补阳还五汤对动脉粥样硬化模型小鼠SIRT1/HMGB1/NF-κB通路及炎症反应的影响

目的:观察补阳还五汤对动脉粥样硬化模型载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠沉默信息调节因子相关酶1(SIRT1)/高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路及炎症反应的影响。方法:小鼠适应性饲养2周后,ApoE^(-/-)小鼠给予高脂饲料喂养进行动脉粥样硬化模型制备。8周后分离小鼠主动脉根部,制备石蜡切片,油红O染色证实模型复制成功。将40只ApoE^(-/-)小鼠随机分为模型组、补阳还五汤低剂量组、补阳还五汤中剂量组、补阳还五汤高剂量组,每组10只;另将10只C57BL/6J小鼠继续普通饲料喂养设置为空白组,各组小鼠均干预4周。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清炎性因子[γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-12、IL-1β]表达水平;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测小鼠主动脉SIRT1、HMGB1、NF-κB蛋白表达。结果:补阳还五汤可升高小鼠主动脉斑块中SIRT1蛋白表达,降低HMGB1、NF-κB蛋白表达及小鼠血清IFN-γ、TNF-α、IL-12、IL-1β表达。结论:补阳还五汤可能通过调控SIRT1/HMGB1/NF-κB信号通路,减低炎症反应,发挥抗动脉粥样硬化的作用。

沉默信息调节因子2相关酶1在急性呼吸窘迫综合征/急性肺损伤中的研究进展

急性呼吸窘迫综合征(ARDS)/急性肺损伤(ALI)是以不可控炎症反应导致肺泡屏障损伤为发病机制的临床疾病。肺部严重炎症反应时,肺泡内皮细胞和上皮细胞屏障破坏,引起微血管屏障通透性增加,进而导致肺水肿。因此,炎症介质的过度生成在破坏肺泡-毛细血管屏障和通透性中起着关键作用。沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)可通过去非组蛋白/组蛋白的去乙酰化作用影响细胞代谢、基因转录、细胞凋亡、炎症反应等生物学过程,减轻肺损伤严重程度。本文将近年来有关SIRT1在各种肺损伤模型下作用的研究进展进行综述,以期能够通过SIRT1对ARDS/ALI的治疗提供新思路。

维生素A对黏膜免疫反应的影响及相关信号通路

维生素A及其衍生物在儿童生长发育、生殖、免疫调节等过程中有重要作用,其在多种黏膜上皮中都显示出调控黏膜炎症、维护上皮功能的作用,然而在某些情况下维生素A反而加重炎症反应。探讨维生素A的黏膜免疫调节机制及相关信号通路有助于了解目前这一领域的研究现状,为进一步的研究提供思路,从而在临床上更有效更精确的使用维生素A。

疏肝平喘方通过转化生长因子-β_(1)/Smad信号通路对哮喘小鼠免疫平衡的影响

目的:阐明疏肝平喘方对哮喘小鼠维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)/叉头框蛋白P3(Foxp3)以及辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的干预作用,对转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))/Smad信号通路的影响。方法:建立空白对照组、哮喘模型组、疏肝平喘组及地塞米松组实验动物模型。酶联免疫吸附试验检测肺组织匀浆中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17A(IL-17A)和TGF-β_(1)水平,流式细胞仪检测肺组织中Th17/Treg细胞量,蛋白质印迹法检测肺组织中RORγt、Foxp3的蛋白表达,以及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织TGF-β_(1)、Smad2、Smad3、Smad7的mRNA表达水平。结果:疏肝平喘方能够降低哮喘小鼠肺组织IL-6、TGF-β_(1),与地塞米松比较,差异均有统计学意义(均P<0.05),调节IL-10、IL-17A,与地塞米松组相当(均P>0.05);Th17/Treg细胞量,RORγt、Foxp3的蛋白表达量,与地塞米松相当(均P>0.05)。与哮喘模型组比较,疏肝平喘方组、地塞米松组的TGF-β_(1)、Smad2、Smad3的mRNA表达水平下降,而Smad7的mRNA表达水平升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:疏肝平喘方在改善气道炎症方面,和地塞米松疗效相当,是通过TGF-β_(1)/Smad信号通路,从而调节哮喘小鼠的Th17/Treg免疫平衡。

参苓白术散通过TLR4/NFκB/Nrf2通路和自噬对脂多糖诱导的GES-1细胞炎症反应的影响

目的 探讨参苓白术散对幽门螺旋杆菌脂多糖诱导人胃黏膜上皮细胞(GES-1)炎症反应的影响及作用机制。方法 建立幽门螺旋杆菌脂多糖诱导的GES-1细胞炎症模型。采用Griess法检测一氧化氮(NO)释放水平;CCK8法检测细胞活力;ELISA检测炎性细胞因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6和IL-1β]的水平;荧光探针染色检测细胞活性氧(ROS)和Caspase 3/7含量;荧光探针JC-1观察GES-1细胞线粒体膜电位的变化;免疫荧光技术检测核因子-κB(NF-κB)p65的核转位情况;荧光定量PCR检测Toll样受体4(TLR4)和核因子E2相关因子2(Nrf2)的基因表达水平;透射电镜观察细胞中自噬小体数量;蛋白质免疫印迹法检测TLR4、Nrf2、LC3II和p62蛋白的表达水平。结果 与模型组比较,参苓白术散6.25、12.5μg/mL组可显著降低细胞上清NO含量(P<0.01);参苓白术散6.25、12.5μg/mL组能显著降低IL-6和IL-1β含量,参苓白术散12.5μg/mL组能显著降低TNF-α含量(P<0.05、0.01);参苓白术散6.25、12.5μg/mL组ROS生成显著减少(P<0.05、0.01);参苓白术散12.5μg/mL组细胞线粒体膜电位水平显著提高(P<0.05);参苓白术散可以显著抑制细胞NF-κB p65核位移(P<0.05);参苓白术散12.5μg/mL组Caspase 3/7绿色荧光强度显著降低(P<0.05);参苓白术散12.5μg/mL组细胞TLR4蛋白相对表达量显著降低、Nrf2相对表达量显著升高(P<0.05),参苓白术散各剂量组TLR4 mRNA相对表达量均显著降低(P<0.01),参苓白术散6.25、12.5μg/mL组Nrf2 mRNA相对表达量均显著升高(P<0.05、0.01)。参苓白术散能够提高脂多糖环境下GES-1细胞内自噬小体的数量。与模型组比较,参苓白术散12.5μg/mL组细胞内LC3II表达显著升高,p62表达显著降低(P<0.05)。结论 参苓白术散能改善脂多糖诱导的GES-1细胞炎症反应,其作用机制可能与调节TLR4/NF-κB/Nrf2信号通路和促进细胞自噬有关。

