大剂量过敏原对致敏小鼠DC表面共刺激分子表达及调节性T细胞极化的作用

目的观察和比较致敏小鼠及正常小鼠DC表面共刺激分子表达及CD4+CD25+Foxp3+T数量的差异及大剂量过敏原在体外的作用。方法流式细胞仪检测致敏及正常对照小鼠脾脏DC表面分子CD11c、MHCⅡ、CD80、CD86表达。分离致敏及正常对照小鼠CD4+T细胞,流式细胞仪检测CD4+CD25+Foxp3+T细胞的数量。致敏小鼠脾脏DC、CD4+T细胞与10 mg/ml OVA或生理盐水共培养后,流式细胞仪检测并比较CD80、CD86等共刺激分子的表达及CD4+CD25+Foxp3+T细胞的数量。结果致敏小鼠脾脏DC表面共刺激分子CD80、CD86、MHCⅡ表达显著高于正常对照小鼠。10 mg/ml的OVA作用后,致敏小鼠脾脏DC表面共刺激分子CD80、CD86的表达明显降低。致敏小鼠脾脏细胞中CD4+CD25+Foxp3+T细胞数量显著低于正常对照小鼠。10 mg/ml的OVA作用后,致敏小鼠CD4+CD25+Foxp3+T细胞数量显著上升。结论大剂量过敏原在体外诱导致敏小鼠T细胞的不反应性,其机制与降低致敏小鼠DC共刺激分子表达,诱导调节性T细胞极化等有关。

耐多药肺结核患者外周血调节性T细胞及表面共刺激分子的表达及作用探讨

目的探讨耐多药肺结核(MDR-TB)患者外周血中调节性T细胞(Treg)、相关细胞因子、表面共刺激分子的表达情况及免疫功能状态。方法回顾性收集2016年9月-2018年10月期间在我院初治的105例非耐药肺结核(DS-TB)患者、45例MDR-TB患者和50例健康志愿者的资料,采用ELISA法检测外周血转化生长因子β1(TGF-β1)和白介素10(IL-10)的含量;经荧光抗体标记后,采用流式细胞术检测CD4+CD25+Foxp3+和CD4+CD25+CD127-Treg细胞比例,以及Treg细胞表面共刺激分子-细胞毒T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)、程序性死亡因子-1(PD-1)、可诱导共刺激分子(ICOS)的表达情况,并进行相关性分析。结果DS-TB患者和MDR-TB患者外周血TGF-β1和IL-10含量均高于对照组,且MDR-TB患者外周血TGF-β1和IL-10含量高于DS-TB患者(P<0.05)。MDR-TB患者外周血CD4^+CD25^+Foxp3^+和CD4^+CD25^+CD127^-Treg细胞比例分别为(5.24±1.18)%和(7.76±1.75)%,高于对照组和DS-TB患者(P<0.05),且两者呈正相关性(R2=0.674,P<0.001)。另外,MDR-TB患者外周Treg细胞表面共刺激分子CTLA-4、PD-1和ICOS表达量分别为(0.49±0.15)%、(4.13±1.27)%、(0.46±0.23)%,均高于对照组和DS-TB患者(P<0.05)。相关分析显示,TGF-β1(R^2=0.521,P<0.001)、CTLA-4+Treg细胞(R^2=0.434,P<0.001)、PD-1+Treg细胞(R2=0.436,P<0.001)、ICOS+Treg细胞(R^2=0.570,P<0.001)比例与CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg细胞含量呈正相关性。结论Treg细胞在肺结核患者特别是MDR-TB患者外周血中的表达明显升高,提示TB患者免疫功能受损程度可能与Treg细胞水平有关,且MDR-TB患者免疫抑制状态更严重。而Treg细胞表面共刺激分子CTLA-4、PD-1、ICOS有望成为未来肺结核治疗的潜在靶标。

负性共刺激分子BTLA/HVEM抑制肺结核患者CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)调节性T细胞增殖

