化浊法对冠心病痰浊证患者补体调节蛋白的影响

目的 观察化浊法治疗冠心病的临床效果,从补体调节蛋白方面探讨其机制。方法 将60例冠心病痰浊证患者随机分为对照组和治疗组,每组30例。对照组给予西药规范化治疗,治疗组在对照组的基础上加用化浊法中药治疗。治疗周期为2周,对比用药前后中医证候积分、西雅图心绞痛量表评分、补体调节蛋白以及肝肾功能、血常规、凝血功能等指标。结果 2组治疗均可降低中医证候积分,且治疗组更明显;2组治疗均可提高西雅图心绞痛量表评分;治疗后2组血浆补体蛋白CD55、CD59比较,治疗组优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 化浊法可缓解冠心病痰浊证患者的临床症状,改善生活质量,其机制可能与升高补体调节蛋白,减少补体过度活化,抑制炎症反应有关。

老年心绞痛患者单核细胞表面补体调节蛋白与冠状动脉狭窄程度的相关性研究

目的:探讨老年心绞痛患者单核细胞表面补体调节蛋白与冠状动脉狭窄程度的相关性。方法:本研究为横断面研究。根据Gensini评分将2021年1月~6月在我院住院并行冠脉造影的老年心绞痛患者120例分为低评分组(Gensini评分≤20分,55例)和高评分组(Gensini评分>20分,65例)。比较两组患者的一般临床资料及单核细胞表面补体调节蛋白的表达。分析Gensini评分和补体调节蛋白及临床各指标的相关性。结果:与低评分组比较,高评分组低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)[(2.26±0.78)mmol/L比(2.63±0.73)mmol/L]水平及糖尿病史比例(21.8%比38.5%)显著升高,而单核细胞表面CD35[9.86(8.33,12.51)比6.44(4.26,8.16)]、CD46[13.28(11.42,14.66)比10.42(9.19,15.38)]、CD55[39.90(32.40,47.48)比22.66(19.18,26.97)]表达显著降低(P<0.05或<0.01)。Spearman相关分析结果显示,高评分组Gensini评分与LDL-C呈显著正相关(r=0.292,P=0.018),与单核细胞表面CD35、CD46、CD55表达呈显著负相关(r=-0.870,P<0.001;r=-0.327,P<0.001;r=-0.200,P=0.028)。多因素Logistic回归分析结果显示LDL-C是老年心绞痛患者高Gensini评分的独立危险因素(OR=2.517,P=0.036),而CD35、CD55为其独立保护因素(OR=0.786、0.670,P<0.05或<0.01)。结论:老年心绞痛合并冠脉严重狭窄患者单核细胞表面CD35、CD46和CD55表达与冠脉狭窄程度呈显著负相关。

补体调节因子与视神经脊髓炎谱系疾病的研究进展

视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSD)是一种获得性、异质性神经眼科交叉性罕见免疫性疾病,特异性高发于视神经和脊髓等中枢神经系统部位,有严重的致残致盲性。虽然补体在NMOSD发病中的重要性已被证实,但膜补体调节因子在NMOSD发病机制中的关键调控作用尚不完全清楚,论述其在NMOSD发病中的生理和病理作用,可能成为解释NMOSD中枢发病的重要原因之一。本文重点回顾近些年来与NMOSD发病相关的补体调节因子CD46、CD55和CD59的研究进展,试图分析、综述补体调节因子在NMOSD发病机制中的作用现状及未来发展前景。

高脂血症患者血清补体C3、C4、备解素和白细胞补体调节蛋白CD35、CD55、CD59的表达

目的:探讨高脂血症患者血清补体和外周血白细胞补体调节蛋白的表达及其在动脉粥样硬化中的意义。方法:选高脂血症患者46例(高脂血症组),年龄、性别、体重指数匹配的正常人20例作为正常对照组,用免疫散射比浊法测血清补体C3、C4、备解素(Pf);用流式细胞术测定外周血中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞CD35、CD55、CD59的表达,观察上述指标在高脂血症组中的变化,分析影响因素。结果:高脂血症组血清C3、C4、Pf水平较正常对照组明显升高(P<0.01);补体C3、C4水平与血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)明显正相关(P<0.01),Pf与TC、LDLC正相关(P<0.01)。CD35阳性淋巴细胞、单核细胞、粒细胞百分率较正常对照组升高(P<0.05),CD35阳性淋巴细胞、粒细胞百分率与TG呈正相关(P<0.05～0.01);CD55阳性淋巴细胞平均荧光强度较正常对照组下降(P<0.05);CD59阳性淋巴细胞、单核细胞百分率较正常对照组下降(P<0.05)。结论:高脂血症患者血清补体C3、C4、Pf升高,白细胞补体调节蛋白表达改变,补体及补体调节蛋白的改变与血脂水平相关,表明脂代谢紊乱可影响补体及补体调节蛋白的表达,提示补体及补体调节蛋白可能参与动脉粥样硬化的病理生理过程。

