谷氨酰胺磷酸核糖焦磷酸转酰胺酶研究进展

谷氨酰胺磷酸核糖焦磷酸转酰胺酶是生物体内嘌呤产物合成途径的关键酶,负责催化全合成途径的第一步反应。肌苷属于嘌呤核苷,是食品和医药行业广泛应用的重要产品。谷氨酰胺磷酸核糖焦磷酸转酰胺酶在肌苷的生物合成途径中起重要调节作用,对其深入研究将有助于提高肌苷的产量,对工业化生产有重大意义。本文从谷氨酰胺磷酸核糖焦磷酸转酰胺酶的属性、功能、结构和基因表达与调控方面对其做了介绍,为肌苷产量的提高工作奠定了基础。

焦磷酸钠对氧化猪肉肌原纤维蛋白的谷氨酰胺转移酶交联反应及凝胶性能的影响

以猪肉肌原纤维蛋白为研究对象,考察焦磷酸钠(sodium pyrophosphate,TSPP)对微生物谷氨酰胺转移酶(microbial transglutaminase,MTG)催化天然和氧化肌原纤维蛋白交联的程度及后续蛋白凝胶特性的影响。结果表明,肌原纤维蛋白的氧化程度随着H2O2溶液浓度的升高而增加,但TSPP在一定程度上可抑制羟自由基对蛋白的攻击,且TSPP处理(+TSPP)样品的MTG交联程度明显高于未经TSPP处理(-TSPP)样品。无论是否添加TSPP,随着H2O2溶液浓度的升高,蛋白凝胶的储能模量(G’)和凝胶强度均逐渐降低,加入MTG后均有所回升,且增幅随着H2O2溶液浓度升高逐渐降低。相对于未经TSPP处理样品,TSPP处理条件下未氧化样品的G’和凝胶强度增幅更高,但氧化时增幅降低速度更快。说明虽然TSPP处理有利于MTG交联引起的凝胶性能提高,但当受到氧化胁迫时,TSPP处理反而对其不利。

磷酸盐和转谷氨酰胺酶对鸡肉肠出品率和硬度的影响

本文主要研究了焦磷酸钠(SPP)、三聚磷酸钠(STP)和六偏磷酸钠(SHMP)对鸡肉肠出品率的影响,并采用L9(34)正交试验设计确定了鸡肉肠中添加复合磷酸盐的最佳配比;通过复合磷酸盐(0.2%、0.3%、0.4%)与转谷氨酰胺酶(0.4%、0.6%、0.8%)析因实验,分析了复合磷酸盐与转谷氨酰胺酶对鸡肉肠质构特性的影响。结果显示,复合磷酸盐的最优配比为STP:SPP:SHMP为4:2:3;复合磷酸盐能显著提高鸡肉肠出品率;转谷氨酰胺酶能显著提高鸡肉肠硬度;二者之间对肉制品出品率及硬度均无显著性交互作用。

转谷氨酰胺酶、复合磷酸盐、卡拉胶、酪蛋白对鸡肉肠质硬度的影响

本文以鸡脯肉为原料,利用中心复合正交试验设计的原理,设计了4因子3水平的试验,并采用响应曲面法研究了转谷氨酰胺酶(0～0.8%)及复合磷酸盐(0～0.5%)、卡拉胶(0～0.8%)、酪蛋白(0～5%)对鸡肉肠硬度的综合影响。结果显示,TGase和酪蛋白能显著提高鸡肉肠硬度(p<0.05),而复合磷酸盐和卡拉胶则影响不显著(p>0.05)。并得出硬度预测回归方程,并优化得到最佳组合:TGase(0.8%)、复合磷酸盐(0%)、卡拉胶(0.8%)、酪蛋白(5%)条件下有最大硬度705.517g。

组织型转谷氨酰胺酶及其在上皮性卵巢癌中的研究进展

组织型转谷氨酰胺酶,又称TG2,是转谷氨酰胺酶家族中最常见及研究最多的成员。它是一种多功能蛋白质,主要催化Ca（2＋）依赖的谷氨酰胺残基与赖氨酸残基的转酰基反应,参与翻译后蛋白质修饰。并有腺苷三磷酸酶（ATPase）、鸟苷三磷酸酶（GTPase）及蛋白质二硫化物异构酶、蛋白激酶活性。同时能介导与细胞外基质（ECM）中纤连蛋白、整合蛋白及蛋白聚糖的相互作用。正是由于它的多功能性,使其在细胞生长分化、

