辅助性和调节性T淋巴细胞亚群与过敏性紫癜患儿疾病严重程度的关系

目的 探讨辅助性(Th)(CD3^(+)CD4^(+))和调节性(Treg)(CD4^(+)CD25^(+))T淋巴细胞亚群与过敏性紫癜(HSP)患儿疾病严重程度的关系。方法 选择2018年1月至2021年1月苏州大学附属儿童医院收治的HSP患儿(150例)为研究对象,根据HSP症状积分将其分为轻度组(<33分,50例)、中度组(33~67分,56例)、重度组(>67分,44例);另选择同期于门诊进行体检的健康儿童(150例)为对照组。对比分析各组儿童的一般资料、临床症状及实验室指标。通过曲线拟合及阈值效应分析CD3^(+)CD4^(+)和CD4^(+)CD25^(+)与HSP症状积分的关系。通过LASSO模型和多因素Logistic回归分析探讨HSP患儿病情加重的影响因素,建立反向传播(BP)神经网络模型,并对模型进行评价。结果 轻度组、中度组、重度组患儿皮肤紫癜持续时间>28d的比例比较差异有统计学意义(χ^(2)=6.340,P<0.05)。轻度组、中度组、重度组、对照组儿童的白细胞计数(WBC)、C-反应蛋白(CRP)、D-二聚体(D-D)、免疫球蛋白A(IgA)、CD3^(+)CD4^(+)、CD4^(+)CD25^(+)、白细胞介素-21(IL-21)、转化生长因子β1(TGF-β1)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平比较差异均有统计学意义(F值分别为6.559、9.707、29.202、12.719、7.671、5.290、10.226、19.119、13.329,P<0.05),随着HSP病情加重,WBC、CRP、D-D、IgA、TGF-β1及TNF-α水平均有所升高,而CD3^(+)CD4^(+)、CD4^(+)CD25^(+)及IL-21水平均有所降低。随着HSP患儿病情的进展,CD3^(+)CD4^(+)和CD4^(+)CD25^(+)的水平均有所下降,当CD3^(+)CD4^(+)<37.3%时,随着CD3^(+)CD4^(+)水平升高,HSP症状积分呈下降趋势(OR=0.962,95%CI:0.947~0.977,P<0.001);当CD4^(+)CD25^(+)<10.2%时,随着CD4^(+)CD25^(+)水平升高,HSP症状积分呈下降趋势(OR=0.976,95%CI:0.953~0.998,P<0.001)。多因素Logistic回归分析显示,CRP>12.4mg/L(OR=5.017,95%CI:4.609~5.811)、D-D>3.4mg/L(OR=4.391,95%CI:4.051~5.132)、IgA>2.3g/L(OR=3.148,95%CI:2.742~3.524)、TGF-β1≥6.5pg/mL(OR=4.137,95%CI:3.372~4.512)及TNF-α≥14.5pg/mL(OR=3.811,95%CI:3.028~4.226)均为发生重度HSP的独立危险因素(P<0.05);CD3^(+)CD4^(+)≥32%(OR=0.694,95%CI:0.443~0.956)、CD4^(+)CD25^(+)≥7%(OR=0.644,95%CI:0.399~0.910)及IL-21≥23.1pg/mL(OR=0.442,95%CI:0.185~0.807)均为独立保护因素(P<0.05)。BP神经网络模型的隐含层节点数为4时,交叉验证的均方根误差最小,其中CRP(0.160分)、D-D(0.154分)、CD3^(+)CD4^(+)(0.135分)、CD4^(+)CD25^(+)(0.130分)对模型分类的贡献度较高。受试者工作特征(ROC)曲线、校准曲线和临床决策曲线(DCA)显示,该预测模型的区分度、准确性和有效性均较高。结论 CD3^(+)CD4^(+)、CD4^(+)CD25^(+)水平异常变化与HSP症状积分密切相关,随着患儿HSP病情进展,CD3^(+)CD4^(+)、CD4^(+)CD25^(+)水平明显降低;患儿HSP病情进展还与CRP、D-D、IgA、TGF-β1、TNF-α及IL-21水平密切相关。临床医护人员应密切关注相关指标,以期改善预后。

