉默CircFoxo3可能通过海绵化上调miR-130a-5p来抑制TEAD1表达,进而抑制HF大鼠心肌细胞凋亡。

全真一气汤对肾气虚型哮喘大鼠转录因子FOXP3/RORγt及Th17/Treg免疫失衡的影响

目的 观察全真一气汤对肾气虚型哮喘大鼠Th17/Treg及相关细胞因子(IL-6、IL-17、IL-10、IL-35)和转录因子维甲酸相关孤独核受体-γt(OrPhan nuclear recePtor gamma t,RORγt)、叉头状转录因子(forkhead transcriPtion factor P3,FOXP3)的影响,探讨全真一气汤调控哮喘气道炎症的机制。方法 将24只SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组、全真一气汤低剂量治疗组(8.33g·kg^(-1))和全真一气汤高剂量治疗组(33.32 g·kg^(-1)),每组6只。模型组与低、高剂量治疗组予卵蛋白1mg、氢氧化铝凝胶10 mg的混悬液1 mL致敏,1%的卵清蛋白超声雾化吸入以激发哮喘,进行惊恐刺激,负重游泳直至力竭等进行肾气虚型哮喘大鼠造模,造模成功后开始药物干预。空白组和模型组予生理盐水3 mL灌服,治疗组按低、高剂量予全真一气汤3 mL灌服,每日1次,连服30 d。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real time Quanti tative PCR,qRT-PCR)检测各组大鼠肺组织中FOXP3、RORγt mRNA水平,流式细胞术检测外周血Th17、Treg细胞百分比,酶联免疫吸附实验(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测血清IL-6、IL-17、IL-10、IL-35细胞因子含量。结果 与空白组相比,模型组血Th17细胞比例、血清IL-6、IL-17含量及相关肺组织中RORγt mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05),模型组Treg细胞比例、血清IL-10、IL-35含量及相关肺组织中FOXP3 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与模型组相比,全真一气汤低、高剂量组血Th17细胞百分比、血清IL-6、IL-17含量及肺组织RORγt mRNA和蛋白的表达明显减少(P<0.05),高剂量组血Treg细胞百分比显著升高(P<0.05),但全真一气汤低剂量组血Treg细胞百分比无显著变化(P>0.05),高剂量组血清IL-10含量增加(P<0.05),全真一气汤低剂量组IL-10含量亦增加,但差异无统计学意义(P>0.05),两组血清IL-35含量、FOXP3 mRNA及蛋白的表达同时明显升高(P<0.05);与全真一气汤低剂量组相比,高剂量组Th17细胞百分比明显降低(P>0.05),IL-17亦降低(P>0.05),IL-6含量及RORγt表达减少(P<0.05),高剂量组IL-35含量及Treg相关的FOXP3表达增加(P<0.05)。结论 全真一气汤低剂量组、全真一气汤高剂量组全真一气汤均可降低Th17细胞及相关促炎因子IL-6、IL-17的含量,抑制RORγt的表达;高剂量组可以升高Treg细胞百分比,而全真一气汤低剂量组对Treg细胞百分比影响则不明显,但都可以上调FOXP3的表达,促进相关抑炎因子IL-10、IL-35分泌。