补体调节蛋白CD46、CD55及CD59在肿瘤免疫治疗中的研究进展

以往对肿瘤逃避补体攻击的免疫机制并不是非常清楚,因而对肿瘤的传统免疫治疗,尤其是体液免疫治疗,往往效果并不理想。随着免疫学的发展,经研究发现不同的肿瘤细胞表面往往高表达补体调节蛋白(CD46/MCP,CD55/DAF,CD59/potectin)中的一类或几类分子,由于补体调节蛋白的高表达,从而抑制机体的补体系统对肿瘤细胞的攻击,使肿瘤逃避机体免疫防御。近年来随着对补体调节蛋白在肿瘤中表达及机制的进一步研究,针对补体调节蛋白的单克隆抗体及细胞因子的免疫治疗开始应用于动物实验和临床实验,取得了一定成功。本文阐述补体调节蛋白在肿瘤免疫治疗的研究中所取得的一些认识和进展。

2型糖尿病患者补体调节蛋白CD55、CD59水平的变化及其意义

选2型糖尿病患者33例,24名健康自愿者作为对照,检测外周血白细胞CD55、CD59的表达,探讨其与糖尿病肾病的关系。2型糖尿病患者CD55、CD59表达下调,糖尿病病程、CD55阳性单核细胞平均荧光强度是尿白蛋白排泄率(UAER)的独立预测因素。补体调节蛋白表达减低可能与糖尿病肾病的发生有关。

新风胶囊对类风湿性关节炎补体调节蛋白红细胞CR1及CD59的影响

目的:探讨新风胶囊对类风湿性关节炎(RA)补体调节蛋白的影响及其作用机制。方法:将40例RA患者按随机数字表分为新风胶囊实验组(20例)和正清风痛宁对照组(20例),并设10名健康者为健康对照组,观察两组RA患者治疗前后补体调节蛋白红细胞CR 1、CD 59以及临床症状、体征关节疼痛度、关节肿胀度、关节压痛度、晨僵时间、握力、步行15 m时间和实验室指标〔血沉(ESR),类风湿因子滴度(RF),C反应蛋白(CRP),补体C 3、C 4,免疫球蛋白IgG、IgM、IgA,α1糖酸蛋白(1αAGP),红细胞计数(RBC)〕的改善情况。结果:RA患者治疗前红细胞CR 1与CD 59表达水平均显著低于健康对照组(P均<0.05);治疗后两组RA患者临床症状、体征及实验室指标均较治疗前有明显改善(P均<0.05),其中实验组关节疼痛度、晨僵时间、双手平均握力、15 m步行时间及ESR、补体C 3、RBC改善程度均较对照组显著(P<0.05或P<0.01)。两组治疗后红细胞CR 1、CD 59均比治疗前显著升高(P均<0.05),治疗后实验组的红细胞CR 1、CD 59均值均显著高于对照组(P均<0.01)。结论:新风胶囊能有效提高体内过低的补体调节蛋白红细胞CR 1、CD 59含量,进而抑制过亢的体液免疫反应,使补体有效清除体内循环免疫复合物,并减少补体对自身细胞的攻击损伤,从而控制病情活动,这也是其治疗RA的机制之一。

六味地黄汤对IgA肾病模型大鼠转化生长因子-β1和补体调节蛋白CR1表达的影响

目的观察六味地黄汤对IgA肾病模型大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)和补体调节蛋白CR1表达的影响,并探讨其作用机制。方法 40只SD大鼠适应性喂养1周,按完全随机方法分为正常组、模型组、雷公藤组、六味地黄汤组。采用复合方法建立IgA肾病模型,成模后各给药组给予相应药物灌胃,连续4周。检测各组大鼠尿常规、尿红细胞计数和24 h尿蛋白,取血检测肌酐、尿素氮、血清总蛋白、血清白蛋白,取肾组织HE、Masson染色观察大鼠肾脏病理结构,免疫组化检测大鼠肾脏组织TGF-β1和CR1的表达。结果与模型组比较,六味地黄汤组模型大鼠蛋白尿、血尿及肾脏纤维化减轻(P<0.05),TGF-β1表达下降、CR1表达上调(P<0.05)。结论六味地黄汤可能通过降低TGF-β1的生成,促进CR1的表达,延缓IgA肾病模型大鼠肾脏纤维化。