基于网络药理学预测金钱草治疗泌尿系结石的作用机制

【目的】基于网络药理学预测金钱草治疗泌尿系结石的作用机制。【方法】通过中药系统药理学技术平台(TCMSP)检索金钱草化学成分,通过SwissTargetPrediction数据库得到金钱草的预测靶点,通过GeneCards数据库获取泌尿系结石相关靶点,将金钱草的预测靶点与泌尿系结石相关靶点进行映射得到金钱草治疗泌尿系结石的预测靶点。通过Cytoscape 3.6.0软件,生成金钱草治疗泌尿系结石的蛋白质相互作用(PPI)网络。通过DAVID网站京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析,运用systems Dock网站对预测靶标与其对应的成分进行分子对接。【结果】金钱草活性化合物有9种,筛选出金钱草可能与泌尿系结石相关的靶点21个,关键靶点共8个,包括表皮生长因子受体(EGFR)、雌激素受体α(ESRα)、醛糖还原酶(AR)、表皮生长因子受体2(ERBB2)等。通过KEGG通路分析得到126条通路,结合文献检索,筛选出金钱草治疗泌尿系结石的可能通路为8条,主要分两类:①泌尿系炎症及黏膜相关通路:磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路、血趋化因子信号通路、核因子E2相关因子2/Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Nrf2/Keap1)信号通路、p38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)信号通路、酪氨酸激酶/信号转导和转录激活子(JAK/STAT)信号通路等;②尿钙相关通路:核因子κB(NF-κB)信号通路、辣椒素受体5(TRPV5)信号通路。【结论】金钱草治疗泌尿系结石的作用机制可能与调节炎症及黏膜相关通路、尿钙相关通路有关,但对已有结石成分破坏及分解尚无明确结论。

NALPs及其信号调节通路在痛风炎症反应中的作用

NALPs（ NACHT-LRR-PYD-containing proteins ）是一个近年在炎症反应中m现的胞质蛋白家族，作为NOD样受体（ NOD-like receptors, NLRs ）家族中的业族之一，同Toll样受体（Toll-like receptors,TLRs ）一样，是固有免疫系统对病原体的一类重要感受器，广泛参与病原体上的病原相关分子模式（pathogen-asssociated molecular patterns, PAMPs ）的识别，

罗氟司特对急性心肌梗死大鼠心肌损伤的影响

目的 研究罗氟司特对急性心肌梗死(AMI)大鼠的治疗作用及其可能的作用机制。方法 将SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组(AMI)、低剂量实验组(AMI+1 mg·kg^(-1)罗氟司特)、高剂量实验组(AMI+3 mg·kg^(-1)罗氟司特),对照组(AMI+0.9 mg·kg^(-1)倍他乐克),每组10只,连续药物干预10 d后进行AMI造模。造模成功7 d后检测大鼠心功能指标水平,以酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清因子水平,以试剂盒检测心肌组织氧化应激相关指标水平,以原位末端标记法(TUNEL)法检测大鼠心肌组织心肌细胞凋亡情况,以蛋白质印迹法检测心肌组织蛋白表达水平。结果 假手术组、模型组、低剂量实验组、高剂量实验组和对照组大鼠的左心室射血分数(EF)水平分别为(64.44±3.65)%、(36.12±2.50)%、(41.91±3.92)%、(49.90±2.48)%、(53.28±3.22)%,肌酸激脢同工酶(CK-MB)水平分别为(19.15±0.91)、(77.86±5.92)、(61.58±4.78)、(43.62±4.17)、(39.73±4.08)U·L^(-1),丙二醛(MDA)含量分别为(2.07±0.23)、(4.57±0.15)、(3.55±0.32)、(2.88±0.27)、(2.46±0.17)nmol·mL^(-1),TUNEL阳性细胞率分别为(3.96±0.20)%、(16.56±1.82)%、(14.30±0.80)%、(9.73±1.07)%、(7.80±0.56)%,磷酸化腺苷一磷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)蛋白相对表达水平分别为1.10±0.09、0.34±0.04、0.59±0.06、0.87±0.05和0.78±0.09,沉默信息调节因子相关酶1(SIRT1)蛋白相对表达水平分别为0.96±0.13、0.33±0.03、0.48±0.06、0.77±0.07和0.69±0.06;模型组的上述指标与假手术组比较,低、高剂量实验组和对照组的上述指标与模型组比较,低、高剂量实验组的上述指标比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 罗氟司特可能通过激活AMPK/SIRT1通路抑制炎症反应和氧化应激,减轻心肌细胞凋亡改善AMI大鼠心功能。