青藤碱对类风湿关节炎患者外周血辅助性T淋巴细胞17/调节性T淋巴细胞比例的影响

目的从细胞层面探讨抗风湿中药单体青藤碱(SIN)对辅助性T淋巴细胞(Th)17/调节性T淋巴细胞(Tregs)细胞比例的影响,进一步阐明SIN治疗类风湿关节炎(RA)的机制。方法分别抽取SIN组和双氯酚酸钠组RA患者治疗前、治疗12周后以及对照组健康体检者的外周静脉血20mL,以肝素钠抗凝,采用Ficol1密度梯度离心法分离外周血单核细胞,进行荧光抗体标记,应用流式细胞仪测定Th17(CD4+IL-17+)和Tregs(CD4+CD25+CD127lowFoxP3+)细胞比例,观察SIN组和双氯芬酸钠组治疗前后类风湿因子(RF)、红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、抗环瓜氨酸多肽(CCP)抗体水平和疾病活动性评分(DAS)28评分的变化,比较SIN组和双氯芬酸钠组Th17/Tregs细胞比例,观察SIN的临床疗效。结果 SIN组和双氯酚酸钠组治疗后的CRP、ESR、RF、抗CCP抗体水平均较同组治疗前显著下降(P值分别<0.05、0.01),但两组间治疗前后上述各项指标的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。SIN组和双氯酚酸钠组治疗后的DAS28评分均较同组治疗前显著下降(P值均<0.05),双氯芬钠组治疗后的DAS28评分显著高于SIN组(P<0.05)。SIN组和双氯芬酸钠组治疗前的Th17细胞比例均显著高于对照组(P值均<0.05),SIN组治疗后的Th17细胞比例较同组治疗前显著降低(P<0.05)。SIN组和双氯芬酸钠组治疗前的Tregs细胞比例均显著低于对照组(P值均<0.01),SIN组治疗后的Tregs细胞比例较同组治疗前显著升高(P<0.01),双氯芬酸钠组治疗前后Tregs细胞比例的差异无统计学意义(P>0.05)。双氯芬酸钠组治疗后的Tregs细胞比例显著低于SIN组(P<0.01)。结论 SIN可能通过抑制致炎细胞Th17升高,具有免疫抑制作用的Tregs细胞比例,而产生治疗RA的作用。

淋巴结核患者外周血CD4^+CD25^(high)FoxP3^+调节性T淋巴细胞以及血浆IFN-γ和IL-10水平及其临床意义

目的研究淋巴结核患者外周血CD4+CD25highFoxP3+调节性T淋巴细胞(Treg)和干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素10(IL-10)水平的变化及临床意义。方法采用流式细胞仪对100例淋巴结核患者及30名正常人外周血CD4+CD25highFoxP3+Treg和IFN-γ、IL-10水平进行检测。结果淋巴结核患者组与正常对照组比较,外周血CD4+CD25highFoxP3+Treg和IL-10水平均升高(P<0.05),而IFN-γ水平则降低(P<0.05)。在干酪样型、增殖型和混合型3种类型的淋巴结核病之间各指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论淋巴结核患者细胞免疫功能明显异常。CD4+CD25highFoxP3+Treg和IFN-γ、IL-10在淋巴结核的发病过程中发挥了重要作用。

胸部创伤患者早期血清调节性T淋巴细胞及Th1/Th2细胞因子变化与创伤后感染的关系

目的探讨胸部创伤患者早期血清调节性T淋巴细胞及辅助型T细胞1/辅助型T细胞2(Th1/Th2)细胞因子变化与创伤后感染的关系。方法选择160例胸部创伤患者作为研究对象,根据是否发生感染分为感染组与非感染组。详细记录患者基本信息,记录入院后24 h内白细胞(WBC)、降钙素原(PCT)、外周血CD4+/CD25+T淋巴细胞数量及Th1相关细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、Th2相关细胞因子白细胞介素-4(IL-4)水平。分析影响胸部创伤后感染发生的因素。结果(1)160例胸部创伤患者有46例并发感染,占28.75%;有114例未并发感染,占71.25%。(2)感染组与非感染组年龄、机械通气时间、合并脑损伤、ISS评分、APACHE-Ⅱ评分比较差异有统计学意义(P<0.05)。(3)感染组PCT、WBC、IFN-γ/IL-4均高于非感染组(P<0.05);CD4+/CD25+低于非感染组(P<0.05)。(4)多因素logistic回归分析显示:机械通气时间、合并脑损伤、ISS评分、APACHE-Ⅱ评分、PCT、IFN-γ/IL-4,CD4+/CD25+是胸部创伤发生感染的危险因素(P<0.05)。结论胸部创伤后早期机体免疫功能紊乱,高龄、脑损伤、ISS评分高、APACHE-Ⅱ评分高、IFN-γ/IL-4升高及CD4+/CD25+降低等多种因素可增加患者创伤后感染的风险。

