基于TLR4/NF-κB通路调补肺肾法干预细胞自噬对COPD肺血管重塑的影响和机制

目的基于Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)通路研究调补肺肾法干预细胞自噬对慢性阻塞性肺疾病(COPD)肺血管重塑的影响和机制。方法取SD大鼠采用香烟烟雾暴露结合反复细菌感染的方案建立COPD模型,随机分为3组,模型组、补肺益肾方(3.7 g/kg)组、补肺益肾方(3.7 g/kg)+脂多糖(LPS)(TLR4激活剂,15 mg/kg)组,每组12只,另取12只大鼠正常呼吸并气管滴注等剂量生理盐水作为对照组,经补肺益肾方、LPS对大鼠分组干预后,检测各组大鼠肺功能指标:潮气量(TV)、呼气峰流速(PEF)、第0.3秒用力呼气容积(FEV0.3)/用力肺活量(FVC)。以HE染色检测各组大鼠肺组织病理形态和肺血管重塑,比较其管壁厚度(WT)占血管直径(VD)百分比WT/VD(%)、管腔面积(LA)占血管总面积(TA)百分比LA/TA(%)。以免疫荧光染色检测各组大鼠肺组织内肺血管内皮标记物CD34表达。以酶标仪检测各组大鼠肺泡灌洗液(BALF)及血清促炎因子:肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-17水平。以免疫印迹法检测各组大鼠肺组织自噬及TLR4/NF-κB信号通路相关蛋白表达。结果与对照组相比,模型组大鼠肺组织呈现明显病理损伤及肺血管重塑症状,TV、PEF、FEV0.3/FVC、LA/TA、肺组织Beclin-1蛋白表达与LC3Ⅱ/LC3Ⅰ显著降低(P<0.05),WT/VD、CD34相对阳性表达、BALF及血清促炎因子TNF-α与IL-17水平、肺组织TLR4蛋白表达与p-NF-κB p65/NF-κB p65显著升高(P<0.05)。与模型组相比,补肺益肾方组大鼠肺组织损伤及肺血管重塑症状减轻,TV、PEF、FEV0.3/FVC、LA/TA、肺组织Beclin-1蛋白表达与LC3Ⅱ/LC3Ⅰ升高(P<0.05),WT/VD、CD34相对阳性表达、BALF及血清促炎因子TNF-α与IL-17水平、肺组织TLR4蛋白表达与p-NF-κB p65/NF-κB p65降低(P<0.05)。与补肺益肾方组相比,补肺益肾方+LPS组大鼠肺组织损伤及肺血管重塑症状加重,TV、PEF、FEV0.3/FVC、LA/TA、肺组织Beclin-1蛋白表达与LC3Ⅱ/LC3Ⅰ降低(P<0.05),WT/VD、CD34相对阳性表达、BALF及血清促炎因子TNF-α与IL-17水平、肺组织TLR4蛋白表达与p-NF-κB p65/NF-κB p65升高(P<0.05)。结论补肺益肾方可通过抑制TLR4/NF-κB信号而抑制COPD体内炎症,并增强自噬,进而减轻大鼠肺组织病理损伤和肺血管重塑,改善其肺功能。

晁恩祥调补肺肾法治疗肺痿临床经验

晁恩祥教授在慢性肺系疾病的临床实践中,认为肺肾之间的病理生理基础在慢性肺系病发展过程中起着关键的作用,并提出了调补肺肾学术主张。指出肺痿乃"肺之质萎,肺之功萎",使用调补肺肾法治疗补中寓调,标本兼顾,可收到良好疗效,例举医案体现晁教授调补肺肾之临床妙用。