麻杏石甘汤加味佐治小儿支原体肺炎的疗效及对叉头样转录因子3、调节性T细胞表达的影响

目的:探讨麻杏石甘汤加味佐治小儿支原体肺炎的临床疗效,分析其治疗机制。方法:选择2018年6月至2020年6月秦皇岛市中医医院收治的支原体肺炎患儿110例,按照随机数字表法分为两组,每组55例。对照组患儿予以阿奇霉素治疗,研究组患儿在对照组治疗基础上应用中药麻杏石甘汤加味。比较两组患儿治疗前后的中医证候评分,潮气呼吸肺功能指标[最大呼气流量(MEF)、达峰容积(VPEF)、潮气量(VT)和达峰容积比(VPEF/VE)]、呼出气一氧化氮(FeNO)、血清白三烯B4(LTB4)和嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)水平,比较两组患儿外周血叉头样转录因子3(Foxp3)蛋白、Foxp3 mRNA表达及CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞(Treg)、CD4^(+)Foxp3^(+)Treg含量,并比较两组患儿的治疗总有效率。结果:治疗后,研究组患儿高热、咳嗽、胸痛和喘息等中医证候评分明显低于对照组,MEF、VPEF、VT和VPEF/VE水平明显高于对照组,FeNO、血清LTB4和血清ECP水平明显低于对照组,外周血Foxp3蛋白、Foxp3 mRNA表达及CD4^(+)CD25^(+)Treg、CD4^(+)Foxp3^(+)Treg含量明显高于对照组,上述差异均有统计学意义(P<0.01);研究组患儿的治疗总有效率为96.36%(53/55),明显高于对照组的83.64%(46/55),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:麻杏石甘汤加味辅助治疗小儿支原体肺炎,可有效改善患儿的中医证候评分和肺功能,抑制气道炎症,效果显著;其机制可能与上调Foxp3基因表达,促进Treg的合成和分泌,增强机体免疫功能有关。

免疫调节中的一个关键转录因子——叉头状转录因子3

调节性T细胞是机体维持自身耐受的重要组成部分,在免疫耐受、自身免疫病、移植、肿瘤等方面均有极其重要的作用。在很多免疫性疾病如移植物抗宿主病中调节性T细胞的数量和功能存在显著异常。最近研究发现,叉头状转录因子3(FOXP3)对于调节性T细胞的发育和功能具有重要作用,是调节性T细胞发育的一个关键转录因子。文章就FOXP3的分子结构功能、与CD4+CD2+5Treg细胞在发育和功能上的关系及临床检测的意义予以综述。

白细胞介素-17和叉头状螺旋转录因子3在子痫前期发病机制中的作用及剖宫产术后自控镇痛对其表达的影响

目的探究白细胞介素-17(IL-17)和叉头状螺旋转录因子3(Foxp3)在子痫前期发病机制中的作用,对比重度子痫前期产妇剖宫产术后,超声引导下双侧腹横肌平面(TAP)阻滞复合静脉泵自控镇痛(PCIA)与硬膜外镇痛对疼痛控制及外周血中IL-17和Foxp3表达水平的影响。方法筛选2016年2月至2020年2月苏州市立医院重度子痫前期产妇40例,按随机数字表法分为两组(n=20),于腰-硬联合阻滞麻醉(CSEA)下行剖宫产手术,术毕T组:超声引导下低位TAP阻滞,双侧各注入0.375%罗哌卡因20 mL,复合舒芬太尼50μg+氟比洛芬200 mg生理盐水稀释至100 mL静脉自控镇痛;E组:0.15%罗哌卡因100 mL+0.04 mg/L舒芬太尼,硬膜外泵镇痛。另选20例正常产妇入C组为对照组。术后6 h(T_(1))、12 h(T_(2))、24 h(T_(3))、48 h(T_(4))对T组和E组产妇进行视觉模拟评分法(VAS)。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测外周血中IL-17和Foxp3表达水平,T组和E组产妇于麻醉开始即刻T_(0)、T_(1)、T_(2)、T_(3)、T_(4);C组于入院分娩时(T)。结果T组和E组产妇静止、咳嗽VAS评分差异无统计学意义(P>0.05);T组和E组T_(0)时较C组IL-17水平明显升高、Foxp3水平明显降低;T组和E组,T_(1)较T_(0) IL-17水平明显升高、Foxp3水平明显降低,T_(3)、T_(4)较T_(1) IL-17水平逐渐减低、Foxp3水平逐渐升高,T_(3)较T_(2),T_(4)较T_(0)、T_(2)、T_(3) IL-17水平明显降低、Foxp3水平明显升高(P<0.05);T_(1)和T_(2),T组和E组间IL-17、Foxp3水平变化差异无统计学意义(P>0.05);T_(3)和T_(4),较T组,E组IL-17水平[(68.98±14.82)ng/L比(83.51±15.77)ng/L,(36.38±12.34)ng/L比(51.65±18.43)ng/L]明显降低,Foxp3水平[(89.36±25.83)ng/L比(74.97±23.31)ng/L,(116.17±32.46)ng/L比(98.74±27.59)ng/L]明显升高(P<0.05)。结论Foxp3低表达和IL-17高表达参与了子痫前期的发病过程,可能与发病机制相关。超声引导下双侧TAP阻滞复合PCIA对剖宫产术后镇痛效果确切,有效调控IL-17和Foxp3表达,促进术后重度子痫前期产妇预后;但其抑炎作用较硬膜外镇痛弱。