1,25-二羟维生素D_3对哮喘大鼠调节性T淋巴细胞和气道炎症的影响

目的探讨1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]对哮喘大鼠调节性T淋巴细胞(即CD4+CD25+Foxp3+T细胞)及气道炎症的影响。方法28只Wistar大鼠用卵白蛋白作为致敏原制备大鼠哮喘模型,然后随机分为四组(n=7)。治疗组1于激发前1 h给予口服1,25(OH)2D3;治疗组2于激发前1 h给予皮下注射地塞米松;治疗组3则于激发前1 h给予以上两药联合应用;组4于激发前1 h不用药(哮喘对照组)。分别测定各组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4和IL-10水平,计数总细胞数和嗜酸性粒细胞数;流式细胞仪检测外周血和脾脏单个核细胞中Treg与CD4+T细胞的比值;检测肺组织中IL-10和Foxp3mRNA表达。以未造模Wistar大鼠作为正常对照组(n=7)。结果哮喘对照组与正常对照组比较各项指标均有显著差异。与哮喘对照组比较,各哮喘治疗组大鼠BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞计数明显减少,IL-4水平降低而IL-10水平增高;外周血和脾脏单个核细胞中Treg与CD4+T细胞比值明显增高;肺组织中IL-10 mRNA和Foxp3 mRNA表达增加。各哮喘治疗组间及其与正常对照组间各项检测指标比较均无显著差异。结论哮喘大鼠给予1,25(OH)2D3可增加外周血和脾脏Treg比例和Foxp3mRNA表达水平。提示1,25(OH)2D3对Treg具有调节作用,对哮喘可能有潜在的治疗作用。

CD4^+CD25^+FOXP3^+调节性T淋巴细胞数量及功能变化与子宫内膜异位症患者发病相关性研究

目的:分析子宫内膜异位症(EMs)患者在位、异位内膜及外周血内CD4^+CD25^+FOXP3^+调节性T淋巴细胞(Treg细胞)的数量、分布及功能特性,探讨Treg细胞与EMs发病之间的关系。方法:收集EMs患者在位、异位内膜组织及外周血标本,并以非内异症患者作为对照,免疫组化分析在位、异位内膜内叉头状/翅膀状螺旋转录因子3(FOXP3)阳性细胞的数量及分布变化情况,并与EMs患者的r AFS临床分期进行相关性分析。流式细胞术检测Treg细胞占外周血CD4^+T淋巴细胞的百分比,及磁珠分选外周血内CD4^+CD25^+T细胞及CD4^+CD25-T细胞,3H-thymidine法测定CD4^+CD25^+T细胞免疫抑制功能变化情况。结果:EMs、非EMs患者在位内膜内平均FOXP3阳性细胞密度并无显著差异[(76.44±62.14)/mm^2vs(50.59±20.79)/mm^2;WU=152.0,P=0.20]。进一步按月经周期行亚组分析:EMs分泌期内膜内FOXP3阳性细胞密度显著高于非EMs患者[(94.84±53.91)/mm^2vs(31.37±19.02)/mm^2;MU=43.00,P=0.03]。不同r AFS期别患者卵巢异位症病灶内FOXP3阳性细胞密度并无显著差异[I^II期:(123.00±115.00)/mm^2vs III^IV期:(111.00±108.00)/mm^2;MU=139.5,P>0.05]。EMs患者外周血内Treg细胞比例显著低于非EMs患者[(0.58±0.21)%vs(1.35±0.38)%,P<0.001],但EMs患者外周血CD4^+CD25^+T淋巴细胞对CD4^+CD25-T淋巴细胞增殖抑制率,与非EMs相比并无显著变化[(68.43±18.15)%vs(66.37±17.78)%,P>0.05]。结论:EMs患者在位内膜内Treg细胞失去正常的周期波动性,EMs患者分泌期内Treg细胞数目增加可能与内异症发病相关。EMs患者外周血内Treg细胞比例下降,但其免疫抑制功能并无明显改变。