益气活血调补肺肾法对肺间质纤维化患者肺功能及血清IL-13、TGF-β含量的影响

目的:观察益气活血调补肺肾法对肺间质纤维化患者肺功能及血清IL-13和TGF-β含量的影响。方法:将78例肺间质纤维化患者随机分为治疗组和对照组各39例。对照组给予常规临床治疗,治疗组在此基础上,采用益气活血调补肺肾法处方治疗,共治疗3个月。分析比较两组中医症状积分、肺功能指标、血清炎性因子的改善状况,并评估疗效。结果:两组治疗后中医症状积分、IL-13和TGF-β含量均明显降低(P<0.05),且治疗组的改善情况均显著优于对照组(P<0.05);两组治疗后VC、FEV/FV和DLCO均明显升高(P<0.05),且治疗组的改善情况均显著优于对照组(P<0.05);治疗组治疗后总有效率显著高于对照组(P<0.05)。结论:益气活血调补肺肾法治疗肺间质纤维化,疗效确切,能够有效改善患者的肺功能,是治疗肺间质纤维化的有效方法之一。

晁恩祥调补肺肾法治疗稳定期慢性阻塞性肺疾病的思路与经验

晁恩祥指出:中医药治疗稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD),有独特的专长和潜在优势,应重视在其稳定期扶正固本,以减少急性发作,延缓疾病进展。他认为,稳定期COPD属于中医“虚喘”范畴,其主要病机为肺肾两虚,治疗当以调补肺肾、纳气平喘为大法。应用调补肺肾具有明显优势,且安全性好。为今后进一步控制COPD的进展,提高患者生活质量、延长生存时间提供了可行性思路和方法。

调补肺肾法治疗血管性痴呆的研究进展

从血管性痴呆的病因病机、辨证治疗方面,对从肺肾立论治疗血管性痴呆的相关文献进行了浅析,发现肾精亏虚是血管性痴呆的主要病机,肺虚宣降失司是血管性痴呆的重要病因,调补肺肾法这一治则不容忽视。

调补肺肾法论治慢阻肺稳定期初探

慢阻肺属于中医学"肺胀"等病的范畴,病位主要在肺,日久则延及他脏,以肾脏为著;其稳定期的病理特点以本虚为著,本虚即脏腑亏虚,尤以肺肾两脏为主;且多兼夹痰、瘀。故调补肺肾当为慢阻肺稳定期治疗之大法,酌加化痰祛瘀之品。单用西医治疗慢阻肺稳定期患者并不足以控制病情进展,且具有一定副作用。中医药防治慢阻肺具有一定的优势,而调补肺肾法在诸多研究中已被证实可巩固稳定期患者病情,减少急性加重次数,延缓病程进展,在临床上值得被广泛应用。

调补肺肾法对慢阻肺稳定期综合预后指标影响的临床研究

目的:探讨调补肺肾法治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期的临床疗效,评价治疗COPD稳定期患者的预后作用。方法:选取2014年1月至2015年6月在我院就诊的COPD稳定期患者84例,采用随机方法将患者分为观察组(42例)和对照组(42例),观察组给予常规治疗和口服调补肺肾方药,而对照组仅给予常规治疗,观察2组临床疗效及综合预后情况。结果:2组治疗后中医症候总积分较治疗前均有所下降,而观察组较对照组下降幅度明显(P<0.05);观察组治疗总有效率为92.86%,明显高于对照组的64.29%,治疗组疗效优于对照组(P<0.05);2组治疗后肺功能均有所改善,其中观察组FEV1和FEV1/预计值(%)、FVC和FVC/预计值(%)等指标改善情况优于对照组(P<0.05);观察组治疗后呼吸困难情况、6 min行走距离和BODE评价总分均较治疗前有改善(P<0.05),而对照组治疗后6 min行走距离和BODE评价总分亦较治疗前有所改善(P<0.05),但呼吸困难情况改善不明显(P>0.05),观察组治疗后呼吸困难情况、6 min行走距离和BODE评价总分均较对照组治疗后明显改善(P<0.05)。观察组治疗后各免疫指标、生活质量指标和急性发作次数较对照组均有所改善(P<0.05)。结论:调补肺肾法能有效治疗COPD稳定期患者,改善患者预后情况。