无磷酸盐鱼丸品质改良剂研究

目的:研究一种不含复合磷酸盐的鱼丸品质改良剂的最佳配方。方法:选用淡水鲢鱼肉作为鱼丸主材,在不添加复合磷酸盐的前提下,按照淡水鲢鱼丸制作工艺制作鱼丸,并通过测定鱼丸的蒸煮损失、质构特性、感官品质等指标,研究卡拉胶、微生物转谷氨酰胺酶(TG酶)、蛋清三因素对鱼丸品质的影响,以得到最佳的无磷酸盐品质改良剂配方。结果:正交试验测定得到最适配方为卡拉胶0.2%、TG酶0.2%、蛋清7%。结论:卡拉胶、TG酶、蛋清三者都分别对鱼丸品质有不同的影响。

3,5,2',4'-四羟基查尔酮对小鼠尿酸及尿酸合成相关酶基因的影响

用氧嗪酸钾诱导高尿酸血症动物模型,对化合物3,5,2',4'-四羟基查尔酮(P40)的降尿酸作用及尿酸合成相关酶基因进行研究。用磷钨酸法测定小鼠血清尿酸水平,用RT-PCR测定脑组织中次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)、肝脏中的磷酸核糖焦磷酸合成酶(PRPS)和磷酸核糖焦磷酸酰胺转移酶(PRPPAT)mRNA的表达水平。结果表明:灌胃给予高尿酸血症小鼠P40 2、4、8 mg/kg和阳性对照药别嘌醇1 mg/kg,共给药5次,每天2次,均显著降低血清尿酸水平(P<0.05,0.01),具有显著的降尿酸作用;但对HGPRT、PRPS、PRPPAT的mRNA表达水平无明显影响。

TGase 1、ACPase及APLase A酶活性与皮肤脱屑的关系

收集20例异常脱屑患者[板层鱼鳞病（LI）、寻常银屑病各10例]和10例健康人的皮屑，进行转谷氨酰胺酶1活性（TGase 1）、酸性磷酸酶活性（ACPase）和酸性磷脂酶A（APLaseA）活性检测，并对u患者局部皮肤施以低浓度乙醇酸一甘油，个别重度LI患者进行TGase1基因测序。结果：①健康人TGase1酶活性呈棕色细颗粒，定位于角质形成细胞（KC）胞膜；ACPase酶活性呈黑色细颗粒，主要位于KC的细胞间桥，APLaseA酶活性呈蓝色细颗粒，位于KC表面。②LI及银屑病皮屑的以上酶活性皆缺乏或缺如。③多数LI患者治疗1～4周后异常脱屑表型可获得一定改善，但以上酶活性无明显改变。认为TGase 1、ACPase、APLase A活性皆参与正常脱屑机制；低浓度乙醇酸-甘油的疗效可能与其参与KC之间的细胞间桥断裂有关。

3,5,2',4'-四羟基查尔酮对大鼠尿酸及PC12细胞嘌呤代谢酶的影响

目的研究3,5,2',4'-四羟基查尔酮(P40)对高尿酸血症大鼠尿酸的影响及对PC12细胞嘌呤代谢关键酶的影响.方法灌胃给予SD大鼠P40(2.0、4.0和8.0 mg/kg)5次,末次给药前1 h腹腔注射氧嗪酸钾(250mg/kg)诱导成高尿酸血症动物模型,注射后2 h取血,用磷钨酸法测定血尿酸水平及肝尿酸含量.给予PC12细胞系列浓度的P40和阳性对照药别嘌醇后培养48 h,收集细胞提取总RNA,采用逆转录聚合酶链(RT-PCR)的方法,检测嘌呤代谢关键酶HGPRT、PRPS和PRPPAT m RNA的表达水平.结果给予P40 2.0、4.0 mg/kg均能显著降低高尿酸血症大鼠的血尿酸水平,和模型组相比,差异有统计学意义(P<0.01),但对肝尿酸含量没有影响.给予P40 1×10^(-8),1×10^(-7),1×10^(-6) mol/L处理PC12细胞48 h后,对HGPRT、PRPS和PRPPAT基因的m RNA表达没有明显影响,与对照组相比差异无统计学意义(P<0.01).结论在本实验条件下,P40能降低氧嗪酸钾诱导的高尿酸血症大鼠的血尿酸水平,对PC12细胞的HGPRT、PRPS和PRPPAT基因的m RNA表达无影响.