宫颈癌患者外周血中CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T淋巴细胞及血清中IL-10、TGF-β的表达及其临床意义

目的探讨宫颈癌患者外周血CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T淋巴细胞(regulatory T cells,Treg)、T淋巴细胞亚群以及血清IL-10、TGF-β1、TGF-β2细胞因子的表达及其临床意义。方法选取32例宫颈癌患者和24位健康体检者为研究对象,采用流式细胞术检测受试者外周血中CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg占CD4^+T淋巴细胞的比例、T淋巴细胞亚群细胞比例;采用ELISA方法检测血清中细胞因子IL-10、TGF-β1、TGF-β2的含量。结果与健康对照组相比,宫颈癌组外周血中CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg占CD4^+T淋巴细胞的比值明显增高,差异有统计学意义(P<0.01),T淋巴细胞亚群(CD3^+、CD4^+、CD8^+、CD4^+/CD8^+、CD19^+)比例差异无统计学意义(P>0.05),血清IL-10含量明显增高,TGF-β2含量明显降低,差异有统计学意义(P<0.01),TGF-β1的含量差异无统计学意义(P>0.05);宫颈癌组手术后、化疗后CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg占CD4^+T淋巴细胞的比例,血清IL-10、TGF-β1、TGF-β2含量均明显降低,差异有统计学意义(P<0.01),CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg与TGF-β1之间存在正相关(r=0.673,P<0.01)。结论宫颈癌患者CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg占CD4^+T淋巴细胞的比值增高,且与TGF-β1含量呈正相关,可能在宫颈癌的肿瘤发生发展及肿瘤免疫逃逸中起着重要作用。

输血相关性急性肺损伤患者免疫调节性T淋巴细胞表达与预后的关系

目的探讨输血相关性急性肺损伤(transfusion-related acute lung injury,TRALI)患者外周血免疫调节性T细胞(Treg)免疫活性的变化规律,并探讨其在患者不良预后中的临床意义。方法 TRALI患者(TRALI组)26例,根据临床多器官功能障碍综合征(MODS)的诊断标准,分为并发MODS组(n=8)和非MODS组(n=18),根据患者的预后情况,将其分为死亡组(n=5)和生存组(n=21);输血未发生TRALI组(非TRALI)30例,正常对照组为同期健康体检者30例。分别采集各组的外周静脉血,采用免疫磁性分离系统对外周血CD4+CD25+Treg进行分离纯化;采用流式细胞术检测CD4+CD25+Treg表面分子T淋巴细胞毒性相关抗原-4(CTLA-4)的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测Treg孵育液上清中IL-10的水平。结果 TRALI组患者CD4+CD25+Treg表面分子CTLA-4表达率[(37.65±7.33)%]及分泌IL-10水平[(45.34±4.19)pg/mL]与正常对照组[(22.12±7.23)%和(12.12±3.23)pg/mL]比较,均明显升高(P<0.05,P<0.01);MODS组患者CTLA-4表达率[(42.23±7.43)%]及分泌IL-10水平[(61.35±10.09)pg/mL]显著高于非MODS组[(30.26±5.65)%和(37.87±6.55)pg/mL](P<0.05,P<0.01);死亡组CTLA-4表达率(44.45±12.34)%及分泌IL-10水平(65.76±22.32)pg/mL显著高于生存组[(31.43±10.12)%和(43.46±10.67)pg/mL](P<0.05,P<0.01)。结论 TRALI患者外周血CD4+CD25+Treg表面分子表达及细胞因子分泌在是否并发MODS及是否生存等不同组间存在显著差异,提示TRALI可促进CD4+CD25+Treg表面分子表达,并刺激其分泌大量抑制性细胞因子发挥自身免疫作用,从而导致机体免疫功能障碍甚至免疫紊乱的发生与发展。