目的研究B、T淋巴细胞衰减因子(B and T lymphocyte attenuator,BTLA)及其配体疱疹病毒进入中介体(herpesvirus entry mediator,HVEM)在肺结核患者CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)调节性T细胞(CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg)中的表达及其与患者临床特征的关系。方法选取肺结核患者30例(肺结核组)和20例健康体检者(健康对照组),通过流式细胞术检测2组外周血淋巴细胞CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg细胞的阳性率,以及检测BTLA/HVEM在肺结核患者外周血和淋巴细胞上的表达;利用蛋白芯片法检测结核抗体;通过影像检测结果判断肺结核进展程度;采用罗氏培养法培养结核分枝杆菌。结果结核组CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg所占比例为(9.14±2.66)%,健康对照组CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg所占比例为(6.39±1.73)%,相对于健康对照组,肺结核组患者外周血中CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg比率明显增高;健康对照组CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg上BTLA和HVEM的表达率高于肺结核组;BTLA、HVEM在肺结核组患者CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg上的表达呈正相关;BTLA、HVEM在CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg上的表达在痰涂阳性患者组中更低,而与其他临床特征无关。结论肺结核患者体内的CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg增高,可能是抗结核免疫应答被抑制的原因,提示过度扩增导致数量异常增高的Treg是免疫应答不足和MTB逃逸的一个重要因素。负性共刺激信号BTLA/HVEM在结核患者体内下调提示其参与对CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg的增殖的抑制作用。

自身反应性T细胞及共刺激分子CD28／CTLA-4／B7、CD40／CD40L和ITP

血小板抗原特异性自身反应性T细胞的活化在特发性血小板减少性紫癜(ITP)的发病机制中起着关键性作用,T细胞的活化除需要抗原递呈细胞表面MHCⅡ抗原复合物外还需要共刺激分子(第二信号),主要包括CD28／CTLA-4／B7和CD40／CD40L。本文就自身反应性T细胞和共刺激分子CD28／ CTLA-4／B7、CD40／CD40L在ITP中的作用机制及潜在的治疗价值作一综述。

慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞共刺激分子和FOXP3 mRNA表达的研究

目的探讨外周血单个核细胞共刺激分子和(CD_4)^+(CD_(25))^+调节性T细胞FOXP3 mRNA表达在慢性乙型肝炎患者免疫耐受中的作用。方法以β-actin为内参,用RT-PCR和Real-Time PCR方法对61例慢性HBV感染者(其中免疫清除期患者37例、免疫耐受期患者24例)和20例健康对照组外周血单个核细胞共刺激分子B7-2、PD-L1及FOXP3 mRNA的表达水平进行检测,并分析PD-L1/B7-2比值与FOXP3的相关性。结果外周血单个核细胞PD-L1/B7-2比值在慢性乙型肝炎患者免疫清除期和免疫耐受期均明显高于健康对照组;FOXP3 mRNA表达在免疫清除期明显高于免疫耐受期和健康对照组(P<0.01);免疫清除期PD-L1/B7-2比值与FOXP3表达呈明显正相关。结论慢性乙型肝炎患者正负共刺激分子和FOXP3 mRNA的表达有相关性;共刺激分子和(CD_4)^+(CD_(25))^+调节性T细胞可能共同参与调节机体对HBV感染的免疫耐受。