结直肠癌组织中PPAT的水平及临床意义

目的探讨结直肠癌组织中磷酸核糖焦磷酸酰胺转移酶(PPAT)的水平及临床意义。方法基于TIMER、GEPIA和UALCAN数据库分析PPAT在结直肠癌组织和正常组织之间的表达差异,采用实时定量PCR检测105对结直肠癌组织和癌旁组织的PPAT水平及其与结直肠癌临床病理特征和预后的关系,TIMER数据库探讨PPAT在结直肠癌中的表达与免疫浸润水平的相关性。结果TIMER、GEPIA和UALCAN数据库分析结果均发现,结直肠癌的PPAT水平高于正常组织,差异有统计学意义(P<0.05);利用qPCR验证发现,癌组织的PPAT水平为5.287±1.996,高于癌旁组织的1.392±0.751,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线显示组织PPAT水平诊断结直肠癌的曲线下面积分别为0.958(95%CI:0.932~0.985),以2.931为参考值时对应的约登指数最大,灵敏度分别为86.67%,特异度为97.14%。组织PPAT水平与性别、年龄、家族史、部位和T分期无关(P>0.05),而与分化程度、淋巴结转移、肿瘤大小和TNM分期有关(P<0.05)。PPAT低水平者的中位总生存期为50.0个月,优于高水平者的45.5个月(HR=4.123,95%CI:1.952~6.245,P<0.001),经多因素分析显示PPAT水平升高是结直肠癌患者预后不良的独立危险因素(HR=3.245,95%CI:1.754~5.012,P=0.013)。结肠癌中PPAT水平与B细胞、CD8+T细胞、巨噬细胞、中性粒细胞和树突状细胞的浸润呈显著正相关(P<0.05),而与CD4+T细胞的浸润无关(P>0.05);直肠癌中PPAT水平与CD8+T细胞、中性粒细胞的浸润呈显著正相关(P<0.05),而与B细胞、CD4+T细胞、巨噬细胞和树突状细胞的浸润无关(P>0.05)。结论PPAT可能是结直肠癌的一种潜在的新的预后标志物,PPAT过度表达可能参与CRC的能量代谢和免疫浸润调节。

三种添加剂在鱼肉猪肉复合凝胶中的作用

为了改善鱼肉/猪肉复合肉糜(配比分别为3:7和7:3)的凝胶性能,研究了添加剂(TGase、CaCl2和焦磷酸钠)对鱼肉/猪肉复合凝胶的作用效果。结果表明,两种复合肉糜凝胶的破断强度、凝胶强度和保水性均随着TGase添加量的增加而增大,对鱼肉/猪肉(7:3)复合凝胶的增强作用更显著,而且降低了鱼肉/猪肉(7:3)复合凝胶的白度。CaCl2的添加也可增大复合肉糜的凝胶强度和白度,但高剂量的CaCl2(>10mmol/kg)会降低其保水性。鱼肉/猪肉为7:3和3:7复合凝胶的凝胶强度分别于焦磷酸钠为0.05%和0.3%时达到最大值,高剂量的焦磷酸钠(>0.3%)会提高复合凝胶的持水性,而对白度的影响较小。

狗肉肌肉蛋白质胶凝化特性的研究

以狗肉为原材料,研究了复合磷酸盐及谷氨酰胺转胺酶对肌肉凝胶特性的影响.正交试验结果表明,当复合磷酸盐的配比为1:2:2(六偏磷酸钠,三聚磷酸钠,焦磷酸钠),添加量为o.5%,肉制品的持水性和切片性最佳.谷氨酰胺转胺酶可通过催化蛋白质的共价交联,从而增强蛋白质的凝胶强度结构,在肉样品中分别添加不同量的谷氨酰胺转胺酶,在不同的温度和时间下进行反应,优化生产条件.结果表明,当谷氨酰胺转胺酶的添加量为10g/kg肉样品,在25～35℃下反应2～3h时,肉制品的凝胶强度最大.