自发性高血压大鼠肾损伤伴随调节性T淋巴细胞下降及连接蛋白43的表达增强

目的探讨高血压大鼠肾损伤时调节性T淋巴细胞（regulatory T lymphocytes,Treg）及连接蛋白43（connexin 43,Cx43）在外周血的表达变化。方法选取16~17周龄雄性自发性高血压大鼠（spontaneous hypertension rats,SHR）和正常Wistar京都（Wistar-Kyoto,WKY）大鼠,各17只,测量血压后,采用苏木素-伊红（hematoxylin and eosin,HE）染色观察大鼠肾脏组织的病理学改变,应用流式细胞术检测大鼠外周血中CD4＋CD25＋调节性T淋巴细胞以及Cx43在CD4＋和CD8＋T细胞的表达比率。结果与WKY大鼠比较,SHR肾脏血管壁增厚,部分血管周围炎性细胞浸润和肾小球萎缩等肾损伤现象;WKY大鼠和SHR外周血中CD4＋CD25＋调节性T淋巴细胞所占CD4＋T细胞的频率分别为（3.1±0.1）%和（1.9±0.1）%,两者间有显著性差异（P〈0.01）;WKY大鼠和SHR外周血中CD4＋Cx43＋的表达比率分别为（0.76±0.20）%和（1.83±0.34）%;CD8＋Cx43＋的表达比率分别为（25.33±1.71）%和（36.46±2.87）%,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论自发性高血压大鼠肾损伤伴随其外周血中CD4＋CD25＋调节性T淋巴细胞的频率下调,且Cx43在CD4＋和CD8＋T淋巴细胞的表达增加。

急性脑梗死患者免疫调节性T淋巴细胞表达与预后的关系

目的探讨急性脑梗死患者外周血免疫调节性T淋巴细胞的表达及其与预后的关系。方法急性脑梗死患者30例,根据多器官功能障碍综合征诊断标准分为多器官功能障碍综合征组(n=8)和非多器官功能障碍综合征组(n=22),根据患者转归分为死亡组(n=5)和生存组(n=25);正常对照组为同期健康体检者30例。分别采集各组的外周静脉血,采用免疫磁性分离系统对外周血CD4+CD25+Treg进行分离纯化;采用流式细胞术检测CD4+CD25+Treg表面分子T淋巴细胞毒性相关抗原4(CTLA-4)的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测CD4+CD25+Treg孵育液上清中白细胞介素10(IL-10)的水平。结果急性脑梗死组患者CD4+CD25+Treg表面分子CTLA-4表达率(36.68%±7.41%)及分泌IL-10水平(15.38±3.79 ng/L)与正常对照组(22.20%±7.18%和8.96±3.28 ng/L)比较,均明显升高(P<0.01);多器官功能障碍综合征组患者CTLA-4表达率(42.10%±7.44%)及分泌IL-10水平(28.30±9.48 ng/L)显著高于非多器官功能障碍综合征组(30.26%±5.60%和17.86±6.54 ng/L;P<0.01);死亡组CTLA-4表达率(44.45%±12.34%)及分泌IL-10水平(33.90±10.62 ng/L)显著高于生存组(31.43%±10.12%和16.08±8.67 ng/L;P<0.01)。结论急性脑梗死患者可促进外周血CD4+CD25+Treg表面分子表达,并刺激其分泌大量抑制性细胞因子发挥自身免疫作用,从而导致机体免疫功能障碍甚至免疫紊乱的发生与发展,且与患者的预后密切相关。