调补肺肾法对慢阻肺稳定期综合预后指标影响的临床研究

目的:探讨调补肺肾法治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期的临床疗效,评价治疗COPD稳定期患者的预后作用。方法:选取2014年1月至2015年6月在我院就诊的COPD稳定期患者84例,采用随机方法将患者分为治疗组(42例)和对照组(42例),治疗组给予常规治疗和口服调补肺肾方药,而对照组仅给予常规治疗,观察2组临床疗效及综合预后情况。结果:2组治疗后中医症候总积分较治疗前均有所下降,而治疗组较对照组下降幅度明显(P<0.05);治疗组治疗总有效率为92.86%,明显高于对照组的64.29%,治疗组疗效优于对照组(P<0.05);2组治疗后肺功能均有所改善,其中治疗组FEV1和FEV1/预计值(%)、FVC和FVC/预计值(%)等指标改善情况优于对照组(P<0.05);治疗组治疗后呼吸困难情况、6 min行走距离和BODE评价总分均较治疗前有改善(P<0.05),而对照组治疗后6 min行走距离和BODE评价总分亦较治疗前有所改善(P<0.05),但呼吸困难情况改善不明显(P>0.05),治疗组治疗后呼吸困难情况、6 min行走距离和BODE评价总分均较对照组治疗后明显改善(P<0.05)。治疗组治疗后各免疫指标、生活质量指标和急性发作次数较对照组均有所改善(P<0.05)。结论:调补肺肾法能有效治疗COPD稳定期患者,改善患者预后情况。

调补肺肾法在慢性肺疾病稳定期患者中医症候积分、肺功能情况的施行意义

目的 将调补肺肾法用于慢性肺疾病稳定期患者的临床治疗中，探究其对慢性肺疾病稳定期患者的中医症候积分以及肺功能的改善作用。方法将2014年1月至2017年1月在本院就诊并接受治疗的60例慢性肺疾病稳定期患者选取为此次研究的对象，分为对照组和实验组，每组各有30例患者，对照组患者采用常规西医予以治疗，实验组患者采用常规西医加调补肺肾法予以治疗，对比分析实验组和对照组患者的效果。结果实验组患者治疗之后的中医症候总积分与对照组患者相对比，差异有统计学意义(p<0.05)，实验组患者的治疗总有效率93.33%，与参照组患者66.67%相对比，差异有统计学意义(p<0.05)。实验组患者治疗之后的FEV1、FEV1/预计值、FVC等肺功能指标与对照组患者相对比，差异有统计学意义(p<0.05)。结论对慢性肺疾病稳定期患者在常规西医治疗的同时增加调补肺肾法治疗可获得良好疗效，有助于改善患者的中医症候积分以及肺功能。

浅析调补肺肾法联合沙美特罗替卡松对慢阻肺急性加重期患者免疫功能的影响

目前,临床治疗慢阻肺的方式效果不佳,所以选取一种高效且可以有效提高患者免疫力的治疗方式是临床的重点,所以本院对调补肺肾法联合沙美特罗替卡的治疗效果和应用价值展开深入研究。方法:时间段为2020年1月-2020年5月、研究对象为本院收治的慢阻肺急性加重期患者88例、随机分组方式为抽签法。对照组:沙美特罗替卡松;观察组调补肺肾法+沙美特罗替卡松。评价指标:治疗效果、肺功能相关指标、治疗前后血清TNF-α与IL-6含量变化。结果:2组治疗后效果均优于治疗前,但观察组优于对照组(P<0.05);治疗后2组FEV、FEV/FVC及FEC水平均优于治疗前,但观察组优于对照组(P<0.05);治疗后,2组患者TNF-α与IL-6水平均低于治疗前,且观察组优于对照组(P<0.05);结论:慢阻肺多发于老年患者,临床治疗难度较大,常规治疗方式效果不佳,本次研究中证实调补肺肾法联合沙美特罗替卡松治疗效果较好,此种方法可以增强患者免疫力、促进肺功能恢复正常,应用价值较高。

调补肺肾法联合沙美特罗替卡松对慢阻肺急性加重期患者免疫功能的影响

探讨调补肺肾法、沙美特罗替卡松联合治疗对慢阻肺急性加重期患者免疫功能的影响。方法:抽取104例慢阻肺急性加重期患者为研究对象,分为两组。对照组以沙美特罗替卡松治疗,联合组以沙美特罗替卡松+调补肺肾法治疗。结果:相较于联合组,对照组治疗后FEV1、MVV、FVC明显更低;PaCO2、血清TNF-α、IL-6指标明显更高(P<0.05)。结论:慢阻肺急性加重期患者,予以调补肺肾法、沙美特罗替卡松联合治疗,可有效改善病人的免疫功能、肺功能。

