一种慢性阻塞性肺疾病合并气管支气管软化症模型制备方法及调补肺肾方干预效果评价

目的建立一种慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并气管支气管软化症模型并评价调补肺肾方保护气管软骨细胞退变的机制。方法实验分为空白组、模型组、模型+调补肺肾方组。采用流式细胞分析方法确定中药调补肺肾方和香烟烟雾提取物(CSE)的最适浓度,采用最适浓度CSE处理气管软骨细胞制作COPD细胞模型,然后加入白细胞介素-1β(IL-1β)建立软骨细胞退变模型。造模成功后,模型+调补肺肾方组中加入调补肺肾方干预48 h,空白组、模型组不予特殊处理。甲苯胺蓝染色和免疫组化染色观察各组软骨细胞退变情况,Western blot法检测各组软骨细胞中p-p38、caveolin-1表达情况,RT-PCR法检测各组软骨细胞中基质金属蛋白酶3(MMP-3)、caveolin-1 mRNA表达情况。结果调补肺肾方最适干预浓度为1%,CSE最适建模浓度为2.5%。模型组甲苯胺蓝染色显示软骨细胞染色明显变浅,细胞狭长,多为单层生长,胞内可见较多空泡形成,核仁变形,细胞形态不规则,细胞明显退变;免疫组化法显示Ⅱ型胶原表达明显减弱,基本为阴性。模型+调补肺肾方组甲苯胺蓝染色显示软骨细胞呈浅蓝色,核仁较清晰,胞内空泡较少,细胞形态相对规则,退变明显减轻;免疫组化法显示Ⅱ型胶原表达减弱,在较多软骨细胞质及胞外可见。模型组软骨细胞中p-p38、caveolin-1表达水平和MMP-3、caveolin-1 mRNA表达水平均明显高于空白组(P均<0.05),模型+调补肺肾方组均明显低于模型组(P均<0.05)。结论采用CSE联合IL-1β处理气管软骨细胞能成功制备COPD合并气管支气管软化症模型,调补肺肾方能降低软骨细胞中p-p38、caveolin-1、MMP-3的表达,从而抑制气管软骨细胞退变。

调补肺肾方配合针灸治疗睡眠呼吸暂停综合征21例

目的:观察补肾壮骨、活血止痛类中药配合针灸治疗睡眠呼吸暂停综合征的临床疗效。方法:采用调补肺肾方(桑寄生、杜仲、桑椹子、夜交藤、山萸肉、党参、菟丝子、补骨脂、远志、南黄芪、炙麻黄、细辛等)配合耳穴贴压法治疗本病21例。结果:治疗后嗜睡疲倦、头痛、夜尿次数及总积分下降明显,具有显著性差异(P<0.05),最低血氧饱和度明显升高,具有显著性差异(P<0.05)。结论:本方法对本病有缓解症状,可改善夜间睡眠最低血氧饱和度,提高睡眠质量的作用。

调补肺肾方对慢性阻塞性肺疾病合并气管支气管软化症患者肺功能和生活质量的影响

目的:探讨调补肺肾方对慢性阻塞性肺疾病合并气管支气管患者肺功能和生活质量的影响。方法:分析我科从2016年3月～2017年12月诊治的60例慢阻肺合并气管支气管软化症患者临床资料。根据入院先后及是否采用中医治疗分为对照组和观察组,2组各30例。对照组采用单纯西医对症治疗组,包括:轻度软化症患者常规给予沙美特罗替卡松(50/250 ug)2吸bid,或布地奈德福莫特罗(160/4.5 ug)2吸bid,或联合噻托溴铵(18 ug)1吸qd;中度患者在常规治疗基础上给予无创呼吸机辅助通气(模式BiPAP或CPAP),重度患者酌情给予气道支架植入,肺部感染患者给予抗感染治疗。观察组在对照组基础上加用中医调补肺肾方水煎剂,1剂/d, 3次/d。统计分析2组患者治疗前后肺功能、C反应蛋白(CRP, C-reactive Protein)、降钙素原(PCT, Procalcitonin)、改良英国医学研究学会呼吸困难指数(mMRC, Modified British Medical Research Council)、慢阻肺评估测试(CAT, Chronic Obstructive Pulmonary Disease Assessment Test)变化。结果:研究显示,与基线值比较,对照组与观察组都能改善患者肺功能FEV1值,降低CRP及PCT,改善呼吸困难指数及CAT评分,差异有统计学意义;但在改善FEV1/FVC、RV/TLC、DLCO、PO_2及PCO_2方面无统计学差异。组间比较显示,观察组较对照组能更好改善患者PO_2、mMRC及CAT评分,能进一步改善患者生活质量,差异有统计学意义,但2组在改善肺功能FEV1、FEV1/FVC、RV/TLC、DLCO及PCO2上无统计学意义。结论:调补肺肾方治疗慢阻肺合并气管支气管软化症疗效肯定,值得进一步研究。

调补肺肾方治疗虚喘的临床研究

调补肺肾方是针对虚喘患者肺肾两虚的病机特点而创制的。为了探讨该方的作用机理，本文重点从自由基氧化损伤、免疫功能状态方面进行了研究，现报告如下。1 临床资料1．1 病例选择标准1．1.1 慢性阻塞性肺病患者，包括：慢性支气管炎、阻塞性肺气肿。