特异性免疫治疗对支气管哮喘患儿血清调节性T淋巴细胞水平、IL-10、sIgE水平的影响及疗效评价

目的探讨特异性免疫治疗对支气管哮喘患儿血清调节性T淋巴细胞、IL-10、sIgE水平的影响,分析特异性免疫治疗对儿童哮喘的疗效。方法选取2017年2月至2018年4月贵州省贵阳市妇幼保健院儿童呼吸哮喘专科收治的支气管哮喘患儿60例,随机分为实验组和对照组,各30例。对照组患儿接受常规糖皮质激素吸入剂等基础用药治疗;实验组在基础用药治疗的同时给予特异性免疫(Specific immunotherapy,SIT)治疗。检测并对比CD4^+CD25^+T细胞、CD4^+CD25^high CD127^low Treg细胞占比变化,血清IL-10、sIgE水平变化。结果治疗前两组患儿咳喘发作次数与持续时间比较无显著差异(P>0.05);两组经过治疗1年后,患儿临床症状均明显改善;但实验组患儿平均咳喘次数、持续时间均明显低于对照组(P<0.05);治疗1年后两组CD4^+CD25^+T细胞、CD4^+CD25^high CD127^low Treg细胞、IL-10水平升高(P<0.05),实验组均高于对照组(P<0.05);1年后两组sIgE水平均下降,实验组均低于对照组(P<0.05)。结论对支气管哮喘患儿给予特异性免疫治疗可改善调节性T淋巴细胞水平,还可改善炎症因子、免疫指标水平,可改善哮喘临床症状,降低其复发率,有效缓解哮喘病情,随访观察一年疗效理想,值得推广。

宫颈癌患者外周血CD4^+CD25^+调节性T淋巴细胞与白细胞介素-17水平及其相关性研究

目的探讨外周血CD4^+CD25^+调节性T淋巴细胞(Tr细胞)和白细胞介素-17(IL-17)水平在宫颈癌患者中的变化及其相关性。方法选取2014年1月至2015年3月该院确诊宫颈癌患者60例(宫颈癌组)和查体的健康女性60例(健康对照组),采用流式细胞仪检测外周血Tr细胞数量及占CD4^+细胞百分比,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清IL-17水平。结果宫颈癌组外周血Foxp3^+Tr、Tr、CD4^+T淋巴细胞百分比,Foxp3^+Tr/Tr、Tr/CD4^+T淋巴细胞比值及血清IL-17水平均较健康对照组明显升高,而IL-17/Tr比值明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。宫颈癌组患者外周血CD4^+CD25^+Tr细胞水平与血清IL-17水平呈正相关(r=0.768,P<0.05)。结论宫颈癌患者存在细胞免疫功能紊乱,IL-17与Tr细胞比值失衡可能在宫颈癌发病机制中起一定的作用。

地西他滨对老年急性髓细胞白血病患者肿瘤相关巨噬细胞及调节性T淋巴细胞表达的影响

目的观察地西他滨(DAC)对老年急性髓细胞白血病(AML)患者肿瘤相关巨噬细胞(TAM)及调节性T淋巴细胞(Tregs)表达的影响,探讨其免疫调节及抗肿瘤的机制。方法选取2016年1月至2019年1月海南医学院第一附属医院收治的96例AML患者作为研究对象,所有患者随机分为两组:观察组48例(DAC+CAG化疗方案),对照组48例(CAG化疗方案),治疗持续3个疗程。记录两组患者1个疗程、2个疗程及3个疗程后完全缓解(CR)/骨髓完全缓解(mCR)率,比较两组治疗前后TAM及Tregs表达水平。结果观察组治疗第1疗程和第3疗程后的缓解率显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗前TAM及Tregs的差异无统计学意义(P>0.05)。观察组治疗后巨噬细胞炎症蛋白(MIP)-1α、CD206^+细胞比例及Tregs细胞比例均明显降低(P<0.05),对照组治疗后MIP-1α无明显变化(P>0.05),治疗后上述指标的组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 DAC可能通过抑制老年AML患者TAM及Tregs的表达发挥免疫调节作用,提高患者缓解率。

肝移植组织中调节性T淋巴细胞的表达及分布

背景:调节性T细胞在动物肝脏移植免疫耐受诱导中起重要作用。目的:探讨调节性T细胞在肝移植组织中的表达与分布。方法:由第一作者检索Medline数据库1990-01/2010-12,万方医学网1990-01/2010-12,中国医院知识仓库1998-01/2010-12文献。英文检索词为"liver transplantation,rejection,immune tolerance,regulatory T cells";中文检索词为"肝移植,排斥反应,免疫耐受,调节性T淋巴细胞"。结果与结论:调节性T淋巴细胞是调节机体免疫应答的一类重要调节性细胞,具有辅助体液和细胞免疫的功能,调节性T淋巴细胞及其细胞因子在肝移植免疫中起十分重要的作用:Th1/rh2的平衡与肝移植后免疫反应密切相关,Th1细胞因子分泌增加可致肝移植排斥反应,当Th1/rh2向Th2偏移,易发生免疫耐受反应。临床评价肝移植患者免疫状态需要联合ImmuKnow、T淋巴细胞、血药浓度、肝功能指标检测等相关检查,来有效指导肝移植受体免疫抑制剂的个体化使用。