调补肺肾三法对慢性阻塞性肺疾病大鼠肾损伤的影响

目的:探讨调补肺肾三法对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)大鼠肾损伤的影响及机制。方法:将SPF级SD大鼠随机分为对照(control)组、COPD组、吡咯烷二硫代甲酸铵(pyrrolidinedithiocarbamate ammonium,PDTC)组、补肺健脾方(Bufei-Jianpi formula,BJF)组、补肺益肾方(Bufei-Yishen formula,BYF)组、益气滋肾方(Yiqi-Zishen formula,YZF)组、BJF联合PDTC(BJF+PDTC)组、BYF联合PDTC组(BYF+PDTC)和YZF联合PDTC(YZF+PDTC)组。采用香烟烟雾暴露联合细菌感染的方法建立COPD稳定期大鼠模型,筛选COPD肾损伤大鼠进行后续治疗。第16周末取材观察大鼠肺、肾功能;HE染色观察肺、肾病理形态学;检测24 h尿量和尿生化指标;免疫组化检测水通道蛋白(aquaporins,AQPs)水平;取支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)进行细胞分类计数;测定血清炎症因子水平及肾组织IKK和NF-κB的mRNA和蛋白表达变化。结果:与control组比较,COPD大鼠肺功能指标用力肺活量(forced expiratory vital capacity,FVC)、第0.1秒用力呼气容积(forced expiratory volume in 0.1 second,FEV_(0.1))及FEV_(0.1)/FVC显著降低(P<0.05),肺组织病理表现为肺泡壁断裂、融合,气道炎症细胞浸润;肾功能指标血清肌酐(creatinine,Cr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)及血清胱抑素C(cystatin C,Cys-C)水平显著升高(P<0.01);肾组织病理表现为肾小管上皮细胞肿胀、排列紊乱;24 h尿量降低(P<0.01),尿生化指标24 h尿总蛋白、尿肾损伤分子1、尿Cys-C和尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶水平显著升高(P<0.01),肾小管AQP1~4蛋白水平显著升高(P<0.01);BALF中性粒细胞和淋巴细胞百分比增高(P<0.01),单核细胞百分比降低(P<0.01);血清炎症因子TNF-α、IL-6、IL-13、IL-1β和TGF-β1水平显著升高(P<0.01),肾组织IKK和NF-κB的mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与COPD组比较,各治疗组干预后大鼠上述症状及指标均有不同程度的改善,其中BJF、BYF和YZF组表现出与PDTC相似的作用效果,BJF+PDTC、BYF+PDTC和YZF+PDTC组改善效果优于对应的中药组。结论:调补肺肾三法能缓解COPD大鼠气道和全身炎症反应,改善肾功能,减轻肾组织损伤,其机制可能与抑制NF-κB信号通路有关。