OX40/OX40L共刺激信号分子在慢性乙肝病毒感染者外周血中的表达研究

目的:探讨OX40/OX40L共刺激信号分子在慢性乙肝病毒(HBV)感染者外周血中的表达情况。方法:选取2019年6月—2020年6月本院收治的慢性HBV感染患者82例为观察组,同期选取健康体检者80例为对照组。观察组分为免疫耐受组、免疫清除组、低复制组、再活动组4个亚组,比较各亚组白蛋白/球蛋白(A/G)、总胆红素(TBIL)、谷丙转氨酶(ALT)等肝功能指标,以及肝功能与OX40/OX40L表达水平的相关性。结果:观察组外周血T细胞亚群CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)、CD_(4)^(+)、CD_(3)^(+)较对照组低,CD_(8)^(+)较对照组高(P<0.05)。观察组外周血CD_(4)^(+)、CD_(14)^(+)、CD_(19)^(+)T细胞表面的OX40/OX40L较对照组表达水平高(P<0.05)。4个亚组外周血CD_(4)^(+)T细胞表面的OX40表达水平比较,再活动组最高,其次是免疫清除组、低复制组,免疫耐受组最低(P<0.05);4个亚组CD _(14)^(+)、CD_(19)^(+)T细胞表面的OX40L表达比较,差异无统计学意义(P>0.05)。4个亚组肝功能指标A/G水平依次降低,ALT、TBIL水平依次升高,差异有统计学意义(P<0.05)。OX40/OX40L表达水平与肝功能指标ALT、A/G呈正相关(P<0.05),与TBIL不具相关性(P>0.05)。结论:慢性乙肝患者外周血OX40/OX40L分子表达水平与病例发展阶段、肝功能指标具有相关性,活动性越高,表达水平越高,肝功能受损越严重,借助于检测OX40/OX40L表达,可反映患者免疫功能。

OX40对CD4记忆T细胞的调节

CD4记忆T细胞在保护机体免受病毒、细菌、寄生虫等物质感染中起十分重要的作用,并与自身免疫反应、变态反应等有关异常的免疫反应相关。理解免疫记忆反应有效的控制机制对于疫苗的设计以及调控异常免疫反应有着重要的意义。近年来,肿瘤坏死因子受体超家族成员-OX40(CD134),作为一共刺激分子对于维持CD4+T细胞的活化、增值、存活起到关键性作用。本文对此研究进展作以综述。

OX40/OX40L与T细胞

OX40(CD134)及其配体OX40L(CD252)属于肿瘤坏死因子超家族成员,是机体免疫应答过程中一对重要的协同刺激分子,对维持T细胞的活化、增殖以及存活都起到关键性作用。作者就OX40与T细胞的关系进行综述。

重症肌无力患者外周血CD4^+T细胞OX40的表达及作用机制研究

目的分析重症肌无力(MG)患者外周血CD4+T细胞协同刺激分子OX40表达及其对FoxP3+CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的调控作用,初步探讨OX40在MG免疫学发病中的作用机制。方法以流式细胞技术检测42例MG患者及38名健康对照的外周血OX40+CD4+T细胞、FoxP3+CD4+CD25+Treg表达水平,比较OX40表达在MG患者不同临床疾病状态、Osserman分型、临床绝对评分、胸腺病理类型等情况下的差异,并分析OX40对FoxP3+CD4+CD25+Treg细胞的影响。结果 (1)MG患者外周血OX40+CD4+T细胞占淋巴细胞百分比高于健康对照组(P<0.01)。(2)MG患者OX40+CD4+T细胞百分比在发作或加重期高于缓解期(P<0.05);在临床绝对评分呈中、重度患者OX40+CD4+T细胞百分比高于轻度患者(均P<0.05);OssermanⅡ、Ⅳ型患者OX40+CD4+T细胞百分比高于Ⅰ型患者(均P<0.05);胸腺增生及胸腺瘤患者OX40+CD4+T细胞百分比高于胸腺正常患者(P<0.05,P<0.01)。(3)MG患者外周血OX40+CD4+T细胞百分比与FoxP3+CD4+CD25+Treg细胞百分比呈负相关(r=-0.843,P=0.01)。结论协同刺激分子OX40参与MG发病,可能通过抑制FoxP3+CD4+CD25+Treg细胞生成发挥作用。