重度子痫前期患者外周血CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T淋巴细胞改变与发病孕周的关系

目的探讨子痫前期患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞(Treg)的比例改变与发病孕周之间的关系。方法 2010年1月至2011年12月对宁波市妇女儿童医院早发型重度子痫前期患者20例、晚发型重度子痫前期患者20例、28~34周的正常妊娠组20例及34周以后的正常妊娠20例,采用流式细胞仪检测其外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg的比率,分析其与子痫前期发病及发病孕周之间的关系。结果早发型和晚发型子痫前期患者妇女外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg比例分别为(2.80±0.54)%、(3.23±0.44)%,分别低于28~34、>34周正常妊娠组妇女外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg比例(3.48±0.31)%、(3.58±0.41)%,差异有统计学意义(P<0.05)。且早发型子痫前期患者妇女外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg比例低于晚发型子痫前期患者,差异有统计学意义(P<0.01)。28~34、>34周正常妊娠组妇女外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg比例比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CD4+CD25+Foxp3+Treg的减少可能参与子痫前期的发病,下降程度可能与子痫前期发病孕周密切相关。

HCV早期感染者病毒载量与CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T淋巴细胞相关性研究

目的研究丙型肝炎病毒(HCV)早期感染者(抗原阳性、抗体阴性)的HCV病毒载量与CD4+CD25+叉头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3+)调节性T淋巴细胞水平的相关性,分析CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞在HCV感染中的作用。方法应用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ RT-PCR)技术检测22例HCV核心抗原阳性、抗体阴性(即HCV Ag阳性、抗-HCV阴性)的早期感染病例、26例核心抗原阳性、抗体阳性(即HCV Ag阳性、抗-HCV阳性)的慢性HCV感染病例,24例核心抗原阴性、抗体阳性(即HCV Ag阴性、抗-HCV阳性)的既往HCV感染病例及22例健康对照组HCV RNA病毒载量;并用流式细胞技术检测各组外周血有核细胞中的CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞水平。结果 HCV Ag阳性、抗-HCV阴性组,HCV Ag阳性、抗-HCV阳性组,HCV Ag阴性、抗-HCV阳性组及健康对照组CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞逐级下降,其中抗原阳性、抗体阴性组[(4.86±2.14)%]高于其他组[分别为(3.74±1.67)%、(2.74±1.27)%、(2.56±1.18)%],差异有统计学意义(t值分别为2.023、4.125、4.402,P<0.05);HCV Ag阳性、抗-HCV阴性组CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞与HCV RNA病毒载量的对数(copy/mL,Ig)呈正相关(r=0.535,P<0.05)。结论 HCV早期感染者CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞水平与高病毒调定点相关,CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞水平可能是加速HCV早期感染的影响因素之一。

AIDS患者肺组织巨细胞病毒感染与CD4^+CD25^+调节性T淋巴细胞表达的关系

目的研究AIDS患者肺组织巨细胞病毒(CMV)感染与CD4^+CD25^+调节性T淋巴细胞表达的关系。方法应用免疫组织化学方法,检测15例AIDS尸检患者肺门淋巴结中CD4^+CD25^+调节性T淋巴细胞的特异性标记物叉头/翅膀状螺旋转录因子(FOXP3)的表达,同时应用免疫组织化学和核酸原位杂交方法检测肺组织中CMV抗原及核酸的表达。结果本组病例中有8例表现为肺部CMV感染。CMV肺炎主要表现为间质性肺炎及巨细胞包涵体形成;肺部CMV感染常合并其他机会性感染;应用CMV单克隆抗体免疫组织化学及原位杂交技术可明确CMV感染诊断。CMV感染者FOXP3阳性标记指数显著高于无感染者;CMV感染者CD4^+、CD8^+淋巴细胞计数略低于无感染者,但差异无统计学意义。结论本组病例AIDS患者肺部CMV感染率较高,可能与调节性T淋巴细胞的高表达有关。

