谷氨酰胺转胺酶(MTG)分批发酵中温度对S.mobaraense生长及产酶影响的模型化

研究了 2 .5L小罐培养过程中控制温度为 2 5℃～ 35℃时对细胞生长和MTG合成的影响 .结果表明 :当控制相对较低的温度时 ,细胞生长的延滞期较长 ,当控制温度较高时 ,细胞生长的延滞期较短 ,达到最大DCW和最高MTG酶活的时间均较短 ;通过研究各种不同模型对细胞生长的影响得到最适合描述S .mobaraense生长与温度之间的关系方程为Schoolfield方程 ;通过对最大DCW和最大MTG酶活进行数学模拟 ,发现方程X(U) =-a0 (θ -θ0 ) 2 +X1(U1) +a1{ 1-exp[a2 ·(θ-θ1) ) ]}能较好地描述最大DCW和最大MTG酶活与温度之间的关系 ;通过研究延滞时间与温度之间的关系 ,得到描述两者之间关系的最适关系式为 :λ =l/ (A0 +A1·T +A1·T2 +A2 ·T3 +A) 4·T4 ) ;通过对单一温度以及分阶段控制温度的细胞生长及产酶的模型预测值及实验值进行比较 ,发现模型预测值与实验结果较吻合 .图 6表 6参

发酵法生产谷氨酰胺转胺酶(MTG)的中试研究

比较了摇瓶和 2 .5L种子罐所培养的种子液 ,并在 5L罐上考察了以种子罐培养种子时不同接种量对发酵过程的影响。在将 5L小罐实验结果放大到 30 0L和 3m3 罐的中试规模时 ,分别采用以vvm相等和KLa相等的原则 ,对通风量进行放大 ,以P V相等为依据对搅拌转速进行放大。结果表明 ,当采用种子罐培养种子液时 ,适宜的种龄为 18～ 2 0h ,接种量为 2 % ,30 0L罐中酶活和生产强度分别达到 3.12u mL和 78.0u L·h ,均高于 5L罐的水平 ,3m3 罐酶活为 2 .70u mL ,接近于 5L罐的酶活水平 ,表明本研究所采用的通气量。

微生物谷氨酰胺转胺酶(MTG)分批发酵模型的建立

在本文中,以本实验优化好的工艺条件,建立了关于微生物谷氨酰胺转胺酶分批发酵的数学模型方程细胞生长的动力学方程、产物合成的动力学方程和底物消耗的动力学方程。并对所建立的动力学方程进行了生物统计分析,结果表明所建立的模型具有一定的可信度。

微生物谷氨酰胺转胺酶(MTG)分批发酵模型的建立

以实验室优化好的工艺条件,建立了关于微生物谷氨酰胺转胺酶分批发酵的数学模型方程——细胞生长的动力学方程、产物合成的动力学方程和底物(葡萄糖)消耗的动力学方程。并对所建立的动力学方程进行了生物统计分析,结果表明所建立的模型具有一定的可信度。

微生物谷氨酰胺转胺酶(MTG)的分离纯化

利用产谷氨酰胺转胺酶的H-197菌株发酵产生MTG,发酵液通过高速离心、冷冻浓缩、乙醇沉淀、冷冻干燥,制得粗酶粉,粗酶粉溶解后经过Sephadex G-75柱得到较纯酶样.结果表明:经冷冻浓缩、乙醇沉淀后其活力回收率为44.6%,酶的比活为0.83 U/mg,较浓缩前增加了2.43倍;粗酶经Sephadex G-75凝胶过滤层析后得到较纯的酶,酶的比活力为1.44 U/mg,最终纯化倍数达7.08.

谷氨酰胺转胺酶(MTG)的中试生产条件

考察了 5L小罐中淀粉预处理方式对微生物谷氨酰胺转胺酶 (MTG)酶活的影响 ,探讨了MTG中试生产过程的逐级放大原则 ,并将 5L小罐实验结果放大到 30L小试和 30 0L中试规模 .研究结果表明 :采用经液化处理的工业淀粉培养基进行发酵 ,MTG酶活、MTG生产强度及MTG产率分别比未用液化淀粉培养基提高了 32 % ,32 %和70 % ;以单位培养液体积中空气流量 (qv/V)相同及消耗的功率 (p0 /V)相同的原则为放大依据 ,将 5L罐实验结果放大至 30L小试及 30 0L中试规模 .30L罐发酵MTG酶活和MTG生产强度均高于 5L罐 .30 0L罐中MTG酶活达到3.15u/mL ,MTG的平均比合成速率达到 2 .6 8uh-1g-1,接近于 5L罐的MTG平均比合成速率 ,表明本研究所采用的通气量、搅拌转速等放大原则是可行的 .图 3表 2参