ICOS在健康人外周血调节性T细胞上的生物学特征初探

目的:研究ICOS在健康人外周血Treg离体培养中的作用,了解m TOR对离体培养Treg ICOS表达的调控。方法:MACS分选Treg后经anti-CD3+anti-CD28磁珠刺激后第3、7天流式检测Treg表面ICOS表达情况;anti-CD3+anti-CD28抗体或anti-CD3+ICOSL-Fc刺激3 d,流式检测Treg ICOS表达情况;雷帕霉素处理离体培养Treg,流式分析其对Treg ICOS表达作用。CFSE标记人PBMC细胞,并与离体培养Treg混合培养,流式检测Treg的接触抑制活性。结果:anti-CD3+anti-CD28磁珠刺激Treg 3 d,ICOS+Treg中活、死细胞的比例分别为(92.00±2.69)%和(2.20±0.56)%,在ICOS-Treg中比例为(90.30±3.53)%和(1.77±0.78)%,两者无显著差异;培养第7天,ICOS+Treg细胞比例从第3天(40.20±1.83)%降至(11.60±1.10)%;anti-CD3+ICOSL-FC刺激Treg 3 d后,ICOS MFI为(403.30±74.42),anti-CD3+anti-CD28刺激组为(2 410.0±746.4),anti-CD3+ICOSL-FC刺激后Treg ICOS表达相比anti-CD3+anti-CD28组显著下降;雷帕霉素处理离体培养Treg细胞3 d后,ICOS表达下调。此外,雷帕霉素处理的离体培养Treg均能有效抑制PBMC中Tcon的分裂增殖。结论:ICOS表达高低对人外周血Treg存活率影响无显著差异,m TOR信号并非调控人Treg离体培养ICOS表达的唯一因素,CD28协同信号对调控离体培养人Treg。表达比ICOSL信号更为重要,雷帕霉素处理的离体培养人Treg仍具有细胞接触抑制活性。

Herpes virus entry mediator/CD160介导人调节性T细胞对CD4^+效应性T细胞的抑制作用

目的研究HVEM、CD160在不同CD4+T细胞亚群,不同功能状态下的表达以及HVEM-CD160通路对CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)免疫调节作用的影响。方法采用流式细胞分析术分别检测3例不同个体CD4+CD25+Tregs及CD4+CD25-T细胞在1 000 IU/ml人重组IL-2、与细胞数量1∶1的抗CD3/CD28 mAb包被磁珠的刺激下第0、3、5天HVEM或CD160的表达情况。采用1.25、2.5、5μg/ml HSV1gD蛋白处理4例不同个体Treg,培养5 d后,将处理的Treg与Teff在体外以1∶1混合并加入300 IU/ml IL-2及等量抗CD3/CD28 mAb包被磁珠,行混合淋巴细胞共培养,于培养结束前18 h加入3H-TdR,共培养7 d后检测各组细胞CPM增殖情况。5μg/ml gD蛋白处理5例不同个体Treg后将其细胞浓度调整为5×106并接种于6孔培养板内,加入500 IU/ml IL-2共培养7 d,行RT-PCR(Realtime PCR)分析Treg Foxp3基因表达。结果 HVEM在初始CD4+CD25+Tregs表面呈中度表达,平均表达率为42%,且随着Treg的活化其表达HVEM上调;CD160在初始CD4+CD25-T细胞表面呈低度表达,平均表达率仅7%,但伴随其活化,表达CD160有所上调。采用不同浓度HSV1gD蛋白处理Treg后2.5μg/ml与5μg/ml浓度组抑制CD4+CD25-T细胞增殖作用与空白对照组(276±35)相比明显下降,CPM值分别为(2 014±202)、(6 535±531),差异具有统计学意义(P<0.05),且具有浓度依赖性;RT-PCR分析发现Treg经5μg/ml gD蛋白处理后Foxp3基因表达率下降,仅为空白对照组的48%,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论机体接受免疫刺激后Treg通过上调HVEM表达与CD4+CD25-效应性T细胞(ef-fective Tcell,Teff)表面上调表达的受体CD160交联从而上调Treg Foxp3基因的表达,最终介导了Treg对Teff活化、增殖的抑制作用,HVEM-CD160通路对Treg免疫调节作用具有重要意义。