调补肺肾三法通过抑制ERK1/2信号通路改善COPD大鼠气道黏液高分泌

目的 探究调补肺肾三法对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)稳定期大鼠气道黏液高分泌的影响及作用机制。方法 90只大鼠随机分为对照(Control)组、模型(COPD)组、补肺健脾(Bu-Fei Jian-Pi Formula, BJF)组、补肺益肾(Bu-Fei Yi-Shen Formula, BYF)组、益气滋肾(Yi-Qi Zi-Shen Formula, YZF)组、ERK1/2抑制剂(PD98059)组、补肺健脾联合抑制剂(BJF+PD98059)组、补肺益肾联合抑制剂(BYF+PD98059)组和益气滋肾联合抑制剂(YZF+PD98059)组。第1~8周采用香烟烟雾暴露联合细菌反复感染的方法建立COPD大鼠模型,9~16周Control组和COPD组给予生理盐水每只2 mL,BJF组、BYF组和YZF组分别给予对应的调补肺肾三方灌胃,第16周PD98059组、BJF+PD98059组、BYF+PD98059组和YZF+PD98059组给予PD98059腹腔注射7 d。16周结束后取材,检测大鼠肺功能、肺组织形态、肺组织水含量、BALF中炎性细胞计数和血清炎性因子水平。AB-PAS染色和免疫组化法分别检测杯状细胞比例和Muc5AC、Muc5B表达。PCR检测ERK1、ERK2、ENaC、CFTR、AQP5 mRNA表达。Western Blot测定肺组织中ERK1/2、P-ERK1/2蛋白表达。结果 与Control组相比,COPD组大鼠TV、MV、FVC、FEV_(0.1)及FEV_(0.1)/FVC均显著下降(P<0.01);肺病理显示肺泡紊乱,肺泡壁大量断裂,气管壁严重皱缩增厚,周围有大量炎性细胞浸润;肺组织水含量明显升高(P<0.01);BALF中巨噬细胞比例显著降低(P<0.01),中性粒细胞和淋巴细胞比例显著升高(P<0.01);血清炎性因子TNF-α、IL-1β水平显著增高(P<0.05,P<0.01);气道上皮杯状细胞比例和Muc5AC、Muc5B表达水平均显著升高(P<0.01);肺组织ERK1、ERK2、ENaC mRNA表达量均明显升高(P<0.01),CFTR和AQP5 mRNA的表达均明显降低(P<0.01);肺组织P-ERK1/2, ERK1/2表达明显升高(P<0.01);与COPD组相比,各治疗组能不同程度改善上述指标变化(P<0.05,P<0.01),调补肺肾三方联合PD98059组治疗效果优于单一治疗组(P<0.05,P<0.01)。结论 调补肺肾三法通过抑制ERK1/2信号通路改善COPD大鼠气道黏液高分泌。

国医大师晁恩祥调补肺肾法临床运用探析

文章初步介绍了国医大师晁恩祥教授基于中医理论关于调补肺肾法的认识及研究过程。在早期研究慢性支气管治疗的基础上,通过在临床实践中不断深入探讨,明确了疾病的病机认识,确立了临床用药特点,创立了有效方剂,扩充了临床运用范畴,逐步形成了完善的理法方药体系。通过总结晁恩祥教授关于调补肺肾法临床运用的学术经验,初步分析了调补肺肾法的应用乃基于肺系疾病的病机根本,并解析了调补肺肾法的狭义与广义之不同。

调补肺肾三法对慢性阻塞性肺疾病稳定期大鼠肠道黏膜屏障的影响

目的:探讨调补肺肾三法对慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期大鼠肠道黏膜屏障的作用。方法:将SPF级SD大鼠随机分为空白(control)组、COPD模型(model)组、补肺健脾(BJ)组、补肺益肾(BY)组、益气滋肾(ZS)组和茶碱(Am)组。于第1~8周采用香烟烟雾暴露联合脂多糖滴注法制备COPD稳定期大鼠模型,第9~12周分别给予各组大鼠灌胃。观察动物一般情况,HE染色观察肺和结肠组织形态学变化,透射电镜下观察结肠组织超微结构变化,TUNEL法测定结肠组织细胞凋亡率,免疫组化染色检测结肠组织occludin(OCLN)和zonula occludens-1(ZO-1)蛋白表达,ELISA法检测血清二胺氧化酶(DAO)、肠脂肪酸结合蛋白(IFABP)和D-乳酸(D-LA)水平。结果:与control组比较,model组大鼠出现进食减少、消瘦和大便溏薄等症状,支气管黏膜皱襞增多明显,肺泡结构紊乱,形成大的气腔,大量炎症细胞浸润;结肠黏膜结构破坏,大量上皮细胞坏死脱落,杯状细胞明显减少,吸收上皮细胞的微绒毛稀疏、缺损,细胞间隙增宽,细胞间连接装置损坏,结肠细胞凋亡率显著升高(P<0.01),结肠OCLN和ZO-1显著降低(P<0.01),血清DAO、IFABP和D-LA水平显著升高(P<0.01);与model组比较,调补肺肾三方治疗后大鼠上述胃肠道症状均明显改善,支气管和肺泡结构恢复,结肠黏膜结构基本完整,吸收上皮细胞和细胞间紧密连接结构损伤减少,结肠细胞凋亡率均明显降低(P<0.05),结肠OCLN与ZO-1水平均有不同程度升高,其中BJ和ZS组OCLN明显升高(P<0.05或P<0.01),各中药组ZO-1明显升高(P<0.05或P<0.01),BJ和ZS组ZO-1表达较Am组明显升高(P<0.05或P<0.01),ZS组ZO-1较BY组显著升高(P<0.01),血清DAO、IFABP和D-LA水平均显著降低(P<0.01)。结论:调补肺肾三法均能够通过减轻结肠上皮细胞与细胞间紧密连接损伤,降低肠道黏膜屏障通透性,缓解COPD大鼠肠道黏膜屏障损伤,从而保护肠道黏膜屏障完整性。