黄羽肉鸡不同生长时间肌苷酸含量及相关基因表达的对比

以广东地方黄羽肉鸡麒麟鸡、怀乡鸡为研究对象,采用高效液相色谱法测定不同时间鸡肉肌苷酸(IMP)含量,利用实时荧光定量PCR法比较影响肌苷酸含量的GPAT和PURH基因在不同时间各组织中的表达水平,并研究2种基因在不同鸡中的表达量与肌苷酸含量的相关性。结果表明:怀乡鸡鸡肉中肌苷酸含量最高时为16周龄,麒麟鸡则为14周龄。GPAT、PURH基因在麒麟鸡各组织表达量随日龄增加均呈下降趋势,而怀乡鸡则呈先升后降的变化。麒麟鸡和怀乡鸡GPAT基因3个时间点中肝脏的表达量最高,而PURH基因3个时间点胸肌的表达量最高。GPAT在麒麟鸡和怀乡鸡肝脏的表达量与腿肌肌苷酸含量呈极显著负相关,PURH在怀乡鸡胸肌的表达量与胸肌肌苷酸含量呈显著负相关。

添加物对大米凝胶微结构和理化性质的影响

以籼米为主要原料,添加单甘酯、复合磷酸盐、TG酶(谷氨酰胺转氨酶)和山梨醇,制作大米凝胶,研究添加物对大米凝胶的热特性、流变特性、晶体结构、微观结构的影响,初步探究添加物对大米凝胶稳定性的作用机理。结果表明,添加TG酶、复合磷酸盐、单甘酯能显著提高大米凝胶的糊化峰值温度,而添加山梨醇则降低大米凝胶的糊化峰值温度。添加TG酶、山梨醇、单甘酯能显著提高大米凝胶的糊化热焓,而添加复合磷酸盐降低了大米凝胶的糊化热焓。四种添加物均能提高大米凝胶的弹性模量(G')上升的起始温度(T_(oG'))和G'峰值对应的温度(T_(G'max));添加山梨醇的大米凝胶,其弹性模量峰值(G'_(max))和黏性模量峰值(G″_(max))增大,而添加TG酶、复合磷酸盐、单甘酯的大米凝胶,其G'_(max)和G″_(max)降低。四种添加物均能降低大米凝胶G'值的变化速率和结晶程度,抑制凝胶的老化,降低凝胶内部孔洞数量和凝胶表面粗糙度。

肺腺癌组织GART基因高表达对患者预后的影响

目的揭示肺腺癌中磷酸核糖甘氨酰胺转甲酰酶(GART)基因变化及其与患者预后的关系。方法2020年1月使用癌症芯片数据库Oncomine、癌症基因组学分析门户网站cBioPortal、癌症基因组学门户网站UALCAN及生物信息学数据库DAVID 6.8分析肺腺癌组织GART基因变化及其与患者预后的关系。结果Oncomine数据库结果显示,肺腺癌组织GART基因表达明显升高。cBioPortal数据库结果显示,501例肺腺癌患者中发生GART基因改变38例,包括错义突变、截短突变、基因融合、拷贝数畸变和mRNA水平上调。GART基因高表达不利于患者预后,差异有统计学意义(P<0.05)。UALCAN数据库结果显示,肺腺癌组织GART基因表达明显提高,且在40岁以上、吸烟人群中GART的表达更为显著。DAVID富集分析结果显示,GART主要与细胞周期、RNA转运、DNA复制途径相关。结论肺腺癌组织GART高表达不利于患者预后,该基因可作为判断肺腺癌患者预后的候选标志物。