OX40/OX40L轴介导T细胞免疫参与口腔扁平苔藓病程的研究进展

口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)是一种发病机制尚不明确的、常见的口腔黏膜慢性疾病。T细胞的局部浸润在其病理过程中起关键作用。越来越多的研究支持辅助性T细胞(helper T cell,Th)如Th1/Th2、Th17/调节T细胞(regulatory T cells,Treg)及其相关细胞因子的失衡与OLP的发病进展密切相关。近年来研究显示,共刺激分子OX40(CD134)及其配体OX40L(CD252)在T细胞免疫应答过程中具有重要意义而受到关注,参与Th1/Th2、Th17/Treg的平衡调控,介导促炎和抗炎的失衡,影响多种自身免疫性疾病的发生发展。但目前缺乏OX40/OX40L轴介导OLP发病过程中T细胞亚群失衡作用机制的研究。因此,未来仍需要针对OX40/OX40L轴调控OLP中T细胞亚群平衡机制开展大样本的临床和体内外实验研究。

共刺激分子OX40在急性脑梗死患者外周血调节性T细胞上的表达及其临床意义

目的探讨急性脑梗死患者外周血调节性T细胞(Treg)上共刺激分子OX40的表达情况及其临床意义。方法选择苏州大学附属第一医院神经内科自2019年4月至l2月收治的75例首次发病的急性脑梗死患者纳入病例组,选择同期招募的年龄、性别与病例组相匹配的36例健康志愿者纳入对照组。采用免疫荧光标记和流式细胞技术检测2组受试者肘静脉血中CD4+CD25+CD127^low Treg细胞上OX40的表达,并分析病例组的OX40^+Treg细胞比例与其美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、缺血半暗带体积、核心梗死灶体积、梗死灶体积的相关性,同时比较病例组的OX40^+Treg细胞比例在血管内治疗或静脉溶栓前后的变化。结果与对照组比较,病例组的外周血Treg细胞比例明显降低,OX40^+Treg细胞比例明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。病例组的外周血OX40^+Treg细胞比例与其NIHSS评分呈正相关关系(rs=0.271,P=0.018),与其缺血半暗带体积、核心梗死灶体积、梗死灶体积亦均呈正相关关系(rs=0.435,P=0.000;rs=0.343,P=0.003;rs=0.245,P=0.034)。病例组中血管内治疗患者的术后第7天外周血OX40^+Treg细胞比例较术前明显降低,静脉溶栓患者的术后第3、7天外周血OX40^+Treg细胞比例较术前明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论OX40在急性脑梗死患者外周血Treg细胞上异常表达,并与神经功能缺损、影像学表现及再灌注治疗密切相关。

胶原诱导性关节炎炎症条件下诱导的调节性T细胞与B细胞的相互作用

目的:探讨胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠炎症条件下,诱导的调节性T细胞(i Tregs)与B细胞的相互作用模式。方法:分别从正常DBA1/J和免疫后第35天的关节炎小鼠的脾脏细胞分选出CD19+细胞(N-B和CIA-B细胞),以此细胞作为抗原提呈细胞观察其诱导Tregs生成的差异;经典方法制备i Tregs,将CIA-B细胞与i Tregs共培养,观察其对i Tregs自身的增殖及i Tregs表达CTLA-4的影响;观察i Tregs对CIA-B细胞共刺激分子(CD80,CD86)和MHCⅡ类分子表达的影响,并设立Transwell实验探讨作用机制。结果:CIA-B较N-B诱导更多Tregs的生成;CIA-B促进i Tregs的增殖并上调i Tregs细胞表面CTLA-4的表达,后者的作用是通过细胞直接接触的途径实现;同时,i Tregs促进CIA-B细胞表面共刺激分子和MHCⅡ类分子的表达且该作用也通过细胞直接接触途径而实现。结论:在CIA炎症条件下,i Tregs通过与B细胞的相互作用来发挥其免疫抑制作用,两者的相互作用通过细胞直接接触实现。