呼吸道合胞病毒毛细支气管炎模型大鼠中叉状头转录因子p3的表达及其意义

目的研究叉状头转录因子p3（Foxp3）在呼吸道合胞病毒（RSV）至毛细支气管炎模型大鼠中的表达情况及其意义。方法将30只大鼠完全随机分为对照组和RSV组，每组15只，RSV组大鼠采用滴鼻法建立RSV毛细支气管炎模型。观察2组大鼠肺组织病理变化；比较2组大鼠外周血单个核细胞（PBMC）中和肺组织中Foxp3 mRNA水平及肺组织中Foxp3蛋白表达水平差异；比较2组大鼠血浆白细胞介素10（IL-10）和转化生长因子β（TGF-β）水平差异。结果RSV组大鼠肺组织肺间质炎症严重，肺泡间隔增宽，伴大量淋巴细胞浸润，对照组肺组织无异常表现；RSV组PBMC和肺组织中Foxp3 mRNA水平均明显低于对照组［相对值：（0.15±0.03）比（1.00±0.00），（0.26±0.05）比（1.00±0.00）］,差异有统计学意义（P〈0.01）；RSV组肺组织中Foxp3蛋白水平明显低于对照组；RSV组大鼠血浆IL-10和TGF-β表达水平明显低于对照组［（86±7） μg/L比（118±8） μg/L，（22±4） μg/L比（43±5） μg/L］，差异有统计学意义（P〈0.05）。结论Foxp3在RSV毛细支气管炎中表达下调，可能是导致毛细支气管炎发病的重要机制。

CC类趋化因子22和叉头状翅膀样转录因子3在胆管癌组织中的表达及意义

目的探讨CC类趋化因22(C-C class chemokines 22,CCL22)和叉头状翅膀样转录因子3(forkhead/winged helix transcription factor 3,FOXP3)在胆管癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测70例胆管癌组织和15例非肿瘤胆道上皮组织中CCL22、FOXP3的表达情况,分析其与胆管癌临床和预后的关系。结果 70例胆管癌、15例非肿瘤胆道上皮组织中CCL22和FOXP3阳性表达率分别为62.4%(44/70)、20.0%(3/15)及71.4%(50/70)、13.3%(2/15)。CCL22和FOXP3蛋白在胆管癌组织中的表达水平均明显高于非肿瘤胆道上皮组织(P<0.01)。有淋巴结转移者和TNM分期Ⅲ+Ⅳ期者较无淋巴结转移者和TNM分期Ⅰ+Ⅱ期者CCL22和FOXP3的表达阳性率高,差异有统计学意义(P<0.05)。CCL22与FOXP3蛋白表达呈明显正相关(P<0.01)。CCL22和FOXP3蛋白阴性表达者生存时间明显长于阳性表达者(P<0.01)。结论 CCL22和FOXP3可能对胆管癌发展及预后产生重要影响。