调补肺肾三法对慢性阻塞性肺疾病稳定期大鼠肺与肠道炎症指标的影响

目的探讨调补肺肾三法对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)稳定期大鼠肺与肠道IL-6、IL-33和IFN-γ的调控。方法将60只SD大鼠随机分为空白(Control)组、COPD模型(Model)组、补肺健脾(Bufei Jianpi,BJ)组、补肺益肾(Bufei Yishen,BY)组、益气滋肾(Yiqi Zishen,ZS)组和氨茶碱(aminophylline,Am)组。第1-8周,采用香烟烟雾暴露联合脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)滴注法制备稳定期COPD大鼠模型,对应给予生理盐水、补肺健脾方、补肺益肾方、益气滋肾方、氨茶碱灌胃4周,于第13周灌胃周期结束后取材。光镜下观察肺与结肠组织形态学改变,采用免疫组化法(IHC)对肺与结肠组织中白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-33、干扰素(interferon,IFN)-γ蛋白进行定位与半定量观察。结果与Control组相比,Model组大鼠不仅支气管周围与肺泡腔出现大量炎症细胞及炎性渗出,结肠黏膜也出现了大量炎症细胞浸润,肺和结肠IL-6、IL-33和IFN-γ水平明显升高(P<0.05,P<0.01);与Model组相比,各治疗组不仅支气管和肺泡炎症细胞浸润减少,而且结肠黏膜炎症细胞也出现减少,肺与结肠中IL-33和IFN-γ、结肠IL-6水平均明显降低(P<0.05,P<0.01),BY、ZS、Am组肺IL-6水平显著降低(P<0.01)。肺IL-6与结肠IL-6水平呈正相关,肺IL-33与结肠IL-33水平呈正相关,肺IFN-γ和结肠IFN-γ水平呈正相关。结论调补肺肾三法均可以改善慢性阻塞性肺疾病稳定期大鼠肠道功能障碍,其机制可能与抑制肺与结肠中IL-6、IL-33和IFN-γ的释放,降低肺与肠道炎症反应有关。

调补肺肾法治疗慢性阻塞性肺疾病稳定期的病因机制研究

研究调补肺肾法治疗慢性阻塞性肺疾病稳定期的治疗效果以及治疗机制。方法:选择我院在2020年1月至2021年1月期间收治的100例稳定期慢性阻塞性肺疾病患者作为本次研究的对象,通过对照研究,比较两组患者的临床疗效。结果:观察组患者的临床疗效优于对照组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:稳定期慢性阻塞性肺疾病患者通过调补肺肾法进行治疗,能够哟有效升临床疗效,改善肺功能,应用价值高,值得推广。