调补肺肾方对慢性阻塞性肺疾病患者肺功能影响临床研究

目的:探讨调补肺肾方加减对慢性阻塞性肺疾病患者肺功能的影响,以期提高临床效果。方法:选取2011年12月—2013年11月104例稳定期慢性阻塞性肺疾病患者为研究对象,随机分成对照组、观察组各52例,对照组常规西医治疗,观察组加用调补肺肾方治疗,观察治疗前后肺功能、动脉血气、中医证候积分、MMRC量表、CAT量表相关指标变化。结果:两组患者治疗后FEV1、FVC、FEV1/FVC、Pa O_2较治疗前明显升高,Pa CO_2较治疗前明显下降,治疗前后比较差异显著(P<0.05),观察组治疗后FEV1、FVC、FEV1/FVC、Pa O_2、Pa CO_2改善水平较对照组治疗后更加显著(P<0.05)。两组治疗后中医证候积分、MMRC量表、CAT量表较治疗前明显下降,治疗前后比较差异显著(P<0.05),观察组下降水平优于对照组(P<0.05)。对照组临床控制率28.85%、总有效率80.77%,观察组临床控制率42.31%、总有效率90.38%,观察组在临床控制率和总有效率上明显高于对照组,两组比较差异显著(P<0.05)。结论:调补肺肾方能改善慢性阻塞性肺疾病患者肺功能,提高生活质量。

益肺灸及其联合调补肺肾三方对COPD稳定期大鼠气道MUC5AC和MUC5B的影响

目的探讨益肺灸及其联合调补肺肾三方对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)稳定期大鼠气道黏蛋白5AC(mucin 5AC,MUC5AC)和黏蛋白5B(mucin 5B,MUC5B)水平的影响,阐明益肺灸作用机制和灸药联合是否具备治疗优势。方法采用香烟烟雾暴露联合肺炎克雷伯杆菌感染法建立COPD稳定期大鼠模型。第9~20周,空白组和模型(COPD)组给予生理盐水(每只2 mL/d)、氨茶碱组给予氨茶碱(27 mg/(kg·d))、补肺健脾组和益肺灸+补肺健脾组给予补肺健脾方(12.42 g/(kg·d))、补肺益肾组和益肺灸+补肺益肾组给予补肺益肾方(11.61 g/(kg·d))、益气滋肾组和益肺灸+益气滋肾组给予益气滋肾方(12.42 g/(kg·d))灌胃,益肺灸组及灸药联合组每周益肺灸灸2次,每次10~15 min。检测大鼠肺功能、肺组织病理、以及支气管肺泡灌洗液(BALF)和气道中MUC5AC、MUC5B蛋白表达。结果COPD组大鼠较空白组Penh水平显著升高(P=0.007),支气管管壁增厚,管腔狭窄,小气道和BALF中MUC5AC蛋白表达均显著升高(P<0.001,P=0.005),MUC5B有升高趋势(P>0.05)。各治疗干预均显著降低COPD大鼠Penh以及BALF和气道MUC5AC水平(P<0.05),益肺灸、调补肺肾三方和益肺灸+益气滋肾方有降低COPD大鼠MUC5B的趋势(P>0.05)。灸药联合在降低Penh、MUC5AC或MUC5B气道表达、分泌方面有不同程度上的优于灸、药单独应用的趋势。结论益肺灸、调补肺肾三方及其联合均可改善COPD大鼠气道通气功能和黏蛋白高表达、分泌,其中,灸药联合可能是更有效策略。

调补肺肾三方对香烟烟雾提取物和脂多糖刺激人中性粒细胞释放活性氧及弹性蛋白酶的影响

目的分析调补肺肾（补肺益肾、补肺健脾、益气滋肾）三方对香烟烟雾提取物（CSE）和脂多糖（LSP）刺激人中性粒细胞释放活性氧（ROS）及弹性蛋白酶（NE）的影响。方法 2014年9月—2015年12月,将常规饲养1周的普通级日本大耳白兔96只按照随机数字表法分为正常组、补肺益肾组、补肺健脾组、益气滋肾组,24只/组。补肺益肾组、补肺健脾组、益气滋肾组大耳白兔分别采用补肺益肾方剂、补肺健脾方剂、益气滋肾方剂灌胃,正常组采用等量的0.9%氯化钠溶液灌胃,4组均于第7次灌胃后取腹主动脉血,分离血清,-70℃保存备用。取来自河南中医药大学健康成年男性（年龄20~25岁）志愿者外周血,分离人中性粒细胞。CSE刺激下,将人中性粒细胞分为正常对照组（加20%的正常组兔血清）,CSE模型组（加20%的正常组兔血清＋10%CSE）,补肺益肾血清组、补肺健脾血清组、益气滋肾血清组（分别添加20%相应的含药兔血清＋10%CSE）。LPS刺激下,将人中性粒细胞分为正常对照组（加20%的正常组兔血清）,LPS模型组（加20%的正常组兔血清＋2μg/ml LPS）,补肺益肾血清组、补肺健脾血清组、益气滋肾血清组（分别添加20%相应的含药兔血清＋2μg/ml LPS）。分别采用流式细胞仪和酶联免疫吸附实验（ELISA）法检测各组ROS活性、NE水平。结果与正常对照组比较,CSE模型组、LPS模型组ROS活性增强,NE水平升高（P〈0.05）。与CSE模型组比较,补肺益肾血清组ROS活性减弱（P〈0.05）,补肺益肾血清组、补肺健脾血清组、益气滋肾血清组NE水平均降低（P〈0.05）。与LPS模型组比较,补肺益肾血清组、益气滋肾血清组ROS活性减弱（P〈0.05）;补肺健脾血清组、益气滋肾组血清组NE水平降低（P〈0.05）。结论调补肺肾三方含药血清对CSE、LPS刺激下人中性粒细胞释放ROS和NE水平均有影响;CSE刺激下,补肺益肾方含药血清降低ROS活性及NE水平的效果最好;LPS刺激下,益气滋肾方含药血清降低ROS活性氧及NE水平的效果最好。