叉头状螺旋转录因子3在结直肠癌组织中的表达及与临床病理的关系

目的探讨结直肠癌组织中叉头状螺旋转录因子Foxp3的表达水平以及与结直肠癌患者临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学染色检测45例结直肠癌组织和癌旁组织中Foxp3的表达。结果结直肠癌组织中Foxp3的阳性表达率71.1%(32/45)明显高于癌旁组织阳性表达率22.2%(10/45),两者差异有统计学意义(P<0.01),且Foxp3表达水平与肿瘤的分期和淋巴结转移有相关性(P<0.05);肿瘤分期为Ⅲ期/Ⅳ期,以及淋巴结转移的结直肠癌组织中的Foxp3阳性表达率高于肿瘤分期Ⅰ期/Ⅱ期、以及淋巴结未转移的结直肠癌组织,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Foxp3在结直肠癌组织中高表达,有助于判断结直肠癌转移潜能,有望成为结直肠癌评估诊断的新靶点。

恶性黑素瘤细胞miR-508-3p与叉头框转录因子C1的关系及对增殖、迁移和侵袭的影响

目的探讨miR-508-3p与叉头框转录因子C1(forkhead box C1,FOXC1)的关系及其在恶性黑素瘤中的表达和作用机制。方法通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测mi R-508-3p和FOXC1在HEM正常黑素细胞及A375恶性黑素瘤细胞中的表达;将体外培养的A375细胞分为mimics NC组、mi R-508-3p mimics组、inhibitor NC组和mi R-508-3p inhibitor组,RT-qPCR检测其沉默效果及对FOXC1 mRNA水平的影响;免疫印迹法(Western blot)分别检测FOXC1蛋白的表达量;MTT法检测A375细胞的增殖能力;Transwell实验检测转染后A375细胞侵袭及迁移能力的变化;荧光素酶报告基因技术检测FOXC1是否为mi R-508-3p的直接靶基因。结果与人正常黑素细胞相比,A375细胞中mi R-508-3p表达明显降低,而FOXC1表达明显升高;与inhibitor NC组相比,转染mi R-508-3p inhibitors的A375细胞中mi R-508-3p的表达明显下调,FOXC1 mRNA和蛋白表达、细胞的增殖、侵袭及迁移能力明显升高;与mimics NC组相比,转染mi R-508-3p mimics的A375细胞中mi R-508-3p的表达明显升高,FOXC1 mRNA和蛋白表达、细胞的增殖、侵袭及迁移能力明显降低;mi R-508-3p mimics可降低野生型FOXC1 3’-UTR的荧光素酶报告基因相对活性。结论 mi R-508-3p通过负向调控FOXC1抑制恶性黑素瘤的增殖、迁移和侵袭。

大鼠舌黏膜癌变中转化生长因子-β和叉状头转录因子P3的表达变化及相关性研究

目的观察在大鼠舌黏膜癌变过程中转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)和叉状头转录因子P3(forkhead box P3 transcription factor,FOXP3)的mRNA表达变化情况及两者的相关性,初步探讨两者在大鼠舌黏膜癌变中的作用。方法应用前期实验获取的4-亚基硝氧喹啉(4-nitroquinoline-1-oxid,4NQO)诱发大鼠舌黏膜癌变标本,包括正常黏膜组织(对照组)、异常增生组织(异常增生组)和鳞癌组织(鳞癌组)各8例。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测各标本中TGF-β、FOXP3 mRNA表达水平,并对二者表达的相关性进行分析。结果 TGF-β、FOXP3的mRNA相对表达量在对照组中分别为3.0±1.6、1.8±0.8,异常增生组中分别为5.2±1.6、3.6±1.0,鳞癌组中分别为13.6±3.0、6.1±2.5。与对照组相比,TGF-β、POXP3在异常增生组中表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);在鳞癌组中两者的表达水平进一步增强。随病理分级增加,TGF-β、POXP3的表达呈现递增趋势。并且,在异常增生和鳞癌组中,TGF-β与FOXP3 mRNA表达呈正相关关系(相关系数r=0.686,P<0.001)。结论 TGF-β、POXP3基因表达异常可能与4NQO诱发的大鼠舌黏膜癌变相关。