芒果苷对高尿酸血症小鼠血尿酸及嘌呤代谢相关酶表达的影响

目的:研究芒果苷对氧嗪酸钾诱导的高尿酸血症小鼠血尿酸的影响以及对磷酸核糖焦磷酸合成酶(PRPS),磷酸核糖焦磷酸酰胺转移酶(PRPPAT)和次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT) mRNA表达水平的影响。方法:雄性昆明种小鼠60只,随机分为正常组、高尿酸血症模型组、芒果苷1. 5,3. 0,6. 0 mg·kg^-1组、别嘌醇组(1. 0 mg·kg^-1),每组10只。按10 m L·kg-1每天灌胃给药2次,连续10次,给药后1 h再灌胃给予氧嗪酸钾(500. 0 mg·kg^-1)诱导形成高尿酸血症小鼠。磷钨酸法测血清尿酸水平,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测小鼠肝脏PRPS,PRPPAT和脑组织中HGPRT mRNA的表达水平。结果:灌胃给予氧嗪酸钾后,与正常组比较,模型组小鼠血尿酸水平显著升高(P <0. 05);给予芒果苷和别嘌醇后,与模型组比较,芒果苷各剂量(1. 5,3. 0,6. 0 mg·kg^-1)和别嘌醇(1. 0 mg·kg^-1)均能显著降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平(P <0. 05,P <0. 01);与正常组和模型组比较,芒果苷各剂量组小鼠肝脏PRPS和PRPPAT mRNA的表达没有显著性差异,小鼠脑组织中HGPRT mRNA表达水平也没有显著性差异。结论:在本实验条件下,芒果苷的降尿酸作用与嘌呤代谢相关酶PRPS,PRPPAT和HGPRT mRNA的表达无关。

鲣鱼肌肉品质改良研究

目的:研究转谷氨酰胺酶、三聚磷酸钠和浸泡时间对鲣鱼肌肉品质的影响。方法:以弹性、咀嚼性、色差及蒸煮损失为指标,进行单因素试验,选取因素和水平。在此基础上,以弹性和咀嚼性为指标,进行响应面法优化。结果:最佳工艺条件:转谷氨酰胺酶添加量0.64%,三聚磷酸钠添加量0.20%,浸泡时间1.85 h。通过扫描电镜观察改良前、后鱼肉的超微结构,结果经改良的鱼肉凝胶网络结构更加紧密。

利用生物技术研制低脂白羽鸡肉丸

目的:利用复合磷酸盐、大豆分离蛋白、复配亲水胶和转谷氨酰胺酶研制新型低脂白羽鸡肉丸产品,并分析其质构与感官品质。方法:以硬度和感官为指标,利用单因素试验和响应面法筛选、优化配方,并进行感官评定。结果:白羽鸡肉丸的最佳制作工艺是:大豆分离蛋白1.58%(体积分数,下同),转谷氨酰胺酶0.59%,复配亲水胶0.26%,复合磷酸盐0.26%。在降低脂肪的同时,产品感官品质得以提高。结论:利用生物技术研制的新型低脂白羽鸡肉丸具有低脂、健康、风味佳的特点。

氮磷钾不同配比对饲用稻威优198产量及糙米蛋白含量的影响

采用田间小区试验研究“推荐配比”(N:P2O5:K2O比率为190:90:100 kg hm-2)、“高氮量配比”(N:P2O5:K2O比率为210:90:100 kg hm-2)、“低氮量配比”(N:P2O5:K2O比率为170:90:100 kg hm-2)以及“常规配比”(N:P2O5:K2O比率为216:112.5:202.5 kg hm-2)4种氮、磷、钾配比施肥对饲用稻威优198蔗糖合成酶(SUS)、腺苷二磷酸焦磷酸化酶(AGPase)、硝酸还原酶(NR)、谷氨酰胺合成酶(GS)以及产量和糙米蛋白质的影响。结果表明:“推荐配比”能提高不同生育时期水稻功能叶(旗叶)和粒籽中碳、氮代谢关键酶的活性,这些关键酶活性的变化显著影响水稻产量和糙米全氮以及蛋白氮的含量。统计(P0.05)结果证实“推荐配比”能提高水稻产量达到8200 kg hm-2,与“常规配比”相比产量提高了24.81%;“推荐配比”糙米全氮和蛋白氮含量分别达到22.70 g kg-1和21.98 g kg-1,与“常规配比”相比差异显著,并且其全氮和蛋白氮含量分别提高17.01%,18.38%。