微生物谷氨酰胺转胺酶(MTGase)的分子生物学研究进展

谷氨酰胺转胺酶具有催化蛋白质分子内和分子间的交联,蛋白质和氨基酸之间的连接以及蛋白质分子内谷氨酰胺基水解的功能,被广泛应用于食品、医药及纺织等领域。微生物来源的谷氨酰胺转胺酶具有非Ca2+依赖性和底物特异性低等特点,在研究开发中更为引人注目。本研究综述了微生物谷氨酰胺转胺酶基因表达研究方面的进展,归纳了微生物谷氨酰胺转胺酶的基因序列特点及酶学特性,分析了该酶的结构与功能之间的关系,指出基因工程技术生产谷氨酰胺转胺酶的优势及存在的问题。认为应该进一步加强谷氨酰胺转胺酶的表达策略研究以及分子改造研究,以期提高该酶的产量、催化活力及热稳定性等。

添加CTAB促进吸水链霉菌产谷氨酰胺转胺酶

研究了添加十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)对吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)合成谷氨酰胺转胺酶的影响。结果表明,添加CTAB可以提高发酵过程中谷氨酰胺转胺酶的酶活,摇瓶培养中,CTAB的最佳添加时间和添加量分别为32h和1%,发酵终了时,谷氨酰胺转胺酶酶活最高达5.04u/mL,比对照提高了21.8%。初步研究表明,CTAB的主要作用是促使谷氨酰胺转胺酶的酶原转化为成熟酶,因此,在发酵过程中添加适当浓度的CTAB,可使酶原快速、完全地转化为成熟的MTG,解除酶原的产物抑制作用,促进了细胞产酶。

微生物谷氨酰胺转胺酶作用机制及检测方法研究进展

微生物谷氨酰胺转胺酶(MTG)在食品、医药、生物技术等领域具有优良的品质及广泛的应用前景。本文简要介绍了MTG的结构、作用机理以及目前国内外检测方法的原理。并对检测方法的适用性、优缺点进行适当评述。随着MTG应用的日益广泛,对其活性的检测要求也在不断地提高。建立其安全、准确、灵敏度高、重现性好的检测体系日益成为研究的热点。

微生物谷氨酰胺转胺酶改善羊毛织物性能

以微生物发酵生产的谷氨酰胺转胺酶(MTG)作为羊毛织物的酶整理剂,探讨了MTG在羊毛织物防毡缩和强力损伤恢复中的作用。对所用的羊毛纤维进行了氨基酸分析,从理论上为MTG的作用提供了依据。经过高锰酸钾和蛋白酶预处理后再利用MTG处理,与对照样相比,织物强力提高了30%,毡缩率从处理前的9.35%下降至2.30%。与树脂整理方法比较,结果表明强力不及树脂整理方法,毡缩率达到了与之相当的效果,并且处理液的COD值只有树脂整理的1/3。

谷氨酰胺转胺酶的功能性质及其在食品中的应用方法

本文主要论述了微生物谷氨酰胺转胺酶的性质、功能及其在食品加工工业以及开发新型食品中的应用。

微生物谷氨酰胺转胺酶的应用进展

谷氨酰胺转胺酶是一种催化酰基转移反应的转移酶，它可使酪蛋白、肌球蛋白、谷蛋白和乳球蛋白等分子之间产生交联，改变蛋白质的功能性质。简述了谷氨酰胺转胺酶在食品应用的一些最新进展。

谷氨酰胺转胺酶对豆腐凝胶强度的影响

本文主要研究谷氨酰胺转胺酶(TGase)对豆腐的凝胶强度的影响。运用单因素及正交实验法得出:在豆浆中蛋白质浓度为9%的条件下,TGase酶的添加量0.8 U/g蛋白质,离子强度0.3、pH 7.0时,在50℃下加热1.5 h时凝胶强度为148.6 g,并且具有良好的感官品质。

谷氨酰胺转胺酶对饺子粉品质改良效果的研究

研究分析了添加不同剂量谷氨酰胺转氨酶（M-TG）对小麦粉的粉质参数和拉伸参数,生饺子皮的色泽、质构特性和蒸煮干物质失落率,以及熟饺子皮的质构特性。结果表明,在0~45 mg/kg范围内,随着M-TG添加量的增加,面团的形成时间、稳定时间、评价值以及生饺子皮的亮度、熟饺子皮的回复性均不断增加,弱化度逐渐降低;当M-TG酶的添加量高于45 mg/kg时,其对面团的粉质特性、饺子皮的品质特性有弱化作用。当添加量为45 mg/kg时,生饺子皮的干物质失落率最小,饺子皮的综合评分最高。因此,M-TG对饺子粉品质有明显的改善作用,确定其最佳添加量为45 mg/kg。