叉头状转录因子3和转化生长因子-β1在口腔扁平苔藓中的表达及意义

目的:研究叉头状转录因子3(Foxp3)和转化生长因子β1(TGF-β1)在口腔扁平苔藓(OLP)组织中的表达及意义。方法:采用免疫组织化学法检测15例正常口腔黏膜(NOM)组织(NOM组)、30例OLP组织中的Foxp3和TGF-β1表达。结果:Foxp3在NOM组阴性表达,在OLP组表达强度及表达率均显著高于NOM组(P<0.01);TGF-β1在NOM组弱阳性表达,在OLP组表达强度显著高于NOM组(P<0.01),表达率与NOM组无区别(P>0.05);在OLP组Foxp3和TGF-β1表达无相关性(P>0.05)。结论:Foxp3和TGF-β1参与了口腔扁平苔藓的发病。

血液病患者信号转导及转录激活子5和叉头状转录因子3的表达

目的观察恶性血液病患者外周血中单个核细胞磷酸化STAT5及Foxp3的表达水平及其相关性。方法采用蛋白磷酸化流式细胞术分别检测45例急性白血病患者(AL)、23例慢性白血病(CL)、29例骨髓增生异常综合征(MDS)、20例重型再生障碍性贫血(SAA)及38例对照组外周血单个核细胞磷酸化STAT5(P-STAT5)及Foxp3阳性细胞的百分率。结果PSTAT5表达AL组(2.29±0.79)%、CL组(2.45±0.88)%、MDS组(2.21±0.75)%都较对照组(0.54±0.15)%增高,差异具有统计学意义(P<0.05),SAA组P-STAT5表达(0.43±0.17)%较对照组降低,差异无统计学意义(P>0.05);Foxp3表达AL组(3.86±1.13)%、CL组(3.60±1.10)%、MDS组(4.01±1.19)%高于对照组(0.89±0.38)%,差异具有统计学意义(P<0.05),SAA组Foxp3表达(0.57±0.21)%较对照组降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。AL、CL、MDS、SAA各组P-STAT5与Foxp3表达水平都呈正相关(P<0.05)。结论 STAT5及Foxp3可能共同参与了AL、CL、MDS、SAA这几类恶性血液病的发生过程,同时测定可以提供有临床意义的实验依据。

Foxp3在小鼠肺发育中的动态表达及意义

目的:通过分析叉头样转录因子3(forkhead box protein 3,Foxp3)在小鼠肺发育过程中的表达及其与肺发育相关标志物之间的关系,探讨Foxp3在肺发育中的可能作用。方法:根据小鼠肺发育的进程,选取胎鼠及新生鼠分为6组,分别于孕17.5 d及出生后1、4、7、14、21 d留取肺组织,HE染色观察肺组织形态,免疫组织化学染色检测CD31含量并观察肺微血管密度。qRT-PCR检测Foxp3及肺表面活性蛋白C(surfactant protein C,SP-C)、血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGF-A)、血管生成素-1(angiopoietin 1,Ang-1)mRNA表达,蛋白质印迹法检测Foxp3及SP-C、VEGF-A、Ang-1蛋白表达。结果:肺组织内Foxp3 mRNA在孕17.5 d小管期表达最高,后呈现不断减少趋势。SP-C mRNA在小鼠出生后1 d表达最高,随后逐渐减弱,直至肺泡化晚期。VEGF-A、Ang-1 mRNA在孕17.5 d表达最高,之后呈现不断减少趋势,最终趋于稳定。Foxp3蛋白在小管期已有表达,且在小管期及囊泡期表达最高,其后逐渐趋于平稳,VEGF-A及Ang-1在小管期及囊泡期表达亦最高,后逐渐减少;SP-C表达于出生后1 d达到最高,随后逐渐减少,并于肺泡化中晚期趋于平稳。相关性分析显示,Foxp3与SP-C、VEGF-A及Ang-1存在相关性(r分别为0.661、0.630和0.738)。结论:Foxp3在胎肺期及出生后早期呈现动态表达,Foxp3在小管期及囊泡早中期的高表达与SP-C、VEGF-A及Ang-1呈正相关,提示Foxp3可能促进肺泡上皮细胞及肺血管内皮细胞的增殖,参与肺发育过程。