谷氧还蛋白3基因表达对肺癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制

目的观察抑制谷氧还蛋白3（GLRX3）基因表达对肺癌细胞增殖和凋亡的影响，并探讨其机制。方法Western blot检测人胚肺成纤维细胞MRC5及肺癌A427、A549、PC9、H1299细胞中GLRX3的蛋白表达。采用RNA干扰技术，将合成的GLRX3 siRNA转染A549细胞（实验组），转染阴性siRNA的A549细胞作为阴性组，不经特殊处理的A549细胞为空白组。Western blot检测转染48 h各组细胞中GLRX3、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（cleaved caspase-3）、信号转导与转录因子3（STAT3）和p-STAT3的蛋白表达，细胞计数试剂盒8（CCK-8）法检测转染24、48和72 h细胞的增殖情况，流式细胞术检测转染48 h细胞的凋亡情况。结果人胚肺成纤维细胞MRC5及肺癌A427、A549、PC9、H1299细胞中GLRX3的蛋白表达量分别为0.094±0.010、0.282±0.021、0.551±0.045、0.423±0.039和0.454±0.036，肺癌A427、A549、PC9、H1299细胞中GLRX3的蛋白表达量均显著高于MRC5细胞（均P〈0.01）。转染A549细胞24、48和72 h，实验组与空白组吸光度差异均有统计学意义（均P〈0.01）。转染A549细胞48 h，空白组、阴性组和实验组细胞中GLRX3的蛋白表达量分别为0.311±0.029、0.328±0.032和0.103±0.012，实验组显著低于空白组（P〈0.01），阴性组与空白组差异无统计学意义（P〉0.05）；空白组、阴性组和实验组细胞凋亡率分别为（1.65±0.22）%、（1.42±0.26）%和（9.52±0.56）%，实验组细胞凋亡率显著高于空白组（P〈0.01）；实验组cleaved caspase-3的蛋白表达显著高于空白组（P〈0.01），p-STAT3的蛋白表达显著低于空白组（P〈0.01），而STAT3蛋白表达各组间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论抑制GLRX3基因表达，可通过上调cleaved caspase-3的表达、下调STAT3信号通路，抑制肺癌细胞增殖，诱导细胞凋亡。

人类Grx3蛋白与转录因子p65相互作用的研究

巯基氧化还原酶在生物体的系统内担当着非常重要的角色,其主要介导的是巯基和二硫键之间的相互转化的反应。人类Grx3蛋白作为一种巯基氧化还原酶在谷氧还蛋白系统中有着非常重要的作用。已有的研究表明,Grx3蛋白对NF-κB信号通路的活性有十分显著的影响。p65(RELA)是人类机体内十分重要的一种蛋白质,其在NF-κB信号通路有着重要的调控作用,几乎调控着NF-κB信号通路中的所有下游反应。通过大肠杆菌提纯表达的p65与Grx3在体外条件下进行偶联实验,为p65与Grx3存在相互作用提供了强有力的证据,同时也为Grx3蛋白对NF-κB信号通路的影响机制提供了一个可能的解释。