CaM、OX40^(+)Treg、Cys C与急性脑梗死早期机械再通术后血流再灌注程度的相关性

目的探讨钙调蛋白(CaM)、调节性T细胞上共刺激分子OX40(OX40^(+)Treg)、胱抑素C(Cys C)与急性脑梗死(ACI)早期机械再通术后血流再灌注程度的相关性。方法选取华北油田管理局总医院126例行早期机械再通术的ACI患者,根据梗死血管是否再通分为非再通组(n=22)和再通组(n=104),比较两组CaM、OX40^(+)Treg、Cys C水平,分析血管再通的相关影响因素,并比较不同CaM、OX40^(+)Treg、Cys C水平者术后改良缺血再灌注分级(mTICI),分析CaM、OX40^(+)Treg、Cys C与mTICI分级的相关性及预测血管再通的价值。结果非再通组CaM、OX40^(+)Treg、Cys C血清水平高于再通组(P<0.05);CaM、OX40^(+)Treg、Cys C高水平者,其术后mTICI分级高于低水平者(P<0.05);CaM、OX40^(+)Treg、Cys C与术后mTICI分级间存在负相关关系;CaM、OX40^(+)Treg、Cys C均为ACI患者早期机械再通术血管再通的影响因素(P<0.05);CaM、OX40^(+)Treg、Cys C预测血管再通的曲线下面积(AUC)分别为0.646、0.770、0.844,联合预测的AUC最大为0.925。结论CaM、OX40^(+)Treg、Cys C与ACI患者早期机械再通术血管再通情况显著相关,早期检测各指标可辅助临床预测血管再通情况。

Nogo-66蛋白对视网膜小胶质细胞OX40L表达的影响

目的研究免疫共刺激分子OX40配体(OX40 ligand,OX40L)在小胶质细胞上的表达,探讨Nogo-66蛋白刺激小鼠视网膜小胶质细胞株N9表达细胞膜黏附分子OX40L的可能性。方法根据不同浓度(250μg·L-1、500μg·L-1、1000μg·L-1、2000μg·L-1)的Nogo-66蛋白细胞培养液将实验组分为1、2、3、4组。应用免疫细胞化学方法,鉴定小胶质细胞在不同浓度的Nogo-66蛋白细胞培养溶液(实验组)中的表达情况,并与无刺激因子的细胞培养液(对照组)中小胶质细胞OX40L表达对比,Image-Pro Plus Version6.0图像分析软件处理,比较激活后小胶质细胞OX40L表达差异。结果Nogo-66蛋白质作为刺激因子处理后的小胶质细胞表现激活状态下的典型形态,细胞突起减少,体积明显增大,相同倍率拍照后图像分析可知,对照组细胞相对平均体积为(93.0020±17.0101)pixel,实验1、2、3、4组相对平均体积分别为(134.2258±23.5828)pixel、(242.7430±72·9439)pixel、(228.1760±37.1582)pixel、(204.7210±43.4950)pixel,与对照组相比,差异均有显著统计学意义(P均<0.001),实验1组与2、3、4组相比差异亦有显著统计学意义(P均<0.01)。对照组OX40L表达的细胞体积比为0.12%,实验1、2、3、4组分别为34.30%、58.91%、60.25%、59.71%,与对照组相比,差异均有显著统计学意义(P均<0·01)。结论Nogo-66蛋白能够刺激小胶质细胞处于激活状态,表达OX40L,从而可能进一步影响中枢神经系统疾病治疗的临床前研究。

可诱导共刺激分子与自身免疫性葡萄膜炎

可诱导共刺激分子（ICOS）是共刺激分子CD28超家族的一员，大量表达于活化后的T细胞表面，与相应配体（ICOSL）结合后产生共刺激信号，促进活化后的T细胞增生、分化以及细胞因子的产生。临床研究和实验研究均表明，ICOS在多种自身免疫性疾病中发挥重要作用，在自身免疫性葡萄膜炎（AIU）和Behcet病的发病和转归过程中，ICOS／ICOSL共刺激通路通过调节T淋巴细胞的效应因子影响病变的严重程度。因此进一步研究ICOS／ICOSL共刺激通路在AIU中的作用机制对于寻找新的AIU治疗途径有重要意义。就ICOS的基本概念、ICOS／ICOSL共刺激通路与效应细胞的关系及其在AIU治疗中的展望进行综述。