Streptomyces hygroscopicus产谷氨酰胺转胺酶摇瓶发酵条件的优化

介绍了吸水链霉菌 (Streptomyceshygroscopicus)WSH0 3 -1 3的筛选过程 ,重点考察了在摇瓶条件下 ,不同碳、氮源对吸水链霉菌生长和产酶的影响 ,利用正交实验 ,确定了复合碳、氮源的浓度 ,并对种龄、接种量、初始 pH值、培养温度和培养时间等条件进行了研究。通过对发酵过程的优化 ,酶活达到 4 46u/mL ,比初始条件下提高了 3 0 9倍。

Streptomyces hygroscopicus谷氨酰胺转胺酶酶原基因的鉴定及在大肠杆菌中的表达

【目的】鉴定来源于吸水链霉菌的谷氨酰胺转胺酶基因;研究其在大肠杆菌系统的克隆与表达;分析该酶与其同源酶的活性中心氨基酸序列。【方法】从本实验室筛选的吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus;CCTCC M203062)发酵液中,分离纯化得到谷氨酰胺转胺酶酶原(pro-MTGase),测得N-端前十个氨基酸序列并与其它链霉菌来源的相应基因序列比较设计引物,扩增得到pro-MTGase基因,将该基因插入到表达载体pET-20b(+)信号肽pelB下游,构建分泌型表达载体pET/pro-MTG,并转化不同的大肠杆菌宿主BL21(DE3)和Rosetta(DE3)pLysS。【结果】获得了pro-MTGase的完整基因序列,多重碱基序列比对表明其与S.platensis和S.caniferus的pro-MTGase基因同源性高达92%。利用Rosetta(DE3)pLysS通过降温至24℃诱导策略,获得部分胞外表达的酶原。SDS-PAGE显示,胞外表达重组蛋白的分子量约为44kDa,与吸水链霉菌表达的天然酶原相符。诱导4h后发酵液中的重组酶原经胰蛋白酶活化为成熟酶后测得最高酶活为0.24U/mL。【结论】该研究是对吸水链霉菌的谷氨酰胺转胺酶基因的首次报道,也是国内首次利用大肠杆菌实现pro-MTGase的胞外可溶性表达。

微生物谷氨酰胺转胺酶研究进展

微生物谷氨酰胺转胺酶是一种在食品、医药、纺织、化妆品等领域具有广泛应用前景的酶制剂。就其理化性质、作用机理、工业化生产、在食品工业上的应用及当前国内外研究热点进行了概述。并讨论了微生物谷氨酰胺转胺酶在我国生产及应用中存在的问题和困难,对未来的研究方向做出展望。

谷氨酰胺转胺酶对酪蛋白的改性效应

羊乳中的酪蛋白经商品级谷氨酰胺转胺酶作用后,产物经SDS-PAGE检测,发现生成了相对分子量较大的聚合物。聚合的最佳条件为:酶量/酪蛋白=15U/g;最适pH:6.0～8.0;最适反应温度:50℃;反应时间:120min。其中β-酪蛋白最易被催化,其次为αs-1酷蛋白,αs-2酷蛋白,k-酪蛋类白不易被催化。经谷氨酰胺转胺酶改性后的酪蛋白溶液,其粘度增加,乳化能力提高,起泡性下降。

谷氨酰胺转胺酶和磷酸盐对鱿鱼鱼糜凝胶性能的影响

研究添加谷氨酰胺转胺酶(TGase)和磷酸盐对鱿鱼鱼糜凝胶硬度和弹性的影响。结果表明:TGase和磷酸盐在鱼糜凝胶化过程中起重要作用,且不同添加量的TGase和磷酸盐均可提高鱿鱼鱼糜的硬度和弹性;单因素试验确定最佳添加量为(以鱼糜质量为基本):TGase(100U/g)0.50%、焦磷酸钠0.30%、六偏磷酸钠0.30%、三聚磷酸钠0.30%;采取二段加热法(60℃保温1h),鱼糜的硬度、弹性达到最大。

谷氨酰胺转胺酶和脂肪酶的使用量对中式香肠品质的影响

研究谷氨酰胺转胺酶和脂肪酶的复合使用在低温腌制过程中对中式香肠食用品质和质构特性的影响。通过对中式香肠的质构特性、加压损失、颜色的测定,发现谷氨酰胺转胺酶的加入能够提高中式香肠的胶黏强度,并且在一定的条件下还能降低加压损失,提高保水性,而脂肪酶的加入能改善中式香肠的硬度和咀嚼性等特性。当谷氨酰胺转胺酶用量为0.2%,脂肪酶为0.75%时,能显著提高中式香肠制品的硬度、凝聚性、胶凝强度和咀嚼性等质构特性,产品的感官品质比对照组更令人满意。