人补体调节蛋白DAF、MCP在哺乳动物细胞中的共表达及协同作用研究

利用双启动子构建含人补体调节蛋白DAF和MCP cDNA的双顺反子重组表达载体pcDNA3-DAFMCP-DP,以磷酸钙沉淀法转染NIH3T3细胞,用G418筛选获得NIH3T3 pcDNA3-DAFMCP-DP转化细胞。PCR实验结果显示人补体调节蛋白基因DAF和MCP整合在转化的异源细胞的染色体上。RT-PCR和Western blot印迹实验分别从RNA水平和蛋白质水平证实了人补体调节蛋白分子DAF和MCP在细胞系中皆获得同步表达。检测连续传代30次的NIH3T3 pcDNA3-DAFMCP-DP结果表明人DAF和MCP基因仍稳定整合在细胞基因组中,并未随着传代而丢失,为稳定的转双基因细胞系。补体依赖的细胞毒反应表明,pcDNA3-DAFMCP-DP转染细胞系由于DAF和MCP的共表达获得较DAF或MCP单一表达时更强的保护能力,能更好地抑制人补体依赖的细胞毒作用的发生,保护宿主细胞免受人补体的攻击。以上结果表明,DAF和MCP双基因重组表达载体实现了人补体调节蛋白基因高效转移和高水平共表达,为获得表达多种人补体调节蛋白的理想供体提供了有效策略。而且共表达的DAF和MCP具有协同效应,能更有效地阻止补体激活造成的细胞损伤,在克服超急性排斥反应的基因治疗中具有潜在的临床应用价值。

S100A8-S100A9蛋白复合物通过调节补体因子C3表达介导银屑病

通过iTRAQiTRAQ （isobaric tag for relativeand absolute quantitation）方法对19例寻常性银屑病患者皮损区及非皮损区的表皮蛋白进行分析，发现1217种蛋白可识别，其中214种表皮蛋白在银屑病患者皮损区与非皮损区的表达有显著差异，其中以S100A8一A9上调最为显著，其次为C3。

大黄鱼(Larimichthys crocea)补体调节因子CFH和CFHR2基因的分子特征及表达分析

补体是鱼类免疫系统重要的组分,具有识别和消除外来病原体,激活免疫细胞,调控获得性免疫等功能。在免疫组织中,补体调节因子大约占据了补体成分的二分之一,当受到外界病原刺激时会迅速活化补体成分,并且进一步聚合形成酶复合物发挥一系列免疫效应。CFH和CFHR2是补体替代途径重要的调节因子,对于补体系统正常运转必不可少。为此,本文测定了大黄鱼补体调节因子CFH和CFHR2基因的c DNA全序列,并对基因组织特异性表达和溶藻弧菌刺激后基因m RNA表达量的变化等方面进行了研究。CFH和CFHR2序列全长分别为1332 bp和1170 bp,分别编码443和389个氨基酸,N端信号肽序列分别为24和32个氨基酸。推导的氨基酸序列结构分析表明大黄鱼CFH和CFHR2基因具有RCA蛋白家族的典型特征,即含有多个保守的CCP结构(补体控制蛋白)。实时荧光定量PCR结果显示,CFH和CFHR2在健康大黄鱼的肝、脾、肾、肠、脑、胃、心和肌肉这8种组织中都有表达,其中肝脏的表达量显著高于其它几种组织。溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)侵染了健康的大黄鱼之后,CFH和CFHR2的m RNA表达量均明显上调,并且随着感染时间的变化呈现不同的上升趋势。结果表明补体调节因子m RNA表达量的变化与溶藻弧菌的侵染密切相关,表明了CFH和CFHR2可能在大黄鱼自身免疫机制中发挥重要的作用。