PD-1+Tfh介导ICOS和OX40信号通路参与HSP患儿发病的免疫学机制研究

目的研究PD-1+滤泡辅助性T细胞(follicular helper T cells, Tfh细胞)介导协调刺激信号分子(inducible costimulator,ICOS)和OX40信号通路参与过敏性紫癜(Henoch Sch?nlein purpura, HSP)患儿发病的免疫学机制。方法选取我院2018年8月至2019年12月期间收治的95例HSP患儿,根据肾脏受累情况将患儿分为无肾脏累及组(43例)、孤立性血尿组(21例)以及血尿合并蛋白尿组(31例),另选取同时段体检健康儿童为对照组(54例)。采用流式细胞术检测儿童外周血各亚型Tfh水平(PD-1+、ICOS、OX40),比较4组之间的水平差异,并采用Pearson相关性分析外周血各亚型Tfh细胞水平与血清IgA水平以及各亚型细胞之间的相关性。结果对照组血清IgA水平明显低于HSP患儿(无肾脏累及组、孤立性血尿组、血尿合并蛋白尿组,P<0.05)。血尿合并蛋白尿组、无肾脏累及组Tfh比例明显高于对照组,血尿合并蛋白尿组Tfh1比例明显低于其他3组,而Tfh2比例明显高于其他3组(P<0.05)。与对照组相比,血尿合并蛋白尿组Tfh细胞表面PD-1表达水平明显降低,而ICOS、OX40表达水平明显增加(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,患儿PD-1+Tfh水平与血清IgA表达量呈负相关性(r=-0.553, P<0.001),患儿ICOS+Tfh细胞、OX40+Tfh细胞水平与血清IgA表达量呈正相关性(r=0.476、0.479, P<0.001),患儿PD-1+Tfh细胞水平与ICOS+Tfh、OX40+Tfh呈负相关性(r=-0.598、-0.539, P<0.001)。结论 Tfh亚型紊乱与HSP的发生密切关联,其中外周血PD-1+Tfh可能通过介导ICOS、OX40信号通路而调控HSP的发生与发展。

滤泡辅助性T细胞及亚群紊乱参与儿童过敏性紫癜发病机制初探

目的探讨外周血滤泡辅助性T细胞(T follicular helper cells,Tfh细胞)及其亚类失衡在儿童过敏性紫癜(HenochSch?nlein purpura,HSP)及紫癜性肾炎(HSP nephritis,HSPN)发生发展中的作用及可能机制。方法收集确诊的HSP患儿45例,根据肾脏受累情况分为3组:无肾脏受累组(A组)21例,孤立性血尿组(B组)12例,血尿合并蛋白尿组(C组)12例,另收集同期在我院健康体检儿童17例为对照组。采用流式细胞术检测外周血中Tfh(CD3^+CD4^+CXCR5^+)细胞及其亚类Tfh1(CCR6^-CXCR3^+Tfh),Tfh2(CCR6^-CXCR3^-Tfh),Tfh17(CCR6^+CXCR3^-Tfh)比例,同时检测ICOS及OX40在Tfh细胞及其亚类上表达情况。结果与对照组相比,A组和C组Tfh细胞及表达ICOS水平都明显增高(P<0.05);C组Tfh2细胞、(Tfh2^+Tfh17)/Tfh1、Tfh细胞OX40和ICOS表达、Tfh2细胞ICOS表达均上调,而Tfh1细胞水平下调,差异有统计学意义(P<0.05);A组和B组Tfh1细胞、Tfh2细胞、Tfh17细胞及这些亚类细胞上ICOS和OX40表达,均无统计学差异(P>0.05)。HSP各组间比较,C组Tfh细胞比例较A、B组有增高的趋势,但差异无统计学意义,A组和B组间Tfh细胞无差异(P>0.05)。进一步发现外周血Tfh细胞、Tfh2细胞、Tfh细胞上ICOS和OX40表达与血清IgA水平成正相关,而Tfh1细胞与IgA水平成负相关,Tfh17细胞与IgA无相关性。结论 Tfh亚类紊乱(Tfh2增加,Tfh1降低)参与了HSP及HPSN发生。而Tfh可能通过ICOS和OX40信号通路参与HSP高IgA血症,但其具体机制尚待进一步研究。