调补肺肾在治疗虚喘中的应用——80例临床病例观察

哮喘病包括现代医学的支气管哮喘、喘息性支气管炎等,是临床常见病、多发病。该病反复发作,缠绵难愈,发病机制极为复杂。

调补肺肾三法对香烟烟雾提取物和脂多糖刺激A549细胞分泌细胞因子的影响

目的:从调补肺肾三法对香烟烟雾提取物(CSE)和脂多糖(LPS)刺激A549分泌细胞因子变化的影响,揭示调补肺肾三法治疗COPD分子机制。方法:CSE和LPS及两者联合(LC)刺激肺泡上皮细胞A549,每种刺激物下分为正常组(20%正常大鼠血清)、刺激物组(20%正常大鼠血清和5%CSE或75pg/mL LPS,或5%CSE和75pg/mL LPS)、补肺益肾组(BYFS)、补肺健脾组(BFJP)和益气滋肾组(YQZS)(20%相应方药大鼠含药血清和5%CSE或75pg/mL LPS,或5%CSE和75pg/mL LPS),ELISA法检测细胞因子,应用网络工具分析细胞因子的转录因子。结果:与正常组比较,CSE、LPS和LC组A549分泌IL-3和TGF-β减少(P<0.01);CSE组分泌MMP-9增加,分泌IL-8减少(P<0.05);LPS组分泌TIMP-1增加(P<0.05),LC组分泌TNF-α和MMP-9减少(P<0.01,P<0.05)。与CSE组比较,BFYS组分泌IL-1β和PPAP2B增加(P<0.01,P<0.05);BFJP组分泌TNF-α减少(P<0.05),IL-1β和PPAP2B增加(P<0.01,P<0.05);YQZS组分泌L1β增加(P<0.01)。与LPS组比较,BFYS组分泌IL-1β、MMP-9(P<0.01)和PPAP2B增加(P<0.05),分泌TIMP-1、PPAP2B和TNF-α减少(P<0.05);BFJP组分泌TIMP-1和TNF-α减少(P<0.01),分泌IL-1β和SOD增加(P<0.05);YQZS组分泌TIMP-1和TNF-α减少(P<0.05,P<0.01),IL-3、MMP-9和IL-1β分泌增加(P<0.05)。与LC组比较,BFYS组分泌MMP-9、IL-3、SOD、IL-1β、TNF-α、CD36分泌增加(P<0.05);BFJP组分泌MMP9、TGF-β、SOD、IL-1β分泌增加(P<0.05);YQZS组分泌MMP-9、IL-3、SOD、TNF-α、TGF-β增加(P<0.05),3个用药组分泌的TIMP-1皆减少(P<0.01)。结论:CSE和LPS对A549分泌细胞因子影响不同。3个调补肺肾方药对CSE和LPS刺激下分泌细胞因子和转录因子均有一定调控作用,补肺益肾中药在CSE刺激下纠正细胞因子分泌作用较好,益气滋肾中药对LPS与CSE联合状态下调节效果较好。

调补肺肾三法对香烟烟雾提取物和脂多糖刺激单核巨噬细胞THP-1分泌细胞因子的影响

目的探讨调补肺肾三法治疗慢性阻塞性肺疾病的分子机理。方法用香烟烟雾提取物(CSE)和脂多糖(LPS)及两者联合(LC)体外刺激单核巨噬细胞THP-1,每种刺激物下分为正常组(加入20%正常大鼠血清)、刺激物组(加入20%正常大鼠血清和5%CSE,或75pg/mlLPS,或5%CSE和75pg/mlLPS)、补肺益肾组、补肺健脾组和益气滋肾组(加20%相应方药大鼠含药血清和5%CSE,或75pg/mlLPS,或5%CSE和75pg/mlLPS),检测各组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-3(IL-3)、巨噬细胞-粒细胞集落刺激因子(GM-CSF)、转化生长因子-β(TGF-β)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)、超氧化物歧化酶(SOD)、CD36、磷脂酸磷酸酶2B(PPAP2B),应用网络工具分析细胞因子的转录因子。结果与正常组比较,CSE组、LPS组和LC组分泌MMP-9增加,分泌TNF-α和PPAP2B减少;CSE组分泌TIMP-1减少,LPS组分泌TGF-β增加,LC组GM-CSF分泌增加(P<0.05或P<0.01)。3个复方对细胞分泌的各因子调节明显不同(P<0.05或P<0.01),其中补益肺肾方在各条件下,所调节分泌的因子和涉及转录因子较为广泛。结论 CSE和LPS对THP-1分泌细胞因子影响不同,调补肺肾三法在一定程度上都对CSE和LPS刺激下分泌细胞因子有调控作用,补益肺肾方药作用最明显而广泛,补肺健脾方次之。