反复自然流产患者免疫治疗后封闭抗体与调节性T淋巴细胞变化

目的:通过研究反复自然流产(RSA)患者主动免疫治疗前后外周血中封闭抗体(BA)和调节性T淋巴细胞(Tr)变化和治疗后的妊娠结局,探讨BA、Tr与RSA发病的关系,评价主动免疫治疗对于RSA的疗效。方法:采用酶联免疫法(ELISA)检测BA;双荧光标记流式细胞分析技术检测80例RSA患者外周血CD4+CD2+5Tr及CD4+CD2h5ighT的表达率。结果:经免疫治疗后,流产组患者外周血中出现BA,阳性率为92.50%;CD4+CD2+5Tr及CD4+CD2h5ighT的表达率明显低于正常妊娠组和正常非妊娠妇女;免疫治疗后,流产组患者外周血CD4+CD2+5Tr及CD4+CD2h5ighT的表达率较治疗前明显增加;再次妊娠的成功率为86.67%。结论:RSA的发生可能与患者外周血中BA水平、CD4+CD2+5Tr和CD4+CD2h5ighT数量减少有关;主动免疫治疗可以提高BA的阳性率,增加CD4+CD2+5Tr数量,提高再次妊娠的成功率,是治疗RSA的一种有效方法。

探讨CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T淋巴细胞在HCV早期感染的作用

目的研究HCV抗原阳性抗体阴性的早期感染者体内的CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T淋巴细胞水平及其与疾病进展相关性，观察CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T淋巴细胞在HCV早期感染的作用。方法20例HCV抗原阳性抗体阴性的早期感染的病例，22例抗原阴性与抗体阳性HCV感染病例及25例抗原阳性与抗体阳性慢性HCV感染病例和21例健康人作对照组。应用流式细胞技术检测比较各组外周血中的有核细胞中的CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T淋巴细胞；并同时检测丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST），分析与其的相关性。结果HCV感染病例的外周血中CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T淋巴细胞表达率（百分率）较健康对照组高（t值分别为2．231，3．764；P均〈0．05）；抗原阳性抗体阴性组与抗原阳性抗体阳性组比较差异有统计学意义（t=2．180，P=0．035）；抗原阴性抗体阳性组与健康对照组比较差异无统计学意义（t=0．437，P=0．665）；抗原阳性抗体阴性组CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T淋巴细胞表达率与肝脏炎症指标的ALT和AST有相关性（rALT=0．571，rAST=0．521，P〈0．05）。结论CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T淋巴细胞水平及其与疾病进展有重要相关性，可能是早期感染HCV并加速其慢性化的其中重要影响因素之一。

反复种植失败患者的外周血Th17/调节性T淋巴细胞的失衡情况

目的探讨反复种植失败(RIF)患者外周血Th17/调节性T淋巴细胞(Treg)的失衡情况。方法纳入26例RIF患者(RIF组)和27例非妊娠期且生育功能正常的女性(对照组)。于月经周期的增殖晚期,检测两组外周血单核淋巴细胞中叉头状/翅膀状螺旋转录因子P3(FOXP3)与视黄酸受体相关孤儿受体γt(RORγt)的mRNA表达量,以及CD4~+IL-17A~+Th17/CD4~+T淋巴细胞比值和CD4~+CD25~+FOXP3~+Treg/CD4~+T淋巴细胞比值;并检测两组血清转化生长因子β1(TGF-β1)、白细胞介素(IL)-10、IL-6、IL-17A、IL-23蛋白水平。结果RIF组CD4~+IL-17A~+Th17/CD4~+T淋巴细胞比值及RORγt mRNA表达量均高于对照组,而CD4~+CD25~+FOXP3~+Treg/CD4~+T淋巴细胞比值及FOXP3 mRNA表达量均低于对照组(均P<0.05)。RIF组血清TGF-β1和IL-10水平均低于对照组,IL-6、IL-17A和IL-23水平均高于对照组(均P<0.05)。结论Treg及相关细胞因子在RIF患者外周血表达降低并伴有活性减弱,而Th17及相关细胞转录因子的表达增高且活性增强;RIF患者机体存在Th17偏移,Th17/Treg失衡可能是RIF的发病机制之一。