变应性鼻炎大鼠鼻黏膜中补体调节蛋白C_1-INH和CD46的表达

目的:检测补体调节蛋白C1-INH和CD46在变应性鼻炎大鼠鼻黏膜中的表达水平,探讨其参与变应性鼻炎病理过程的可能机制。方法:9只SD大鼠以0.1%卵清蛋白辅以氢氧化铝佐剂进行基础致敏,继之鼻部激发建立大鼠变应性鼻炎模型(AR组),另9只以生理盐水代替0.1%卵清蛋白作为对照组(N组)。取大鼠呼吸区鼻黏膜,采用Western印迹法检测组织中补体调节蛋白C1-INH和CD46的表达含量,进行对比。结果:Western印迹结果显示两组大鼠C1-INH和CD46均阳性表达,而AR组大鼠鼻黏膜中C1-INH表达低于N组(P<0.05),CD46表达则高于N组,差异显著(P<0.01)。结论:补体调节蛋白CD46和C1-INH可能参与了变应性鼻炎的病理过程,其调控作用可能与补体激活的经典途径有关。

补体调节蛋白CD55、CD59调控T淋巴细胞免疫研究进展

补体系统在多种可溶性和膜结合调节因子作用下,参与机体抗感染防御、获得性免疫应答的启动及维持等生物学效应。其中补体调节蛋白以特定方式与不同补体成分相互作用,使补体激活与抑制维持精细的平衡状态,从而既防止对自身组织造成损害,又能有效杀灭外来微生物,目前对膜结合调节蛋白CD55（decay-accelerating factor,DAF）、

补体C3、C4、备解素及补体调节蛋白CD55、CD59与颈动脉内膜中层厚度的关系研究

目的:探讨补体及补体调节蛋白与颈动脉内膜中层厚度(IMT)的关系。方法:选高脂血症患者57例(高脂血症组),正常对照20人(正常对照组),测定补体C3、C4、备解素(Pf)水平、补体凋节蛋白CD55、CD59的表达及颈动脉IMT,分析其关系。结果:与正常对照组比较,高脂血症组补体C3、C4及备解素、颈动脉IMI、明显升高,补体调节蛋白CD55阳性淋巴细胞平均荧光强度减低;IMT与年龄、收缩压、腰臀比值、高敏C反应蛋白正相关,与补体调节蛋白CD55阳性淋巴细胞平均荧光强度负相关,与补体C3、C4、备解素及补体调节蛋白CD59不相关。结论:颈动脉IMT增厚与补体调节蛋白CD55表达降低相关,而与补体C3、C4、备解素、补体调节蛋白CD59无直接关系。

人补体调节蛋白MCP、CD59共表达体系的构建及其功能研究

利用双启动子构建含人补体调节蛋白MCP和CD59 cDNA的双顺反子重组表达载体pcDNA3-MCPCD59-DP,以磷酸钙沉淀法转染NIH3T3细胞,用G418筛选获得NIH3T3pcDNA3-MCPCD59-DP转化细胞。PCR实验结果显示人MCP和CD59整合在转化的NIH3T3细胞的染色体上,RT-PCR和Western blot实验分别从RNA水平和蛋白质水平证实了人MCP和CD59在转化细胞中的共表达。检测连续传代30次的NIH3T3pcDNA3-MCPCD59-DP结果表明人MCP和CD59基因仍稳定整合在细胞基因组中,并未随着传代而丢失,为稳定的转双基因细胞系。补体溶破实验表明,pcDNA3-MCPCD59-DP转染细胞由于人MCP和CD59的共表达获得了较MCP或CD59单一表达时更好的保护功效,能有效地保护NIH3T3细胞免受人补体的攻击,从而抑制补体依赖的细胞毒反应的发生。以上结果表明所构建的双基因重组表达载体实现了人补体调节蛋白基因高效转移和高水平共表达,在克服超急性排斥反应的基因治疗中有潜在的应用价值。

血液透析对转化生长因子β1及补体调节蛋白CD59基因表达的影响

目的 研究不同透析膜对维持性血液透析 (MHD)患者外周血转化生长因子 β1及补体调节蛋白CD5 9活性表达的影响。方法 通过流式细胞术和酶联免疫吸附法测定长期采用铜仿膜 (CU)与聚砜膜 (PSU)透析患者外周血TGF β1水平及CD5 9活性表达。结果 MHD患者血浆TGF β1水平明显增加 (P <0 .0 5 ) ,其中CU组为 (81.7± 8.7)ng mL ;PSU组为 (6 4 .3±8.3)ng mL ,与正常对照组 (49.3± 6 .1)ng mL相比均有显著差异 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ;而PSU组与CU组相比 ,外周血TGF β1水平明显下降 (P <0 .0 5 )。CD5 9在正常人外周血单个核细胞中无表达 ,而在尿毒症未透析组及血透组均有表达 ,其中未透析组表达较低 ,而血透组表达较高 ,CU膜血透组较PSU血透组表达要高 (P <0 .0 5 )。经相关分析结果显示 :CU组与PSU组内TGF β1水平与CD5 9表达均呈现良好的相关性 (r=0 .6 4 0 9与 0 .5 83,P <0 .0 5 )。 结论 血液透析通过血液 透析膜间相互反应可活化补体 ,诱导外周血单个核细胞 (PBMC)合成TGF β1增多 ,而增高的TGF β1水平可上调CD5 9基因表达 ,抑制补体异常活化造成的细胞破坏 ,对机体具有代偿性保护意义。然而不同透析膜如CU和PSU对MHD患者TGF β1与CD5 9的影响有所不同 。

老年高脂血症患者补体调节蛋白CD55、CD59与踝臂指数的关系研究

目的探讨老年高脂血症患者补体调节蛋白CD55、CD59与踝臂指数(ABI)的关系。方法选择老年高脂血症患者243例,正常对照者60例,测定补体调节蛋白CD55、CD59的表达及ABI,分析其关系。结果与正常对照组比较,高脂血症组补体调节蛋白CD55阳性淋巴细胞平均荧光强度及百分率明显降低(P<0.05);CD55阳性淋巴细胞平均荧光强度与腰臀比、腰围、体质量指数呈负相关(P<0.05);高脂血症组ABI较正常对照组明显降低(P<0.05);ABI与年龄、高敏C反应蛋白、总胆固醇、收缩压、体质量指数呈负相关(P<0.05),与CD55阳性淋巴细胞平均荧光强度呈正相关(P<0.05),与补体调节蛋白CD59不相关。结论老年高脂血症患者ABI减低,ABI减低与补体调节蛋白CD55表达降低相关,与补体调节蛋白CD59无关。

红细胞老化与补体调节蛋白数量变化

目的通过检测不同老化程度红细胞表面CD55、CD35和CD59数量,来探索老化红细胞清除机制中补体调节蛋白所发挥的作用。方法利用流式细胞术,检测30份标本其毛细管分离的年轻、年老红细胞表面CD35数量,和21份样本年轻、年老红细胞表面CD55和CD59数量。另外检测了其中随机选取的3份标本的4℃保存红细胞和37℃保存红细胞表面CD35、CD55和CD59数量。通过流式细胞术检测了15份标本自身IgG抗体的敏感性。结果与毛细管分离的年轻红细胞相比,年老红细胞CD35的平均荧光强度(MFI)下降了约35%(P<10-22)。年轻、年老红细胞表面CD55和CD59数量也呈现显著性下降(CD55:下降约44.17%;CD59:下降约36.18%,P<10-12)。体外保存的红细胞结果有所不同。对于CD35,4℃和37℃保存的红细胞表面数量变化不大无显著性统计学意义(P>0.05)。对于CD55和CD59,37℃保存的红细胞表面数量显著降低(P<0.01),而4℃保存的红细胞数量无显著性差异(P>0.05)。另外,毛细管分离得到的年老红细胞结合的自身抗体IgG显著高于年轻红细胞,荧光强度是年轻红细胞的1.8倍(P<0.01)。结论年轻、年老红细胞自身IgG抗体敏感性不同,说明毛细管离心方法可以一定程度反映人体生理条件下红细胞的老化状态。随着红细胞在血液循环中的老化,3种补体调节蛋白的显著下降,可能会使更多的C3b在红细胞表面沉积,从而中和调理、增强吞噬。此外,体外红细胞的老化与生理条件下的老化可能存在不同机制。

补体调节蛋白及其在肾脏疾病中的应用

补体调节蛋白分为可溶性和膜结合蛋白两大类 ,它们在各种异常补体激活导致的肾脏损害中起重要作用。分子生物学技术的发展 ,使通过基因操作 ,有目的地改变补体调节蛋白的结构与功能成为可能 ,并在肾脏疾病 ,特别是肾小球疾病、肾移植排异反应等方面展示出良好的前景。